張麗　羅荔　陸春暉

[摘要] 目的 檢測糖尿病周圍神經(jīng)病變患者血清缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）、髓鞘堿性蛋白（MBP）、超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）和氧化應(yīng)激反應(yīng)水平，分析其相關(guān)性。 方法 選擇2015年7月～2016年7月在新疆醫(yī)科大學(xué)第五附屬醫(yī)院（以下簡稱“我院”）接受治療的糖尿病周圍神經(jīng)病變患者90例為研究組，選擇同期在我院體檢的年齡、性別相匹配的健康人群80名為對照組。檢測兩組一般生化指標(biāo)、血清HIF-1α、MBP、hs-CRP及超氧化物歧化酶（SOD）、還原型谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）氧化應(yīng)激指標(biāo)水平。糖尿病周圍神經(jīng)病變發(fā)生的影響因素采用多因素Logistic回歸分析。研究組患者血清HIF-1α、MBP、hs-CRP與SOD、GSH、MDA的相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)性檢驗。 結(jié)果 研究組總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、空腹血糖（FPG）、糖化血紅蛋白（HbA1c）、空腹胰島素（FINS）水平均明顯高于對照組（P ﹤ 0.05）。研究組血清HIF-1α、MBP、hs-CRP水平均明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P ﹤ 0.05）。研究組血清SOD、GSH水平均明顯低于對照組（P < 0.05），MDA水平明顯高于對照組（P < 0.05）。多因素Logistic分析表明，年齡、糖尿病病程、TC、TG、FPG、HbA1c、FINS、HIF-1α、MBP、hs-CRP、MDA是糖尿病周圍神經(jīng)病變發(fā)生的獨(dú)立危險因素（P < 0.05），SOD、GSH是糖尿病周圍神經(jīng)病變的保護(hù)性因素（P < 0.05）。Spearman相關(guān)檢驗分析顯示，研究組血清HIF-1α、MBP、hs-CRP均與MDA水平呈正相關(guān)（r=0.547、0.624、0.685，P < 0.05），均與SOD、GSH水平呈負(fù)相關(guān)（r=-0.565、-0.583、-0.592，r=-0.492、-0.551、-0.572，均P < 0.05）。 結(jié)論 血清HIF-1α、MBP、hs-CRP水平的上升和氧化應(yīng)激反應(yīng)均參與糖尿病周圍神經(jīng)病變的發(fā)生及發(fā)展，可能成為臨床輔助診斷糖尿病周圍神經(jīng)病變患者的生物指標(biāo)，為臨床干預(yù)治療提供理論依據(jù)。

[關(guān)鍵詞] 糖尿病周圍神經(jīng)病變；缺氧誘導(dǎo)因子-1α；髓鞘堿性蛋白；超敏C反應(yīng)蛋白；氧化應(yīng)激反應(yīng)

[中圖分類號] R587.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-7210（2017）05（c）-0174-05

[Abstract] Objective To detect the levels of serum hypoxia inducible factor-1α （HIF-1α）， myelin basic protein （MBP）， high sensitive C reactive protein （hs-CRP） and oxidative stress response in patients with diabetic peripheral neuropathy， and analyze the correlation among them. Methods 90 cases of patients with diabetic peripheral neuropathy treated in the Fifth Atfiliated Hospital of Xinjiang Medical University （"our hospital" for short） from July 2015 to July 2016 were selected as the study group. 80 healthy cases matched by age and gender in our hospital at the same time were selected as the control group. General biochemical indexes， levls of serum HIF-1α， MBP， hs-CRP， oxidative stress levels of super oxide dismutase （SOD）， reduced glutathione （GSH）， and malonaldehyde （MDA） were detected and compared between the two gorups. The multivariate Logistic regression analysis was used to analyze the influence factors of diabetic peripheral neuropathy. Spearman correlation test was used to analyze the correlation among serum HIF-1α， MBP， hs-CRP and SOD， GSH， MDA in the study group. Results The levels of total cholesterol （TC）， triglyceride （TG）， fasting blood glucose （FPG）， glycosylated hemoglobin （HbA1c）， fasting insulin （FINS） in the study group were significantly higher than those in the control group （P < 0.05）. The levers of serum HIF-1α， MBP and hs-CRP in the study group were significantly higher than those in the control group， the differences were statistically significant （P < 0.05）. The levels of serum SOD and GSH in the study group were significantly lower than those in the control group （P < 0.05）， and the serum MDA level in the study group was significantly higher than that in the control group （P < 0.05）. The multivariate Logistic regression analysis showed that age， duration of diabetes， TC， TG， FPG， HbA1c， FINS， MBP， hs-CRP， HIF-1α， MDA were independent risk factors of diabetic peripheral neuropathy （P < 0.05）， SOD and GSH were protective factors of diabetic peripheral neuropathy （P < 0.05）. Spearman correlation analysis showed that serum HIF-1α， MBP and hs-CRP in study group were positively correlated with MDA level （r=0.547， 0.624， 0.685， P < 0.05）， and which were negatively correlated with SOD and GSH levels （r=-0.565， -0.583， -0.592， r=-0.492， -0.551， -0.572， P < 0.05）. Conclusion The higher levels of serum HIF-1α， MBP and hs-CRP levels and oxidative stress are involved in the occurrence and development of diabetic peripheral neuropathy， which can be taken as clinical diagnostic bio-markers in patients with diabetic peripheral neuropathy， and provide theoretical basises for clinical intervention.

