馬 科，張婭娟，詹明華，連晶晶，李寶亮

(河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院 a.檢驗(yàn)科; b.醫(yī)務(wù)處， 張家口 075000)

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檢測未成熟粒細(xì)胞在膿毒癥診斷中的應(yīng)用價(jià)值

馬 科a，張婭娟b，詹明華a，連晶晶a，李寶亮a

(河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院 a.檢驗(yàn)科; b.醫(yī)務(wù)處， 張家口 075000)

目的 分析未成熟粒細(xì)胞(immature granulocyte，IG)在膿毒癥診斷中的檢測價(jià)值。方法 選取河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院2016年9月至12月間就診健康體檢人員50例、非膿毒癥感染患者44例和膿毒癥患者56例，抽取靜脈血液標(biāo)本檢測未成熟粒細(xì)胞(IG#，IG%)、降鈣素原(PCT)、白細(xì)胞(WBC)、中性粒細(xì)胞(NEUT)含量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，應(yīng)用受試者工作特征曲線分析檢測未成熟粒細(xì)胞(IG#和IG%)在膿毒癥診斷中的應(yīng)用價(jià)值。結(jié)果 膿毒癥患者和非膿毒癥感染患者血液中未成熟粒細(xì)胞(IG#，IG%)、降鈣素原(PCT)、白細(xì)胞(WBC)、中性粒細(xì)胞(NEUT)含量均顯著高于正常健康人員，膿毒癥患者未成熟粒細(xì)胞(IG#和IG%)含量雖高于非膿毒癥感染患者，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。檢測未成熟粒細(xì)胞(IG#，IG%)診斷膿毒癥的曲線下面積(area under the curve，AUC)依次為0.862、0.867，當(dāng)IG#和IG%參數(shù)cut-off值為0.065、0.75時(shí)，敏感度為0.679、0.768，特異性為0.980、0.840，約登指數(shù)為0.659、0.608，陽性似然比為33.95、4.80，陰性似然比為0.33、0.28。結(jié)論 檢測未成熟粒細(xì)胞為膿毒癥診斷監(jiān)測的一個(gè)新的炎癥指標(biāo)，但檢測未成熟粒細(xì)胞并不能用于區(qū)分患者感染的嚴(yán)重程度。

未成熟粒細(xì)胞;受試者工作特征曲線;膿毒癥

膿毒癥(sepsis)指由感染引起的全身炎癥反應(yīng)綜合征(systemic inflammatory response syndrome，SIRS)，是感染、燒傷、創(chuàng)傷、休克等急危重患者的嚴(yán)重并發(fā)癥，臨床患者死亡率較高，是ICU患者死亡的主要原因[1-3]。膿毒癥早期發(fā)現(xiàn)困難，確診時(shí)患者病情已發(fā)展至危重，盡管臨床采取抗感染治療、早期目標(biāo)導(dǎo)向治療(early goal-directed therapy，EGDT)等多種治療方案，膿毒癥的死亡率依然較高，治療費(fèi)用高且醫(yī)療資源消耗巨大[4-6]。

