高 玲李至薈封江彬陸 雪蔡恬靜李 爽趙 驊田雪蕾劉青杰*

X射線及UVB對人表皮細(xì)胞細(xì)胞增殖及褪黑素受體表達(dá)的影響*

高 玲①李至薈②封江彬①陸 雪①蔡恬靜①李 爽①趙 驊①田雪蕾①劉青杰①*

目的：研究X射線和紫外線B(UVB)對表皮細(xì)胞增殖的影響，以及對褪黑素受體(MTNR)蛋白表達(dá)的影響，為生活在高海拔地區(qū)可能受到較高電離和非電離輻射的公眾輻射效應(yīng)及其防護(hù)提供指導(dǎo)。方法：經(jīng)照射劑量為0 Gy(對照組)、0.5 Gy、2 Gy和5 Gy(照射組)X射線以及0 mJ/cm2、20 mJ/cm2、50 mJ/cm2、100 mJ/cm2和200 mJ/cm2的UVB分別照射人表皮細(xì)胞Hacat和人黑色素瘤細(xì)胞A875，通過四甲基偶氮唑(MTT)和克隆形成率實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞增殖能力變化，采用蛋白質(zhì)印跡法檢測褪黑素受體MTNR-1B蛋白表達(dá)變化。結(jié)果：在照射劑量為0.5 Gy、2 Gy和5 Gy的X射線以及20 mJ/cm2和50 mJ/cm2UVB的照射下，可導(dǎo)致Hacat和A875細(xì)胞生長不同程度的降低。3種不同劑量X射線照射后Hacat細(xì)胞克隆形成率分別為對照組的71.2%、36.7%和16.3%，與對照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=249.96，P＜0.05)，A875細(xì)胞細(xì)胞克隆形成率分別為對照組的64.7%、49.5%和31.6%，與對照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=147.29，P＜0.05)；在照射劑量為20 mJ/cm2和50 mJ/cm2的UVB照射后Hacat細(xì)胞的克隆形成率分別為對照組的40.74%和12.96%，A875細(xì)胞的克隆形成率分別為對照組的16.33%和6.12%；50 mJ/cm、100 mJ/cm和200 mJ/cm2的UVB照射后A875細(xì)胞中MTNR1B表達(dá)隨著劑量的增大而顯著增加，而3種不同劑量X射線對MTNR1B表達(dá)在不同劑量之間無顯著影響。結(jié)論：X射線和UVB照射后均可引起細(xì)胞增殖和存活能力的降低，UVB照射后引起的細(xì)胞增殖抑制可能與褪黑素受體表達(dá)變化相關(guān)。

X射線; 紫外線B(UVB); 細(xì)胞增殖; 褪黑素受體；蛋白印跡法

褪黑素(melatonin，MEL)是對光線和射線非常敏感的一類激素，通常過強(qiáng)的紫外線照射可導(dǎo)致褪黑素分泌的減少。MEL通過與褪黑素受體，即特異性膜受體或核受體結(jié)合而產(chǎn)生效應(yīng)，具有延緩衰老、調(diào)節(jié)免疫、改善睡眠、抗擊腫瘤以及引起DNA損傷等作用[1-3]。MEL在人體組織視交叉、嗅球、中腦、下丘腦、橋腦、延髓、海馬和小腦等神經(jīng)系統(tǒng)組織、視網(wǎng)膜、免疫系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)以及內(nèi)分泌系統(tǒng)等外周組織中均有分布。血清中褪黑素水平存在晝夜節(jié)律性變化，表現(xiàn)為夜間分泌到峰值而白天降至谷值。褪黑素受體屬于G蛋白偶聯(lián)受體超家族，有7個跨膜結(jié)構(gòu)，不僅存在于神經(jīng)系統(tǒng)，也廣泛存在于免疫系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)等。且褪黑素受體也存在晝夜節(jié)律，節(jié)律也是自主的，受控于晝夜節(jié)律起步點(diǎn)而不受控于褪黑素的節(jié)律[4]。電離輻射及非電離輻射對褪黑素及其受體的影響尚不明確，因此本研究初步探索X射線和UVB對人表皮細(xì)胞細(xì)胞增殖及褪黑素受體表達(dá)的影響。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

