趙博華，賀占國，王憲靈，張海譜，賀政新

兒童呼吸道病原體急性感染流行病學分析

趙博華，賀占國，王憲靈，張海譜，賀政新

目的 分析兒童急性呼吸道感染(ARI)病原體特異性IgM抗體檢出情況，為該地區(qū)兒童ARI的早期診斷、治療提供參考依據(jù)。方法 對選擇的1928例ARI行呼吸道病原體特異性IgM抗體檢測，包括嗜肺軍團菌(LPN)、肺炎支原體(MP)、Q熱立克次體(COX)、肺炎衣原體(CPN)、腺病毒(ADV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(IVA)、乙型流感病毒(IVB)及副流感病毒(PIV)，比較不同年齡段及季節(jié)的病原體感染情況。結(jié)論 本組MP特異性IgM抗體陽性檢出率最高，其次為IVB和PIV。與>3～≤6歲組比較，≤3歲組MP陽性率、≤3歲組和>6～≤16歲組IVB和PIV陽性率均明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。呼吸道感染病原體特異性IgM抗體陽性率以冬季最高，且MP陽性率冬季明顯高于春季和夏季(P<0.05)，IVB陽性率冬季明顯高于夏季和秋季(P<0.01)，PIV陽性率秋季明顯高于春季和冬季，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。結(jié)論 本地區(qū)患兒ARI以MP、IVB、PIV感染為主，且不同年齡和季節(jié)病原體感染存在明顯差異。

呼吸道感染；兒童；病原體；流行病學

呼吸道感染是兒科最常見的感染性疾病[1-2]，也是嬰幼兒死亡的首要病因。若呼吸道感染治療不及時或處理不當，可發(fā)展成重癥肺炎，部分患兒甚至出現(xiàn)呼吸衰竭、心力衰竭或肝腎功能損害，嚴重者可導致死亡[3-5]。呼吸道感染可由多種病原體引起，為了解本地區(qū)兒童呼吸道感染的流行病學特點，本研究采用間接免疫熒光法對急性呼吸道感染(ARI)的患兒進行呼吸道病原體特異性IgM抗體檢測，分析感染特征，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選取我院2015年10月—2016年9月收治的兒童ARI 1928例，其中男1138例，女790例；年齡0～16歲。參照《諸福堂實用兒科學(第8版)》[6]呼吸道感染診斷標準，診斷為肺炎1112例，其中單純性肺炎541例，支氣管肺炎414例，憋喘性肺炎114例，喘息性支氣管肺炎35例，喘息性肺炎8例；支氣管炎816例，其中單純性支氣管炎711例，喘息性支氣管炎97例，憋喘性支氣管炎8例。

1.2 研究方法

1.2.1 儀器及試劑:熒光顯微鏡為日本產(chǎn)OLYMPUSBX51型，呼吸道病原體特異性IgM抗體檢測試劑盒購自西班牙VIRCELL.S.L公司(PNEUMOSLIDE IgM)。

1.2.2 檢測方法:采用間接免疫熒光法檢測呼吸道病原體特異性IgM抗體。所有患兒均于入院當日抽取靜脈血3 ml置于促凝試管內(nèi)，4000 r/min離心10 min，留取血清備用，嚴格按照試劑操作說明書進行。先將待檢血清用磷酸鹽緩沖液(PBS)按1∶1的比例進行稀釋，取稀釋后血清30 μl加入150 μl吸附劑，徹底混勻后13000 r/min離心10 min，除去沉淀；繼之于載玻片的試驗孔內(nèi)分別加入已處理的稀釋血清和質(zhì)控品，37℃濕盒內(nèi)放置90 min，PBS洗滌2次，蒸餾水洗滌1次，自然晾干；再加入熒光素結(jié)合物，37℃濕盒內(nèi)放置30 min，PBS洗滌2次，蒸餾水洗滌1次，自然晾干；最后加入適量封閉介質(zhì)，蓋上蓋玻片，在熒光顯微鏡400倍視野下觀察。均設立陰性和陽性對照，確保試驗和試劑盒的有效性。

1.3 統(tǒng)計學分析 采用 SPSS 17.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)處理。計數(shù)資料采用χ2檢驗，用率(%)表示，當例數(shù)≤5時，采用fisher精確檢驗。以α=0.05為檢驗水準。

2 結(jié)果

2.1 呼吸道病原體特異性IgM抗體檢測結(jié)果 呼吸道病原體包括嗜肺軍團菌(LPN)、肺炎支原體(MP)、Q熱立克次體(COX)、肺炎衣原體(CPN)、腺病毒(ADV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(IVA)、乙型流感病毒(IVB)及副流感病毒(PIV)。本組呼吸道病原體特異性IgM抗體陽性441例次，檢出率為22.87%，其中MP特異性IgM抗體陽性339例次，檢出率最高，達17.58%，見表1。