[Key words] Diabetic peripheral neuropathy； HIF-1α； MBP； hs-CRP； Oxidative stress

糖尿病是一種比較常見的慢性病，在臨床上大概70%的糖尿病患者會并發(fā)糖尿病神經(jīng)病變[1]。糖尿病患者一旦出現(xiàn)周圍神經(jīng)病變，感覺、運(yùn)動與自主方面的神經(jīng)會嚴(yán)重受累，進(jìn)而出現(xiàn)麻木、運(yùn)動功能與自主神經(jīng)功能方面的障礙[2]。相關(guān)研究顯示，糖尿病周圍神經(jīng)病晚期患者致殘率比較高，且患者的生活質(zhì)量受到嚴(yán)重影響[3]。因此，早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療顯得尤為重要。缺氧誘導(dǎo)因子-1α（hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α）是在缺氧條件下的一個重要轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，被證實在一些疾病的生理與病理過程中扮演著十分重要的作用[4]。髓鞘堿性蛋白（myelin basic protein，MBP）屬于中樞神經(jīng)系統(tǒng)髓鞘中的一種蛋白，對髓鞘功能的維持作用重大[5]。超敏C反應(yīng)蛋白（hypersensitive C-reactive protein，hs-CRP）是炎性反應(yīng)的一個重要的早期敏感性指標(biāo)[6]。相關(guān)研究證實，超氧化物歧化酶（SOD）、還原型谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）是氧化應(yīng)激的重要指標(biāo)，能夠誘發(fā)神經(jīng)元及軸突損傷，致使糖尿病神經(jīng)病變的發(fā)生[7]。本文主要研究糖尿病周圍神經(jīng)病變患者血清HIF-1α、MBP、hs-CRP及氧化應(yīng)激指標(biāo)反應(yīng)的變化水平，并分析其相關(guān)性，以期為疾病的臨床診治提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2015年7月～2016年7月在新疆醫(yī)科大學(xué)第五附屬醫(yī)院（以下簡稱“我院”）接受治療的糖尿病周圍神經(jīng)病變患者90例為研究組，其中，男50例，女40例；年齡42～76歲，平均（57.2±2.6）歲；病程1～9年，平均（6.3±1.2）年。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合糖尿病合并周圍神經(jīng)病變診斷標(biāo)準(zhǔn)[8]；②知情同意接受本研究者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①其他原因引起的周圍神經(jīng)病變；②并發(fā)糖尿病急重并發(fā)癥；③急慢性感染者；④惡性腫瘤者。選擇同期在我院體檢的年齡、性別相匹配的健康人群80名為對照組，其中，男45例，女35例；年齡41～75歲，平均（56.7±2.2）歲。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05），具有可比性。

1.2 方法

研究組患者在入院次日清晨抽取空腹靜脈血5 mL，健康體檢者則為來我院體檢當(dāng)日抽取空腹靜脈血5 mL。采集血標(biāo)本置EDTA抗凝管中，低溫離心取上清，加酸置低溫冰箱保存。采用化學(xué)發(fā)光法檢測胰島素水平；采用X-20全自動生化分析儀（美國貝克曼公司）測定空腹血糖（FPG）、總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、糖化血紅蛋白（HbA1c）水平；采用黃嘌呤氧化酶法測定SOD；采用二硫代硝基苯甲酸比色法測定GSH；采用硫代巴比妥法測定MDA；采用酶聯(lián)免疫吸附法測定HIF-1α、MBP、hs-CRP，試劑盒均由南京信帆生物技術(shù)有限公司提供，嚴(yán)格按照試劑盒操作說明書進(jìn)行操作。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

