熊偉，吳磊，饒玉喜，史新安，李雄輝

（1.江西省科學(xué)院應(yīng)用化學(xué)研究所，江西南昌330096；2.江西省喜果綠化有限公司，江西上饒335500）

紅豆杉復(fù)方健康顆粒對皮膚急性毒性和刺激性實驗研究

熊偉1，吳磊1，饒玉喜2，史新安2，李雄輝1

（1.江西省科學(xué)院應(yīng)用化學(xué)研究所，江西南昌330096；2.江西省喜果綠化有限公司，江西上饒335500）

為了研究紅豆杉復(fù)方健康顆粒的皮膚急性毒性與皮膚刺激性，為其臨床安全應(yīng)用提供依據(jù)，通過局部給藥，觀察動物皮膚接觸紅豆杉復(fù)方健康顆粒所產(chǎn)生的反應(yīng)情況，對實驗結(jié)果加以評定。結(jié)果表明，紅豆杉復(fù)方健康顆粒無明顯毒副作用，對完整皮膚無刺激性、破損皮膚輕度刺激性。由此說明紅豆杉復(fù)方健康顆粒外用安全性較好。

紅豆杉；復(fù)方健康顆粒；皮膚；急性毒性；刺激性

紅豆杉是紅豆杉科紅豆杉屬植物的總稱，包括10余種瀕危藥用植物[1，2]。紅豆杉屬植物含有的化學(xué)成分主要包括紫杉烷類、黃酮類、木脂素類、甾體類、酚酸、倍半萜及糖苷類化合物等，具有抗腫瘤、抗氧化、溫腎通絡(luò)、利尿消腫以及改善睡眠等功效[3-7]。項目組以紅豆杉為主料，輔以浮小麥、葛根、首烏藤、銀杏葉、茯神和薰衣草等中藥進行配伍，制備了紅豆杉復(fù)方健康顆粒[8]，以期在臨床上具有一定抗氧化、改善睡眠等功效。本實驗通過對紅豆杉復(fù)方健康顆粒的皮膚刺激性和急性毒性進行研究，為其在臨床上的安全應(yīng)用提供實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

家兔，2.0～2.5kg，白色，雌性，由南昌龍平兔業(yè)有限公司提供，每組3只，共12只。豚鼠，250～300g，白色，雌雄各半，由上海生汪實驗動物養(yǎng)殖有限公司提供，每組5只，共10只。普通級動物房，溫度25～28℃，飲用自來水。

1.2 實驗材料

紅豆杉復(fù)方健康顆粒，由江西省喜果綠化有限公司提供。將紅豆杉復(fù)方健康顆粒碾碎，用蒸餾水稀釋成10%濃度，供實驗用。

1.3 實驗方法

1.3.1 皮膚刺激性實驗

采用完整皮膚及破損皮膚給藥途徑進行實驗。給藥前24h將家兔背部兩側(cè)毛剔除，面積為15cm×10cm，相當(dāng)于體表面積的10%，并用溫水洗凈待用；將受試物1mL涂于受試區(qū)，每天涂抹1次，時間、劑量相同，連續(xù)涂藥7d[9，10]。實驗采用同體左右側(cè)自身對比。完整皮膚及破損皮膚（用砂紙將皮膚擦傷至滲血）2組各3只，完整皮膚組右側(cè)脫毛區(qū)為對照區(qū)，左側(cè)為涂藥區(qū)；破損皮膚組右側(cè)脫毛區(qū)為對照區(qū)，左側(cè)為涂藥區(qū)。連續(xù)給藥7d后停藥，觀察0、24、48、72h分別與各對照區(qū)比較有無紅斑、水腫等反應(yīng)。

1.3.2 皮膚刺激性評分和評價標(biāo)準(zhǔn)

皮膚刺激反應(yīng)評分標(biāo)準(zhǔn)見表1，皮膚刺激強度評價標(biāo)準(zhǔn)見表2。皮膚刺激性反應(yīng)評分按照過敏反應(yīng)紅斑、水腫分值計算平均分值，判斷皮膚刺激程度，計算公式如下：

表1 皮膚刺激反應(yīng)評分標(biāo)準(zhǔn)

