李乾兵，陳 俊，徐裕豐，王智勝，童亞玲

(安慶市第一人民醫(yī)院 呼吸內(nèi)科，安徽 安慶 246003)

COPD患者T淋巴細胞亞群比例及其與BODE指數(shù)和急性加重風(fēng)險的相關(guān)性

李乾兵，陳 俊，徐裕豐，王智勝，童亞玲

(安慶市第一人民醫(yī)院 呼吸內(nèi)科，安徽 安慶 246003)

目的：探討慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血T淋巴細胞亞群的比例，判定其與BODE指數(shù)及急性加重風(fēng)險的相關(guān)性。方法：分別選擇69例COPD患者(吸煙者44例,非吸煙者25例)和50例健康志愿者，采用流式細胞儀檢測兩組受試者外周血T淋巴細胞亞群；分析COPD患者的BODE指數(shù)及1年隨訪期內(nèi)COPD患者急性加重住院治療次數(shù)與T淋巴細胞亞群的相關(guān)關(guān)系。結(jié)果：COPD組外周血CD3+、CD4+T淋巴細胞和CD4+/CD8+比例均低于健康志愿組(P<0.01)，而CD8+T淋巴細胞無明顯改變(P>0.05)；COPD吸煙者外周血CD4+T淋巴細胞和CD4+/CD8+比例明顯低于COPD非吸煙者(P<0.01)，CD3+、CD8+T淋巴細胞與COPD非吸煙者相比無差異性(P>0.05)。CD4+T淋巴細胞和CD4+/CD8+比例與BODE指數(shù)顯著負相關(guān)(r=-0.440、P=0.000；r=-0.456、P=0.000)，而CD3+、CD8+T淋巴細胞與BODE指數(shù)無明顯相關(guān)性(r=-0.200、P=0.099；r=-0.207、P=0.088)；CD3+、CD4+T淋巴細胞和CD4+/CD8+水平與COPD急性加重次數(shù)呈明顯負相關(guān)(r=-0.264、P=0.028；r=-0.296、P=0.013；r=-0.245、P=0.042)，而CD8+T淋巴細胞與COPD急性加重次數(shù)無明顯相關(guān)性(r=-0.005、P=0.967)。結(jié)論：CD4+T淋巴細胞和CD4+/CD8+水平可能與COPD的嚴重程度和COPD急性加重密切相關(guān)，且吸煙影響COPD患者外周T淋巴細胞亞群的比例。

慢性阻塞性肺疾病；T淋巴細胞亞群；BODE指數(shù)；急性加重

【DOI】10.3969/j.issn.1002-0217.2017.03.007

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是全球患病率較高的疾病，患者肺功能進行性減退，嚴重影響患者的生命質(zhì)量；多種炎癥細胞及其釋放的各種炎癥介質(zhì)以及機體的免疫狀態(tài)失調(diào)等在COPD發(fā)生和發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用[1]。研究顯示[2-3]，COPD患者體內(nèi)存在細胞免疫功能的紊亂，表現(xiàn)為T淋巴細胞亞群(CD3+、CD4+T淋巴細胞和CD4+/CD8+)發(fā)生變化，且吸煙可能對COPD患者T細胞功能存在影響。本文通過檢測COPD患者T淋巴細胞及其亞群并記錄其BODE指數(shù)、1年隨訪期內(nèi)急性加重住院治療的次數(shù)，探討COPD患者外周血T淋巴細胞亞群的比例及其與BODE指數(shù)及急性加重風(fēng)險的相關(guān)性和吸煙對COPD患者外周血T淋巴細胞比例的影響。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2014年6月～2015年6月在我院治療的COPD患者(COPD組)69例，年齡44～82歲，平均(70.86±8.59)歲，其中男54例，女15例，病史10～40年不等，COPD診斷符合2013年中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會慢性阻塞性肺疾病(COPD)學(xué)組修訂的COPD診治指南的診治標準[1]，其中吸煙者44例，非吸煙者25例；排除肺結(jié)核、支氣管擴張、肺癌、心功能不全、其他慢性炎癥、腫瘤、風(fēng)濕性疾病、糖尿病等影響免疫功能狀態(tài)的疾病，且近1個月內(nèi)未用過免疫抑制劑等影響免疫功能狀態(tài)的藥物。另選在我院行體檢的健康者50例(對照組)，年齡42～80歲，平均(69.87±9.13)歲，其中男38例，女12例，均未發(fā)現(xiàn)影響免疫功能狀態(tài)的疾病或使用影響免疫功能狀態(tài)的藥物，且經(jīng)病史詢問、體格檢查、相關(guān)輔助檢查、肺通氣功能測定均未發(fā)現(xiàn)異常。兩組患者的年齡、性別等比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。COPD吸煙者與非吸煙者年齡、病程、病情、肺功能等基線水平一致(P>0.05)，具有可比性。所有入組的患者均自愿加入本研究，并簽署知情同意書，本研究得到醫(yī)院倫理委員會同意。