使用SPSS 20.0（IBM，City of New York，USA）統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗；糖尿病周圍神經(jīng)病變發(fā)生的影響因素采用多因素Logistic回歸分析；研究組患者血清HIF-1α、MBP、hs-CRP與SOD、GSH、MDA的相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)性檢驗。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般生化指標(biāo)比較

研究組TC、TG、FPG、HbA1c、FINS水平均明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。見表1。

2.2 兩組血清HIF-1α、MBP、hs-CRP水平比較

研究組血清HIF-1α、MBP、hs-CRP水平均明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。見表2。

2.3 兩組氧化應(yīng)激指標(biāo)水平比較

研究組血清SOD、GSH水平均明顯低于對照組（P < 0.05），血清MDA水平明顯高于對照組（P < 0.05）。見表3。

2.4 糖尿病周圍神經(jīng)病變影響因素的多因素Logistic回歸分析

多因素Logistic回歸分析結(jié)果表明，年齡、糖尿病病程、TC、TG、FPG、HbA1c、FINS、HIF-1α、MBP、hs-CRP、MDA是糖尿病周圍神經(jīng)病變發(fā)生的獨(dú)立危險因素（P < 0.05），SOD、GSH是糖尿病周圍神經(jīng)病變的保護(hù)性因素（P < 0.05）。見表4。

2.5 相關(guān)性分析

研究組血清HIF-1α、MBP、hs-CRP水平均與MDA呈正相關(guān)關(guān)系（r=0.547、0.624、r=0.685，P < 0.05），見圖1；與SOD、GSH水平呈負(fù)相關(guān)關(guān)系（r=-0.565、-0.583、-0.592，r=-0.492、-0.551、-0.572，P < 0.05），見圖2～3。

3 討論

糖尿病合并周圍神經(jīng)病變在臨床上大部分較為隱匿，難以被發(fā)現(xiàn)，確診時大部分患者的臨床癥狀和體征已較為嚴(yán)重，預(yù)后不佳[9-10]。由于受到感染、感覺異常、肢體殘疾等因素的影響，糖尿病合并周圍神經(jīng)病變患者生活質(zhì)量往往較低[11-12]。研究證實，糖尿病發(fā)生周圍神經(jīng)病變的機(jī)制主要是因為糖尿病患者體內(nèi)終末糖基化產(chǎn)物累及較多，誘發(fā)機(jī)體組織缺血或者缺氧，促進(jìn)炎癥細(xì)胞因子釋放，激活多元醇通路，增強(qiáng)機(jī)體氧化應(yīng)激水平，產(chǎn)生過多的自由基，進(jìn)而誘發(fā)周圍神經(jīng)病變[13]。有研究表明，糖尿病周圍神經(jīng)病變發(fā)生和發(fā)展過程中伴隨著患者一般生化指標(biāo)、血清HIF-1α、MBP、hs-CRP和氧化應(yīng)激反應(yīng)的水平變化[14]。本文亦從這些方面入手進(jìn)行相關(guān)性綜合研究。

本研究顯示，研究組一般生化指標(biāo)TC、TG、FPG、HbA1c、FINS水平均明顯高于對照組（P < 0.05）。說明糖尿病周圍神經(jīng)病變患者糖脂代謝出現(xiàn)紊亂，胰島素發(fā)生抵抗。有研究顯示，糖脂代謝異常會誘發(fā)糖尿病患者出現(xiàn)血管病變及多種并發(fā)癥[15]。因此，在疾病治療過程中應(yīng)重視糖脂代謝的糾正。

