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        碼蛋方式的改變對X期雞胚體外發(fā)育的影響

        2017-06-29 18:48:02索南才仁
        湖北畜牧獸醫(yī) 2017年5期
        關鍵詞:孵化率

        索南才仁

        摘要:在種蛋大頭開1.5 cm × 1.0 cm橢圓形口的情況下,就翻蛋和碼蛋方式對X期雞胚體外發(fā)育的影響進行了研究。從試驗結果來看,①9日齡的存活率兩組分別達73%和80%,表明0日齡種蛋在大頭開孔后,0~8日齡小頭向上翻蛋進行孵化是較為合適的。8日齡時碼蛋方式的轉變,即小頭向上轉變?yōu)榇箢^向上,使雞胚出現(xiàn)快速死亡,12日齡時兩組雞胚全部死亡。②對比6~9日齡的存活率,大頭向上碼蛋組從6日齡到9日齡存活率下降了7%,而橫放碼蛋組的存活率沒有下降,因此,在8日齡碼蛋方式發(fā)生改變后,兩組存活率的下降并不明顯(P>0.05),但至12日齡時兩組雞胚均全部死亡。試驗結果表明,8日齡時,碼蛋方式由小頭向上轉變?yōu)榇箢^向上或橫放會加快雞胚的死亡,尤其是轉變?yōu)榇箢^向上。

        關鍵詞:翻蛋次數(shù);置蛋方式;孵化率

        中圖分類號:S831 文獻標識碼:A 文章編號:1007-273X(2017)05-0010-02

        禽類胚胎是發(fā)育生物學研究的良好實驗材料,利用體外培養(yǎng)技術可以滿足對各個發(fā)育階段的胚胎進行操作的需要,而且便于觀察。然而雞胚體外培養(yǎng)的孵化率并不高,特別是剛產下的X期的胚胎。郝志明等[1]采用抽蛋清的方法對X期雞胚體外培養(yǎng)的影響因素進行了研究,發(fā)現(xiàn)抽取1 mL蛋清后,3日齡雞胚的孵化率達到81.3%,而X期雞胚的孵化率僅為31.3%。為了進一步探究造成X期雞胚體外培養(yǎng)孵化率下降的主要原因,本試驗就翻蛋和碼蛋方式對X期雞胚體外培養(yǎng)的影響進行了研究,以期提高X期雞胚體外培養(yǎng)的孵化率,促進雞胚生物工程技術的發(fā)展。

        1 試驗方法

        1.1 試驗設計

        試驗一:在雞蛋大頭頂端開1.5 cm×1.0 cm橢圓形口的情況下,翻蛋和碼蛋方式按下述方法進行: 0~8日齡小頭向上翻蛋,8~12日齡大頭向上不翻蛋,12日齡以后大頭向上翻蛋(一組)或大頭向上不翻蛋(二組),以研究12日齡后翻蛋對X期雞胚體外發(fā)育的影響。

        試驗二:在雞蛋大頭頂端開1.5 cm×1.0 cm橢圓形口的情況下,翻蛋和碼蛋方式按下述方法進行:0~8日齡小頭向上翻蛋,8~12日齡大頭向上(一組)或橫放(二組)不翻蛋,12日齡后大頭向上(一組)或橫放(二組)翻蛋,以研究8日齡后碼蛋方式對X期雞胚體外發(fā)育的影響。

        1.2 方法

        操作全過程在超凈工作臺上進行。試驗前,擦凈超凈工作臺,將所有器械和試劑置于超凈工作臺上,紫外線照射30 min以上進行消毒。用塑料飲料瓶剪切封口蓋,封口蓋的大小較蛋殼開口大2 mm,形狀同蛋殼開口。剪好的封口蓋需置于盛有75%乙醇的平皿中浸泡30 min,并分散置于鋪有硫酸紙的超凈工作臺上,紫外線照射消毒并晾干。種蛋則用酒精棉球擦拭消毒,確保整個蛋殼表面均被擦拭并晾干。用鉛筆在種蛋的大頭畫1.5 cm×1.0 cm橢圓,然后用手術刀片沿所畫線的外沿在蛋殼上刻出劃痕,除去劃痕內的蛋殼和蛋殼膜,切口應盡量平滑,除去蛋殼膜時應用鑷子小心向切口處夾取,不得破壞切口外的蛋殼膜。開口種蛋用預制好的塑料封口蓋蓋好,再用封口膠粘合封閉,確保封閉嚴實,無外漏。封好后開口向下放置20 min,檢查是否有漏出蛋清的現(xiàn)象,如有需進行修補。

