那順白乙拉 孟 和 .內(nèi)蒙古自治區(qū)通遼市傳染病醫(yī)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000；2.內(nèi)蒙古自治區(qū)通遼市食品藥品檢驗(yàn)所，內(nèi)蒙古 通遼 028000

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HPLC法測(cè)定清心沉香八味散中沉香四醇的含量

那順白乙拉1孟 和2*
1.內(nèi)蒙古自治區(qū)通遼市傳染病醫(yī)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000；2.內(nèi)蒙古自治區(qū)通遼市食品藥品檢驗(yàn)所，內(nèi)蒙古 通遼 028000

目的：測(cè)定清心沉香八味散中沉香四醇的含量。方法：采用高效液相色譜法，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈為流動(dòng)相A，0.1%甲酸溶液為流動(dòng)相B，柱溫為30℃；流速1.0mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)為252nm。結(jié)果：沉香四醇進(jìn)樣量在0.004985～0.074775μg范圍之內(nèi)與兩個(gè)峰面積之和具有良好的線性關(guān)系(r=0.9999)；平均加樣回收率為98.3%，RSD值0.9%(n=6)。結(jié)論：該方法穩(wěn)定、準(zhǔn)確，可用于清心沉香八味散的質(zhì)量控制。

清心沉香八味散；沉香四醇；高效液相色譜法

清心沉香八味散為《國家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編》內(nèi)科肺系(二)分冊(cè)[1]收載的品種，是地標(biāo)升國標(biāo)的品種，由沉香、廣棗、檀香、紫檀香、紅花、肉豆蔻、天竺黃和北沙參八味藥材組成。具有清心肺、理氣、鎮(zhèn)靜安神的功效，主要用于心肺火盛，胸悶不舒，胸肋悶痛，心慌氣短。沉香是沉香八味散的主要成分，具有行氣止痛、溫中止嘔、納氣平喘的功效，可以改善和治療氣逆喘息、嘔吐呃逆、脘腹脹痛等癥。現(xiàn)代研究表明，沉香對(duì)于改善血液循環(huán)、調(diào)節(jié)血壓及呼吸等有不錯(cuò)的作用。沉香的醇提取物具有抗組胺、平喘作用[2]，用于治療胸悶氣短，喘息氣逆等。沉香四醇在沉香藥材中含量較高，穩(wěn)定性較好[3]。根據(jù)2015年版《中國藥典》一部[4]建立沉香藥材中沉香四醇的含量測(cè)定方法，采用高效液相色譜法測(cè)定制劑中沉香四醇的含量，使其制劑的質(zhì)量可控。

1 儀器與材料

1.1 儀器 賽默飛世爾 U3000DGLC超高效液相色譜儀；Precisa92SM-202A型電子天平。

1.2 材料 沉香四醇對(duì)照品(批號(hào)：111980-201602，含量98.3%，中國食品藥品檢定研究院)。清心沉香八味散(批號(hào)：1507027、1511038、1512059，內(nèi)蒙古蒙藥股份有限公司；)。乙腈為色譜純，水為高純水。

2 方法和結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱：Diamonsil Cl8(以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑， 4.6mm×250mm， 5μm)。流動(dòng)相：乙腈為流動(dòng)相A，以0.1%甲酸溶液為流動(dòng)相B，按2015年版《中國藥典》一部沉香藥材含量測(cè)定項(xiàng)下規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫；流速為1.0mL/min；柱溫為30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)為252 nm；進(jìn)樣量：10μL。理論板數(shù)按沉香四醇峰計(jì)算應(yīng)不低于6000。沉香四醇峰保留時(shí)間為24.56min。陰性對(duì)照色譜在沉香四醇峰保留時(shí)間處無干擾。見圖1。

2.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取沉香四醇對(duì)照品，加甲醇制成每1mL含0.09820mg的溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備 取清心沉香八味散1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙醇25mL，稱定重量，浸泡0.5h，超聲處理(功率250W，頻率40 kHz)1h，放冷，再稱定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，靜置，取上清液濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.4 陰性對(duì)照溶液的制備 按處方比例并以相同工藝制備缺沉香的陰性樣品，并按供試品溶液制備方法制成陰性對(duì)照溶液。

