吳春芳 沈曉明 喬利軍

(河南大學(xué)淮河醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河南 開封 475000)

鹽酸法舒地爾注射液對急性腦梗死患者血清血管內(nèi)皮生長因子、血管生長素-1濃度的影響

吳春芳 沈曉明1喬利軍2

(河南大學(xué)淮河醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河南 開封 475000)

目的 觀察鹽酸法舒地爾注射液對急性腦梗死(ACI)患者血清血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和血管生成素(Ang)-1濃度的影響。方法 采用前瞻性隨機(jī)、對照試驗方案，連續(xù)選取82例住院治療的ACI患者，分為治療組44例，對照組38例。對照組采用控制血壓、抗血小板聚集、調(diào)脂等常規(guī)治療，治療組在常規(guī)治療基礎(chǔ)上給予鹽酸法舒地爾注射液30 mg加入0.9%生理鹽水250 ml靜脈滴注，每日2次，共治療14 d。所有入選患者均于治療前、治療后第3天、第7天、第14天清晨取肘靜脈血，采取雙抗體夾心聯(lián)酶免疫吸附(ELISA)法測定血清VEGF、Ang-1濃度。結(jié)果 治療后兩組美國國立衛(wèi)生研究院腦卒中量表(NIHSS)評分較治療前均有明顯改善，但治療組NIHSS評分改善較對照組更為顯著(P<0.01)。治療第3天、第14天時治療組與對照組比較VEGF變化無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，至第7天時兩組比較有顯著差異(P<0.01)。治療后第3天、第7天時治療組與對照組比較Ang-1變化無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，至第14天時兩組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。治療組、對照組在治療后第7天、第14天與各組治療前相比，VEGF變化有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，血清VEGF濃度在治療后第7天達(dá)到高峰。治療組、對照組在治療后第14天分別與各組治療前相比，Ang-1變化有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)，血清Ang-1濃度在治療后第14天仍呈上升趨勢。結(jié)論 法舒地爾可促進(jìn)腦缺血后VEGF、Ang-1的高表達(dá)，促進(jìn)血管新生，改善神經(jīng)功能缺損。

法舒地爾；急性腦梗死；血管內(nèi)皮生長因子；血管生長素-1

急性腦梗死(ACI)是由于動脈粥樣硬化等原因造成局部動脈管腔狹窄或者堵塞，腦部血液供應(yīng)障礙，發(fā)生缺血缺氧壞死，引起相應(yīng)神經(jīng)功能缺損的一類缺血性腦血管疾病。因此，盡快恢復(fù)缺血區(qū)的血液供應(yīng)，促進(jìn)缺血區(qū)血管新生，重建損傷區(qū)血運成為ACI治療的關(guān)鍵。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)可維持血管正常狀態(tài)和完整性，是促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長，參與血管生成的必需因子〔1，2〕。血管生成素(Ang)-1促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞、細(xì)胞外基質(zhì)和外膜細(xì)胞之間的相互作用，保持血管內(nèi)皮的穩(wěn)定性，有助于血管的成熟〔3〕。鹽酸法舒地爾是一種具有Rho激酶抑制劑作用的鈣離子拮抗劑，它既可以解除ACI患者腦血管痙攣〔4〕，又可以改善腦組織微循環(huán)，促進(jìn)血管神經(jīng)再生〔5〕。本研究觀察法舒地爾對ACI患者血清VEGF和Ang-1濃度的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年6月至2013年6月在河南大學(xué)淮河醫(yī)院住院治療的ACI連續(xù)病例82例，發(fā)病時間均在24h內(nèi)。采用前瞻性隨機(jī)、對照試驗方案，經(jīng)隨機(jī)數(shù)字表隨機(jī)分為治療組43例，男24例，女19例，平均年齡(64.53±6.37)歲；對照組39例，男21例，女18例，平均年齡(63.18±7.52)歲。兩組患者年齡、性別差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。入選病例均符合中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)病學(xué)分會腦血管病學(xué)組撰寫的《中國急性缺血性腦卒中診治指南2010》中ACI的診斷標(biāo)準(zhǔn)〔6〕，并經(jīng)顱腦CT或MRI確診。排除標(biāo)準(zhǔn)：①發(fā)病24 h內(nèi)發(fā)生腦疝或大面積腦梗死而生命體征未平穩(wěn)者；②合并嚴(yán)重心、肺、肝、腎功能不全；③嚴(yán)重精神疾病、癡呆者。所有入選病例均征得患者本人或家屬同意并簽署知情同意書。

