王 英，朱 峰，王家美，鄢 玲

(十堰市中醫(yī)醫(yī)院婦產(chǎn)科，湖北 十堰 442000)

TNF-在妊娠高血壓患者體內(nèi)的表達(dá)及對(duì)胎兒的影響情況分析

王 英，朱 峰，王家美，鄢 玲

(十堰市中醫(yī)醫(yī)院婦產(chǎn)科，湖北 十堰 442000)

目的 探討腫瘤壞死因子-(TNF-)在妊娠高血壓綜合征患者血清中的表達(dá)及對(duì)胎兒的影響。方法 選取2012年4月至2016年9月在十堰市中醫(yī)醫(yī)院婦產(chǎn)科住院分娩的妊娠高血壓綜合征產(chǎn)婦400例，其中輕度132例，中度140例，重度128例，同時(shí)選取150例健康產(chǎn)婦作為對(duì)照組，采用ELISA法檢測(cè)母血及臍血血清中TNF-的含量。結(jié)果 對(duì)照組母血及臍血TNF-水平明顯低于其他組(t值分別為5.432、6.921、6.722、8.122、7.034、9.116，均P<0.05)；重度組母血及臍血TNF-水平均顯著高于輕度組和中度組(t值分別為7.921、8.055、9.032、10.215，均P<0.05)。重度組Apgar評(píng)分明顯低于其他組(t值分別為5.832、9.821、12.042，均P<0.05)；中度組Apgar評(píng)分明顯低于對(duì)照組(t=8.372，P<0.05)；輕度組與對(duì)照組Apgar評(píng)分比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.104，P>0.05)。母血及臍血TNF-水平與新生兒Apgar評(píng)分呈顯著負(fù)相關(guān)(r值分別為-0.322、-0.411，均P<0.05)。結(jié)論 妊娠期高血壓患者血液中TNF-α呈現(xiàn)出高表達(dá)趨勢(shì)，TNF-的表達(dá)與妊高癥患者的嚴(yán)重程度和胎兒的狀態(tài)有一定的相關(guān)性。

腫瘤壞死因子-；妊娠高血壓；胎兒；母血；臍靜脈血

妊娠期高血壓疾病是臨床上較為常見(jiàn)的妊娠合并癥，相關(guān)研究顯示妊娠期高血壓疾病的發(fā)病率可達(dá)0.5‰以上，且近年來(lái)呈現(xiàn)出了明顯的上升趨勢(shì)[1]。臨床上妊娠期高血壓的發(fā)生發(fā)展可以導(dǎo)致不良妊娠結(jié)局的發(fā)生，增加母兒病死率[2]。對(duì)于妊娠期高血壓疾病的評(píng)估具有重要的意義，病情的評(píng)估可以為早期臨床干預(yù)提供有效的參考。血清學(xué)指標(biāo)在妊娠合并癥的診斷以及臨床預(yù)后評(píng)估中均具有重要的意義。

腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor α,TNF-α)可以通過(guò)加劇血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷，導(dǎo)致胎盤(pán)血管的繼發(fā)性病理改變的發(fā)生，進(jìn)而加劇妊娠期高血壓的病情進(jìn)展[3]。本研究通過(guò)選取2012年4月至2016年9月在十堰市中醫(yī)醫(yī)院住院分娩的妊娠高血壓綜合征產(chǎn)婦400例，探討了其血清及臍帶血中TNF-α的表達(dá)變化，報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1研究對(duì)象

選取2012年4月至2016年9月在十堰市中醫(yī)醫(yī)院婦產(chǎn)科住院分娩的妊娠高血壓綜合征產(chǎn)婦400例，其中輕度132例，中度140例，重度128例，納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)關(guān)于妊娠期高血壓的診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]；②均為單胎初產(chǎn)婦；③患者及家屬知情同意并簽署同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有糖尿病、原發(fā)性高血壓及肝腎慢性疾病史；②有胎膜早破、早產(chǎn)及感染跡象。 同時(shí)選取150例妊娠晚期健康婦女作為對(duì)照組，各組孕婦年齡、孕周比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)，見(jiàn)表1。

