徐 華，王俊鋒

（1.信陽市動物疫病預防控制中心，河南 信陽 464000；2.信陽農(nóng)林學院牧醫(yī)工程學院，河南 信陽 464001；3.信陽市動物健康養(yǎng)殖營養(yǎng)工程技術研究中心，河南 信陽 464001）

信陽地區(qū)豬偽狂犬病免疫狀況調(diào)查

徐 華1，王俊鋒2，3*

（1.信陽市動物疫病預防控制中心，河南 信陽 464000；2.信陽農(nóng)林學院牧醫(yī)工程學院，河南 信陽 464001；3.信陽市動物健康養(yǎng)殖營養(yǎng)工程技術研究中心，河南 信陽 464001）

豬偽狂犬?。╬orcine Pseudorabies，PR）是由偽狂犬病毒（Pseudorabies virus，PRV）引起的一種急性傳染病[1]。豬偽狂犬病主要引起新生仔豬發(fā)熱、神經(jīng)癥狀及消化系統(tǒng)等疾病，并造成大量死亡；成年豬多為隱性感染，并引起妊娠母豬流產(chǎn)、死產(chǎn)、木乃伊胎，公豬表現(xiàn)為繁殖障礙和呼吸道癥狀；給豬場造成較大損失。目前，全國每個省份均有豬偽狂犬病的發(fā)生，對養(yǎng)豬生產(chǎn)造成嚴重影響。

根據(jù)《國家中長期動物疫病防治規(guī)劃（2012—2020年）》的要求，到2020年底完成所有種豬場偽狂犬病的凈化，信陽市作為河南省的生豬大市，豬偽狂犬病也時有發(fā)生，部分豬場還較嚴重，任重而道遠，馬超鋒等[2]2013年調(diào)查信陽地區(qū)豬場偽狂犬病場陽性率為62%，個體陽性率為22．7%。豬偽狂犬病作為病毒性疾病，主要防控方法就是疫苗免疫，免疫后抗體水平的高低對豬群是否有保護力至關重要。為了解信陽市近年來豬偽狂犬病免疫情況，采用美國IDEXX生產(chǎn)的豬偽狂犬病病毒gB抗體檢測試劑盒對全市豬群進行檢測，以獲得較全面的數(shù)據(jù)，為該病的防控和凈化提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 采樣時間及地點

2014—2016年，信陽市所轄7縣2區(qū)（浉河區(qū)、平橋區(qū)、淮濱縣、息縣、新縣、光山縣、羅山縣、潢川縣、商城縣）的不同規(guī)模豬場。

1.2 樣品的采集及制備

通過前腔靜脈或耳靜脈無菌采集每頭豬全血2～3 mL，離心后取上清液于滅菌離心管中、統(tǒng)一編號，-20 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 檢測試劑及儀器設備

1.3.1 檢測試劑 豬偽狂犬病病毒gB抗體檢測試劑盒購自美國IDEXX公司。

1.3.2 儀器設備 10～1 000μL單道移液器及25～300μL多道移液器，德國Eppendorf公司；303系列電熱恒溫培養(yǎng)箱，上海樹立儀器儀表有限公司；TDZ5-WS臺式低速離心機，長沙湘儀離心機儀器有限公司；Thermo FC酶標儀，美國thermo公司；恒溫振蕩器；超聲波清洗器；96孔聚苯乙烯反應板。

1.4 方法

采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）方法操作，按照試劑盒說明書進行。

測量并且記錄每個被檢樣品和對照的A(650)值，計算結(jié)果，結(jié)果判定。

1.4.1 快速孵育模式（1h孵育/室溫：18～25℃） 如果S／N值低于或等于0．60，樣品應判定為PRV抗體陽性；如果S／N值大于0．60但小于或等于0．70，樣品應重測；如果S／N值大于0．70，樣品應判定為PRV抗體陰性。

1.4.2 過夜孵育模式（16～18h/

2～8℃） 如果S／N值低于或等于0．50，樣品應判定為PRV抗體陽性；如果S／N值大于0．50但小于或等于0．60，樣品應重測；如果S／N值大于0．60，樣品應判定為PRV抗體陰性。

