劉秋萍 徐凌

MicroRNAs在肺纖維化中的研究進(jìn)展

劉秋萍 徐凌

肺纖維化是肺組織損傷后修復(fù)失調(diào)的結(jié)果，包括繼發(fā)因素導(dǎo)致的肺纖維化和特發(fā)性肺纖維化(idiopathic pulmonary fibrosis，IPF)，后者病因不明確，是目前最普遍的間質(zhì)性肺疾病，藥物作用有限，目前臨床唯一奏效的手段是肺移植，因此較許多癌癥的預(yù)后更差。其典型特征是肺間質(zhì)中成纖維細(xì)胞分泌膠原，細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix，ECM)過(guò)度沉積，上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial mesenchymal transition，EMT)且普遍伴有轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(transforming growth factor-β，TGF-β)及白細(xì)胞介素-1(interleukin-1，IL-1)、IL-6等多種炎癥介質(zhì)的表達(dá)增加。肺纖維化的具體機(jī)制仍不明確，這給它的治療帶來(lái)巨大困擾。MicroRNAs是一類長(zhǎng)度約為20個(gè)核苷酸的非編碼小RNA，能識(shí)別靶信使RNA(messenger RNAs，mRNAs)3'非翻譯區(qū)(untranslated regions，3'-UTR)的互補(bǔ)位點(diǎn)，抑制mRNA的翻譯或使mRNA降解，從而下調(diào)編碼蛋白的表達(dá)，在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)節(jié)基因的功能。最近有研究證實(shí)MicroRNA也能通過(guò)與靶mRNA的5'非翻譯區(qū)(5'-UTR)結(jié)合而調(diào)節(jié)基因功能。與經(jīng)典的抑制作用不同，MicroRNAs也能刺激靶基因的表達(dá)[1]。第一個(gè)MicroRNAs發(fā)現(xiàn)于1993年[2]，在之后的23年中關(guān)于MicroRNAs的信息呈指數(shù)式增長(zhǎng)。MicroRNAs能控制30%的蛋白編碼基因[2]，從而調(diào)節(jié)重要的生理過(guò)程，參與眾多疾病的發(fā)病。近年來(lái)，MicroRNAs在肺纖維化基因表達(dá)調(diào)控中的作用日益成為研究的熱點(diǎn)。本文作者對(duì)幾種關(guān)鍵MicroRNAs在肺纖維化中作用的最新進(jìn)展做一綜述，以便進(jìn)一步了解MicroRNAs在肺纖維化中的發(fā)病機(jī)制，尋找出治療肺纖維化的有效方法。

肺纖維化中上調(diào)的MicroRNAs

一、miR-21

IPF患者和肺纖維化小鼠肺組織以及IPF患者血清中miR-21上調(diào)[3-6]，而且肺組織上調(diào)的miR-21主要位于成纖維細(xì)胞中。血清miR-21與用力肺活量(forced vital capacity，F(xiàn)VC)以及影像學(xué)上表明的肺組織損傷程度呈正相關(guān)。向?qū)嶒?yàn)小鼠導(dǎo)入miR-21反義探針或敲除miR-21基因可減輕肺纖維化，而導(dǎo)入miR-21前體物質(zhì)則加重肺纖維化，這說(shuō)明miR-21具有致纖維化作用[3]。體外研究發(fā)現(xiàn)，用miR-21模擬物和miR-21抑制劑處理肺成纖維細(xì)胞，前者能夠促進(jìn)肺成纖維細(xì)胞活動(dòng)(增殖和膠原蛋白合成)，后者則作用相反[4]，這證實(shí)了以上的結(jié)論。