組別例數(shù)(n)年齡(y)孕周(w)對(duì)照組15027.01±8.7338.41±1.40輕度組13226.87±9.1038.51±1.73中度組14027.11±7.9937.62±1.80重度組12826.98±9.4037.43±1.58F3.1022.087P>0.05>0.05

1.2檢測(cè)方法

采用低溫高速離心機(jī)進(jìn)行離心，1 000r/min(離心半徑為15cm)，獲得血清后抽取50μL樣品加入96孔板內(nèi)，采用去離子水作為陰性對(duì)照，采用50μL cryab作為陽(yáng)性對(duì)照，平衡搖晃20s混勻，室溫下孵育2h，采用TBSP緩沖液清洗3次，每次5min，加入100μL底物，平衡搖晃30～45s，25攝氏度室溫下孵育40min，加入250μL終止物，直到96孔板中每孔的顏色變黃，最后已空白對(duì)照為基準(zhǔn)，采用分光光度計(jì)進(jìn)行讀數(shù)。TNF-α抗體購(gòu)自羅氏檢測(cè)公司，相關(guān)配套試劑購(gòu)自南京凱基生物科技有限公司，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的要求進(jìn)行操作。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2結(jié)果

2.1各組母血及臍血TNF-水平比較

對(duì)照組母血及臍血TNF-水平明顯低于其他組(t值分別為5.432、6.921、6.722、8.122、7.034、9.116，均P<0.05)；重度組母血及臍血TNF-水平均顯著高于輕度組和中度組(t值分別為7.921、8.055、9.032、10.215，均P<0.05)，見(jiàn)表2。

2.2各組新生兒Apgar評(píng)分比較

重度組Apgar評(píng)分明顯低于其他組(t值分別為5.832、9.821、12.042，均P<0.05)；中度組Apgar評(píng)分明顯低于對(duì)照組(t=8.372，P<0.05)；輕度組與對(duì)照組Apgar評(píng)分比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.104，P>0.05)，見(jiàn)表3。

2.3相關(guān)性分析

將妊娠高血壓綜合征產(chǎn)婦母血及臍血TNF-水平與新生兒Apgar評(píng)分進(jìn)行相關(guān)性分析，母血及臍血TNF-水平與新生兒Apgar評(píng)分呈顯著負(fù)相關(guān)(r值分別為-0.322、-0.411，均P<0.05)。

Table 2 Comparison of TNF-levels in maternal and umbilical cord blood among each ±S)

注：a與對(duì)照組比較P<0.05；b與輕度組比較P<0.05；c與中度組比較P<0.05。

組別例數(shù)(n)Apgar評(píng)分(分)FP對(duì)照組1508.09±1.0681.601<0.05輕度組1327.91±0.90中度組1407.22±0.82a重度組1286.60±0.91abc

注：a與對(duì)照組比較P<0.05；b與輕度組比較P<0.05；c與中度組比較P<0.05。

3討論

3.1妊娠期高血壓疾病的臨床預(yù)后評(píng)估指標(biāo)

自身免疫性因素、高血脂癥及高齡初產(chǎn)婦等，均為妊娠期高血壓的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素，特別是在年齡大于30歲的孕產(chǎn)婦中，妊高癥的發(fā)病率可較普通對(duì)照人群上升3～4倍[4]。臨床上妊高癥的發(fā)生發(fā)展，可以導(dǎo)致孕產(chǎn)婦產(chǎn)后出血的發(fā)生，并增加胎兒宮內(nèi)窘迫或者新生兒窒息的風(fēng)險(xiǎn)。通過(guò)檢測(cè)血壓或者尿蛋白可以評(píng)估妊高癥的病情嚴(yán)重程度，但一項(xiàng)匯集了173例樣本量的臨床回顧性分析研究顯示，單純血壓或者尿蛋白檢測(cè)評(píng)估妊高癥臨床預(yù)后的靈敏度和特異度均不足45%，其評(píng)估一致性較差，臨床應(yīng)用仍然具有一定的局限性[5-6]。血清學(xué)指標(biāo)的檢測(cè)較為方便、經(jīng)濟(jì)，短期內(nèi)可反復(fù)測(cè)量，在妊娠期特有疾病的診斷以及臨床預(yù)后評(píng)估中均發(fā)揮了重要的參考價(jià)值。

