閆麗麗

摘要：在查閱、收集國內(nèi)蒲公英中總黃酮取純化工藝、生物活性文獻基礎上，綜述近年來蒲公英中總黃酮的純化工藝及生物活性研究進展，旨在為進一步開展蒲公英相關(guān)研究提供參考。

關(guān)鍵詞：總黃酮；蒲公英；提取純化；生物活性

中圖分類號：R932 文獻標識碼：A 文章編號：1674-1161（2017）01-0066-02

蒲公英為菊科植物蒲公英屬多年生草本植物，具有清熱解毒、消腫散結(jié)、利尿通淋等功效，其主要有效成分為黃酮類。近年來，國內(nèi)在蒲公英中總黃酮的提取純化、生物活性等方面進行大量研究。在查閱收集文獻的基礎上，綜述近幾年來蒲公英中總黃酮的提取純化、生物活性研究進展，旨在為相關(guān)研究提供參考。

1 蒲公英總黃酮的提取方法

蒲公英總黃酮的提取方法主要有溶劑提取法、超聲輔助提取法、微波輔助提取法、超臨界CO2萃取法等。吳杰等通過試驗獲得的乙醇提取蒲公英中總黃酮最佳提取工藝為：料液比1︰50（g/mL），乙醇濃度50%，提取溫度40 ℃，提取時間2 h，黃酮得率為6.84%。楊春瑜等采用乙醇回流法提取蒲公英中總黃酮，得到的最佳工藝為：料液比1︰20，提取時間2 h，乙醇濃度70%，提取溫度75 ℃，黃酮得率10.10%。李華峰等采用超聲波法提取蒲公英花粉末中的總黃酮，最佳提取工藝為：料液比1︰100、乙醇濃度75%、超聲功率100 W、55 ℃的條件下超聲提取30 min，總黃酮與總酚酸成分的提取較為完全。楊兵等比較微波萃取、索氏提取和超聲波提取3種方法的蒲公英總黃酮類物質(zhì)提取效率，結(jié)果表明：微波萃取法的最優(yōu)條件為微波溫度70 ℃、乙醇濃度70%、加熱時間5 min。周偉等通過正交試驗優(yōu)化的CO2萃取工藝條件為：萃取壓力30 MPa，萃取溫度40 ℃，萃取時間90 min，乙醇流速3 mL/min，總黃酮萃取率1.68%。

2 蒲公英總黃酮的純化方法

目前，蒲公英中總黃酮提取液純化的方法有大孔樹脂柱色譜、大孔吸附樹脂-硅膠層析耦合、聚酰胺柱色譜、硅膠柱層析等，其中大孔樹脂較為常用。

大孔樹脂具有吸附量大、選擇性好、易解吸、易再生、成本低、效率高等優(yōu)點，特別適用于水溶性化合物的提取分離。在大孔樹脂型號的選擇上，衛(wèi)建琮、李華峰和袁杰等采用D-101型，趙惠茹采用AB-8型，姚德坤采用廣譜型，這些型號用于純化蒲公英中總黃酮的效果較好。

衛(wèi)建琮等確定蒲公英中總黃酮的最佳分離純化條件為：在D-101樹脂柱中，上樣液濃度1.238 mg/mL，pH值3，上樣量2 BV（樹脂床體積倍數(shù)），室溫下以流速2.0 BV/h吸附飽和，用4 BV的50%～70%乙醇以2 BV/h 的流速洗脫，黃酮純度為92.56%。

趙惠茹、馬姣姣等研究表明：AB-8型樹脂對蒲公英中總黃酮的吸附與解吸性能較好，最佳吸附條件為上柱液濃度（以總黃酮含量計）9.2 g/L、pH值6、吸附流速2 BV/h，樹脂柱的徑高比1︰6，上樣液體積9 BV；最佳解吸條件為4.5 BV、75%乙醇洗脫，洗脫流速2 BV/h。

聚酰胺吸附樹脂是一種有機高聚吸附劑，具有選擇性好、吸附容量大、解吸容易等優(yōu)點，廣泛應用于黃酮類成分的純化。袁河通過靜態(tài)吸附和解析試驗選定聚酰胺為最佳吸附樹脂，確定最佳吸附條件為：溶液pH值6，上樣量20.00 mL；最佳解析條件為：乙醇濃度90%，溫度30 ℃；最佳動態(tài)工藝條件為：上樣液濃度2.65 mg/mL，上樣液流速2.0 mL/min，洗脫液流速1.5 mL/min，純化前總黃酮含量21.07%，純化后總黃酮含量為47.89%。