(1)Precise直線加速器(瑞典Elekta公司)；SH4B-T紫外光療儀(上海Sigma公司)；

Thermo Labsystems MK3酶標(biāo)儀(美國Thermo Fisher Scientific公司)。

(2)特級胎牛血清和DMEM培養(yǎng)基購自美國Gibco公司；四甲基偶氮唑(methyl thiazolyltetrazolium，MTT)試劑購自美國Sigma公司；D-Hank's緩沖液、甲醛溶液、姬姆薩染色液以及PBS緩沖液均為本實(shí)驗(yàn)室配制；蛋白提取試劑盒及蛋白濃度測定試劑盒購自美國Pierce公司；NC膜購自美國GE公司；MTNR1B抗體及β-肌動蛋白抗體購自美國Santa cruz公司；人表皮細(xì)胞Hacat、人黑色素瘤細(xì)胞A875購自北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院細(xì)胞庫。

1.2 細(xì)胞培養(yǎng)與分組

細(xì)胞株采用含有10%滅活胎牛血清、100 U/ml青霉素和100 μg/ml鏈霉素的DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)分為照射組和對照組，照射組的X射線吸收劑量分別為0.5 Gy、2 Gy和5 Gy；UVB吸收劑量分別為20 mJ/ cm2、50 mJ/cm2、100 mJ/cm2和200 mJ/cm2；對照組X射線和UVB照射的吸收劑量均為0。

1.3 X射線與紫外線B照射

X射線照射使用Precise直線加速器產(chǎn)生的X射線單次照射細(xì)胞，源靶距為100 cm，能量為6 MV，照射組吸收劑量分別為0.5 Gy、2 Gy和5 Gy，采用電離室進(jìn)行劑量校準(zhǔn)；紫外線B(ultraviolet B，UVB)照射采用SH4B-T紫外光療儀，UVB發(fā)射光波長為311～313 nm，照射距離約為40 cm。照射劑量采用本所輻射防護(hù)與建設(shè)項(xiàng)目評價(jià)室TN-2340紫外線強(qiáng)度計(jì)校準(zhǔn)細(xì)胞，照射組吸收劑量分別為20 mJ/cm2、50 mJ/cm2、100 mJ/cm2和200 mJ/cm2。

1.4 MTT實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞濃度調(diào)整為5×104/ml；取24孔培養(yǎng)板，各孔加0.2 ml培養(yǎng)液，設(shè)5個復(fù)孔，在37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2%滅活胎牛血清；分別培養(yǎng)至1 d、2 d和3 d，在相應(yīng)的孔里加入20 μl四甲基偶氮唑(methyl thiazolyl tetrazolium，MTT)比色試劑，繼續(xù)在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4 h；在每孔中加入100 μl二甲基亞砜(dimethyl sulfoxide，DMSO)，震蕩混勻10 min后使用Thermo Labsystems MK3酶標(biāo)儀檢測波長492 nm處的吸光度(D492)值。

1.5 克隆形成率實(shí)驗(yàn)

常規(guī)消化指數(shù)生長期的細(xì)胞，用DMEM培養(yǎng)液懸成單細(xì)胞后置于10 ml離心管中，密封照射，各組細(xì)胞分別接種于5 ml預(yù)溫37 ℃培養(yǎng)液的60 mm培養(yǎng)皿中，接種500個細(xì)胞。以十字方向輕輕晃動培養(yǎng)皿，使細(xì)胞分散均勻。將培養(yǎng)皿移入CO2培養(yǎng)箱，在37 ℃、CO2體積分?jǐn)?shù)為5%和95%濕度環(huán)境下靜止培養(yǎng)7 d后終止培養(yǎng)。用預(yù)溫的D-Hank's洗滌2遍后，甲醇固定20 min，去甲醇，姬姆薩染色液染色15 min，沖洗晾干后解剖顯微鏡下計(jì)數(shù)克隆數(shù)，克隆形成率(colony forming efficiency，CFE)計(jì)算為公式1：