1.2 研究方法 所有COPD患者均詳細詢問病史，入院行血常規(guī)、肝腎功能、動脈血氣、肺部CT等檢查；應(yīng)用美國BD公司FACSCalibur型全自動流式細胞儀檢測T細胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細胞及CD4+/CD8+水平)；對無明顯禁忌的患者行肺通氣功能檢查。分別記錄BODE指數(shù)[(body mass index(B),airflow obstruction(O),dyspnea(D) and exercise capacity(E) index,BODE index)]及各變量，包括體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、第1秒用力呼氣容量占預(yù)計值百分比(FEV1%pred)、改良的英國醫(yī)學(xué)研究委員會呼吸困難量表(modified medical research council scale,MMRC)、6分鐘步行距離(six minutes walking distance,6MWD)(見表1)，隨訪1年并記錄患者因急性加重住院治療的次數(shù)。

表1 BODE評分系統(tǒng)

項目0分1分2分3分FEV1%pred/%≥6550～6436～49≤356MWD/m≥350250～349150～249≤149MMRC/級0～1234BMI/(kg/m2)>21≤21

2 結(jié)果

2.1 外周血T淋巴細胞亞群水平比較 COPD患者外周血CD3+、CD4+T淋巴細胞及CD4+/CD8+水平均降低，與對照組相比具有顯著差異性(P<0.01)，而CD8+T淋巴細胞稍有升高，但與對照組相比無差異性(P>0.05)。見表2。

組別CD3+T淋巴細胞/%CD4+T淋巴細胞/%CD8+T淋巴細胞/%CD4+/CD8+COPD組(n=69)59．18±14．8225．76±11．1130．48±12．071．03±0．77對照組(n=50)70．19±11．6434．89±13．9529．11±10．361．68±0．75t4．373．970．654．59P0．0000．0000．5180．000

2.2 COPD吸煙者與非吸煙者外周血T淋巴細胞亞群水平比較 COPD吸煙者CD4+T淋巴細胞、CD4+/CD8+水平較COPD非吸煙者相比降低(P<0.01)；CD3+T淋巴細胞較非吸煙COPD患者降低，而CD8+T淋巴細胞水平較COPD非吸煙者相比升高，但均無明顯差異(P>0.05)。見表3。

2.3 COPD患者BODE指數(shù)及其各變量和隨訪1年患者COPD急性加重次數(shù)的結(jié)果 見表4。

2.4 COPD患者外周血T淋巴細胞亞群與BODE指數(shù)及隨訪1年COPD急性加重次數(shù)的相關(guān)性 Pearson相關(guān)分析顯示，COPD患者外周血CD4+T淋巴細胞和CD4+/CD8+水平與BODE指數(shù)呈負相關(guān)，而CD3+、CD8+T淋巴細胞與BODE指數(shù)無統(tǒng)計學(xué)相關(guān)性；CD3+、CD4+T淋巴細胞和CD4+/CD8+水平與COPD急性加重次數(shù)呈負相關(guān)，CD8+T淋巴細胞與COPD急性加重次數(shù)相關(guān)性未見。見表5。

組別CD3+T淋巴細胞/%CD4+T淋巴細胞/%CD8+T淋巴細胞/%CD4+/CD8+COPD吸煙者(n=44)56．59±13．8421．74±8．2932．22±10．160．72±0．32COPD非吸煙者(n=25)63．73±15．9132．85±12．0427．42±14．571．58±1．00t1．954．531．614．52P0．0540．0000．1120．000

檢測指標檢測值BMI/(kg/m2)21．55±4．16FEV1%pred/%44．1±11．62MMRC/分1．832±1．0346MWD/m243．6±48．9BODE指數(shù)評分/分4．913±2．448隨訪1年患者COPD急性加重次數(shù)1．043±1．843