表1 兒童急性呼吸道感染1928例呼吸道病原體特異性IgM抗體檢測結(jié)果

2.2 呼吸道病原體混合感染情況 本組同時檢出2種呼吸道病原體特異性IgM抗體陽性28例，占1.45%(28/1928)，同時檢出3種呼吸道病原體特異性IgM抗體陽性2例，占0.10%(2/1928)。在30例混合感染中，出現(xiàn)MP+IVB感染15例，IVB+PIV感染8例，MP+PIV感染3例，MP+LPN感染、IVA+PIV感染、MP+PIV+IVB感染及MP+PIV+IVA感染各1例。

2.3 不同年齡段呼吸道病原體特異性IgM抗體感染情況 依據(jù)兒童的生長發(fā)育過程進行分組，其中≤3歲組患兒呼吸道病原體特異性IgM抗體陽性227例次，>3～≤6歲組132例次，>6～≤16歲組82例次。各年齡段呼吸道病原體陽性率均為MP最高，其次為IVB。與>3～≤6歲組比較，≤3歲組MP陽性率、≤3歲組及>6～≤16歲組IVB和PIV陽性率均明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，而>6～≤16歲組MP陽性率降低不明顯，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；與≤3歲組比較，>6～≤16歲組MP、IVB及PIV陽性率差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，見表2。

表2 不同年齡段兒童急性呼吸道感染1928例呼吸道病原體特異性IgM抗體陽性檢出情況[例(%)]

注：與>3～≤6歲組比較，aP<0.05，bP<0.01

2.4 不同季節(jié)呼吸道病原體特異性IgM抗體陽性檢出情況 本研究定義春季為3～5月，夏季為6～8月，秋季為9～11月，冬季為12～次年2月。呼吸道病原體特異性IgM抗體陽性檢出率以冬季最高，其余依次為秋季、夏季、春季。MP陽性率冬季明顯高于春季和夏季，IVB陽性率冬季明顯高于夏季和秋季，PIV陽性率秋季明顯高于春季和冬季，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表3。

表3 不同季節(jié)急性呼吸道感染1928例呼吸道病原體特異性IgM抗體陽性檢出情況[例(%)]

注：與春季和夏季肺炎支原體陽性率比較，aP<0.05；與夏季和秋季乙型流感病毒陽性率比較，cP<0.05；與春季和冬季副流感病毒陽性率比較，bP<0.01

3 討論

ARI為兒童常見病，在學齡前兒童中下呼吸道感染發(fā)病率較高[7-8]。有報道發(fā)現(xiàn)ARI人數(shù)占兒科住院總?cè)藬?shù)的72.3%[9]。近年兒童呼吸道病原體感染的檢測越來越受到重視，且呼吸道病原體感染常因地區(qū)、年份、季節(jié)和年齡的不同而存在差異[10]。本研究發(fā)現(xiàn)該地區(qū)1928例ARI檢出呼吸道病原體特異性IgM抗體陽性441例次，檢出率為22.87%，與江嶠等[11-12]研究結(jié)果一致，但與許沙沙等[13-14]研究結(jié)果存在差異，可能與氣候、環(huán)境、生活習慣和研究對象的選擇及其構(gòu)成等有關。本組MP特異性IgM抗體陽性339例次，檢出率最高，與國內(nèi)多項兒童呼吸道感染研究結(jié)果相一致[15-17]，其余依次為IVB、PIV、CPN、LPN、ADV、IVA、RSV及COX﹙未檢出﹚，提示本地區(qū)兒童ARI以MP、和IVB和PIV感染為主，與李寧霞等[16]報道一致。本組同時檢出2種或3種呼吸道病原體特異性IgM抗體30例，占1.56%，提示ARI患兒可能存在多種呼吸道病原體的混合感染，亦可能是患兒在近期先后感染了2種以上病原體，即在一種病原體特異性IgM抗體未消失時又感染了其他病原體，而非真正意義上的混合感染[18]。在30例混合感染病例中，IVB感染24例，占80.00%(24/30)，說明混合感染以IVB多見，提示IVB易與其他病原體發(fā)生混合感染，且以MP+IVB混合感染最多見，與許沙沙等[13]報道一致。