生存分?jǐn)?shù)(survival fraction，SF)計(jì)算為公式2：

1.6 蛋白提取及Western blot

消化并收集細(xì)胞，按Pierce蛋白提取試劑盒說明書提取細(xì)胞總蛋白，Bradford法測定蛋白濃度，取50 μg上樣，制備12%的聚丙烯酰胺凝膠垂直電泳，將蛋白轉(zhuǎn)移至NC膜，分別用抗MTNR1B抗體(工作濃度1∶1000)及抗β-肌動蛋白多抗(工作濃度1∶500)檢測MTNR1B及β-肌動蛋白的表達(dá)，一抗及二抗孵育后，采用增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光(enhanced chemiluminescence，ECL)法顯影。電泳條帶經(jīng)ImageJ軟件處理計(jì)算積分光密度(integrated density)，使用光密度總和÷面積計(jì)算積分光密度，目的條帶與內(nèi)參照條帶的比值代表目的蛋白的表達(dá)水平。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 12.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布，兩組比較采用獨(dú)立樣本，每個照射組均與對照組配對，照射組與對照組之間的比較采用單因素方差分析，以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同劑量X射線照射對細(xì)胞增殖的影響

利用MTT和克隆形成率方法檢測兩組X射線對Hacat和A875細(xì)胞增殖的影響，MTT結(jié)果顯示Hacat和A875細(xì)胞增殖如下。

(1)Hacat細(xì)胞照射后48 h，照射組吸收劑量0.5 Gy、2 Gy和5 Gy與對照組相比，細(xì)胞增殖能力均出現(xiàn)降低，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=249.96，P＜0.05)；照射后72 h吸收劑量0.5 Gy和5 Gy與對照組相比，細(xì)胞增殖能力均出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的降低；吸收劑量2 Gy與0.5 Gy相比，出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的降低；吸收劑量5 Gy與2 Gy比較，出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的降低(見表1)。

(2)A875細(xì)胞照射后24 h和48 h，吸收劑量0.5和5 Gy與對照組相比，細(xì)胞增殖能力出現(xiàn)顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=174.29，P＜0.05)。照射后72 h，吸收劑量0.5 Gy、2 Gy和5 Gy與對照組相比，細(xì)胞增殖能力均出現(xiàn)明顯降低；吸收劑量2 Gy與0.5 Gy相比，出現(xiàn)明顯降低；吸收劑量5 Gy與2 Gy比較，細(xì)胞增殖能力出現(xiàn)明顯降低(見表2)。

(3)克隆形成率實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，X射線照射2種細(xì)胞后克隆形成率在吸收劑量0.5 Gy、2 Gy和5 Gy不同劑量間均出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。Hacat細(xì)胞克隆形成率分別為對照組的71.2%、36.7%和16.3%，如圖1所示。

A875細(xì)胞細(xì)胞克隆形成率分別為對照組的64.7%、49.5%和31.6%。如圖2所示。

2.2 UVB照射對細(xì)胞增殖的影響

(1)經(jīng)0、20 mJ/cm2和50 mJ/cm2UVB照射后，人表皮細(xì)胞Hacat、人黑色素瘤細(xì)胞A875的MTT吸光度數(shù)值均出顯著降低(見表3、表4)[5]。

(2)細(xì)胞受到照射后，部分細(xì)胞盡管DNA發(fā)生損傷，卻仍然可以進(jìn)行1～2代細(xì)胞分裂，但最終喪失細(xì)胞的再分裂和增殖能力。為了更準(zhǔn)確檢測射線對細(xì)胞增殖能力的遠(yuǎn)后影響而進(jìn)行克隆形成率實(shí)驗(yàn)。采用20 mJ/cm2和50 mJ/cm2的UVB照射后進(jìn)行克隆形成率實(shí)驗(yàn)，Hacat、A875的克隆形成率和存活分?jǐn)?shù)均顯著降低。其中在50 mJ/cm2劑量時對UVB紫外線耐受性較強(qiáng)的Hacat細(xì)胞克隆形成率和存活分?jǐn)?shù)分別為3.11%和12.96%，克隆形成率為對照組的12.96%；對UVB紫外線耐受性較弱的A875細(xì)胞克隆形成率和存活分?jǐn)?shù)分別為0.67%和6.12%，克隆形成率為對照組的6.12%，見表5[5]。

表1 MTT檢測兩組X射線對Hacat 細(xì)胞生長的影響

表1 MTT檢測兩組X射線對Hacat 細(xì)胞生長的影響

注：*表示48 h照射組與對照組細(xì)胞吸光值比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；&表示72 h照射組與對照組細(xì)胞吸光值比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；#表示72 h照射組與0.5 Gy組細(xì)胞吸光值比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；$表示72 h照射組與2 Gy組細(xì)胞吸光值比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