目前臨床診斷膿毒癥的檢測項(xiàng)目主要有降鈣素原(PCT)、C反應(yīng)蛋白(CRP)、血細(xì)胞計(jì)數(shù)和血培養(yǎng)，由于膿毒癥患者病情復(fù)雜，依據(jù)現(xiàn)有檢測方法確診膿毒癥較病情發(fā)展相對滯后，尤其是早期膿毒癥(early-onset sepsis，EOS)診斷十分困難，一旦確診病程已進(jìn)入中晚期階段，能為臨床提供一種快速、準(zhǔn)確鑒別診斷膿毒癥的檢測項(xiàng)目，第一時(shí)間給予患者治療顯得極其重要[7-8]。早期研究發(fā)現(xiàn)，膿毒癥患者血液中中性桿狀核粒細(xì)胞含量增高，臨床把患者中性桿狀核粒細(xì)胞計(jì)數(shù)與白細(xì)胞總數(shù)比率超過10%作為膿毒癥、感染性疾病診斷的炎癥指標(biāo)。近期研究發(fā)現(xiàn)，感染、膿毒癥患者病程早期骨髓釋放早幼粒細(xì)胞、中幼粒細(xì)胞、晚幼粒細(xì)胞等未成熟粒細(xì)胞(immature granulocyte，IG)進(jìn)入外周血中，檢測未成熟粒細(xì)胞作為炎癥指標(biāo)在感染疾病、膿毒癥的診斷治療過程中發(fā)揮作用[9-10]。未成熟粒細(xì)胞在人外周血中含量極低，計(jì)數(shù)常低于0.1(109/L)，應(yīng)用傳統(tǒng)顯微鏡涂片鏡檢方法不能準(zhǔn)確計(jì)數(shù)未成熟粒細(xì)胞，新一代全自動(dòng)血液分析儀應(yīng)用核酸熒光染色技術(shù)，可準(zhǔn)確計(jì)數(shù)高熒光強(qiáng)度的未成熟粒細(xì)胞[11-12]。本研究應(yīng)用Sysmex XN-2000全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測患者外周血未成熟粒細(xì)胞絕對值(IG#)和百分比(IG%)，探討未成熟粒細(xì)胞在膿毒癥診斷治療中的應(yīng)用價(jià)值，豐富膿毒癥的檢測方法，為膿毒癥的早期診斷、治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院2016年9月至12月間健康體檢人員外周血標(biāo)本50例作為正常對照組，其中男26例，女24例，年齡22～60歲，平均年齡(32.5±9.8)歲；非膿毒癥感染患者44例作為非膿毒癥組，其中男21例，女23例，年齡30～61歲，平均年齡(43.2±10.8)歲；膿毒癥感染患者56例作為膿毒癥組，其中男30例，女26例，年齡35～65歲，平均年齡(45.5±10.5)歲。所有人員對本次研究的具體情況均知情同意，符合本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 膿毒癥診斷標(biāo)準(zhǔn)

患者感染引發(fā)全身炎癥反應(yīng)，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)證實(shí)有細(xì)菌感染或有高度可疑感染灶，同時(shí)具備以下2項(xiàng)或2項(xiàng)以上體征：(1)體溫>38 ℃或<36 ℃；(2)外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)>10.0×109/L或<4.0×109/L；(3)中性桿狀核粒細(xì)胞計(jì)數(shù)比>10%；(4)心率>90次/min；(5)呼吸頻率>20次/min或動(dòng)脈二氧化碳分壓(PaCO2)<32 mmHg。

1.3 儀器和試劑

血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀器選取Sysmex XN-2000全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀，使用原廠配套試劑及Sysmex專用質(zhì)控品(Sysmex e-Check) 進(jìn)行檢測，采集標(biāo)本使用EDTA-K2抗凝管保存。PCT使用UPT上轉(zhuǎn)發(fā)光免疫分析儀測定，標(biāo)本使用肝素鋰抗凝管保存。

1.4 標(biāo)本采集與檢測

標(biāo)本采集依據(jù)《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程(第4版)》要求，抽取患者靜脈血液標(biāo)本2ml置于EDTA-K2抗凝管中檢測白細(xì)胞(WBC)、中性粒細(xì)胞(NEUT)、未成熟粒細(xì)胞含量(IG#，IG%)，同時(shí)抽取3ml靜脈血標(biāo)本置于肝素鋰抗凝管中檢測降鈣素原(PCT)，標(biāo)本采集后2小時(shí)內(nèi)完成檢測。試驗(yàn)期間每天采用質(zhì)控物對儀器進(jìn)行監(jiān)測，質(zhì)控結(jié)果符合要求。