大量研究已證實(shí)TGF-β/Samd信號(hào)通路在心、肝、腎等器官的纖維化過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。miR-21能直接結(jié)合到Smad7 mRNA的3'-UTR，使Smad7表達(dá)下調(diào)，減輕了Smad7阻止TGF-β I型受體(TβR I)對(duì)Smad2的磷酸化，從而促進(jìn)了TGF-β1/Samd信號(hào)傳導(dǎo)，使成纖維細(xì)胞纖維化活動(dòng)增強(qiáng)，而且，miR-21與TGF-β I之間存在正反饋回路，這些最終導(dǎo)致纖維化的發(fā)生[3]。最近，Xie等[5]發(fā)現(xiàn)miR-21還能通過(guò)作用于TGF-β I型受體基因、TGF-β Ⅱ型受體(TβR Ⅱ)基因以及I型膠原α2鏈(collagen type I alpha 2 chain，COL1A2)基因調(diào)節(jié)TGF-β/Samd信號(hào)通路，表明miR-21能通過(guò)作用于除Smad7外更廣泛的TGF-β/Samd信號(hào)通路成員調(diào)控成纖維細(xì)胞的活動(dòng)，從而促進(jìn)肺纖維化。

二、miR-155

miR-155在肺纖維化小鼠肺組織中表達(dá)上調(diào)[7]。IPF患者血清中miR-155表達(dá)也增加[8]，血清中miR-155表達(dá)越高，F(xiàn)VC越低，HRCT顯示的肺陰影越明顯。miR-155的促纖維化作用主要是通過(guò)抑制角質(zhì)化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(keratinocyte growth factor，KGF)的表達(dá)而實(shí)現(xiàn)的。KGF是組織修復(fù)的中心因子，能夠促進(jìn)上皮細(xì)胞再生，具有抑制EMT的作用，而EMT是纖維化發(fā)生的重要機(jī)制。研究顯示，轉(zhuǎn)染miR-155前體后IL-1β刺激的正常人肺成纖維細(xì)胞釋放的KGF減少，而敲除miR-155后KGF釋放增加；miR-155可以有效地與KGF mRNA 3'-UTR結(jié)合抑制KGF表達(dá)[7]。腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor，TNF-α)和IL-1β則能刺激肺成纖維細(xì)胞表達(dá)miR-155[7]。當(dāng)然，要想明確miR-155在肺纖維化中的調(diào)控作用，還需進(jìn)行大量研究。

除miR-21、miR-155外，肺纖維化時(shí)上調(diào)的MicroRNAs(見(jiàn)表1)。

表1 MicroRNAs在肺纖維化中的作用

肺纖維化中下調(diào)的MicroRNAs

一、miR-26a

肺纖維化小鼠和IPF患者肺組織中miR-26a下調(diào)[9-10]。抑制miR-26a導(dǎo)致肺上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化成肌成纖維細(xì)胞(EMT)，加重了肺纖維化，而過(guò)度表達(dá)miR-26a減輕了EMT，從而使肺纖維化嚴(yán)重程度降低，這表明miR-26a具有抗肺纖維化作用[9-10]。

研究發(fā)現(xiàn)，高遷移率族蛋白A2(High mobility group protein A2，HMGA2)是miR-26a的靶基因[9]。HMGA2蛋白是與染色體結(jié)合的非組蛋白，可與DNA中富含A-T的序列結(jié)合，調(diào)節(jié)大量靶基因的轉(zhuǎn)錄[11]。HMGA2蛋白能正向調(diào)節(jié)EMT，因而參與肺纖維化[12]。miR-26a通過(guò)減少HMGA2的表達(dá)抑制EMT，從而抑制肺纖維化。之后的研究中，Liang H等[13]發(fā)現(xiàn)，Lin28B也是miR-26a的靶基因，Lin28B通過(guò)抑制let-7d能夠誘導(dǎo)EMT。抑制Lin28B能夠減輕EMT，從而抑制肺纖維化。miR-26a還能直接作用于靶基因Smad4[10]，Smad4是p-Smad2/Smad3核轉(zhuǎn)位的決定因素[14-15]。miR-26a通過(guò)抑制Smad4抑制了p-Smad3核轉(zhuǎn)位，從而抑制了TGF-β/Samd通路。miR-26a還能通過(guò)抑制TβR Ⅱ基因和TGF-β2基因的表達(dá)，從而抑制TGF-β/Smad信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)，導(dǎo)致成纖維細(xì)胞增殖減少，進(jìn)而抑制肺纖維化的發(fā)生[16]。細(xì)胞周期蛋白D2(Cyclin D2，CCND2)亦是miR-26a的靶基因[16]，miR-26a通過(guò)直接結(jié)合到CCND2基因mRNA 3'-UTR，抑制CCND2蛋白表達(dá)。CCND2能夠調(diào)控細(xì)胞G1/S期轉(zhuǎn)換[17]。miR-26a通過(guò)抑制CCND2蛋白表達(dá)阻斷了成纖維細(xì)胞G1/S期轉(zhuǎn)換，從而抑制了肺纖維化過(guò)程中成纖維細(xì)胞的增殖。