3 蒲公英總黃酮的生物活性

研究表明，蒲公英總黃酮具有抑菌、抗氧化、心肌細胞保護、腦保護、抗癌、保鮮和改善卷煙吸味等活性。

3.1 抑菌活性

王曉英的研究表明：蒲公英總黃酮類提取物能破壞細胞膜結(jié)構(gòu)，導致細胞通透性增加，使細胞內(nèi)容物外泄。另外，蒲公英總黃酮類提取物可以妨礙細菌蛋白質(zhì)的正常表達，導致細菌正常生理功能喪失，起到抑菌作用。楊春瑜等用平板打孔法測定蒲公英黃酮的抗菌活性，結(jié)果表明，蒲公英黃酮的抗菌活性強弱順序為白色黃色葡萄球菌>枯草芽孢桿菌>大腸桿菌。李華峰的研究表明：蒲公英提取液對金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、變形桿菌和綠膿桿菌敏感，對大腸埃希菌低度敏感。

3.2 抗氧化活性

李華峰的研究表明：蒲公英花提取液對超氧陰離子自由基、羥自由基和油脂自氧化均有較好的清除效果，并在供試質(zhì)量濃度范圍內(nèi)呈現(xiàn)量效關(guān)系；對超氧陰離子自由基的半數(shù)抑制率IC50為96.1 μg/mL，對羥自由基的IC50為7.7 μg/mL；蒲公英花提取液可使花生油的過氧化值顯著降低，效果與在花生油中添加0.10%的VC相當。

袁河對蒲公英總黃酮提取物抗氧化作用的研究表明：DPPH自由基的清除率隨蒲公英黃酮提取物濃度的增加而增大，純化后的黃酮提取物比純化前的清除DPPH自由基能力強，也比對照品BHT強，但比添加VC弱。楊銳杰等研究發(fā)現(xiàn)：蒲公英花各萃取相的體外抗氧化作用與黃酮含量呈正相關(guān)作用，效果順序為乙酸乙酯相>正丁醇相>水相>石油醚相。

3.3 腦保護活性

隋洪玉等研究發(fā)現(xiàn)：蒲公英水提液能夠降低大鼠腦組織MDA、MAO含量，提高SOD活性，具有一定的抗自由基作用。蔣喜巧的研究表明：蒲公英總黃酮可改善造模后小鼠側(cè)支循環(huán)和局部血液循環(huán)，進而升高小鼠結(jié)扎后的血流平均灌注量，使腦血流降低，從而改善小鼠腦膜微循環(huán)障礙；提高腦組織LDH、SOD、ATP酶的活力，改善腦部能量供應，減輕腦組織損傷；降低腦組織中LD、NOS活力和NO、MDA水平，以及IL-1β、ICAM-1、VcAM-1、TNF-α、NSE、MPO、S-100β蛋白的含量；降低死亡率；改善神經(jīng)功能缺失評分；保護大腦皮質(zhì)及海馬區(qū)免受缺血再灌注引起的腦損傷。

3.4 心肌細胞保護活性

李建紅將100只雄性BALB/c小鼠隨機分為正常對照組，模型組，利巴韋林組和蒲公英總黃酮低、中、高劑量組，模型組和給藥組小鼠腹腔接種CVB3病毒，觀察蒲公英總黃酮對模型鼠生存率的影響，結(jié)果表明：蒲公英總黃酮能有效抑制病毒性心肌炎和小鼠心肌細胞凋亡。

參考文獻

[1] 趙惠茹，馬姣姣，魏彩霞，等.大孔吸附樹脂分離純化蒲公英中總黃酮的工藝研究[J].中國藥業(yè)，2014（12）：81-83.

[2] 衛(wèi)建琮，李華峰，喬華.中藥蒲公英花中總黃酮的分離純化研究[J].中國藥物與臨床，2014，14（1）：19-21.

[3] 楊銳杰，喬華，劉文，等.中藥蒲公英花體外抗氧化活性部位研究[J].中國藥物與臨床，2016，16（1）：9-11.

[4] 蔣喜巧.蒲公英總黃酮對腦缺血模型的干預作用研究[D].鄭州：河南中醫(yī)學院，2015.