沈 平，謝朝梅，謝燕湘，林永濤，曾小元，李兆敏，鄧香香

（常德市疾病預(yù)防控制中心，常德415000）

氣相色譜－質(zhì)譜法測(cè)定火鍋底料中的嗎啡

沈 平，謝朝梅，謝燕湘，林永濤，曾小元，李兆敏，鄧香香

（常德市疾病預(yù)防控制中心，常德415000）

嗎啡是鴉片類毒品的重要組成部分，其在罌粟殼中含量較高。罌粟殼俗稱大煙殼，為罌粟科植物罌粟割取漿汁后的干燥成熟果殼，內(nèi)含多種生物堿，其中含量最多的生物堿分別為嗎啡、可待因、蒂巴因、罌粟堿、那可汀等［1］。長(zhǎng)期食用含有這類毒品的食物，會(huì)出現(xiàn)發(fā)冷、出虛汗、乏力、面黃肌瘦、犯困等癥狀，嚴(yán)重時(shí)可能對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)造成損害，甚至出現(xiàn)內(nèi)分泌失調(diào)等癥狀［2］。在我國(guó)，罌粟殼為非食用物質(zhì)，不允許在食品及調(diào)味品中添加使用。但近年來(lái)少數(shù)食品生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)者為了招攬顧客，牟取暴利，利用罌粟殼上癮的特點(diǎn)將其添加在火鍋底料中，對(duì)消費(fèi)者身體造成極大傷害。

目前嗎啡的測(cè)定方法主要有高效液相色譜法［36］以及液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法［7］等。這些方法各有特點(diǎn)，液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，但該法對(duì)儀器設(shè)備和人員的要求較高。本工作采用氣相色譜－質(zhì)譜法測(cè)定火鍋底料中的嗎啡含量。

1 試驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

Thermo Trace1300－ISQ型氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀，配AI 1310型自動(dòng)進(jìn)樣器；TTL－DC型多功能氮吹儀；KQ－250DE型數(shù)控超聲波清洗器；MJ－30BH01A型手持?jǐn)嚢鑴驖{機(jī)；Research RooⅠ－50型及ELGA－Lc134型純水器；DragonMED型移液器；TGL－20M型離心機(jī)；VORTEX QL－902型混勻器。

嗎啡標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：1.00mg·L－1，稱取嗎啡標(biāo)準(zhǔn)品0.10mg（純度大于99%）于100mL容量瓶中，用正己烷稀釋并定容。

乙腈、正己烷、乙醚為色譜純；無(wú)水硫酸鎂和無(wú)水乙酸鈉、鹽酸、氫氧化鈉為優(yōu)級(jí)純。

1.2 儀器工作條件

2）質(zhì)譜條件 電子轟擊離子源（EI），選擇性離子掃描方式，離子源溫度280℃，傳輸線溫度250℃；溶劑延長(zhǎng)時(shí)間4min。全掃描范圍（m／z）為100～400；嗎啡的定性離子（m／z）為162，215；定量離子（m／z）為285。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 樣品處理

稱取試樣2.00g（固體樣品攪拌勻漿后稱?。┲糜?0 mL聚四氟乙烯具塞刻度離心管中，加入0.1mol·L－1鹽酸溶液5mL，超聲處理30min，用1mol·L－1氫氧化鈉溶液（約0.8mL）調(diào)節(jié)至中性，加入乙醚20mL，加入混合粉末（無(wú)水硫酸鎂4g和無(wú)水乙酸鈉1.2g），渦旋振蕩1min，以4 000r· min－1轉(zhuǎn)速離心5 min，棄除乙醚層，加入乙腈10mL，渦旋振蕩1min后，以4 000r·min－1轉(zhuǎn)速離心5min，取上清液待凈化。

采用N－丙基乙二胺（PSA）／C18柱（150 mg／200mg），移取上清液3.0mL置于柱中，渦旋混合1min，以10 000r·min－1轉(zhuǎn)速離心2min，移取上清液于5mL試管中，氮?dú)獯蹈?，用正己烷溶解殘?jiān)?，定容?mL，按儀器工作條件進(jìn)行測(cè)定。

1.3.2 計(jì)算

試驗(yàn)采用外標(biāo)法定量，校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)曲線得樣品中嗎啡的質(zhì)量濃度，按公式（1）計(jì)算結(jié)果：

細(xì)紙筒一個(gè)，粗紙筒一個(gè)，紙圈兩個(gè)，黑色套圈兩個(gè)，黑色圓孔觀察蓋一個(gè)，彩色珠子若干，長(zhǎng)方形鏡片三個(gè)（也可以用能夠反光的鏡面紙，一般的快餐盒或禮品盒內(nèi)都可以找到），彩色塑料片一片，透明塑料片一片，膠水、膠帶、畫(huà)筆，畫(huà)紙若干。

式中：ρ為樣品中嗎啡的質(zhì)量濃度，mg·L－1；w為校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)曲線實(shí)際測(cè)出的嗎啡的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，mg· kg－1。

2 結(jié)果與討論

2.1 樣品前處理?xiàng)l件的選擇

由于嗎啡能溶于水，且在酸性條件下較穩(wěn)定，因此先加0.1mol·L－1鹽酸溶液5mL溶解樣品，再超聲處理30min。試驗(yàn)考察了pH分別為1，2，3，4時(shí)對(duì)嗎啡提取效果的影響。結(jié)果表明：在pH為1時(shí)，對(duì)嗎啡的提取效果最好。