二、miR-29

肺纖維化小鼠和IPF患者肺組織中miR-29表達(dá)下調(diào)[18-19]。敲除肺成纖維細(xì)胞miR-29基因后肺纖維化嚴(yán)重程度加重，而轉(zhuǎn)染miR-29模擬物后肺纖維化嚴(yán)重程度減輕[18-20]，表明miR-29具有抗肺纖維化作用。在對(duì)miR-29抗肺纖維化機(jī)制的研究中，Cushing等[18]發(fā)現(xiàn)編碼整合素的基因ITGA11，與蛋白質(zhì)分解和細(xì)胞外基質(zhì)重塑相關(guān)的基因ADAM12和ADAMTS9，以及編碼基底膜成分的基因NID1均是miR-29的靶基因；miR-29的下調(diào)導(dǎo)致纖維化相關(guān)基因表達(dá)增加，從而導(dǎo)致肺纖維化。另外，肺纖維化時(shí)miR-29表達(dá)下調(diào)可能會(huì)增加兩大纖維化相關(guān)因子-TGF-β和結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(connective tissue growth factor，CTGF)的表達(dá)以及Smad3的磷酸化，從而促進(jìn)肺纖維化[20]。miR-29的下調(diào)還能使PI3K-AKT通路和Wnt/β-catenin信號(hào)通路抗纖維化作用減弱，致使成纖維細(xì)胞活動(dòng)增加，促進(jìn)肺纖維化[21-22]。

Montgomery等[23]的研究亦證實(shí)給肺纖維化小鼠注射合成的雙鏈RNA(作為MicroRNAs的模擬物)增加體內(nèi)miR-29水平可減輕肺纖維化，表明了miR-29有望成為治療肺纖維化的有效MicroRNAs。

三、miR-149

Fan等[24]研究發(fā)現(xiàn)，二氧化硅誘導(dǎo)的肺纖維化小鼠肺組織中miR-149表達(dá)明顯下調(diào)，而肺組織中IL-6的表達(dá)明顯增加。同時(shí)，他們發(fā)現(xiàn)用二氧化硅刺激的上皮細(xì)胞miR-149表達(dá)下調(diào)而IL-6的表達(dá)上調(diào)。因此，miR-149的下調(diào)及IL-6的上調(diào)可能參與了二氧化硅刺激后肺纖維化的形成，但研究人員只是觀察到miR-149能夠負(fù)調(diào)控IL-6這一現(xiàn)象，并未開(kāi)展進(jìn)一步的機(jī)制探討。而Clay等[25]發(fā)現(xiàn)暴露于臭氧后氣道上皮細(xì)胞內(nèi)表達(dá)上調(diào)的miR-149能夠結(jié)合到IL-6 mRNA 3'-UTR從而抑制IL-6蛋白的合成；Santini等[26]發(fā)現(xiàn)骨關(guān)節(jié)炎時(shí)軟骨細(xì)胞內(nèi)下調(diào)的miR-149對(duì)IL-6 mRNA 3'-UTR抑制減少，從而IL-6蛋白表達(dá)增加。在肺纖維化中，miR-149是否也是通過(guò)這種機(jī)制調(diào)控IL-6的合成需要進(jìn)一步的研究。

