趙玉蓮 吳邦仁 劉 昆 顧新偉*

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浙江省青褶傘屬一個(gè)新記錄種的鑒定

趙玉蓮1吳邦仁2劉 昆3顧新偉2*

（1. 麗水市蓮都區(qū)聯(lián)城農(nóng)業(yè)技術(shù)服務(wù)站，浙江麗水 323000；2. 麗水市農(nóng)作物站，浙江麗水 323000 3. 麗水市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，浙江麗水 323000）

記錄到的青褶傘屬中疑似存在2種不同種，分別對(duì)2個(gè)樣本進(jìn)行生態(tài)學(xué)觀察，依據(jù)形態(tài)學(xué)特征鑒定，結(jié)合Rdna-ITS分析，確認(rèn)浙江省青褶傘屬大型真菌中存在擬乳頭狀青褶傘和大青褶傘2個(gè)種。此前，浙江省域沒(méi)有擬乳頭狀青褶傘的報(bào)道，其一直被誤認(rèn)為與大青褶傘同種。

青褶傘；擬乳頭狀青褶傘；鑒定

根據(jù)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫(kù)檢索，大青褶傘（(G. Mey.) Massee）是浙江省大型真菌資源研究中唯一被記錄的青褶傘屬物種。該種屬毒蕈，常年在秋季或初夏發(fā)生，與高大環(huán)柄菇、脫皮環(huán)柄菇等食用菌發(fā)生期基本一致，宏觀形態(tài)也有些相似，不易區(qū)分，而常被誤食，引起野生菌中毒事故。

大青褶傘含有引發(fā)胃腸炎型、肝腎損害型和溶血型中毒的多種毒素[1]，誤食后除出現(xiàn)腹痛、惡心、嘔吐等胃腸炎癥狀外，還會(huì)引起肝臟傷害、血相異常等情況。從一些中毒病人和醫(yī)務(wù)人員處得知，食用大青褶傘屬中毒，僅出現(xiàn)胃腸炎型癥狀的病人，采取摧吐、洗胃、補(bǔ)液等措施可以治愈。而同一種毒蕈中毒出現(xiàn)兩種截然不同的中毒癥狀，則存在大青褶傘近似種的可能性[2～4]。經(jīng)野生環(huán)境調(diào)查和形態(tài)學(xué)鑒定，結(jié)合核酸序列分析，確認(rèn)近似種為擬乳頭狀青褶傘（(Hongo) Vellinga）。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本采集地與生境觀察

分別選擇麗水市蓮都區(qū)聯(lián)城街道瑤畈村和蓮都區(qū)碧湖鎮(zhèn)下梁村2個(gè)青褶傘發(fā)生點(diǎn)，采集不同發(fā)育階段子實(shí)體標(biāo)本，觀察兩地土壤、肥力、地表植被等主要生境。

1.2 子實(shí)體形態(tài)學(xué)鑒定

對(duì)采集的標(biāo)本形態(tài)、大小及各組織結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀測(cè)記錄，重點(diǎn)觀察標(biāo)本間宏觀特征及其差異。

1.3 rDNA-ITS分析

將形態(tài)存在顯著差異的2個(gè)標(biāo)本交由上海生工生物工程股份有限公司進(jìn)行測(cè)序，將測(cè)得的序列與GenBank核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì)，通過(guò)BLASTn檢索具有最大相似性的物種[3]。

2 結(jié)果與分析

2.1 青褶傘發(fā)生點(diǎn)主要生境

聯(lián)城街道瑤畈村附近山壟地，之前被附近河流洪水倒灌淹沒(méi)，土壤為砂壤土，施有較大量的羊糞和沼渣。標(biāo)本A采集于路邊地塊，作物為生姜，作物周邊長(zhǎng)有7個(gè)青褶菌，子實(shí)體呈散生狀。標(biāo)本B采集于距標(biāo)本A 15 m左右一空地，空地收獲玉米不久，長(zhǎng)有成片子實(shí)體，約數(shù)千個(gè)，呈群生至叢生狀。

標(biāo)本C采集于碧湖鎮(zhèn)下梁村村邊農(nóng)地，土壤為壤土，在收獲茄子后的空地上堆放沼渣，沼渣堆及周邊地上長(zhǎng)有百余個(gè)子實(shí)體，呈近叢生狀。在該村附近，當(dāng)?shù)胤Q“對(duì)門淤”的淤地，四周環(huán)水，土壤為砂土。淤地高處有一養(yǎng)豬場(chǎng)，附近有堆放豬欄肥，雜草叢生。標(biāo)本D采集于肥堆周邊地上，共長(zhǎng)子實(shí)體5個(gè)，呈散生狀。

2.2 標(biāo)本A、D主要形態(tài)特征

子實(shí)體表皮裂成鱗片，裸露的菌肉白色，傷變紅色，菌褶初期白色，老熟后或采摘后1 h內(nèi)轉(zhuǎn)青綠色，菌環(huán)厚。標(biāo)本A和D子實(shí)體整體較大，鱗片大且易脫落。標(biāo)本B和C子實(shí)體整體較小，鱗片不易脫落。根據(jù)表觀形態(tài)及生境特征，初步判定標(biāo)本A和D同種，標(biāo)本B和C同種。