3.2 TNF-α在妊娠期高血壓疾病中的作用機(jī)制

TNF-α作為血清中的細(xì)胞炎癥因子，可以通過(guò)加劇下游細(xì)胞炎癥因子如白細(xì)胞介素-6(interleukin-6，IL-6)、白細(xì)胞介素-10(interleukin-10，IL-10)等的激活或者富集，進(jìn)而促進(jìn)炎癥細(xì)胞對(duì)于胎盤(pán)組織的浸潤(rùn)，導(dǎo)致胎盤(pán)血流動(dòng)力學(xué)的紊亂，加劇胎兒宮內(nèi)缺氧表現(xiàn)。相關(guān)基礎(chǔ)研究也顯示， TNF-α可以通過(guò)加劇氧化應(yīng)激損傷，進(jìn)而促進(jìn)胎盤(pán)血管微循環(huán)的障礙，導(dǎo)致胎兒宮內(nèi)生長(zhǎng)受限，并增加新生兒窒息的風(fēng)險(xiǎn)[7-8]。已有的研究探討了 TNF-α在妊高癥患者血清中的異常表達(dá)，認(rèn)為高表達(dá)的 TNF-α與患者的遠(yuǎn)期不良臨床預(yù)后具有密切的關(guān)系[9]，但相關(guān)研究的樣本量不足，臨床資料的收集偏移較為嚴(yán)重，可信性不高。本研究的創(chuàng)新點(diǎn)主要在于分析了不同嚴(yán)重程度的新生兒窒息與血清TNF-α的關(guān)系，且總體樣本量達(dá)400例以上，樣本量較為豐富，研究結(jié)論的可靠性較高。

3.3 TNF-α在妊高癥中的異常表達(dá)及其與患者臨床預(yù)后的關(guān)系

本研究發(fā)現(xiàn)，妊高癥組患者血清及臍帶血中的TNF-α均明顯高于正常對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示TNF-α可能參與到了妊高癥的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中。TNF-α可以通過(guò)加劇血管內(nèi)皮細(xì)胞的氧化損傷，促進(jìn)胎盤(pán)血流阻力系數(shù)的上升，進(jìn)而導(dǎo)致孕產(chǎn)婦不良妊娠結(jié)局的發(fā)生。Limoges等[10]研究者通過(guò)回顧性分析了73例樣本量的臨床資料，發(fā)現(xiàn)妊娠期高血壓患者血清中的TNF-α可較正常對(duì)照人群上升25%以上，這與本研究的結(jié)論較為一致。在不同病情嚴(yán)重程度的孕產(chǎn)婦中，TNF-α的表達(dá)同樣具有明顯的差異，妊高癥患者的病情越為嚴(yán)重，其血清或者臍帶血中的TNF-α表達(dá)濃度越高，趨勢(shì)較為明顯，提示TNF-α的表達(dá)可以作為評(píng)估妊高癥病情的重要參考[10]。但需要注意的是，Maru等[11]研究者的研究中并未發(fā)現(xiàn)血清中TNF-α的表達(dá)與妊高癥患者病情間的關(guān)系，這與本研究的結(jié)論存在一定的差別，考慮到樣本量的不足、臨床資料的收集偏移等，均可能導(dǎo)致了最終結(jié)論的差別。重度組及中度組患者的Apgar評(píng)分較低，低于正常對(duì)照組，Apgar評(píng)分是評(píng)估新生兒臨床結(jié)局的重要指標(biāo)，而在輕度、中度及重度組患者血清中，TNF-α的表達(dá)逐漸上升，提示TNF-α與新生兒不良臨床結(jié)局具有密切的關(guān)系，臨床上可以通過(guò)妊娠中晚期采集孕產(chǎn)婦的血清TNF-α，進(jìn)而評(píng)估新生兒不良結(jié)局風(fēng)險(xiǎn)，據(jù)此有利于早期進(jìn)行新生兒復(fù)蘇急救。但本研究并未發(fā)現(xiàn)輕度組及正常對(duì)照組間的TNF-α表達(dá)差異，考慮TNF-α的表達(dá)主要參與到了較為嚴(yán)重的新生兒窒息的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中。而通過(guò)相關(guān)關(guān)系分析可以發(fā)現(xiàn)，母血及臍血TNF-α水平與新生兒Apgar評(píng)分呈負(fù)相關(guān)，TNF-α的表達(dá)越高，孕產(chǎn)婦新生兒窒息的風(fēng)險(xiǎn)越高，進(jìn)一步提示TNF-α的表達(dá)可以作為評(píng)估新生兒宮內(nèi)缺氧或者窒息風(fēng)險(xiǎn)的重要依據(jù)。