組別劑量( G y ) F值P值0 h 2 4 h 4 8 h 7 2 h H a c a t細(xì)胞不同培養(yǎng)時間吸光度( O D 4 9 2 ) 0 . 5 0 . 2 4 9 5 ± 0 . 0 0 0 1 0 . 2 6 1 6 ± 0 . 0 0 2 1 0 . 2 6 9 6 ± 0 . 0 0 3 4*0 . 4 3 6 5 ± 0 . 0 0 9 5&2 0 . 2 4 8 4 5 ± 0 . 0 0 0 2 0 . 2 6 3 6 ± 0 . 0 0 2 7 0 . 2 6 9 2 ± 0 . 0 0 3*0 . 4 6 7 ± 0 . 0 3 0 3#5 0 . 2 4 8 4 ± 0 . 0 0 0 6 0 . 2 6 1 3 ± 0 . 0 0 1 2 0 . 2 6 8 3 ± 0 . 0 0 3 7*0 . 4 2 9 7 ± 0 . 0 1 8 4&$對照組 0 0 . 2 4 7 3 4 ± 0 . 0 0 1 9 0 . 2 5 8 8 ± 0 . 0 0 0 7 0 . 2 8 9 4 ± 0 . 0 0 7 5 0 . 4 8 ± 0 . 0 0 1 6 2 4 9 . 9 6＜0 . 0 5照射組

表2 MTT檢測兩組X射線對A875細(xì)胞生長的影響

表2 MTT檢測兩組X射線對A875細(xì)胞生長的影響

注：*表示24 h照射組與對照組細(xì)胞吸光值比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；&表示48 h照射組與對照組細(xì)胞吸光值比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；#表示72 h照射組與對照組細(xì)胞吸光值比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；$表示72 h照射組與0.5 Gy組細(xì)胞吸光值比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；?表示72 h照射組與2 Gy組細(xì)胞吸光值比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

組別劑量( G y ) F值P值0 h 2 4 h 4 8 h 7 2 h A 8 7 5細(xì)胞不同培養(yǎng)時間吸光度( O D 4 9 2 ) 0 . 5 0 . 2 6 8 ± 0 . 0 0 3 4 0 . 2 8 1 6 ± 0 . 0 0 3 1*0 . 2 9 1 2 ± 0 . 0 0 1 1&0 . 3 6 7 5 ± 0 . 0 1 6#2 0 . 2 6 4 5 ± 0 . 0 0 1 0 . 2 9 1 6 ± 0 . 0 1 0 . 3 0 3 7 ± 0 . 0 0 5 0 . 4 0 5 1 ± 0 . 0 1 1 6#$5 0 . 2 3 9 6 ± 0 . 0 0 3 2 0 . 2 7 3 3 ± 0 . 0 0 8 4*0 . 2 7 6 2 ± 0 . 0 0 3 1&0 . 4 3 4 8 ± 0 . 0 0 9 6#$?對照組 0 0 . 2 6 4 6 ± 0 . 0 0 2 3 0 . 3 1 6 5 ± 0 . 0 0 2 2 0 . 3 2 2 5 ± 0 . 0 0 5 0 0 . 5 0 9 4 ± 0 . 0 2 7 4 1 7 4 . 2 9＜0 . 0 5照射組

圖1 克隆形成率檢測不同劑量的X射線對Hacat細(xì)胞增殖的影響

圖2 克隆形成率檢測不同劑量的X射線對A875細(xì)胞增殖的影響

2.3 X射線和UVB對褪黑素表達(dá)的影響

利用蛋白質(zhì)印跡(western blot，WB)實(shí)驗(yàn)檢測褪黑素受體MTNR-1B蛋白表達(dá)，結(jié)果顯示，X射線對A875和Hacat細(xì)胞MTNR-1B表達(dá)無特別顯著的影響；經(jīng)50 mJ/cm2、100 mJ/cm2和200 mJ/cm2UVB照射后A875細(xì)胞中MTNR-1B表達(dá)隨著劑量的增大而顯著增加(如圖3、圖4所示)。X射線和UVB對MTNR-1B蛋白表達(dá)的影響積分光密度比值如圖5所示。