（1）標(biāo)本A、D主要形態(tài)特征。子實(shí)體大，傷處變暗紅色、紅色，干時(shí)氣香。菌蓋直徑5～25 cm，初時(shí)近球形至半球形，后為扁半球形至平展，中間平緩?fù)蛊鸹蚱秸?，幼時(shí)表皮淡褐色，逐漸裂成鱗片。鱗片卷曲，干后深褐色，易脫落，頂部表皮較厚、成龜裂狀，鱗片脫落部分表面粗糙。菌肉白色或帶淺粉紅色，松軟。菌褶初期污白色，后期呈淺綠至青褐色，離生，寬，不等長(zhǎng)，褶緣有粉粒。菌柄長(zhǎng)10～28 cm，直徑1～2.5 cm，圓柱形，污白色至淺灰褐色，纖維質(zhì)，表面光滑，基部稍膨大，內(nèi)部空心。菌環(huán)肉質(zhì)，稍厚呈環(huán)形，生于菌柄上部，可移動(dòng)，色白，下面呈紫色或褐色斑紋。孢子印帶青黃褐色，后呈淺土黃色。孢子大小8～12×6～8（μm），光滑，具明顯芽孔，寬卵圓形至寬橢圓形（圖1a）。

（2）標(biāo)本B、C主要形態(tài)學(xué)差異。子實(shí)體一般中等大，株高只有標(biāo)本A、D的50%左右，大小比較一致，但最大個(gè)體菌蓋直徑達(dá)17 cm，比標(biāo)本A、D中較小的個(gè)體大。菌蓋老熟后呈扁平，邊緣略上翹，中部有明顯凸起，部分凸起成乳頭狀。凸起部分表皮色深，緊貼，不成鱗片。鱗片淡黃褐色，較薄，色較淺，一般成龜裂狀，不脫落，但在氣候干燥或晴天時(shí)會(huì)卷曲脫落。菌皮脫落后裸露的菌肉往往形成新的纖毛狀鱗片，在陰暗處呈白色至乳白色，陽(yáng)光照射后呈淺黃白色至炒米黃色。菌褶初時(shí)乳白色或粉黃色，在十分老熟后或采摘后才逐步呈青綠色（圖1b、圖1c）。菌環(huán)下面未見(jiàn)紫色斑紋。孢子比標(biāo)本A、D小1～2 μm。

a：標(biāo)本D

b：標(biāo)本B（晴天）

c：標(biāo)本C（雨后）

2.3 rDNA-ITS分析結(jié)果

子實(shí)體基因組DNA的ITS區(qū)域PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，經(jīng)測(cè)序及修正分析后，標(biāo)本A、D得到一條732 bp的有效堿基序列，標(biāo)本B、C得到一條716 bp的有效堿基序列（圖2）。序列經(jīng)核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)的結(jié)果，標(biāo)本A、D與大青褶傘（）同源性最高；而標(biāo)本B、C則與擬乳頭狀青褶傘（）同源性最高。

圖2 標(biāo)本C實(shí)體ITS區(qū)域堿基序

3 討 論

擬乳頭狀青褶傘與擬乳頭狀大環(huán)柄菇（）為同物異名關(guān)系[4]，此前筆者在相關(guān)專著中曾以擬乳頭狀大環(huán)柄菇之名發(fā)布。但受鑒定能力與手段的局限，之前鑒定已證明是個(gè)錯(cuò)誤，此文做一個(gè)訂正[5]。

結(jié)合近幾年野生菌采集情況看，2種青褶傘多發(fā)于9月下旬至11月上旬，持續(xù)時(shí)間約3周，初夏季節(jié)也有少量發(fā)生。大青褶傘大多長(zhǎng)在有機(jī)質(zhì)豐富的砂性土壤，在同一地塊的發(fā)生量往往不大，生長(zhǎng)習(xí)性為單生或散生。而擬乳頭狀青褶傘則多發(fā)生在肥堆或有機(jī)肥非常多的土壤上，對(duì)土壤類型要求不高。在同一地塊的發(fā)生量往往很大，生長(zhǎng)習(xí)性多為群生至近叢生，生境與生長(zhǎng)習(xí)性的差異或許是兩者重要的區(qū)分點(diǎn)。

兩種青褶菌都有傷變紅色、菌褶老熟后或采摘后變青綠色的情況，這是青褶菌屬的共同特性。由于野生狀態(tài)大型真菌的形態(tài)受環(huán)境條件影響會(huì)有較大的變化，使得種類鑒別易出現(xiàn)偏差。大青褶傘與擬乳頭狀青褶傘二者表觀形態(tài)，在不同的氣候、土壤基質(zhì)條件下都會(huì)出現(xiàn)較大的差異，它們的鑒別關(guān)鍵點(diǎn)可集中在菌蓋中心凸起部位及其菌皮、鱗片形態(tài)，以及子實(shí)體整體大小等方面。

[1] 龔慶芳, 張玉梅, 譚寧華, 等. 三種毒菌的化學(xué)成分研究龔慶芳[J]. 天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā), 2010(22): 185-188.

[2] 圖力古爾, 包海鷹, 李玉. 中國(guó)毒蘑菇名錄[J]. 菌物學(xué)報(bào), 2014, 33(3): 517-548.

[3] 宋小亞, 劉德云, 李陽(yáng), 等. 野生赭鱗蘑菇及其分離菌株的鑒定[J]. 食用菌學(xué)報(bào), 2012, 19(1): 27-35.

[4] 卯曉嵐. 中國(guó)毒菌物種多樣性及其毒素[J]. 菌物學(xué)報(bào), 25(3): 345-363.

[5] 顧新偉, 何伯偉. 浙南山區(qū)大型真菌[M]. 杭州: 浙江科學(xué)技術(shù)出版社, 2012.

S646

A

2095-0934（2017）03-178-03

浙江省現(xiàn)代種業(yè)發(fā)展工程項(xiàng)目“浙南山區(qū)藥用真菌種質(zhì)鑒定與評(píng)價(jià)”（浙財(cái)農(nóng)[2014]232號(hào)）

*通訊作者：顧新偉（1961—），男，農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣研究員，近十余年主要從事大型真菌資源調(diào)查研究工作。E-mail：894397403@qq.com