四、miR-200家族

miR-200家族有miR-200a，miR-200b，miR-200c，miR-141和miR-429五個(gè)成員。miR-200b、miR-200c在肺纖維化小鼠和IPF患者肺組織中表達(dá)下調(diào)[27]，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)miR-200家族成員可抑制TGF-β1誘導(dǎo)的肺泡上皮細(xì)胞的EMT，從而抑制肺纖維化。對(duì)乳癌細(xì)胞以及腎纖維化的研究顯示[28-29]，表達(dá)下調(diào)的miR-200家族成員通過(guò)增強(qiáng)上皮細(xì)胞鈣黏蛋白轉(zhuǎn)錄抑制因子E盒結(jié)合鋅指蛋白1(E-box binding zinc finger protein 1，ZEB1)和Smad相互作用蛋白-1(Smad interacting protein 1，SIP1)的表達(dá)從而促進(jìn)EMT。ZEB1則能抑制miR-200家族成員miR-200c和miR-141的表達(dá)[30]，表明ZEB1與miR-200家族成員之間存在負(fù)反饋通路。在肺纖維化時(shí)是否也是這種機(jī)制，還未得到證實(shí)。

五、let-7家族

let-7家族共有16個(gè)成員：let-7a-1、let-7a-2、let-7a-3、let-7b、let-7c、let-7d、let-7e、let-7f-1、let-7f-2、let-7g、let-7h、let-7i、let-7j 、let-7k、miR-202和miR-98。let-7d在IPF患者和纖維化大鼠肺組織中表達(dá)下調(diào)[31-32]。用let-7d抑制劑可造成多種上皮細(xì)胞株的間質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物(包括HMGA2)表達(dá)增加[31]。研究發(fā)現(xiàn)，IPF患者肺組織肺泡上皮細(xì)胞的HMGA2增加。究其原因，發(fā)現(xiàn)HMGA2是let-7d的靶目標(biāo)，因此，IPF時(shí)下調(diào)的Let-7d促進(jìn)了EMT，從而促進(jìn)了肺纖維化。此外，轉(zhuǎn)染let-7d到纖維母細(xì)胞可引起間質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物(包括HMGA2)表達(dá)降低，而上皮標(biāo)記表達(dá)增加[33]。因此，轉(zhuǎn)染let-7d抑制了EMT，進(jìn)而抑制了肺纖維化。

Gao等[32]對(duì)let-7家族成員miR-98進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)miR-98可作用于STAT 3的3'-UTR，抑制其表達(dá)，從而減輕肺纖維化；三氧化二砷抑制肺纖維化的作用正是通過(guò)上調(diào)miR-98，進(jìn)而抑制其下游STAT3信號(hào)而實(shí)現(xiàn)的。

