郭旭升，倫峰，趙良杰，彭新亮，呂瑛

（1信陽農林學院水產學院，河南省漁業(yè)生物工程技術研究中心，河南信陽464000；2羅山縣水產局，河南羅山464200）

黃尾鲴自然受精與人工授精孵化效果比較研究

郭旭升1，倫峰1，趙良杰1，彭新亮1，呂瑛2

（1信陽農林學院水產學院，河南省漁業(yè)生物工程技術研究中心，河南信陽464000；2羅山縣水產局，河南羅山464200）

對黃尾鲴進行人工催產，比較自然受精和人工授精的孵化效果。結果顯示，人工授精的受精率和出苗率分別為92.00±4.60%和88.30%，優(yōu)于自然受精的81.50±7.00%和84.30%，但人工授精的親魚成活率僅為57.50%，明顯低于自然受精的90.00%。

黃尾鲴；自然受精；人工授精

黃尾鲴（Xenocypris davidiBleeker）[1]俗稱黃尾、黃片、黃姑子、黃瓜魚等[2]，是一種中小型淡水魚類，主要分布于長江、珠江、閩江及閩東南各溪流，具有食性雜、生長快、適應能力強、易捕撈等特點。黃尾鲴主要以腐殖質、有機碎屑及附生藻類為食，在不增加飼料的情況下，在大水面進行黃尾鲴移植、增殖，并加強資源保護，讓其形成自然種群，不僅能增加單位面積魚產量，而且對凈化水質、減緩水體富營養(yǎng)化進程、促進主養(yǎng)魚增產和提高經濟效益有重要作用。該魚易養(yǎng)殖，飼料來源廣，養(yǎng)殖成本低，具有較好的經濟效益和增養(yǎng)殖前景，已成為當前水產養(yǎng)殖品種結構調整中首選的優(yōu)良品種之一。但該魚性情急躁，應激反應劇烈，人工繁殖難度較大。為了進一步優(yōu)化黃尾鲴人工繁殖技術，探索不同人工繁殖方式的效果，于2016年5-6月開展了自然受精和人工授精對黃尾鲴孵化效果的對比試驗，以期為黃尾鲴的大規(guī)模人工繁殖提供參考。

1 材料與方法

1.1 親魚

親魚為羅山縣小龍山魚類良種繁育場培育的黃尾鲴，年齡為3齡，平均體質量為500 g。

1.2 催產劑

催產劑為魚用促黃體素釋放激素A2（LRH-A2）和馬來酸地歐酮（DOM），均購自寧波第二激素廠。

1.3 產卵池和孵化設施

產卵池采用小龍山魚類良種繁育場的家魚人工繁殖圓形產卵池，孵化設施為新建的玻璃鋼孵化缸，為保證孵化效果，孵化缸底部鋪設環(huán)形管用于充氣，并通過管道與充氣泵相通。

1.4 親魚選擇

雄魚頭部、鰓蓋、胸鰭等處“追星”較多，體表撫摸粗糙，輕壓腹部能擠出乳白色精液；雌魚則腹部膨大，卵巢輪廓明顯，壓感松軟，在催產之前，用挖卵器取卵檢查，卵粒大小均勻、飽滿、容易分開，可以進行人工催產。

1.5 雌雄配比及催產

自然受精和人工授精試驗同步進行，每個試驗親魚分別為20組；自然受精的雌雄配比為1:1.5；人工授精的雌雄配比為1:1。兩種方法的催產劑用量為10 ug LRH-A2/kg和6 mg DOM/kg，雄魚減半，于胸鰭基部一次性注射，注射后放入產卵池，微流水刺激，促進親魚性腺成熟。

1.6 自然受精

親魚注射催產劑后，按雌雄1:1.5的比例放入產卵池中，適時沖水，讓其自然產卵受精，產卵池水溫為23.5℃，效應時間8 h左右[3]。發(fā)情后的親魚不停的沿產卵池四周追逐，雄魚時而用頭部撞擊雌魚的腹部，發(fā)情達到最高潮時雌雄魚游泳速度加快，尾部擺動頻率增加，并行片刻，交尾發(fā)出“啪”的響聲并翻起浪花，雌雄魚完成一次產卵交配活動。產卵后雌、雄親魚隨即下沉，不久又重復產卵活動，整個過程持續(xù)3-4 h。發(fā)現親魚大批量發(fā)情產卵后，及時向產卵池中潑灑10%黃泥漿水[4]，用量為1 kg/m3，使其自行脫粘。產卵結束15 min后分批取出受精卵，然后漂洗，用于人工孵化。