HIF-1α是機(jī)體在缺氧條件下所產(chǎn)生的一種重要的蛋白質(zhì)調(diào)節(jié)因子，HIF-1α水平受氧濃度的調(diào)控[16]。MBP是一種可以反映神經(jīng)系統(tǒng)損傷的敏感指標(biāo)及特異性標(biāo)志物，近年來其得到了國內(nèi)外許多學(xué)者的關(guān)注[17-18]。血清MBP含量的高低可以較準(zhǔn)確地反映神經(jīng)損害的嚴(yán)重程度。hs-CRP是在病原微生物入侵或者機(jī)體組織發(fā)生損傷等一系列炎癥性刺激下，在肝細(xì)胞中所合成的急性相蛋白。本研究顯示，研究組血清HIF-1α、MBP、hs-CRP水平均明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。提示血清HIF-1α、MBP、hs-CRP水平越高，糖尿病周圍神經(jīng)病變的臨床癥狀越嚴(yán)重，神經(jīng)傳導(dǎo)功能越差。這可能與糖尿病周圍神經(jīng)病變患者糖脂代謝異常，機(jī)體耗氧量增加，而紅細(xì)胞攜氧能力降低有關(guān)。另外，終末糖基化產(chǎn)物廣泛沉積于神經(jīng)內(nèi)血管，使管腔狹窄、閉塞，造成神經(jīng)內(nèi)膜血流減少、缺血和缺氧，誘發(fā)患者血清HIF-1α升高。hs-CRP已被證實是糖尿病有效預(yù)測因子，其在糖尿病患者血清中表達(dá)顯著升高，hs-CRP升高同時會刺激血管內(nèi)皮因子的釋放，使供應(yīng)神經(jīng)組織血流下降，造成周圍神經(jīng)、自主神經(jīng)以及神經(jīng)元損害，MBP指標(biāo)水平隨之升高，誘發(fā)糖尿病周圍神經(jīng)病變。因此，HIF-1α、hs-CRP和MBP均參與了糖尿病周圍神經(jīng)病變發(fā)生和發(fā)展。

國外研究認(rèn)為，糖尿病周圍神經(jīng)病變的發(fā)生及發(fā)展與人體氧化應(yīng)激中的相關(guān)通路密切相關(guān)[19]。氧化應(yīng)激可以激活體內(nèi)的生長因子、產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)的元件與體內(nèi)組織細(xì)胞凋亡通路，與此同時可以抑制人體中參與葡萄糖代謝的多種細(xì)胞因子及酶類[20]。本研究顯示，研究組血清SOD、GSH水平明顯低于對照組（P < 0.05），血清MDA水平明顯高于對照組（P < 0.05）。說明糖尿病周圍神經(jīng)病變患者體內(nèi)氧化應(yīng)激水平發(fā)生明顯變化。這可能因為糖尿病患者機(jī)體中活性氧簇（ROS）較多，進(jìn)而使氧化應(yīng)激指標(biāo)發(fā)生異常。為此，在糖尿病合并周圍神經(jīng)病變治療過程中應(yīng)該注重修復(fù)患者體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)，提高患者機(jī)體清除ROS的能力。

多因素Logistic回歸分析表明，年齡、糖尿病病程、TC、TG、FPG、HbA1c、FINS、HIF-1α、MBP、hs-CRP、MDA是糖尿病周圍神經(jīng)病變發(fā)生的獨(dú)立危險因素（P < 0.05），SOD、GSH是糖尿病周圍神經(jīng)病變的保護(hù)性因素（P < 0.05）。說明上述因素可作為預(yù)測糖尿病周圍神經(jīng)病變患者病情進(jìn)展及預(yù)后的輔助指標(biāo)。Spearman相關(guān)性檢驗顯示，研究組血清HIF-1α、MBP、hs-CRP均與MDA水平呈正相關(guān)（P < 0.05），與SOD、GSH水平呈負(fù)相關(guān)（P < 0.05）。說明糖尿病周圍神經(jīng)病變患者血清HIF-1α、MBP、hs-CRP水平升高，致使氧化應(yīng)激反應(yīng)增強(qiáng)，誘發(fā)微循環(huán)發(fā)生障礙，使神經(jīng)營養(yǎng)出現(xiàn)失調(diào)，發(fā)生糖尿病神經(jīng)損傷。本研究認(rèn)為HIF-1α、MBP、hs-CRP、SOD、GSH與MDA水平能夠用于糖尿病周圍神經(jīng)病變患者病情的動態(tài)觀測，對于糖尿病患者應(yīng)該給予動態(tài)監(jiān)測HIF-1α、MBP、hs-CRP濃度，強(qiáng)化干預(yù)，進(jìn)而預(yù)防糖尿病周圍神經(jīng)病變的發(fā)生。

綜上所述，血清HIF-1α、MBP、hs-CRP水平的上升和氧化應(yīng)激反應(yīng)均參與糖尿病周圍神經(jīng)病變的發(fā)生及發(fā)展，可能成為臨床輔助診斷糖尿病周圍神經(jīng)病變患者的生物指標(biāo)，為臨床干預(yù)治療提供理論依據(jù)。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Inceu G，Demea H，Veresiu IA. Corneal Confocal Microscopy-A Novel，Noninvasive Method to Assess Diabetic Peripheral Neuropathy [J]. Romanian J Diabet Nutr Metab Dis，2016， 21（4）：319-326.