表3 MTT檢測兩組UVB對Hacat細(xì)胞生長的影響

表3 MTT檢測兩組UVB對Hacat細(xì)胞生長的影響

注：表中*表示與對照組吸光值比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；表3引自參考文獻(xiàn)[5]。

組別M T T吸光度數(shù)值1 d 2 d 3 d對照組0 m J / c m20 . 3 3 0 7 ± 0 . 0 0 8 7 0 . 3 1 8 9 ± 0 . 0 0 7 0 . 4 2 8 3 ± 0 . 0 2 4 8照射組 2 0 m J / c m20 . 2 7 8 ± 0 . 0 0 1*0 . 2 2 9 ± 0 . 0 0 1*0 . 2 9 7 3 ± 0 . 0 0 1 2*5 0 m J / c m20 . 3 2 ± 0 . 0 0 4 4*0 . 2 7 1 3 ± 0 . 0 0 9 9*0 . 2 1 5 7 ± 0 . 0 1 3 7*

表4 MTT檢測兩組UVB對A875細(xì)胞生長的影響

表4 MTT檢測兩組UVB對A875細(xì)胞生長的影響

注：表中*表示與對照組吸光值比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；表4引自參考文獻(xiàn)[5]。

組別M T T吸光度數(shù)值1 d 2 d 3 d對照組0 m J / c m20 . 2 9 2 3 ± 0 . 0 0 1 5 0 . 3 8 1 7 ± 0 . 0 0 5 8 0 . 4 6 4 7 ± 0 . 0 1 1 4照射組2 0 m J / c m20 . 3 0 3 ± 0 . 0 0 8 7 * 0 . 2 5 3 3 ± 0 . 0 0 4 7 * 0 . 1 8 9 3 ± 0 . 0 0 1 5 * 5 0 m J / c m20 . 2 0 6 ± 0 . 0 0 3 6 * 0 . 2 1 6 7 ± 0 . 0 0 2 5 * 0 . 1 2 7 ± 0 . 0 1 1 *

表5 克隆形成率檢測UVB紫外線對Hacat、A875細(xì)胞增殖的影響(x-±s)

圖3 不同劑量X射線對MTNR1B蛋白表達(dá)的影響

注：圖中a和c使用A875細(xì)胞， b和d使用 Hacat細(xì)胞；其中a和b是X射線照射， c和d是UVB照射。

3 討論

褪黑素與褪黑素受體(MTNR1A和MTNR1B)具有良好的親和力，通過激活免疫活性細(xì)胞中的特異性受體，調(diào)節(jié)白細(xì)胞介素1α(interleukin-1α，IL-1α) IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-α和IFN-γ等細(xì)胞因子的生成和釋放，在多種疾病中發(fā)揮重要作用[6-9]。有研究表明，褪黑素可通過調(diào)節(jié)抗氧化物酶和自由基來發(fā)揮其輻射損傷防護(hù)的作用[10]。輻射對褪黑素受體表達(dá)的影響目前尚無定論。

研究表明，經(jīng)50 mJ/cm2的UVB照射可引起表皮細(xì)胞Hacat增殖能力降低，發(fā)生凋亡和自噬[11-12]?？寺⌒纬陕蕦?shí)驗(yàn)結(jié)果與前期研究結(jié)果一致，均表明經(jīng)20 mJ/cm2和50 mJ/cm2的UVB照射后，HaCaT和A875細(xì)胞克隆形成率和存活分?jǐn)?shù)均顯著降低。其中在50 mJ/cm2劑量時HaCaT細(xì)胞克隆形成率和存活分?jǐn)?shù)分別為3.11%和12.96%；A875細(xì)胞克隆形成率和存活分?jǐn)?shù)分別為0.67%和6.12%[5]。MTT和克隆形成率結(jié)果表明，經(jīng)0.5 Gy、2 Gy和5 Gy的X射線和0 mJ/ cm2、20 mJ/cm2和50 mJ/cm2的UVB照射后可導(dǎo)致Hacat和A875細(xì)胞的增殖能力出現(xiàn)不同程度的降低。蛋白檢測結(jié)果表明，經(jīng)50 mJ/cm2、100 mJ/cm2和200 mJ/cm2的UVB照射后，A875細(xì)胞中MTNR-1B表達(dá)隨著劑量的增大而顯著增加。這些結(jié)果提示，X射線和UVB照射后均可引起細(xì)胞增殖能力的降低，UVB照射后引起的細(xì)胞增殖抑制可能與褪黑素受體表達(dá)變化相關(guān)。

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Effects of X-ray and UVB for proliferation and the expression of melatonin receptor of human epidermal cells/

GAO Ling, LI Zhi-hui, FENG Jiang-bin, et al//China Medical Equipment,2017,14(6):156-160.