2 檢測情況

2.1 2014-2016年總體檢測情況

從表1可以看出，2014—2016年共檢測樣品2 735份，合格2 450份，合格率89．58%，2014—2016年樣品合格率分別為91．77%、79．32%、93．68%，均高于70%的國家合格率標準。

2.2 2014—2016年不同月份檢測情況

從表2可以看出，信陽市全年各個月份豬偽狂犬病免疫抗體合格率有差異，各月份均在70%以上，10月份最高為100%、5月份次高為96．28%，最低的8月份為70．24%、6月次低76．87%。

2.3 不同規(guī)模豬場檢測情況

2014—2016年，規(guī)模豬場PR免疫抗體合格率為90．02%，高于散養(yǎng)戶的84．84%；2014—2016年每年度規(guī)模場免疫抗體合格率（分別為92．87%、84．05%和95．94%）均高于當年散養(yǎng)戶的合格率（90．08%、69．38%和88．41%），只有2015年散養(yǎng)戶豬偽狂犬病免疫抗體合格率低于70%，具體情況見表3。

3 討論

本次對信陽市PR免疫抗體檢測，歷時3年，覆蓋信陽地區(qū)不同規(guī)模的豬場，較全面地代表全市的豬偽狂犬病免疫狀況。2014—2016年共監(jiān)測樣品2 735份，合格率89．58%，高于國家規(guī)定的70%的群體合格率標準，能夠給信陽地區(qū)豬群提供較好的保護。需要注意的是，PRgB抗體既可來源于疫苗免疫，也可來源于野毒感染產(chǎn)生的抗體，評價豬偽狂犬病的整體保護效果時還要結(jié)合野毒抗體檢測情況和豬群的臨床表現(xiàn)來評估。

從本次檢測結(jié)果看，每個月份均PR免疫抗體水平都較高，均在70%的群體合格率之上，但月份之間有差異，最高的3個月（10月、5月、4月）分別為100%、96．28%、96．11%，最低的3個月（8月、6月、3月）陽性率為70．24%、76．87%和78．53%。

本次調(diào)查有規(guī)模場和散養(yǎng)戶，規(guī)模場的PR免疫抗體合格率為92．02%，高于散養(yǎng)戶的84．84%，這可能與規(guī)模場較為重視豬偽狂犬病的免疫有關。

表1 2014-2016年信陽市豬偽狂犬病免疫抗體檢測情況統(tǒng)計

表2 2014—2016年信陽市不同月份豬偽狂犬病免疫抗體檢測情況統(tǒng)計

表3 2014—2016年信陽市不同類型豬場豬偽狂犬病免疫抗體檢測情況統(tǒng)計

近年來，豬價一直居高不下，養(yǎng)豬戶養(yǎng)殖熱情高漲，盲目擴大養(yǎng)豬規(guī)模，但忽視豬場生物安全，造成豬場疫病的發(fā)生，特別是豬偽狂犬病等病毒性疾病，給豬場帶來較大的損失。豬場要凈化和根除PR，需采取綜合防控措施：1）做好引種檢測，確保陰性豬進場；2）定期抽檢豬群，掌握豬群動態(tài)，發(fā)現(xiàn)帶毒豬，立即淘汰；3）采用科學免疫程序，給豬群免疫高效優(yōu)質(zhì)豬偽狂犬疫苗，確保豬群抗體水平；4）豬場制定嚴格的進出制度，控制人流、車流、物流，豬群實行全進全出；5）做好豬場消毒管理工作，切斷PR傳播途徑。

[1] 陳溥言．獸醫(yī)傳染病學［M］．5版．北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2006：377-381．

[2] 馬超鋒，劉琨，張軼，等． 信陽地區(qū)規(guī)模化豬場偽狂犬病血清學調(diào)查[J]． 畜牧與獸醫(yī)，2013，45(11)：73-76．

2017-05-14）

河南省高等學校重點科研項目計劃資助項目（201601-201712）；河南省高等學校青年骨干教師資助計劃項目（2015GGJS-267）；信陽農(nóng)林學院“大別山區(qū)畜禽生態(tài)養(yǎng)殖技術”校級科技創(chuàng)新團隊

徐華（1971-），女，河南新縣人，獸醫(yī)師，?？?，主要從事動物疫病防治工作

*為通訊作者