為了降低嗎啡在水溶液中的溶解度，用1mol· L－1氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)至pH試紙呈中性，使乙腈萃取更加完全。嗎啡基本不溶于乙醚，試驗(yàn)選擇用乙醚除去脂肪雜質(zhì)。

試驗(yàn)考察了（150±5）mg PSA、（300±5）mg無(wú)水硫酸鎂、（200±5）mg C18的混合物對(duì)樣品的凈化效果。結(jié)果表明：PSA具有較強(qiáng)的離子交換能力，能除去溶液中的干擾離子；無(wú)水硫酸鎂可吸除乙腈中的少量水分；C18可去除有機(jī)物。由于無(wú)水硫酸鎂和無(wú)水乙酸鈉能讓兩相分層完全，便于分離，試驗(yàn)選擇用混合粉末一次性凈化樣品，可以減少凈化操作次數(shù)，降低樣品在凈化過(guò)程中的損失。

2.2 色譜條件及質(zhì)譜條件的選擇

試驗(yàn)采用TG－5MS色譜柱（30m×0.32mm，0.25μm），峰較對(duì)稱，半峰寬窄，峰形較好；在1.0mL·min－1柱流量和試驗(yàn)選用程序升溫條件下，各組分能實(shí)現(xiàn)良好地分離；進(jìn)樣口溫度采用280℃，能實(shí)現(xiàn)樣品充分氣化。EI源下有較好的響應(yīng)值，在選擇性離子掃描模式下，嗎啡溶液經(jīng)質(zhì)譜掃描后產(chǎn)生m／z285，162，215等3個(gè)特征離子，嗎啡相對(duì)分子質(zhì)量是285，所以選擇特征碎片離子285作為定量離子，162，215作為定性離子。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線和檢出限

移取1.00mg·L－1嗎啡標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液2.50，5.00，10.00，25.00，50.00mL分別置于50mL容量瓶中，用正己烷稀釋至刻度，配制成0.05，0.10，0.20，0.50，1.00mg·L－1標(biāo)準(zhǔn)溶液，按儀器工作條件進(jìn)行測(cè)定，以嗎啡的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明：?jiǎn)岱鹊馁|(zhì)量濃度在0.05～1.0mg·L－1內(nèi)呈線性，線性回歸方程為y＝2.72×105x－170.2，相關(guān)系數(shù)為0.999 0，檢出限（3s／k）為0.05mg·L－1。

2.4 精密度和回收試驗(yàn)

取空白樣品18份，分成3組，每組分別加入1.00mg·L－1嗎啡標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液0.20，1.0，1.8mL，加標(biāo)量依次為0.10，0.50，0.90 mg· kg－1，按試驗(yàn)方法進(jìn)行樣品前處理后測(cè)定，其結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 精密度與回收試驗(yàn)結(jié)果（n＝6）Tab.1 Results of tests for precision and recovery（n＝6）

2.5 樣品分析

從一次食品安全事件處理中采集火鍋底料樣品，按試驗(yàn)方法進(jìn)行前處理后測(cè)定，其色譜圖見(jiàn)圖1。

本工作采用氣相色譜－質(zhì)譜法測(cè)定了火鍋底料中嗎啡的含量，通過(guò)對(duì)樣品前處理?xiàng)l件和氣相色譜及質(zhì)譜參數(shù)的優(yōu)化后，操作簡(jiǎn)便快速，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確可靠，靈敏度高，穩(wěn)定性好，可滿足火鍋底料中嗎啡含量的測(cè)定，可用于實(shí)際檢測(cè)工作。

［1］ 沈平，謝朝梅，謝燕湘，等.GC－MS法直接測(cè)定食品中罌粟殼提取物的殘留量［J］.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2015，25（20）：3466－3468.

［2］ 陳偉，喬勇升，董貴軍.高效液相色譜－熒光檢測(cè)法同時(shí)檢測(cè)火鍋底料中嗎啡和可待因［J］.糧油食品科技，2015，23（6）：89－91.

圖1 樣品的色譜圖Fig.1 Chromatogram of the sample

［3］ 馬維平，鄧自力，李利軍.高效液相色譜法測(cè)定罌黃散中嗎啡的含量［J］.武警醫(yī)學(xué)，2012，23（6）：480－482.

［4］ 徐麗紅，王建清，陶秋，等.高效液相色譜同時(shí)測(cè)定3類食品中的5種罌粟殼生物堿［J］.分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2011，12（30）：1387－1391.

［5］ 谷巖，劉廣福，張?jiān)?，?固相萃?。咝б合嗌V法測(cè)定湯料中罌粟殼提取物殘留量［J］.理化檢驗(yàn)－化學(xué)分冊(cè)，2011，47（12）：1411－1412.

［6］ 張靖.食品中罌粟堿、嗎啡、可待因含量的液相色譜檢測(cè)法研究［J］.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2007，17（1）：72－73.

［7］ 李昱，方均建，吳勝明，等.高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜分析人血漿中的罌粟堿含量［J］.藥物分析雜志，2008，28（8）：1326－1329.

O657.63

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1001－4020（2017）05－0559－03

10.11973／lhjy－h(huán)x201705014

2016－05－13