在肺纖維化時(shí)還有許多下調(diào)的MicroRNAs，(見(jiàn)表1)。

MicroRNAs與肺纖維化的診斷

在人體血清、血漿等體液中存在豐富而穩(wěn)定的MicroRNAs，研究循環(huán)血MicroRNAs 表達(dá)變化與肺纖維化發(fā)生發(fā)展的關(guān)系，尋根究底是為了找到一種無(wú)創(chuàng)性診療手段，用以輔助甚至代替目前尚有不足的有創(chuàng)診療手段。Li P等[6]首次對(duì)IPF患者血清中的MicroRNAs進(jìn)行了研究。他們的研究發(fā)現(xiàn)，IPF患者血清中的miR-21 和miR-155水平顯著增高，而且血清中miR-21的增高水平與肺纖維化的嚴(yán)重程度成正比。此后，他們的進(jìn)一步研究[8]發(fā)現(xiàn)IPF患者血清中的8種MicroRNAs表達(dá)上調(diào)，而52種MicroRNAs表達(dá)下調(diào)。其中，miR-21和miR-155的上調(diào)，以及miR-101-3p的下調(diào)最為顯著。而且，這些MicroRNAs的表達(dá)水平與FVC的降低以及肺損傷程度成正比。最新研究顯示，硅肺、IPF患者以及肺纖維化小鼠模型血清中的miR-486-5p表達(dá)都降低[34]。另外，Yang G等[35]發(fā)現(xiàn)IPF患者血清中有47種MicroRNAs表達(dá)存在顯著差異，包括21種上調(diào)MicroRNAs和26種下調(diào)的MicroRNAs。經(jīng)定量RT-PCR 表明，IPF患者血清中miR-21，miR-199a-5p 和miR-200c顯著提高，而miR-31，let-7d表達(dá)明顯下降?？傊@些結(jié)果表明循環(huán)血MicroRNAs在早期診斷肺纖維化方面具有潛在意義，可及時(shí)、有效地利用無(wú)創(chuàng)性手段對(duì)肺纖維化發(fā)展進(jìn)程進(jìn)行監(jiān)測(cè)以便及時(shí)加以阻遏。

雖然循環(huán)血MicroRNAs 有望成為肺纖維化早期診療的分子標(biāo)志物，但到目前為止，其分泌方式、在循環(huán)血液中維持穩(wěn)定的保護(hù)機(jī)制及定量檢測(cè)方法等尚需進(jìn)一步探究；血清或血漿中的MicroRNAs含量并不相同，凝血過(guò)程對(duì)MicroRNAs的影響也尚未被研究清楚[36]。另外，MicroRNAs在體內(nèi)作用的靶基因和調(diào)控機(jī)制未明確，只是從循環(huán)血MicroRNAs的上調(diào)和下調(diào)來(lái)預(yù)測(cè)疾病的發(fā)生，1 種MicroRNAs可能存在于多種疾病中，1種疾病也可能有多種MicroRNAs。盡管如此，相信循環(huán)血MicroRNAs在疾病的診斷、療效監(jiān)測(cè)、預(yù)后評(píng)估等方面作為無(wú)創(chuàng)性標(biāo)志物能由預(yù)測(cè)階段變?yōu)楝F(xiàn)實(shí)，并且在臨床上得到推廣應(yīng)用。

MicroRNAs與肺纖維化的治療

以往肺纖維化的治療包括糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑、抗纖維化藥物、抗生素、細(xì)胞因子特異性抑制劑等，但這些治療的效果不佳，且長(zhǎng)期服用極易引發(fā)嚴(yán)重的不良反應(yīng)。而肺移植因存在較多不利因素也限制了其開(kāi)展。近幾年來(lái)發(fā)現(xiàn)，肺纖維化時(shí)，肺組織中MicroRNAs的異常表達(dá)參與肺纖維化的發(fā)生。而MicroRNAs調(diào)控著至少1/3的人類蛋白編碼基因。因此，可以選擇特定的MicroRNAs干預(yù)其靶基因，從而調(diào)控肺纖維化的發(fā)生發(fā)展。理論上來(lái)說(shuō)，對(duì)于MicroRNAs表達(dá)增加的肺纖維化，導(dǎo)入反義核苷酸下調(diào)MicroRNAs活性，從而恢復(fù)其正常調(diào)節(jié)水平，可以治療肺纖維化；對(duì)于MicroRNAs表達(dá)下調(diào)的肺纖維化，將MicroRNAs導(dǎo)入體內(nèi)，可以治療肺纖維化。隨著對(duì)MicroRNAs及其靶mRNA的深入研究，我們會(huì)更好地理解MicroRNAs的生理作用以及在肺纖維化發(fā)病中的作用，從而為其應(yīng)用于肺纖維化的診斷與治療提供依據(jù)。