1.2 治療方法 對照組采用控制血壓、抗血小板聚集、調(diào)脂等常規(guī)治療，治療組在常規(guī)治療基礎(chǔ)上加用鹽酸法舒地爾注射液(2 ml：30 mg，由天津紅日藥業(yè)股份有限公司提供，批號：國藥準(zhǔn)字H20040356)30 mg配入0.9%生理鹽水250 ml靜脈滴注，每日2次，共治療14 d。

1.3 檢測方法 兩組患者均于治療前及治療后第3、7、14天各采集清晨空腹靜脈血4 ml，放入肝素抗凝的玻璃試管中，采血后30 min內(nèi)分離血漿，貯存于-70℃冰箱中備用。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法測定血清VEGF和Ang-1濃度，試劑盒由武漢博美生物工程有限公司，操作由專人嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

1.4 神經(jīng)功能評分 采用美國國立衛(wèi)生研究院神經(jīng)功能缺損評分量表美國國立衛(wèi)生研究院腦卒中量表(NIHSS)在患者治療前及治療后第3、7、14天對患者進(jìn)行評分。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行方差分析。

2 結(jié) 果

2.1 兩組患者治療前后NIHSS評分比較 兩組在治療7、14 d后神經(jīng)功能較治療前均有明顯好轉(zhuǎn)(P<0.05，P<0.01)，并且治療組改善程度在7、14 d均優(yōu)于對照組(P<0.05，P<0.01)。見表1。

表1 兩組患者NIHSS評分比較,分)

與對照組比較:1)P<0.05，2)P<0.01；與治療前比較:3)P<0.05，4)P<0.01。

2.2 兩組患者治療前后血清VEGF濃度變化 兩組在治療7、14 d后血清VEGF濃度較治療前均有明顯升高(P<0.05，P<0.01)，并且治療組升高程度在第7天明顯優(yōu)于對照組(P<0.01)，血清VEGF濃度在治療后第7天達(dá)到高峰。見表2。

2.3 兩組患者治療前后血清Ang-1濃度變化 兩組在治療14 d后血清Ang-1濃度較治療前升高(P<0.05)，并且治療組升高程度在第14天優(yōu)于對照組(P<0.05)，血清Ang-1濃度在治療后第14天仍呈上升趨勢。見表2。

表2 兩組患者血清VEGF、Ang-1濃度變化

與對照組比較:1)P<0.05，2)P<0.01；與治療前比較:3)P<0.05，4)P<0.01

3 討 論

ACT患者由于腦組織缺血、缺氧而引起神經(jīng)細(xì)胞變性、壞死、凋亡，導(dǎo)致神經(jīng)功能受損。中心壞死區(qū)及其周圍的缺血半暗帶共同組成急性梗死灶，病灶中細(xì)胞壞死與細(xì)胞凋亡并存，及時恢復(fù)缺血區(qū)的血供，挽救半暗帶可逆的神經(jīng)元是改善缺血性腦血管病預(yù)后的關(guān)鍵。Krupinski等〔7〕研究證實，急性梗死灶區(qū)的新生血管可以明顯改善缺血區(qū)周圍的組織灌注，減輕因血流量不足導(dǎo)致的腦損傷，縮小梗死體積，重塑神經(jīng)結(jié)構(gòu)，使神經(jīng)功能盡可能恢復(fù)。因此，促進(jìn)血管新生是治療缺血性腦損傷的有效方法。

