張蕊蕊，胡偉群，朱衛(wèi)剛

(浙江省化工研究院有限公司 國家南方農(nóng)藥創(chuàng)制中心浙江基地，浙江 杭州 310023)

精甲霜靈與代森錳鋅混配防治煙草黑脛病的增效作用

張蕊蕊，胡偉群，朱衛(wèi)剛

(浙江省化工研究院有限公司 國家南方農(nóng)藥創(chuàng)制中心浙江基地，浙江 杭州 310023)

通過菌絲生長抑制法，測定精甲霜靈與代森錳鋅及其5個配比對煙草黑脛病的室內(nèi)毒力。通過共毒系數(shù)法計算出當(dāng)精甲霜靈與代森錳鋅質(zhì)量分?jǐn)?shù)比為1∶16時，兩者表現(xiàn)增效作用，其余配比表現(xiàn)相加作用。此比例可以作為田間試驗的指導(dǎo)比例。

精甲霜靈； 代森錳鋅； 混配； 煙草黑脛??； 聯(lián)合毒力

煙草黑脛病是煙草上主要真菌病害之一，該病原菌屬于鞭毛菌亞門，卵菌綱，疫霉屬(PhytophthoranocitianaeBreda de Haan)[1-2]。該病原菌主要侵染煙草植株的莖基部和根部，高溫高濕情況極易誘導(dǎo)該病發(fā)生，發(fā)病時引起植株莖基部出現(xiàn)水漬狀病斑進(jìn)而引起植株倒伏，發(fā)病嚴(yán)重時植株在一兩周之內(nèi)整株枯死，在我國由煙草黑脛病造成的經(jīng)濟(jì)損失超過億元[3]。

生產(chǎn)上通常采用種植抗病品種、作物輪作等防治措施來降低煙草黑脛病為害，但優(yōu)質(zhì)抗病品種難培育及病原菌變異導(dǎo)致抗性喪失等問題一直存在，故化學(xué)防治仍是目前防治煙草黑脛病最快捷、有效的方法。目前生產(chǎn)上常用的化學(xué)藥劑有保護(hù)性殺菌劑如代森錳鋅、丙森鋅等以及以甲霜靈為代表的內(nèi)吸性殺菌劑等[4]。精甲霜靈屬于苯基酰胺類殺菌劑(PAFs)，主要作用機(jī)制是抑制RNA聚合酶Ⅰ的活性，從而抑制rRNA的合成，抑制病原菌在寄主體內(nèi)的發(fā)展[5]。代森錳鋅屬于多位點的廣譜有機(jī)硫保護(hù)性殺菌劑，其主要作用機(jī)制是抑制病菌體內(nèi)丙酮酸的氧化。但內(nèi)吸性殺菌劑因其作用位點單一、殺菌譜較窄，極易使病原菌產(chǎn)生抗藥性。因此，研究開發(fā)新型高效復(fù)配劑對于克服和延緩病菌抗藥性、有效地控制煙草黑脛病為害、保障煙草穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)具有重要意義。本研究主要針對精甲霜靈和代森錳鋅及其不同配比對煙草黑脛病的聯(lián)合毒力進(jìn)行測定，旨在明確不同配比對煙草黑脛病的協(xié)同增效作用及最佳配比，以期為延緩煙草黑脛病對精甲霜靈和代森錳鋅的抗藥性及對煙草黑脛病的防治提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

供試藥劑為95%精甲霜靈原藥、98%代森錳鋅原藥，由浙江禾本作物科技有限公司提供。

供試菌株煙草黑脛病(PhytophthoranocitianaeBreda de Haan)由貴州大學(xué)提供，浙化院生測安評中心保存培養(yǎng)。

1.2 方法

1.2.1 藥劑處理

參照殺菌劑農(nóng)藥室內(nèi)生物測定試驗準(zhǔn)則和農(nóng)藥試驗技術(shù)與評價方法進(jìn)行[6]，采用菌絲生長速率法。將原藥用DMF配制成5%乳油溶液，然后用含0.1%吐溫80蒸餾水配制成試驗所需的劑量。

精甲霜靈(A)、代森錳鋅(B)及二者的5個配比(質(zhì)量分?jǐn)?shù)比分別為1∶24、1∶20、1∶16、1∶12、1∶8)。精甲霜靈設(shè)置5、2.5、1.25、0.625、0.312 5 mg·L-15個濃度，除此之外均設(shè)50、25、12.5、6.25、3.125 mg·L-15個濃度，每個質(zhì)量濃度設(shè)置4個重復(fù)，另設(shè)空白對照。

1.2.2 毒力測定

將精甲霜靈配制成50、25、12.5、6.25和3.125 mg·L-1的溶液，分別吸取6 mL到滅菌過的三角燒瓶，加入50 ℃左右的PDA培養(yǎng)基54 mL，搖勻后倒入4個直徑9 cm的平皿，制成4個含5、2.5、1.25、0.625和0.312 5 mg·L-1濃度的PDA含毒培養(yǎng)基。將培養(yǎng)好的煙草黑脛病病原菌，用直徑5 mm的打孔器在菌落邊緣打成菌塊，用接種針將菌塊移至預(yù)先配制成的PDA含毒培養(yǎng)基中央，處理后的培養(yǎng)皿置于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)，每處理重復(fù)4次。視CK菌落生長情況，采用十字法用卡尺量取各處理菌落直徑。代森錳鋅以及兩者之間5個配比的含毒培養(yǎng)基配制方法同精甲霜靈。