小結(jié)與展望

肺纖維化的發(fā)病機(jī)制尚不明確，這成為治療的最大障礙，并且肺纖維化的死亡率高，因此尋求有效的治療方法迫在眉睫。本文對(duì)與肺纖維化相關(guān)的幾種關(guān)鍵MicroRNAs進(jìn)行總結(jié)，希望找到治療肺纖維化的有效方法。目前尚有一些問(wèn)題需要解決：① 盡管已有動(dòng)物和IPF患者樣本顯示MicroRNAs在肺纖維化中發(fā)揮作用，但仍需大量的實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證。② MicroRNAs有多個(gè)靶目標(biāo)，如何使MicroRNAs作用于特定的與肺纖維化發(fā)病相關(guān)的靶目標(biāo)而不影響其他靶目標(biāo)。③ 如何有效的將MicroRNAs導(dǎo)入體內(nèi)并發(fā)揮作用。盡管有很多的問(wèn)題等待解決，但我們相信MicroRNAs仍然有可能成為治療肺纖維化的有效方法，也許在將來(lái)臨床工作者就可以通過(guò)上調(diào)或下調(diào)肺纖維化患者體內(nèi)的MicroRNAs治療肺纖維化。

[1] Agostini M，Knight RA.miR-34: from bench to bedside[J].Oncotarget，2014，5(4):872-881.

[2] Ebrahimi A，Sadroddiny E.MicroRNAs in lung diseases: Recent findings and their pathophysiological implications[J].Pulm Pharmacol Ther，2015，34:55-63.

[3] Liu G，F(xiàn)riggeri A，Yang Y，et al.miR-21 mediates fibrogenic activation of pulmonary fibroblasts and lung fibrosis[J].J Exp Med，2010，207(8):1589-1597.

[4] 劉理靜，錢紅.上調(diào)miR-21表達(dá)促進(jìn)肺成纖維細(xì)胞增殖和膠原蛋白合成[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志，2015，31(7):918-922.

[5] Xie T，Liang J，Guo R，et al.Comprehensive microRNA analysis in bleomycin-induced pulmonary fibrosis identifies multiple sites of molecular regulation[J].Physiol Genomics，2011，43(9):479-487.

[6] Li P，Zhao GQ，Chen TF，et al.Serum miR-21 and miR-155 expression in idiopathic pulmonary fibrosis[J].J Asthma，2013，50(9):960-964.

[7] Pottier N，Maurin T，Chevalier B，et al.Identification of keratinocyte growth factor as a target of microRNA-155 in lung fibroblasts: implication in epithelial-mesenchymal interactions[J].PLoS One，2009，4(8):e6718.

[8] Li P，Li J，Chen T，et al.Expression analysis of serum microRNAs in idiopathic pulmonary fibrosis[J]. Int J Mol Med，2014，33(6):1554-1562.

[9] Liang H，Gu Y，Li T，et al.Integrated analyses identify the involvement of microRNA-26a in epithelial-mesenchymal transition during idiopathic pulmonary fibrosis[J].Cell Death Dis，2014，5:e1238.

[10] Liang H，Xu C，Pan Z，et al.The antifibrotic effects andmechanisms of microRNA-26a action in idiopathic pulmonary fibrosis[J].Mol Ther，2014，22(6):1122-1133.

[11] Bustin M，Reeves R.High-mobility-group chromosomal proteins: architectural components that facilitate chromatin function[J].Prog Nucleic Acid Res Mol Biol，1996，54:35-100.

[12] Thuault S，Valcourt U，Petersen M，et al.Transforming growth factor-beta employs HMGA2 to elicit epithelial-mesenchymal transition[J].J Cell Biol，2006，174(2):175-183.

[13] Liang H，Liu S，Chen Y，et al.miR-26a suppresses EMT by disrupting the Lin28B/let-7d axis: potential cross-talks among MicroRNAs in IPF[J].J Mol Med (Berl)，2016，94(6):655-665.

[14] Lagna G，Hata A，Hemmati-Brivanlou A，et al.Partnership between DPC4 and SMAD proteins in TGF-beta signalling pathways[J].Nature，1996，383(6603):832-836.