VEGF是直接作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞(ECs)特異的有絲分裂原，是目前已知的作用最強(qiáng)烈的促血管生長因子，直接作用于內(nèi)皮細(xì)胞膜上的受體VEGFR，誘發(fā)ECs增殖、遷移以及細(xì)胞間的相互作用和管腔的形成，促進(jìn)新生血管形成。動物實驗表明〔8〕，VEGF在短暫性腦缺血預(yù)處理大鼠缺血腦組織中的陽性表達(dá)細(xì)胞增多，持續(xù)7 d，并且主要分布于缺血灶及周圍的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、神經(jīng)元及微血管內(nèi)皮細(xì)胞。Oladipupo等〔9〕研究表明，腦組織在缺血、缺氧條件下可激活VEGF等血管生長因子，促進(jìn)血管內(nèi)皮出芽式血管新生的發(fā)生。Liman等〔10〕在ACI患者的缺血半暗帶區(qū)觀察到大量VEGF等與血管新生有關(guān)的生長因子，證實了VEGF及其受體變化是影響梗死后血管新生的重要因素。Ang及Tie是由血管內(nèi)皮分泌的血管生成調(diào)節(jié)因子，在腦缺血后血管的成熟、穩(wěn)定及重建等方面具有重要的作用〔11〕。Ang-1是Ang家族的一員，可降低血管通透性，維持血腦屏障(BBB)完整性；促進(jìn)缺血腦組織側(cè)支循環(huán)形成、穩(wěn)定血管；抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡、保護(hù)神經(jīng)元〔12〕。腦缺血損傷后血管生成是多種調(diào)節(jié)因子直接或間接作用的結(jié)果，血管形成早期，主要是VEGF的高表達(dá)，促進(jìn)原始血管網(wǎng)形成；而血管形成后期，Ang家族則在血管重建、塑形、成熟及穩(wěn)定中發(fā)揮關(guān)鍵作用〔13〕。

法舒地爾是一種異喹啉磺酰基衍生物，Ca2+拮抗劑，為Rho激酶強(qiáng)效抑制劑。VEGF介導(dǎo)的血管新生涉及RhoA/Rho激酶通路，VEGF增加RhoA活性，當(dāng)RhoA激活隨后使VEGFR2 的酪氨酸磷酸化。鄭惠珍等〔14〕通過體外血管新生實驗證實法舒地爾能夠促進(jìn)血管新生，尤以濃度在10 mmol/L、30 mmol/L 促血管新生效果最佳。Rho激酶在細(xì)胞內(nèi)有復(fù)雜的信號交聯(lián)，壓力應(yīng)激活化的整合素信號、G蛋白耦聯(lián)受體和酪氨酸激酶受體的信號均能活化RhoA，進(jìn)而活化Rho激酶，而這些受體的配體中即包含了AngⅡ、去甲腎上腺素及炎性因子等。袁杰〔5〕通過對MACO大鼠的研究發(fā)現(xiàn)，以Ang-1作標(biāo)記分子，法舒地爾組在腦缺血再灌注后3 h即開始表達(dá)增加，且上調(diào)的趨勢一直延伸到缺血再灌后72 h。

本研究提示血清VEGF的高表達(dá)，在血管形成過程中發(fā)揮重要作用，VEGF的促血管新生作用發(fā)生于血管形成早期，Ang-1可能主要作用于腦缺血損傷的后期階段；法舒地爾可改善ACI患者神經(jīng)功能缺損癥狀，促進(jìn)腦缺血后血管特異性生長因子的表達(dá)。

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〔2015-03-13修回〕

(編輯 安冉冉/曹夢園)

開封市2014年社會發(fā)展科技攻關(guān)計劃(No.1403004)

喬利軍(1984-)，男，博士，主要從事中醫(yī)藥治療腦血管病的研究。

吳春芳(1980-)，女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事神經(jīng)內(nèi)科疾病研究。

R735.1

A

1005-9202(2017)11-2696-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.11.042

1 河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院 2 廣東省中醫(yī)院內(nèi)六科