表2 皮膚刺激強度評價

1.3.3 皮膚急性毒性實驗

于實驗前24h將大鼠背脊柱兩側(cè)毛去掉，去毛區(qū)各為2cm×3cm大小，去毛24h后將10%紅豆杉復(fù)方健康顆粒溶液0.2mL涂抹于一側(cè)去毛區(qū)皮膚，上覆蓋紗布和塑料膜，用無刺激性膠布固定，另一側(cè)涂抹淀粉水溶液作對照，24h后用清水洗涂拭區(qū)，于1、4、7、14d觀察記錄大鼠中毒表現(xiàn)和死亡率[11，12]。

2 結(jié)果與討論

2.1 皮膚刺激性實驗

紅豆杉復(fù)方健康顆粒對皮膚刺激性實驗結(jié)果見表3。完整皮膚組的刺激反應(yīng)平均值＜0.5，說明紅豆杉復(fù)方健康顆粒對家兔完整皮膚無刺激性。破損皮膚組刺激反應(yīng)平均值＜3，說明紅豆杉復(fù)方健康顆粒對家兔破損皮膚有輕度刺激性。

表3 紅豆杉復(fù)方健康顆粒對家兔皮膚刺激的平均反應(yīng)值

2.2 皮膚急性毒性實驗

紅豆杉復(fù)方健康顆粒對豚鼠皮膚急性毒性的實驗結(jié)果見表4。由表4可知，在整個實驗期間，未出現(xiàn)豚鼠死亡現(xiàn)象，而且所有豚鼠正常生長，毛色、行為活動、飲水、飲食及大小便均正常，口、鼻、耳等處無異常分泌物，說明紅豆杉復(fù)方健康顆粒對豚鼠無明顯毒副作用。

表4 紅豆杉復(fù)方健康顆粒對豚鼠皮膚急性毒性實驗

3 結(jié)論

實驗結(jié)果表明，紅豆杉復(fù)方健康顆粒無明顯毒副作用，對完整皮膚無刺激性、破損皮膚有輕度刺激性，外用安全性較好。

[1]馬明東,劉躍建.紅豆杉資源及開發(fā)利用綜述[J].四川林業(yè)科技,2004,25(1):21-25.

[2]陳際伸,黃寶龍.紅豆杉資源與紫杉醇研究進展[J].江西林業(yè)科技,1998,26(4):32-36.

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[7]王衛(wèi)斌,姜遠(yuǎn)標(biāo).紅豆杉的藥用價值與紫杉醇藥源的開發(fā)利用[J].中國林業(yè)產(chǎn)業(yè),2006,3(10):42-45.

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[9]中華人民共和國衛(wèi)生部藥政管理局.新藥臨床前研究指導(dǎo)原則匯編[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1993:206-207.

[10]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2006:159.

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[12]王樹梅.小兒止瀉膏急性毒性及皮膚刺激性試驗[J].中醫(yī)兒科雜志,2012,8(1):10-12.

Study on Skin Acute Toxicity and Irritation of Taxus chinensis Compound Healthy Particles

Xiong Wei1,Wu Lei1,Rao Yu-xi2,Shi Xin-an2,Li Xiong-hui1
(1.Institute of Applied Chemistry,Jiangxi Academy of Sciences,Jiangxi Nanchang 330096;2.Jiangxi Xiguo Greening Limited Company,Jiangxi Shangrao 335500)

In order to study the skin acute toxicity and irritation of Taxus chinensiscompound healthy particles on skin,to provide the obtained evidence for clinical application.Taxus Chinensis compound healthy particles were performed on skin of animal by local administration to observe their response,and the results were evaluated.The result showed that Taxus chinensis compound healthy particles had no obvious side effects ,no inritation on intact skin and mild inritatinn on damaged skin.This shows that Taxus chinensis compound healthy particles is safe for external use.

Taxus chinensis;Compound healthy particles;Skin;Acute toxicity;Irritation

R285.5

A

2096-0387（2017）03-0013-03

江西省科學(xué)院杰出青年學(xué)者項目（2017-JCQN-02）；江西省科學(xué)院產(chǎn)學(xué)研合作項目（2014-CXY-04）。

熊偉（1982-），男，碩士，副研究員，研究方向：天然產(chǎn)物提取分離與分子修飾。