[15] Zhang Y，F(xiàn)eng X，We R，et al.Receptor-associated Mad homologues synergizeas effectors of the TGF-beta response[J].Nature，1996，383(6596):168-172.

[16] Li X，Liu L，Shen Y，et al.MicroRNA-26a modulates transforming growth factor beta-1-induced proliferation in human fetal lung fibroblasts[J].Biochem Biophys Res Commun，2014，454(4):512-517.

[17] Ando K，Ajchenbaum-Cymbalista F，Griffin JD.Regulation of G1/S transition by cyclins D2 and D3 in hematopoietic cells[J].Proc Natl Acad Sci U S A，1993，90(20):9571-9575.

[18] Cushing L，Kuang PP，Qian J，et al.miR-29 is a major regulator of genes associated with pulmonary fibrosis[J].Am J Respir Cell Mol Biol，2011，45(2):287-294.

[19] Khalil W，Xia H，Bodempudi V，et al.Pathologic Regulation of Collagen I by an Aberrant Protein Phosphatase 2A/Histone Deacetylase C4/MicroRNA-29 Signal Axis in Idiopathic Pulmonary Fibrosis Fibroblasts[J].Am J Respir Cell Mol Biol，2015，53(3):391-399.

[20] Xiao J，Meng XM，Huang XR，et al.miR-29 inhibits bleomycin-induced pulmonary fibrosis in mice[J].Mol Ther，2012，20(6):1251-1260.

[21] Yang T，Liang Y，Lin Q，et al.miR-29 mediates TGFβ1-induced extracellular matrix synthesis through activation of PI3K-AKT pathway in human lung fibroblasts[J].J Cell Biochem，2013，114(6):1336-1342.

[22] Wang Y，Liu J，Chen J，et al.MiR-29 mediates TGFβ 1-induced extracellular matrix synthesis through activation of Wnt/β -catenin pathway in human pulmonary fibroblasts[J].Technol Health Care，2015，23 Suppl 1:S119-S125.

[23] Montgomery RL，Yu G，Latimer PA，et al.MicroRNA mimicry blocks pulmonary fibrosis[J].EMBO Mol Med，2014,6(10):1347-1356.

[24] 范晶晶，吉曉明，王莎莎，等.二氧化硅誘導(dǎo)的肺纖維化中miR-149對(duì)白細(xì)胞介素-6的調(diào)節(jié)[J].中華勞動(dòng)衛(wèi)生職業(yè)病雜志，2014，32(3):161-167.

[25] Clay CC，Maniar-Hew K，Gerriets JE，et al.Early life ozone exposure results in dysregulated innate immune function and altered microRNA expression in airway epithelium[J].PLoS One，2014，9(3):e90401.

[26] Santini P，Politi L，Vedova PD，et al.The inflammatory circuitry of miR-149 as a pathological mechanism in osteoarthritis[J].Rheumatol Int，2014，34(5):711-716.

[27] Yang S，Banerjee S，de Freitas A，et al.Participation of miR-200 in pulmonary fibrosis[J].Am J Pathol，2012，180(2):484-493.

[28] Gregory PA，Bert AG，Paterson EL，et al.The miR-200 family and miR-205 regulate epithelial to mesenchymal transition by targeting ZEB1 and SIP1[J].Nat Cell Biol，2008，10(5):593-601.

[29] Xiong M，Jiang L，Zhou Y，et al.The miR-200 family regulates TGF-β1-induced renal tubular epithelial to mesenchymal transition through Smad pathway by targeting ZEB1 and ZEB2 expression[J].Am J Physiol Renal Physiol，2012，302(3):F369-F379.

[30] Burk U，Schubert J，Wellner U，et al.A reciprocal repression between ZEB1 and members of the miR-200 family promotes EMT and invasion in cancer cells[J].EMBO Rep，2008,9(6):582-589.