        按照試驗分組的設計方案,將開過口的種蛋放置于孵化器托盤中。

        孵化條件:孵化溫度為37.80 ℃,濕度為60%~65%。出雛溫度為37.00 ℃,濕度為70%~75%。翻蛋為自動翻蛋,每2 h一次,翻蛋角度為±45°。孵化期間,每日早、晚觀察孵化器2次,并記錄孵化器溫度、濕度和翻蛋次數(shù)。孵化18 d時落盤,21 d時觀察出雛情況[2]。分別在孵化的第3、6、9、12、15和18天進行照蛋,觀察胚胎的心臟、胎膜、血管、胚體等,以此來判斷雞胚的存活以及胚胎的發(fā)育情況。死亡雞胚及時打開,觀察死胚的發(fā)育情況。試驗數(shù)據(jù)用百分數(shù)表示,并用t檢驗對組間的差異進行顯著性分析。

        2 結果及分析

        2.1 12日齡后翻蛋對X期胚胎體外發(fā)育的影響

        本試驗的目的是想確定12日齡后翻蛋對X期雞胚體外發(fā)育有無影響,但從表1來看,12日齡后雞胚已全部死亡,因此試驗設計沒有達到預想的效果。但從9日齡的存活率來看,兩組的存活率分別達73%和80%,表明0日齡種蛋在大頭開1.5 cm×1.0 cm橢圓形孔后,0~8日齡小頭向上翻蛋進行孵化是較為合適的[3]。但8日齡碼蛋方式的轉變,即小頭向上轉變?yōu)榇箢^向上使雞胚出現(xiàn)快速死亡,至12日齡時,兩組雞胚均全部死亡。

        2.2 8日齡后碼蛋方式對X期雞胚體外發(fā)育的影響

        由表2可見,9日齡存活率方面,大頭向上碼蛋組和橫放碼蛋組的存活率分別為73%和93%,兩組之間具有明顯的差異(P<0.05),但從6~9日齡的存活率來看,大頭向上碼蛋組6~9日齡存活率下降了7個百分點,而橫放碼蛋組的存活率沒有下降,因此,在8日齡碼蛋方式發(fā)生改變后,兩組存活率的下降并不明顯(P>0.05)。但12日齡時雞胚仍全部死亡[4]。

        3 雞胚死亡主要原因分析

        研究結果表明,雞蛋開口及抽取蛋清會對雞胚的體外發(fā)育產生重要的影響。從本試驗結果可以看出,雞蛋開孔對雞胚的發(fā)育有很大影響。通過對死亡雞胚的解剖發(fā)現(xiàn),死亡雞胚常常出現(xiàn)胎膜與蛋殼膜的粘連、胎膜與蛋殼內膜的分離以及雞胚發(fā)育遲緩。蛋殼開孔后若翻蛋,可引起胎膜與蛋殼膜的粘連以及胎膜與蛋殼內膜的分離,胎膜與蛋殼膜的粘連可破壞胎膜,引起出血和胚胎的死亡;而胎膜與蛋殼內膜的分離則影響雞胚營養(yǎng)物質的吸收,從而影響雞胚的正常生長發(fā)育。若不進行翻蛋,則會影響雞胚的運動、血液循環(huán)和生長發(fā)育,甚至粘連,引起雞胚死亡。

        4 結論

        8日齡時,碼蛋方式由小頭向上轉變?yōu)榇箢^向上或橫放會加快雞胚的死亡,尤其轉變?yōu)榇箢^向上時雞胚更易死亡。

        參考文獻:

        [1] 郝志明,馬文芝,祁茂銅,等.空氣對X期雞胚原殼發(fā)育的影響[J].西北農業(yè)學報,2005,14(5):45-48.

        [2] 楊 寧.現(xiàn)代養(yǎng)雞生產[M].北京:北京農業(yè)大學出版社,1994.125-126.

        [3] 郝志明,馬文芝,祁茂銅,等. 雞胚原殼體外培養(yǎng)研究[J].西北農林科技大學學報(自然科學版),2005,33(9):28-31.

        [4] ANDACHT T,HU W,IVARIE R. Rapid and improvement method for windowing eggs accessing the stage Ⅹ chicken embryo[J].Molecular Reproduction and Development,2004,69:31-34.

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