表5 COPD患者的外周血T淋巴細胞亞群與BODE指數(shù)相關(guān)性(n=69)

BODE指數(shù)隨訪1年COPD急性加重次數(shù)r值P值r值P值CD3+T淋巴細胞-0．2000．099-0．2640．028CD4+T淋巴細胞-0．4400．000-0．2960．013CD8+T淋巴細胞0．2070．088-0．0050．967CD4+/CD8+-0．4560．000-0．2450．042

3 討論

T淋巴細胞是機體免疫系統(tǒng)內(nèi)功能最重要的細胞群，機體內(nèi)各個T淋巴細胞亞群相互作用，維持著機體正常的免疫功能。機體通過T淋巴細胞及其亞群和免疫球蛋白、補體C3、補體C4等維持正常的細胞、體液免疫功能狀態(tài)。有研究發(fā)現(xiàn)[2-5]，T細胞表達水平異常、免疫失衡在COPD的發(fā)病中起著重要的作用，COPD患者外周血CD4+、CD8+T淋巴細胞凋亡失衡，造成了COPD患者T淋巴細胞亞群表達異常。

CD3+、CD4+T細胞在COPD的發(fā)病機制中起重要作用，與COPD的發(fā)病和嚴重程度、治療和預(yù)后密切相關(guān)[6-7]。有研究顯示[8-9]，COPD患者氣道內(nèi)CD8+T細胞增多，而外周血CD8+T細胞未見變化，表明CD8+T細胞向氣道內(nèi)募集、激活而釋放多種炎性介質(zhì)進而破壞肺的結(jié)構(gòu)和(或)促進中性粒細胞炎癥反應(yīng)[1]。另有研究顯示，CD8+T細胞為COPD患者肺內(nèi)主要炎癥細胞之一，CD8+T淋巴細胞分泌Th1型細胞因子包括IFN-γ、干擾素介導(dǎo)的蛋白10(IP-10)、IFN-γ誘導(dǎo)產(chǎn)生的單核因子，這些介質(zhì)通過上調(diào)由巨噬細胞生成的基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)和其他免疫效應(yīng)，引起組織損傷，CD8+T淋巴細胞也可通過分泌細胞毒性介質(zhì)(如顆粒酶和穿孔素)，以及Fas的分泌，直接導(dǎo)致細胞凋亡，從而導(dǎo)致肺組織損傷[10-11]。本組資料顯示，COPD患者外周血CD3+、CD4+T淋巴細胞和CD4+/CD8+水平均低于對照組(P<0.01)，CD3+T淋巴細胞降低表明總T細胞減少，主要為CD4+T淋巴細胞的減少所引起，而CD8+T淋巴細胞比例稍增高，但與對照組相比無明顯變化，可能與CD8+T細胞重新分布有關(guān)。由于CD4+T淋巴細胞的減少，導(dǎo)致CD4+/CD8+水平降低，CD4+/CD8+比值異?？蓪?dǎo)致機體免疫紊亂并發(fā)生一系列的病理變化，反映了COPD患者免疫功能低下、失調(diào)即細胞免疫功能受損。吸煙是COPD最重要的環(huán)境發(fā)病因素[1]，香煙的代謝產(chǎn)物二氫二醇環(huán)氧苯并[a]芘(BPDE)可以與DNA的親核位點鳥嘌呤的外環(huán)氨基端共價結(jié)合，而形成DNA加合物(DNA-BPDE)，導(dǎo)致患者T淋巴細胞的凋亡和氣道細胞損傷增加[12]。有研究顯示[3，13]，吸煙COPD患者氣道內(nèi)T淋巴細胞亞群比例失調(diào)，尤其是CD4+/CD8+水平下降最為顯著，表明吸煙主要影響COPD患者氣道局部T淋巴細胞亞群比例，而對外周血T淋巴細胞亞群影響不大。但本組資料顯示，COPD吸煙者CD4+T淋巴細胞、CD4+/CD8+水平較COPD非吸煙者相比均降低明顯(P<0.01)，表明吸煙對COPD患者外周血T淋巴細胞亞群比例存在影響?？赡芘c本組資料COPD吸煙者吸煙指數(shù)高(>400支/年)有關(guān)。

