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        木薯組織培養(yǎng)中常用培養(yǎng)基簡介

        2017-07-01 21:06:30文峰蘇文潘鄭華黃建祺羅燕春韋麗
        農(nóng)業(yè)研究與應用 2017年2期
        關鍵詞:再生組織培養(yǎng)木薯

        文峰+蘇文潘+鄭華+黃建祺+羅燕春+韋麗君+雷開文

        摘 要:木薯是一種重要的糧食和工業(yè)原料作物。組織培養(yǎng)技術在木薯生物技術中起著重要的作用。本文對木薯組織培養(yǎng)中一些常用培養(yǎng)基進行了總結與匯總,包括MS、CIM、MSN、CMM、CEM、GD、SH、TM2G 8種常用培養(yǎng)基的組成及其在木薯組織培養(yǎng)中所處的階段和作用等,為木薯組織培養(yǎng)工作者提供借鑒作用。

        關鍵詞:木薯 組織培養(yǎng) 培養(yǎng)基 再生

        木薯(Manihot esculenta Crantz)別名番薯、樹薯,屬于大戟科(Euphorbiaceae)木薯屬(Manihot)灌木,是一種重要的糧食和工業(yè)原料作物。組織培養(yǎng)技術在木薯生物技術中起著至關重要的作用。木薯組織培養(yǎng)技術雖能使木薯嫩葉、芽、花、愈傷組織、原生質(zhì)體等多種外植體再生成完整植株,但基因型或者再生效率仍有限制。文章對 木薯組織培養(yǎng)中MS、CIM、MSN、CMM、CEM、GD、SH、TM2G 8種常用培養(yǎng)基進行了總結與匯總,為木薯組織培養(yǎng)工作者提供借鑒作用。

        1 木薯培養(yǎng)基組成和作用

        木薯培養(yǎng)基MS、CIM、MSN、CMM、CEM基本組成均一樣,都是由MS鹽和維生素(表1),加上20 g/L蔗糖、8 g/L瓊脂和2 μM CuSO4(也可不加)和激素組成,因激素的種類或激素的用量不同,而在木薯的組織培養(yǎng)再生過程中起的作用卻不同(表2)。

        木薯培養(yǎng)基CIM和MSN均可用于誘導胚胎,但常誘導的外植體不同。CIM常誘導的外植體可以是嫩葉、頂芽、腋芽等,用于初生、次生和循環(huán)的體細胞胚的誘導,是體細胞胚發(fā)生的開始,能長成球型胚、魚雷型胚和子葉型胚等不同類型的胚狀體;MSN常誘導的外植體是脆性胚性愈傷組織(FEC)或者由原生質(zhì)體分裂長成的愈傷,在光下培養(yǎng),在MSN培養(yǎng)基上可以長成球型胚、魚雷型胚和綠色子葉型胚等不同類型的胚狀體。CIM在暗環(huán)境下誘導,而MSN在光下誘導。

        經(jīng)過CIM和MSN培養(yǎng)基誘導的魚雷型胚和子葉型胚的再生過程均一樣,都要經(jīng)過成熟、生芽伸長、生根的過程,分別在CMM、CEM、MS培養(yǎng)基上完成。這幾個過程都要在光下培養(yǎng)。魚雷型胚和子葉型胚在CMM培養(yǎng)基上培養(yǎng)成熟,長成綠色大子葉胚,一般需要1~4周。綠色大子葉胚在CEM培養(yǎng)基上培養(yǎng),起到生芽伸長的作用,莖長至2~3 cm一般需要1~2月。長至2~3 cm的莖在MS培養(yǎng)基中生根,一般1周即可生根。至此一個再生過程就完成了。MS培養(yǎng)基也用于木薯組培苗的常規(guī)繼代。

        GD培養(yǎng)基用于木薯FEC的胚性維持和增殖,也可以用于FEC的誘導。SH培養(yǎng)基,也能起到FEC的胚性維持和增殖的作用。GD是固體培養(yǎng)基培養(yǎng),SH是液體培養(yǎng)基懸浮培養(yǎng),F(xiàn)EC在GD和SH培養(yǎng)基中能夠相互轉換,性質(zhì)不改變。SH培養(yǎng)基培養(yǎng)相比于GD培養(yǎng)基培養(yǎng),細胞一致性更好,增殖更快。

        TM2G培養(yǎng)基用于木薯愈傷原生質(zhì)體的培養(yǎng),在培養(yǎng)過程中需要逐漸減小培養(yǎng)基的滲透壓,以利于細胞團的生長,通常由減少葡萄糖的用量完成[8]。

        2 小結

        隨著細胞工程和基因工程的發(fā)展,高效的木薯再生體系技術顯得尤為重要,而培養(yǎng)基在木薯再生體系過程中起關鍵作用。木薯組織培養(yǎng)技術經(jīng)過多年的發(fā)展,各組織培養(yǎng)階段形成了各自適宜的培養(yǎng)基。本文對各組織培養(yǎng)階段所常用的培養(yǎng)基進行了總結,為木薯組織培養(yǎng)工作者提供借鑒作用。

        參考文獻

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        [3] Zhang P, Puonti-Kaerlas J. PIG-mediated cassava transformation using positive and negative selection[J]. Plant Cell Reports, 2000, 19: 1041-1048.

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        [8] 文峰, 肖詩鑫, 聶揚眉, 等. 木薯脆性胚性愈傷組織原生質(zhì)體培養(yǎng)與植株再生[J]. 中國農(nóng)業(yè)科學, 2012, 45(19): 4050-4056.

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