1.5 檢測IG含量在膿毒癥診斷中的作用

抽取正常對照組、非膿毒癥組和膿毒癥組三組人員靜脈血液標(biāo)本檢測未成熟粒細(xì)胞(IG#，IG%)、降鈣素原(PCT)、白細(xì)胞(WBC)、中性粒細(xì)胞(NEUT)含量，IG#和IG%參數(shù)數(shù)據(jù)使用非參數(shù)檢驗(yàn)(kruskal-wallis H檢驗(yàn))分析，PCT、WBC和NEUT參數(shù)數(shù)據(jù)使用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)分析，比較各組之間檢測指標(biāo)差異。繪制受試者工作特征曲線 (receiver operating characteristic curve，ROC曲線)，計(jì)算IG#和IG%參數(shù)的曲線下面積(AUC),分析檢測IG#和IG%診斷膿毒癥的靈敏度、特異性、約登指數(shù)等指標(biāo)，探討檢測未成熟粒細(xì)胞在膿毒癥診斷中的應(yīng)用價(jià)值，為膿毒癥的早期診斷和治療提供依據(jù)。

1.6 數(shù)據(jù)整理與統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

3組患者血液IG#、IG%、PCT、WBC和NEUT水平比較：膿毒癥感染患者和非膿毒癥感染患者血液IG#、IG%、PCT、WBC和NEUT水平均顯著高于正常非感染患者(P<0.01)，膿毒癥患者血液IG#、IG%、WBC和NEUT水平雖高于非膿毒癥感染患者，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，膿毒癥患者PCT水平顯著高于非膿毒癥感染患者(P<0.01)，見表1。

表1 膿毒癥組、非膿毒癥組和正常對照組3組患者檢測指標(biāo)

a) 與正常對照組比較，P<0.01; b) 與膿毒癥組比較，P<0.01

運(yùn)用受試者工作特征曲線對未成熟粒細(xì)胞IG#和IG%參數(shù)進(jìn)行分析，曲線下面積(area under the curve，AUC)依次為0.862、0.867，當(dāng)IG#和IG%參數(shù)cut-off值為0.065、0.75時(shí)，敏感度為0.679、0.768，特異性為0.980、0.840，約登指數(shù)為0.659、0.608，陽性似然比為33.95、4.69，陰性似然比為0.33、0.28，見表2、圖1。

表2 未成熟粒細(xì)胞IG#及IG%參數(shù)的曲線下面積(AUC)

圖1 IG#和IG%參數(shù)的ROC曲線

3 討論

盡管對膿毒癥發(fā)病機(jī)制的研究取得了很大的進(jìn)展，近年臨床患者因感染引發(fā)膿毒癥比率逐年增高，膿毒癥病死率依然高于30%。膿毒癥早期診斷對于疾病的預(yù)防與治療顯得極其重要，是膿毒癥治療方案的首要目標(biāo)。第一時(shí)間給予患者早期有效的抗菌藥物治療不僅可以降低膿毒癥的病死率，還能大幅降低醫(yī)療費(fèi)用?；谶@些原因，尋找一種新穎的膿毒癥早期診斷指標(biāo)是膿毒癥疾病研究領(lǐng)域的一個(gè)熱門[13-15]。

在研究中，我們篩選出膿毒癥患者、感染的非膿毒癥患者以及正常健康人員抽取靜脈血液標(biāo)本，通過檢測未成熟粒細(xì)胞(IG#、IG%)、降鈣素原、血細(xì)胞計(jì)數(shù)等檢測指標(biāo)，分析檢測未成熟粒細(xì)胞診斷膿毒癥的靈敏度、特異性、約登指數(shù)等指標(biāo)，探討未成熟粒細(xì)胞作為一個(gè)新穎的炎癥檢測指標(biāo)在膿毒癥診療中的應(yīng)用價(jià)值。研究發(fā)現(xiàn)，膿毒癥患者與非膿毒癥感染患者外周血中未成熟粒細(xì)胞含量與正常健康人比較存在顯著性差異，未成熟粒細(xì)胞絕對值(IG#)和百分比(IG%)均高于正常健康人。在膿毒癥患者和非膿毒癥感染患者之間，未成熟粒細(xì)胞絕對值(IG#)和百分比(IG%)比較不存在顯著`性差異，表明未成熟粒細(xì)胞(IG#、IG%)可以作為一個(gè)新型的炎癥指標(biāo)用于感染性疾病的臨床診斷，但未成熟粒細(xì)胞(IG#、IG%)不能用于區(qū)分感染的嚴(yán)重程度。運(yùn)用受試者工作特征曲線 (receiver operating characteristic curve，ROC曲線)分析檢測IG#和IG%診斷膿毒癥的曲線下面積(AUC)依次為0.862、0.867，當(dāng)IG#和IG%參數(shù)cut-off值為0.065、0.75時(shí)，敏感度為0.679、0.768，特異性為0.980、0.840，約登指數(shù)為0.659、0.608，陽性似然比為33.95、4.80，陰性似然比為0.33、0.28。結(jié)果表明，膿毒癥患者檢測未成熟粒細(xì)胞(IG#、IG%)的敏感性、特異性較高，診斷效果顯著，未成熟粒細(xì)胞可用于膿毒癥疾病診斷。