BODE指數(shù)是被廣泛認可的可以評估和有效預(yù)測COPD患者病情嚴重程度、生存質(zhì)量和預(yù)后的重要指標[14]，其分值越高死亡風(fēng)險越大，其各變量分別采用BMI、FEV1%pred、MMRC、6MWD衡量或評價，能可靠、經(jīng)濟、方便地反映COPD對機體的影響，BODE指數(shù)越高，表明患者病情惡化，預(yù)后越差。COPD急性加重可導(dǎo)致患者肺功能迅速下降、生命質(zhì)量惡化、住院和死亡風(fēng)險增高，可以視為遠期不良預(yù)后風(fēng)險的重要評價指標[15]。

本組資料表明，CD4+T淋巴細胞和CD4+/CD8+水平與患者BODE指數(shù)和COPD急性加重次數(shù)呈顯著負相關(guān)(P<0.05)，CD3+、CD4+T淋巴細胞和CD4+/CD8+水平與COPD急性加重次數(shù)呈負相關(guān)(P<0.05)，CD4+T細胞降低，CD4+/CD8+比例的失調(diào)可能影響COPD患者的抗感染的免疫能力，成為COPD并發(fā)感染或致急性加重的重要誘因之一。本研究結(jié)果顯示，通過監(jiān)測CD3+、CD4+T淋巴細胞和CD4+/CD8+水平的變化，可以預(yù)測COPD急性加重的風(fēng)險。吸煙影響COPD患者外周血T淋巴細胞亞群比例，因此，戒煙和調(diào)節(jié)COPD患者的免疫功能可以降低COPD急性加重的風(fēng)險。此外，影響COPD患者的諸多因素如臨床狀態(tài)、吸煙指數(shù)、性別、患病時間、營養(yǎng)狀況等是否影響本研究結(jié)果，則需要進一步觀察。

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Proportion of peripheral blood T-lymphocyte subsets and BODF index for predicting acute exacerbation in COPD patients

LI Qianbing,CHEN Jun,XU Yufeng,WANG Zhisheng,TONG Yaling

Department of Respiratory Medicine,Anqing No.1 People′s Hospital,Anqing 246003,China

Objective：To investigate the proportion of peripheral blood T-lymphocyte subsets and body mass index,airflow obstruction,dyspnea,and exercise capacity index(BODE index) in predicting the acute exacerbation risks in patients with chronic obstructive pulmonary disease(COPD).Methods: Sixty-nine COPD patients(44 cigarette smokers and 25 non-smokers) and 50 healthy volunteers were enrolled,and underwent measurement of peripheral blood T-lymphocyte subsets with flow cytometry.BODE index were measured in COPD patients for assessing the relation of the number of hospitalization due to acute exacerbation with the levels of T-lymphocyte subsets in one-year follow-up period.Results:COPD patients had lower peripheral blood ratio of CD3+,CD4+T-lymphocyte and CD4+/CD8+than healthy volunteers(P<0.01),yet CD8+T-lymphocytes had no obvious change(P>0.05).The ratio of CD4+T-lymphocyte and CD4+/CD8+in peripheral blood in smokers was lower than that of non-smokers(P<0.01),whereas CD3+and CD8+T-lymphocyte had no significant difference with non-smokers(P>0.05).CD4+T-lymphocyte and CD4+/CD8+ratio were negatively correlated with BODE index(r=-0.440,P=0.000;r=-0.456,P=0.000,respectively),yet CD3+and CD8+T-lymphocytes had no significant relation with BODE index(r= -0.200,P=0.099;r= -0.264,P=0.028;r=-0.296,P =0.088,respectively).CD3+,CD4+T-lymphocyte and CD4+/CD8+levels were negatively correlated with the hospitalization frequencies due to acute exacerbations(r=-0.264,P=0.028;r=-0.296,P=0.013;r=-0.245,P=0.042,respectively),and CD8+T-lymphocytes had no obvious relation with the number of COPD exacerbations(r=-0.005,P=0.967).Conclusion:CD4+and CD4+/CD8+T-lymphocyte levels are important roles in the pathogenesis of COPD,indicating that these lymphocytes may be closely correlated with severity and acute exacerbation of COPD,and cigarette smoking could affect the proportion of peripheral blood T-lymphocyte subsets in patients with COPD.

chronic obstructive pulmonary disease;T-lymphocyte subsets;BODE index;acute exacerbation

1002-0217(2017)03-0224-04

2016-10-26

李乾兵(1972-)，男，副主任醫(yī)師，碩士，(電話) 13966958937，(電子信箱)leeqian-b@163.com。

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