1.2.3 藥效計算

每個菌落十字交叉測兩個直徑，以其平均數(shù)代表菌落大小。

菌落生長抑制率/%=(空白對照菌落增長直徑-藥劑處理菌落增長直徑)×100/空白對照菌落增長直徑。

1.2.4 數(shù)據(jù)處理

參照文獻(xiàn)[7]的方法，運用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)3.11專業(yè)版對室內(nèi)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，求出各個藥劑的抑制中濃度(EC50)，根據(jù)EC50值求出回歸直線、相關(guān)系數(shù)和95%置信區(qū)間。參考文獻(xiàn)[8]共毒系數(shù)法計算混劑的共毒系數(shù)(CTC)。若CTC>120，表明有增效作用；若CTC明顯低于100(80以下)，表明為拮抗作用；若CTC在100～120，表明為相加作用。

2 結(jié)果與分析

由表1可知，精甲霜靈對煙草黑脛病表現(xiàn)較好的離體防效，在試驗設(shè)置濃度5～0.3125 mg·L-1下，對煙草黑脛病的防效為91.4%～100.0%；代森錳鋅在試驗設(shè)置濃度50～3.125 mg·L-1時，對煙草黑脛病的防效為66.9%～93.9%。

由表2可知，采用五點法取5個代表性的配比，并對這5個配比和標(biāo)準(zhǔn)藥劑進(jìn)行毒力測定。結(jié)果表明，精甲霜靈A、代森錳鋅B及不同比例復(fù)配對煙草黑脛病的EC50分別為0.016、1.194、0.273、0.268、0.153、0.176、0.128 mg·L-1。

由表3可知，精甲霜靈與代森錳鋅復(fù)配的5個配比對煙草黑脛病的共毒系數(shù)分別為111.32、99.41、147.31、102.52、102.01，精甲霜靈與代森錳鋅質(zhì)量分?jǐn)?shù)比為1∶16時，兩者的共毒系數(shù)為147.31，表現(xiàn)為增效作用。其余配比共毒系數(shù)均在100～120，表現(xiàn)一定的相加作用。

表1 不同處理對煙草黑脛病病原菌的防效

藥劑濃度/(mg·L-1)防效/%精甲霜靈A5100025991125975062595303125914代森錳鋅B50939258601257666257193125669A∶B(1∶24)501000259661259326258783125840A∶B(1∶20)501000259801259466259123125860A∶B(1∶16)501000259751259356259013125872A∶B(1∶12)501000259871259696259413125899A∶B(1∶8)501000259801259666259393125894

表2 精甲霜靈與代森錳鋅及復(fù)配對煙草黑脛病的毒力測定

藥劑回歸直線rEC50/(mg·L-1)置信區(qū)間精甲霜靈Ay=6894+1057x099001600051～00896代森錳鋅By=4935+0845x097119402853～20424A∶B(1∶24)y=5510+0905x099027300014～10538A∶B(1∶20)y=5571+0998x099026800013～10386A∶B(1∶16)y=5678+0831x096015300010～08351A∶B(1∶12)y=5766+1014x099017600001～08992A∶B(1∶8)y=5810+0908x098012800003～07927

表3 精甲霜靈和代森錳鋅及復(fù)配對煙草黑脛病的聯(lián)合毒力

試驗藥劑配比EC50實測毒指理論毒指共毒系數(shù)結(jié)論精甲霜靈A1∶0001610000代森錳鋅B0∶11194135A∶B1∶24027359053011132相加A∶B1∶2002686016059941相加A∶B1∶160153105471514731增效A∶B1∶12017691689410252相加A∶B1∶801281256123110201相加

3 小結(jié)與討論

病原菌的抗藥性是現(xiàn)代農(nóng)業(yè)農(nóng)藥應(yīng)用中產(chǎn)生的一個嚴(yán)重問題。病菌常常能夠通過與殺菌劑作用機(jī)制有關(guān)的單一基因突變來解除特異性位點抑制劑的殺菌活性。作為應(yīng)用廣泛的內(nèi)吸性殺菌劑，由于近些年來苯基酰胺類殺菌劑的大規(guī)模使用，使得我國煙草種植區(qū)煙草黑脛病的抗性逐漸嚴(yán)重[9]。據(jù)調(diào)查，在我國貴州、四川等地的煙草種植區(qū)相繼出現(xiàn)甲霜靈類藥劑對煙草黑脛病的抗藥性，并有逐年加重的趨勢[10-11]。代森錳鋅由于是多位點保護(hù)性殺菌劑，但近些年來大規(guī)模使用，使其用量逐年加大而防效逐年降低[12]。因此，多位點抑制劑和具有不同作用機(jī)理的復(fù)配殺菌劑可以有效的解決病害抗藥性，延長藥劑的使用年限。

本文通過研究兩種作用機(jī)理不同的單劑精甲霜靈和代森錳鋅及其不同比例復(fù)配對煙草黑脛病的聯(lián)合毒力。并通過共毒系數(shù)法計算出當(dāng)精甲霜靈與代森錳鋅質(zhì)量分?jǐn)?shù)比為1∶16時，兩者表現(xiàn)出最大的增效作用。通過合適比例的藥劑混配以期可以有效延緩煙草黑脛病對精甲霜靈及代森錳鋅抗藥性的產(chǎn)生。這個比例可以作為下一步田間試驗的指導(dǎo)比例。

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(責(zé)任編輯：張瑞麟)

2017-02-28

浙江省科技計劃項目(2016F10G5080002)

張蕊蕊(1986—)，女，山東淄博人，碩士，從事殺菌劑方面的研究工作，E-mail：zhangruirui0001@163.com。

10.16178/j.issn.0528-9017.20170531

S435

B

0528-9017(2017)05-0823-03

文獻(xiàn)著錄格式：張蕊蕊，胡偉群，朱衛(wèi)剛. 精甲霜靈與代森錳鋅混配防治煙草黑脛病增效的作用[J].浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2017，58(5)：823-825.