[2] Trippe BS，Barrentine LW，Curole MV，et al. Nutritional management of patients with diabetic peripheral neuropathy with metanx： results of a real-world patient experience trial [J]. Curr Med Res Opin，2016，32（2）：1-28.

[3] Yu S，Chen Y，Hou X，et al. Serum uric acid levels and diabetic peripheral neuropathy in type 2 diabetes：a systematic review and meta-analysis [J]. Mol Neurobiol，2016， 53（2）：1045-1051.

[4] Hewston P，Deshpande N. Falls and balance impairments in older adults with type 2 diabetes： thinking beyond diabetic peripheral neuropathy [J]. Can J Diabetes，2016，40（1）：6-9.

[5] Ozuguz U，Oruc S，Ulu MS，et al. Does vitamin d have any role in the improvement of diabetic peripheral neuropathy in type 1 diabetic patients？ [J]. J Endocrinol Invest，2016， 39（12）：1411-1417.

[6] Adams AS，Parker MM，Moffet HH，et al. Communication barriers and the clinical recognition of diabetic peripheral neuropathy in a diverse cohort of adults： the distance study [J]. J Health Commun，2016，21（5）：544-553.

[7] Handsaker JC，Brown SJ，Bowling FL，et al. People with diabetic peripheral neuropathy display a decreased stepping accuracy during walking：potential implications for risk of tripping [J]. Diabet Med，2016，33（5）：644-649.

[8] Roy RP，Ghosh K，Ghosh M，et al. Study of vitamin b12deficiency and peripheral neuropathy in metformin-treated early type 2 diabetes mellitus [J]. Indian J Endocrinol Metab，2016，20（5）：631-637.

[9] Vas PR，Edmonds ME. Early recognition of diabetic peripheral neuropathy and the need for one-stop microvascular assessment [J]. Lancet Diabetes Endocrinol，2016，4（9）：723-725.

[10] Zhang X，Hu Y，Shen J，et al. Low levels of ficolin-3 are associated with diabetic peripheral neuropathy [J]. Acta Diabetol，2016，53（2）：295-302.

[11] Baltzis D，Roustit M，Grammatikopoulou MG，et al. Diabetic peripheral neuropathy as a predictor of asymptomatic myocardial ischemia in type 2 diabetes mellitus： a cross-sectional study [J]. Adv Ther，2016，33（10）：1-8.

[12] Won JC，Park TS. Recent advances in diagnostic strategies for diabetic peripheral neuropathy [J]. Endocrinol Metab （Seoul），2016，31（2）：230-238.

[13] Jin HY，Lee KA，Park TS. The impact of glycemic variability on diabetic peripheral neuropathy [J]. Endocrine，2016，53（3）：1-6.

[14] Dobrowsky RT. Targeting the diabetic chaperome to improve peripheral neuropathy [J]. Curr Diab Rep，2016，16（8）：1-10.

[15] 王瑞，蘆夏，由天輝，等.廣州市正常體檢人群高血壓前期及其合并的糖脂代謝異常情況[J].廣東醫(yī)學(xué)，2015， 36（13）：2083-2087.

[16] Chatzikosma G，Pafili K，Demetriou M，et al. Evaluation of sural nerve automated nerve conduction study in the diagnosis of peripheral neuropathy in patients with type 2 diabetes mellitus [J]. Arch Med Sci，2016，12（2）：390-393.

[17] Lenherr SM，Clemens JQ，Braffett BH，et al. Glycaemic control and risk of incident urinary incontinence in women with type 1 diabetes：results from the diabetes control and complications trial and epidemiology of diabetes interventions and complications（dcct/edic）study [J]. Diabet Med，2016，33（11）：1528-1535.

[18] Duksal T，Tiftikcioglu BI，Bilgin S，et al. Role of inflammation in sensory neuropathy in prediabetes or diabetes [J]. Acta Neurol Scand，2016，133（5）：384-390.

[19] Srinivasan S，Pritchard N，Sampson GP，et al . Focal loss volume of ganglion cell complex in diabetic neuropathy [J]. Clin Exp Optom，2016，99（6）：526-534.

[20] Chen J，Li L. Validation of neuropathic pain assessment tools among chinese patients with painful diabetic peripheral neuropathy [J]. Int J Nurs Sci，2016，3（2）：139-145.

（收稿日期：2017-02-01 本文編輯：程 銘）