1.7 人工授精

親魚注射催產劑后，按雌雄1:1的比例放入產卵池中，適時沖水觀察，待雌雄親魚發(fā)情追逐激烈時，及時將親魚撈出進行人工授精。為延緩親魚產卵，發(fā)現親魚發(fā)情，可在產卵池中下一道拉網將發(fā)情的親魚短暫隔離。

采取改良的半干法授精。用干毛巾抹去雌親魚腹部及泄殖孔四周的水分，輕壓腹部將魚卵擠入干燥器皿中；同時取雄魚，用干毛巾擦干腹部及生殖孔四周水分，擠精液滴入盛魚卵器皿中，加入0.7%生理鹽水適量，輕輕攪拌20-30 s，然后用手或羽毛輕輕攪拌1-2 min；加入適量清水，再輕輕攪拌1-2 min，靜置1 min左右，倒去污水；隨機將卵子倒入事先配好的10%黃泥漿水中脫粘，用手輕輕攪動4-5 min，將泥漿水連同受精卵一起用網片過濾，洗去多余泥漿，篩出魚卵，如此重復用清水洗卵2-3次，即可移入孵化缸中孵化。

1.8 人工孵化

為防水霉病，先用2-4 g/m3水霉凈浸浴8-10 min，然后按80-100萬粒/m3放受精卵[5]。由于黃尾鲴受精卵較小，人工脫粘后卵表面附有泥沙，同時卵子吸水膨脹不明顯，卵比重較大，孵化時要求水流速度較大，可通過孵化缸底部鋪設環(huán)形管充氣，以看到受精卵粒隨水流上下翻動為宜。

1.9 產后親魚的處理

自然產卵后的親魚，及時用網具捕起，并用濃度為20 g/m3的KMnO4浸浴10 min[6]，期間用氣泵供氣，確保氧氣充足，然后放入親魚暫養(yǎng)池中。人工授精后的親魚，特別是雌魚受傷嚴重，需進行挑選，不能存活或傷勢較重的親魚挑出，受傷較輕的親魚用上述方法處理后下池。

2 結果

2.1 受精率

試驗在水溫23.00±1.00℃條件下，分別完成20組自然受精和人工授精，受精卵孵化3 h后到達原腸胚期，每20組隨機抽取5組，每組抽樣200粒[7]，在4×10倍顯微鏡下觀察，自然受精組的受精率達81.50±7.00%；人工授精組的受精率達92.00±4.60%（表1）。

表1 自然受精和人工授精效果比較Table 1 Effect comparison of natural fertilization and artificial insemination

2.2 出苗率

在水溫23.00±1.00℃條件下，兩種方式得到的受精卵分別放在孵化缸中，孵化水質及其它條件相同，受精卵經過30-36 h后開始破膜出苗，36-47 h完全破膜，仔魚孵出后經過88-92 h出現腰點（鰾充氣），開始平游，并主動開口攝食時，魚苗即可下池培育，此時統計自然受精的出苗率為84.30%；人工授精的出苗率為88.30%，此次試驗共出苗240萬尾。

2.3 產后親魚成活率

黃尾鲴產后2 h親魚死亡和暫養(yǎng)2周內的死亡情況（表2），自然受精的親魚成活率達90.00%；人工授精的親魚成活率為57.50%。

表2 自然受精和人工授精后親魚成活情況Table 2 The survival condition of parent fishes of natural fertilization and artificial insemination