分析呼吸道病原體特異性IgM抗體在不同年齡段的分布，發(fā)現(xiàn)各年齡段病原體特異性IgM抗體陽性率均以MP最高，這與周蓮等[19]報道一致；其次為IVB，其他病原體在各年齡段的陽性率均較低。MP陽性率<3～≤6歲組明顯高于≤3歲組，差異有統(tǒng)計學意義，但>3～≤6歲組與>6～≤16歲組MP陽性率差異無統(tǒng)計學意義，與黃銳等[20-21]報道一致；IVB及PIV陽性率>3～≤6歲組明顯高于≤3歲組和>6～≤16歲組，差異有統(tǒng)計學意義，與邱勝豐等[17]報道一致。提示<3～≤6歲兒童為易感人群，分析原因可能是此年齡段為學齡前，防范意識差，機體的免疫機制尚未完全建立，且常在人群較密集的地方活動，易造成交叉感染。據(jù)文獻報道，學齡前兒童發(fā)生上呼吸道感染的概率高于嬰幼兒[22]，與本研究結(jié)果一致。分析≤3歲組陽性檢出率較低的原因可能為嬰幼兒呼吸道感染常發(fā)病急、就醫(yī)早，采血時可能處于特異性IgM抗體產(chǎn)生的窗口期，不能有效檢測到病原體特異性IgM抗體[23]，且嬰幼兒免疫組織器官功能發(fā)育尚未完全，在病原體感染的短時間內(nèi)不能有效產(chǎn)生特異性IgM抗體。分析>6～≤16歲組呼吸道病原體特異性IgM抗體陽性檢出率較低的原因可能是兒童免疫系統(tǒng)隨年齡的增長而逐漸完善，機體免疫力增強，感染概率下降。

本研究分析了ARI患兒呼吸道病原體特異性IgM抗體在不同季節(jié)的檢出情況，發(fā)現(xiàn)冬季抗體陽性率最高，與李東明等[14,16,19]報道一致；其次為秋季、夏季、春季。MP陽性率冬季明顯高于春季和夏季，與周蓮等[19]等報道一致；IVB陽性率冬季明顯高于夏季和秋季，與謝菲等[24]結(jié)果不一致，可能與檢測方法、病原譜構(gòu)成有關。MP、IVB在冬季檢出率高[25]，原因可能是北方冬季氣候寒冷、干燥，更適宜MP、IVB的生存和傳播；或是本地區(qū)冬季霧霾較嚴重，室內(nèi)外溫差較大，兒童戶外活動減少，機體免疫力下降，增加了病原體的傳播。PIV陽性率秋季明顯高于春季和冬季，與柳鵬程等[26]結(jié)果存在偏差，可能與檢測方法、研究年份、氣候、溫度及濕度有關。本文發(fā)現(xiàn)MP可四季流行，說明MP感染是本地區(qū)ARI最常見的病原體，可能因為人是MP的唯一宿主，常通過飛沫傳播，引發(fā)地方性或流行性擴散[27]。

綜上，不同地域的氣候條件，包括溫度、濕度等均可影響病原體感染的流行[19]，且不同年齡段病原體的感染情況不同，故如何及時準確判斷病原體感染、實現(xiàn)個體化治療是目前臨床面臨的重要問題[28-29]。因此，分析呼吸道病原體感染的流行病學特點，為指導臨床合理用藥、預防及控制疾病的流行提供科學依據(jù)。

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Epidemiological Analysis of Children with Acute Respiratory Infection

ZHAO Bo-hua, HE Zhan-guo, WANG Xian-ling, ZHANG Hai-pu, HE Zheng-xin
(Department of Clinical Laboratory, Bethune International Peace Hospital of PLA, Shijiazhuang 050082, China)

Objective To analyze detection condition of special IgM antibodies of children with acute respiratory infection (ARI) in order to provide reference for early diagnosis and therapy of ARI children in Shijiazhuang area. Methods Serum specific IgM antibodies of respiratory pathogens, which included legionella pneumophila (LPN), mycoplasma pneumoniae (MP), Q fever rickettsia burneti (COX), chlamydia pneumoniae (CPN), adenovirus (ADV), respiratory syncytial virus (RSV), influenza virus A (IVA), influenza virus B (IVB) and parainfluenze virus (PIV), were detected for 1928 patients with ARI. Conditions of pathogen infection in different ages and seasons were compared. Results Among the pathogens, the highest detection rate was MP, and then followed by IVB and PIV. Compared with those in children with >3-≤6 years old group, the MP positive rate in children with ≤3 years old group and IVB and PIV positive rates in children with ≤3 years old group and >3-≤6 years old group were significantly decreased. The highest positive rate of special IgM antibody infection was in the winter, and MP positive rate in the winter was significantly higher than those in the spring and summer (P<0.05), while IVB positive rate in the winter was significantly higher than those in the summer and autumn (P<0.01), and PIV positive rate in the autumn was significantly higher than those in the spring and winter (P<0.01). Conclusion MP, IVB and PIV infection are the main respiratory pathogens of ARI children in Shijiazhuang area, and pathogens in different ages and seasons have significantly different characteristics.

Respiratory tract infections; Children; Pathogens； Epidemiology

050082 石家莊，解放軍白求恩國際和平醫(yī)院檢驗科

賀占國，電話：0311-87978545；E-mail:Zdcwork2011@126.com

R517.6

A

1002-3429(2017)06-0084-04

10.3969/j.issn.1002-3429.2017.06.031

2017-03-15 修回時間：2017-04-17)