綜上，膿毒癥感染患者未成熟粒細(xì)胞含量明顯升高，檢測未成熟粒細(xì)胞為膿毒癥感染疾病診斷監(jiān)測的一個(gè)新的炎癥指標(biāo)，但檢測未成熟粒細(xì)胞并不能用于區(qū)分患者感染的嚴(yán)重程度。

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(責(zé)任編輯 楊繼森)

The Application Value of Monitoring Immature Granulocytes in Patients with Sepsis

MA Kea, ZHANG Yajuanb, ZHAN Minghuaa, LIAN Jingjinga, LI Baolianga

(a.Department of Laboratory Medicine; b.Department of Medical, the First Affiliated Hospital of Hebei North University, Zhangjiakou 075000, China)

Objective To explore the application value of immature granulocytes(IG) in patients with sepsis. Methods Blood samples were routinely taken from clinical patients in the First Affiliated Hospital of Hebei North University from September to December 2016. Three groups of patients have been analyzed and compared: healthy people(n=50), patients with local infections(n=44), and patients with sepsis(n=56).The absolute and percentage number of immature granulocyte (IG# and IG%), procalcitonin (PCT), leukocyte (WBC) and neutrophile granulocyte (NEUT) were analyzed,then we drew the receiver operating characteristic curve (ROC curve) to evaluate the function of immature granulocytes in sepsis. Results Compared with healthy people, the levels of IG#,IG%, PCT, WBC and NEUT were significantly higher in patients with local infections and patients with sepsis. But there was no statistical difference of immature granulocytes between patients with sepsis and those with local infections. The area under curve (AUC) of IG# and IG% were 0.862,0.867, respectively. When the cut -off values of IG# and IG % were presented as follows: 0.065,0.75, Sensitivity values were 0.679,0.768, Specificity values were 0.980, 0.840, Youden index were 0.659,0.608, and positive likelihood ratio were 33.95,4.80 and negative likelihood ratio were 0.33,0.28. Conclusion Immature granulocyte could be a new and powerful indicator for diagnosing and screening sepsis, not discrimination of infections severity.

immature granulocyte; the receiver operating characteristic curve; sepsis

10.11809/scbgxb2017.07.040

2017-03-10；

2017-03-30

河北省張家口市科學(xué)技術(shù)和地震局科學(xué)技術(shù)研究與發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(1421093D)；河北省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究重點(diǎn)課題計(jì)劃項(xiàng)目(20170795)

馬科(1977—)，男，碩士，主要從事臨床檢驗(yàn)方面的研究。

format:MA Ke, ZHANG Yajuan,ZHAN Minghua,et al.The Application Value of Monitoring Immature Granulocytes in Patients with Sepsis[J].Journal of Ordnance Equipment Engineering,2017(7):184-187.

R4

A

2096-2304(2017)07-0184-04

本文引用格式：馬科，張婭娟，詹明華，等.檢測未成熟粒細(xì)胞在膿毒癥診斷中的應(yīng)用價(jià)值[J].兵器裝備工程學(xué)報(bào)，2017(7):184-187.