[31] Pandit KV，Corcoran D，Yousef H，et al.Inhibition and role of let-7d in idiopathic pulmonary fibrosis[J].Am J Respir Crit Care Med，2010，182(2):220-229.

[32] Gao SY，Zhou X，Li YJ，et al.Arsenic trioxide prevents rat pulmonary fibrosis via miR-98 overexpression[J].Life Sci，2014，114(1):20-28.

[33] Huleihel L，Ben-Yehudah A，Milosevic J，et al.Let-7d microRNA affects mesenchymal phenotypic properties of lung fibroblasts[J].Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol，2014，306(6):L534-L542.

[34] Ji X，Wu B，F(xiàn)an J，et al.The Anti-fibrotic Effects and Mechanisms of MicroRNA-486-5p in Pulmonary Fibrosis [J].Sci Rep，2015，5:14131.

[35] Yang G，Yang L，Wang W，et al.Discovery and validation of extracellular/circulating microRNAs during idiopathic pulmonary fibrosis disease progression[J].Gene,2015,562(1):138-144.

[36] Wang K，Yuan Y，Cho JH，et al.Comparing the MicroRNA spectrum between serum and plasma[J].PLoS One,2012,7(7):e41561.

[37] Fierro-Fernández M，Busnadiego，Sandoval P，et al.miR-9-5p suppresses pro-fibrogenic transformation of fibroblasts and prevents organ fibrosis by targeting NOX4 and TGFBR2[J].EMBO Rep，2015，16(10):1358-1377.

[38] Nho RS，Im J，Ho YY，et al.MicroRNA-96 inhibits FoxO3a function in IPF fibroblasts on type I collagen matrix[J].Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol，2014，307(8):L632-L642.

[39] Su S，Zhao Q，He C，et al.miR-142-5p and miR-130a-3p are regulated by IL-4 and IL-13 and control profibrogenic macrophage program[J].Nat Commun，2015，6:8523.

[40] Yang S，Cui H，Xie N，et al.miR-145 regulates myofibroblast differentiation and lung fibrosis[J].FASEB J，2013，27(6):2382-2391.

[41] Milosevic J，Pandit K，Magister M，et al.Profibrotic role of miR-154 in pulmonary fibrosis[J].Am J Respir Cell Mol Biol，2012，47(6):879-887.

[42] Lino Cardenas CL，Henaoui IS，Courcot E，et al.miR-199a-5p Is upregulated during fibrogenic response to tissue injury and mediates TGFbeta-induced lung fibroblast activation by targeting caveolin-1[J].PLoS Genet，2013，9(2):e1003291.

[43] Dakhlallah D，Batte K，Wang Y，et al.Epigenetic regulation of miR-17-92 contributes to the pathogenesis of pulmonary fibrosis[J].Am J Respir Crit Care Med，2013，187(4):397-405.

[44] Chen YC，Chen BC，Yu CC，et al.miR-19a，-19b，and -26b Mediate CTGF Expression and Pulmonary Fibroblast Differentiation[J].J Cell Physiol，2016，231(10)：2236-2248.

[45] Cui H，Banerjee S，Xie N，et al.MicroRNA-27a-3p Is a Negative Regulator of Lung Fibrosis by Targeting Myofibroblast Differentiation[J].Am J Respir Cell Mol Biol，2016，54(6):843-852.

[46] Berschneider B，Ellwanger DC，Baarsma HA，et al.miR-92a regulates TGF-β1-induced WISP1 expression in pulmonary fibrosis[J].Int J Biochem Cell Biol，2014，53:432-441.

[47] Das S，Kumar M，Negi V，et al.MicroRNA-326 regulates profibrotic functions of transforming growth factor-β in pulmonary fibrosis[J].Am J Respir Cell Mol Biol，2014,50(5):882-892.

10.3969/j.issn.1009-6663.2017.08.042

200233 上海，上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院呼吸科

徐凌，E-mail：quanlingxu@163.com

2016-12-13]