綜上所述，在妊娠期高血壓患者血清及臍帶血中，TNF-α呈現(xiàn)出了明顯的高表達(dá)趨勢(shì)，TNF-α的表達(dá)越高，妊高癥患者的病情往往越為嚴(yán)重。但本研究對(duì)于TNF-α的表達(dá)與妊高癥孕產(chǎn)婦不良臨床結(jié)局的關(guān)系研究不足，存在一定的局限性。

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[專(zhuān)業(yè)責(zé)任編輯：于學(xué)文]

Expression of TNF- in pregnancy-induced hypertension patients and its effect on fetus

WANG Ying, ZHU Feng, WANG Jia-mei, YAN Ling

(DepartmentofObstetricsandGynecology,ShiyanHospitalofTraditionalChineseMedicine,HubeiShiyan442000,China)

Objective To investigate the expression of tumor necrosis factor- (TNF-) in pregnancy-induced hypertension patients and its effect on fetus. Methods From April 2012 to September 2016, totally 400 cases of pregnancy-induced hypertension delivering in Shiyan Hospital of Traditional Chinese Medicine were selected, including 132 mild cases, 140 moderate cases and 128 severe cases. At the same period 150 healthy pregnant women were selected in control group. Content of TNF- in maternal and umbilical cord blood was detected by ELISA. Results In the control group TNF- levels in maternal and umbilical cord blood were significantly lower than those in the other groups (tvalue was 5.432, 6.921, 6.722, 8.122, 7.034 and 9.116, respectively, allP<0.05). In severe group TNF- levels in maternal and umbilical cord blood were significantly higher than those in mild group and moderate group (tvalue was 7.921, 8.055, 9.032 and 10.215, respectively, allP<0.05), and Apgar score was significantly lower than the other groups (tvalue was 5.832, 9.821 and 12.042, respectively, allP<0.05). Apgar score in moderate group was significantly lower than in the control group (t=8.372,P<0.05). There was no significant difference in Apgar score between mild group and control group (t=2.104,P>0.05). TNF- level in maternal and umbilical cord blood was negatively correlated with neonatal Apgar score (rvalue was -0.322 and -0.411, respectively, bothP<0.05). Conclusion TNF- is highly expressed in pregnancy-induced hypertension patients. The expression of TNF- is correlated with the severity of patients with pregnancy-induced hypertension and fetal situation.

tumor necrosis factor- (TNF-); pregnancy-induced hypertension; fetus; maternal blood; umbilical vein blood

2017-03-10

王 英(1980-)，女，主治醫(yī)師，主要從事產(chǎn)科臨床工作。

鄢 玲，副主任醫(yī)師。

10.3969/j.issn.1673-5293.2017.05.019

R714.246

A

1673-5293(2017)05-0544-03