2.5 線性關(guān)系考察 精密稱取沉香四醇對(duì)照品0.00982g，置100mL容量瓶中，加乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。作為對(duì)照品溶液。精密吸取對(duì)照品溶液1、2、5、10、15、20μL注入儀器中，記錄色譜圖，以峰面積為縱坐標(biāo)，以對(duì)照品的進(jìn)樣量(μg)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程：Y= 32.61943632X+ 0.11866363(r=0.999 9)結(jié)果表明沉香四醇在0.0982～1.964μg范圍之內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.6 精密度試驗(yàn) 取同一批號(hào)(1512059)清心沉香八味散供試品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)定沉香四醇色譜峰面積，平均面積為34.0453，RSD為0.7%。表明儀器的精密度良好。

2.7 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批號(hào)(1512059)清心沉香八味散供試品溶液6份，進(jìn)行含量測(cè)定，結(jié)果沉香四醇的平均含量為2.55mg/g，RSD為0.9%。表明本試驗(yàn)的重復(fù)性良好。

2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取已知含量的供試品(批號(hào)：1512059)溶液，分別于0、2、5、10、15、24h進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積，結(jié)果峰面積的RSD為1.3%，表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

2.9 回收率試驗(yàn) 取已知含量的樣品(批號(hào)：1512059，含量：2.55mg/g)6份，每份約0.5g，精密稱定，分別精密加入沉香四醇對(duì)照品適量，按供試品溶液制備方法測(cè)定含量，并計(jì)算回收率。結(jié)果見表1。

表1 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.10 樣品測(cè)定 精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液個(gè)10μL，注入高效液相色譜-質(zhì)譜測(cè)定儀，測(cè)定，結(jié)果見表2

表2 沉香四醇含量測(cè)定結(jié)果

3 討論

提取方法的考察中，先后考察了供試品粉末加乙醇超聲處理30min、浸泡30min超聲處理30min提取和浸泡30min超聲處理1h提取結(jié)果，結(jié)果表明前兩種提取方法提取效果不完全，浸泡30min超聲處理1h的提取方法效果較好。

實(shí)驗(yàn)采用HPLC法測(cè)定清心沉香八味散中沉香四醇的含量，經(jīng)方法學(xué)研究表明此方法具有樣品預(yù)處理簡(jiǎn)單、回收率高、重復(fù)性好、專屬性強(qiáng)等特點(diǎn)，可作為清心沉香八味散的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法，能夠更有效地控制樣品的質(zhì)量。

[1]國家食品藥品監(jiān)督管理局.國家食品藥品監(jiān)督管理局國家藥品標(biāo)準(zhǔn)[S].WS-10948(ZD-0948)-2002-2012Z.

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Determination of the Content of agarotetrol in Qingxinchenxiangbawei Powder by HPLC

Nashunbaiyila1MENG He2*

1.Tongliao Infectious Disease Hospital,Tongliao 028000,Chian;2.Tongliao City Institute of Food and Drugs,Tongliao 028000,China

Obiective The content of agarotetrol in Qingxinchenxiangbawei Powder was determined. Methods The HPLC analysis was performed on a column packed with octadecylsilane bonded silica gel as filler in the temperature of 30℃，eluted with acetonitrile as mobile phase A and 0.1% formic acid solution as the mobile phase B, with the flow rate of 1.0 ml/min. The detection wavelength was set at 252 nm. Results There was a good linear relationship between 0.004985 and 0.074775μg in the injection volume of agarotetrol(r=0.99999)， with the average recoveries were 98.3% and theRSDwas 0.9% (n=6). Conclusion The method is stable and accurate, and can be used for quality control of Qingxinchenxiangbawei Powder.

Qingxinchenxiangbawei Powder；Agarotetrol；HPLC

那順白乙拉(1968-),男，蒙古族，本科，副主任藥師，研究方向?yàn)橹忻伤?。E-mail:13947516201@163.com

孟和(1970-)，男，蒙古族，本科，副主任藥師，研究方向?yàn)橹忻伤?。E-mail:13500638181@139.com

R284.1

A

1007-8517(2017)12-0011-03

2017-04-11 編輯：梁志慶)