Objective: To explore the effects of X-rays and ultraviolet B (UVB) for the proliferation of human epidermal cells and the expression of melatonin receptor in human epidermal cells. This study can provide guidance about radiation effect and how to protect the public who may suffered higher ionization and non-ionizing radiation in high altitude region. Methods: Human epidermal cells (Hacat) and human melanoma cell lines A875 were irradiated with X-ray of different doses (0, 0.5, 2 and 5 Gy) and UVB of different doses (20, 50, 100 and 200 mJ/cm2), respectively. The change of cell proliferative capacity was detected by using methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) and cloning efficiency experiment, and the change about expression of melatonin receptor (MTNR-1B) was detected by using western blot. Results: Cell proliferative capacity of Hacat and A875 were decreased in various degrees when they exposed in X-ray of different doses (0.5, 2 and 5 Gy) and ultraviolet B of different dose (20, 50 mJ/cm2). For Hacat cells, the cloning efficiencies of them in observation group after were irradiated by using X-ray of 3 kinds of doses were 71.2%, 36.7% and 16.3% of that in control group, and the differences between the two group were statistically significant (F=249.96, P＜0.05), respectively. While for A875 cells, the cloning efficiencies of them in observation group were 64.7%, 49.5% and 31.6% of that in control group at the same 3 kinds of doses, and the differences between the two group also were statistically significant (F=147.29, P＜0.05), respectively. On the other hand, after Hacat cells were radiated by using UVB of different doses (20 and 50 mJ/cm2), the cloning efficiencies of them in observation group were 40.74% and 12.96% of that in control group, respectively. And for A875 cell, they were 16.33% and 6.12% of that in control group at the same condition of dose, respectively. In addition, after Hacat cells were radiated by using UVB of 50 mJ/cm2, 100 mJ/cm2and 200 mJ/cm2, respectively, the results revealed that expression of MTNR1B was significantly increased with the enhancing of dose, while the X-ray of 3 kinds of doses were no significant effect for the expression of MTNR1B. Conclusion: Both of X-ray irradiation and UVB irradiation can cause the reductions of the capacities of proliferation and survival, and the inhibition of cell proliferation might be relative with the change of expression of melatonin receptor after UVB radiates cell.

X-ray; Ultraviolet-b(UVB); Cell proliferation; Melatonin receptor; Western blot

Key Laboratory of Radiological Protection and Nuclear Emergency, China CDC, National Institute for Radiological Protection, Chinese Center for Disease Control and Prevention, Beijing 100088, China.

10.3969/J.ISSN.1672-8270.2017.06.043

1672-8270(2017)06-0156-05

R-33

A

高玲,女,(1978- ),博士，副研究員，碩士生導(dǎo)師。中國疾病預(yù)防控制中心輻射防護(hù)與核應(yīng)急中國疾病預(yù)防控制中心重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，從事輻射損傷效應(yīng)研究工作。

2017-04-25

國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(31570852)“STAT3調(diào)控caveolin-1介導(dǎo)的抗早衰在腫瘤輻射抗性中的作用及機(jī)制研究”；北京市自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(7162137)“UVB紫外線致黑素細(xì)胞早衰及對黑色素合成的調(diào)節(jié)機(jī)制研究”；中國疾病預(yù)防控制中心青年科研基金(2015A201)“利用負(fù)載lewis細(xì)胞的小鼠模型評價(jià)低劑量輻射對機(jī)體抗腫瘤免疫功能的影響”

①中國疾病預(yù)防控制中心輻射防護(hù)與核應(yīng)急中國疾病預(yù)防控制中心重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 北京 100088

②山西醫(yī)科大學(xué)第二臨床附屬醫(yī)院 山西 太原 030001

*通訊作者：qjliu@nirp.cn