□ 高光普 本刊記者

食品中諾如病毒的檢測

□ 高光普 本刊記者

國家對諾如病毒的檢測制定了詳細的標準，名為GB 4789.42-2016《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 諾如病毒檢驗》。GB 4789.42-2016標準規(guī)定了食品中諾如病毒的實時熒光RT-PCR檢測方法。

諾如病毒可感染人和動物并引起急性腸胃炎、冬季嘔吐性疾病、胃腸性流感等病癥，主要臨床表現(xiàn)為頭痛、發(fā)熱、惡心、腹痛腹瀉等，是非細菌性胃腸炎的主要病原體之一。

近年來，國內(nèi)外多個地區(qū)都爆發(fā)過諾如病毒感染事件。據(jù)統(tǒng)計，1998~2015年，美國諾如病毒爆發(fā)事件共計19000多起，受感染的人數(shù)高達37萬；我國自2017年春季以來也爆發(fā)了多起諾如病毒感染事件。那么諾如病毒到底是什么？針對食品中的諾如病毒，我國是否有與之相對應(yīng)的標準法規(guī)？如何對諾如病毒進行檢驗檢測？帶著這些問題，本刊記者采訪了北京良潤生物科技有限公司（以下簡稱“良潤生物”）總經(jīng)理劉磊先生，請他就諾如病毒的相關(guān)問題進行了解答。

記者：近年來，諾如病毒感染事件頻發(fā)對人民的生命財產(chǎn)安全造成了巨大損失，那么諾如病毒到底是什么？目前在全世界范圍內(nèi)的感染情況是怎樣的？

劉磊：諾如病毒（Norovirus，NoV）又稱諾瓦克病毒，是一組形態(tài)類似、抗原略有不同的病毒顆粒?？筛腥救撕蛣游锊⒁鸺毙阅c胃炎、冬季嘔吐性疾病、胃腸性流感等病癥，主要臨床表現(xiàn)為頭痛、發(fā)熱、惡心、腹痛腹瀉等，是非細菌性胃腸炎的主要病原體之一。諾如病毒是一種單鏈RNA病毒，主要分為6個基因型（GI-GVI），其中常見的世界性流行諾如病毒基因型主要分為GI和GII。

由諾如病毒引起的感染性腹瀉在全世界范圍內(nèi)均有流行，全年均可引發(fā)感染，感染對象主要是抵抗力弱的成人和學齡兒童，且寒冷季節(jié)呈高發(fā)趨勢。在美國每年所有的非細菌性腹瀉暴發(fā)中，60%~90%由諾如病毒引起，荷蘭、英國、日本、澳大利亞等國家也都有類似情況發(fā)生。在中國5歲以下的腹瀉兒童中，諾如病毒檢出率為15%左右，通過血清抗體水平調(diào)查表明中國人群中諾如病毒的感染亦十分普遍。

記者：對于諾如病毒的檢測，我國是否有著相應(yīng)的標準法規(guī)？

劉磊：我國政府十分重視食品安全問題，對于諾如病毒的檢測也制定了非常詳細的標準，名為GB 4789.42-2016《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 諾如病毒檢驗》。GB 4789.42-2016標準規(guī)定了食品中諾如病毒的實時熒光RT-PCR檢測方法，此標準適用于貝類、生食蔬菜、胡蘿卜、瓜、堅果等硬質(zhì)表面食品,草莓、西紅柿、葡萄等軟質(zhì)水果等食品中諾如病毒核酸的檢測。

GB 4789.42-2016中對檢測諾如病毒所需要的材料有著詳細限定，分別包括實時熒光PCR儀、低溫冰箱、微量移液器、網(wǎng)狀過濾袋、無菌棉拭子、無菌剪刀、無菌鉗子、pH計或pH試紙、無菌刀片或等效均質(zhì)器、離心機。而關(guān)于試劑，GB 4789.42-2016中還注明，除有特殊說明外,所有實驗用試劑均為分析純，實驗用水均為無RNase超純水。

對于檢測程序的要求，GB 4789.42-2016以圖表的形式清晰的展現(xiàn)了出來（見圖1）。

GB 4789.42-2016中對軟質(zhì)水果或生食蔬菜、硬質(zhì)食品表面、貝類3種不同的的樣品分別制定了不同的操作步驟。

記者：針對食品中諾如病毒的檢測，良潤生物有著怎樣的解決方案？

劉磊：針對諾如病毒的檢測，良潤生物從RNA提取、過程控制到檢測及定量都有配套的產(chǎn)品，可以實現(xiàn)樣品中諾如病毒的快速檢測，并符合標準要求。

良潤生物的諾如病毒解決方案包括：病毒RNA提取試劑盒、MS2過程控制試劑盒（RTPCR探針法）、諾如病毒核酸（GⅠ/GⅡ）檢測試劑盒（RT-PCR探針法）、諾如病毒標準系列（GI／GII）定量試劑盒等。

圖1 GB 4789.42-2016諾如病毒檢測程序

② 結(jié)構(gòu)和病毒相似，性質(zhì)類似，更準確的標定；③ 與其他病毒RNA無交叉；④ 食品中不含有該噬菌體，無背景；⑤ 可以實現(xiàn)細胞外擴增，實現(xiàn)精準定量；⑥ 可同時標定回收率和擴增效率。

記者：諾如病毒檢測的過程控制需要對照病毒，良潤生物推出的MS2過程控制試劑盒具有哪些優(yōu)勢呢？

劉磊：諾如病毒檢測對過程控制所需對照病毒要求易于體外培養(yǎng)，與諾如病毒具有相似的理化特性，并且與諾如病毒基因組組成不同，不會發(fā)生交叉反應(yīng)，另外還要求是單股正鏈RNA病毒，而且在自然狀態(tài)下不會污染食品。目前常用的有門果病毒、MS2噬菌體。過程控制選用MS2噬菌體的優(yōu)勢：

① 國際通用—歐盟、美國等地區(qū)和國家；

良潤生物簡介

北京良潤生物科技有限公司作為國家高新技術(shù)企業(yè)，專注于食品中微生物、致病菌、病毒、細菌毒素等快速檢測的研究，相繼建立了即用培養(yǎng)技術(shù)平臺、免疫技術(shù)平臺、分子技術(shù)平臺及快速前處理技術(shù)平臺，產(chǎn)品涵蓋微生物測試片、致病菌膠體金快速檢測卡、致病菌快速增菌培養(yǎng)基、致病菌快速檢測組合、免疫磁珠快速測試盒、熒光定量PCR試劑盒等。在此基礎(chǔ)上，為用戶提供更合適的食品安全檢測解決方案。

針對諾如病毒的檢測，良潤生物從RNA提取、過程控制到檢測及定量都有配套的產(chǎn)品，可以實現(xiàn)樣品中諾如病毒的快速檢測，并符合標準要求。