3 討論

由表1可見，黃尾鲴自然受精的受精率明顯低于人工授精，可能有以下幾方面的原因：（1）人工授精方法精子和卵子在器皿內結合的機會多；而自然產卵受精往往由于親魚發(fā)情激烈，卵子和精子射出較遠，分布范圍大，影響受精率。（2）人工授精確保精子和卵子在極短時間內充分接觸，從而提高受精率。但是人工授精必須把握好效應時間，如果超過效應時間再擠卵，則受精率會明顯降低。（3）人工授精是把精子和卵子同時擠入器皿中，人工均勻攪動使精卵結合的機率大大增加；而自然產卵受精在精卵排出體外時，只是親魚用尾巴攪動，另外，自然產卵受精不能保證精卵同時排出，卵子剛產出體外時有下沉趨勢，而精子排出體外遇水即散，從而影響受精率。（4）雌雄搭配比例不盡合理，自然受精情況下，為提高受精率，雌雄搭配比例最好提高到1:2。

鐘岳采用DOM和LRH-A催產進行人工授精，并施以不同注射劑量，獲得的受精率在62.00%-84.00%，采用PG和LRH-A進行催產，同時采用人工授精，其受精率為72.00%-82.00%[8]。而本試驗人工授精的受精率達到92.00±4.60%，效果明顯增強。

由表2可知，無論是自然受精還是人工授精，黃尾鲴產后親魚傷亡較為嚴重，特別是雌魚產后死亡率高，最高達65.00%，這和黃尾鯝性情急躁，應激反應劇烈有關，因此在實際生產操作過程中，從日常管理、拉網捕魚、運輸、催產等各個環(huán)節(jié)都需謹慎操作，以免造成親魚大量死亡。

從試驗結果分析黃尾鲴人工授精效果優(yōu)于自然受精，但親魚的死亡率高。在黃尾鲴養(yǎng)殖生產中，如果后備親魚不足，建議培育好親魚，采取自然受精方式；如果后備親魚充足，可采用人工授精方式，提高受精率和出苗率。

[1]農業(yè)大詞典編輯委員會編,農業(yè)大詞典[M].北京:中國農業(yè)出版社,1998:549.

[2]付輝云,章海鑫,趙春來,等.軍山湖黃尾密鲴的形態(tài)生物學研究[J].江蘇農業(yè)科學,2015,43(7):247-249.

[3]黃邦星.黃尾鲴人工繁殖及苗種培育技術[J].福建農業(yè),2013,3:27.

[4]李生武.鲴魚的生物學特性及養(yǎng)殖技術[J].水產科技情報,2002,29(3):116-118.

[5]卞偉,陽愛生,伍遠安,等.黃尾密鲴人工繁殖技術[J].水利漁業(yè),1987,4:20-23.

[6]潘金培.魚病診斷與防治手冊[M].上海:上?？茖W技術出版社,1988:163.

[7]中華人民共和國國家標準:青魚、草魚、鰱、鳙魚卵受精率計算方法,GB/T15806-1995.

[8]鐘岳.高效魚類催產合劑Ⅱ號催產黃尾密鲴試驗報告[J].江西水產科技,1998(3):16-18.

Study on natural fertilization and artificial insemination hatching of Xenocypris davidiBleeker

Guo Xusheng1,Lun Feng1,Zhao Liangjie1,Peng Xinliang1,Lu Ying2
（1 Colloge of Fisheries,Xinyang Agriculture and Forestry University,Fishery Biological Engineering Technology Research Center of Henan Province, Xinyang 464000,Henan,China;2 Fisheries Bureau of Luoshan County,Luoshan 464200,Henan,China）

Hatching effects ofXenocypris davidiwith natural fertilization and artificial insemination after artificial induced spawning were compared in this study.The results showed that the fertilization rate and emergence rate of artificial insemination were 92.00±4.60%and 88.30%,higher than that of natural fertilization(fertilization rate 81.50±7.00%，emergence rate 84.30%).However,the survival rate of parent fishes of artificial insemination was57.50%,obviously lower than that of natural fertilization(90.00%).

Xenocypris davidi;natural fertilization;artificial insemination

河南省科技攻關項目（162102110053）

郭旭升（1968-），男，教授，研究方向：水產種質資源育種與保護，E-mail：gxs1968@163.com

彭新亮，E-mail：pengxinliang01@126.com