陳 吉， 賈明旭

內(nèi)蒙古包鋼醫(yī)院消化內(nèi)科，內(nèi)蒙古 包頭 014010

胃息肉和胃癌組織中HSP70、Apaf-1和ST13的表達(dá)及相關(guān)性

陳 吉， 賈明旭

內(nèi)蒙古包鋼醫(yī)院消化內(nèi)科，內(nèi)蒙古 包頭 014010

目的檢測(cè)正常胃黏膜組織、胃息肉及胃癌組織中HSP70、Apaf-1和ST13的表達(dá)，為胃癌的早期診斷提供一定的臨床依據(jù)。方法收集2014年12月-2015年9月于內(nèi)蒙古包鋼醫(yī)院消化內(nèi)科行胃鏡檢查患者的胃黏膜組織，分為正常胃黏膜組、增生性息肉組、腺瘤性息肉組及腺癌組，共72例。運(yùn)用蛋白免疫印跡法(Western blotting)檢測(cè)HSP70、Apaf-1和ST13蛋白表達(dá)水平。結(jié)果HSP70在正常胃黏膜、增生性息肉、腺瘤性息肉、腺癌組織中的平均灰度值(IOD)分別為0.33±0.05、0.46±0.05、0.77±0.07、0.93±0.04，組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Apaf-1的IOD分別為0.74±0.03、0.65±0.03、0.49±0.06、0.28±0.05，正常胃黏膜組與增生性息肉組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。其他組兩兩比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。ST13的IOD分別為0.85±0.11、0.64±0.07、0.31±0.06、0.14±0.01，組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。腺瘤性息肉組HSP70與Apaf-1呈負(fù)相關(guān)(r=-0.817，P<0.05)，HSP70與ST13呈負(fù)相關(guān)(r=-0.818，P<0.05)，Apaf-1與ST13呈正相關(guān)(r=0.830，P<0.05)；腺癌組HSP70與Apaf-1呈負(fù)相關(guān)(r=-0.816，P<0.05)，HSP70與ST13呈負(fù)相關(guān)(r=-0.969，P<0.05)，Apaf-1與ST13呈正相關(guān)(r=0.865，P<0.05)。結(jié)論HSP70在胃息肉癌變中表達(dá)遞增，可用于胃癌早期監(jiān)測(cè)；Apaf-1及ST13在癌變中表達(dá)遞減，監(jiān)測(cè)Apaf-1變化及ST13在胃癌中的特異性降低可作為胃癌診斷指標(biāo)深入研究；在胃息肉癌變中，HSP70與Apaf-1、HSP70與ST13表達(dá)均呈負(fù)相關(guān)，Apaf-1與ST13呈正相關(guān)，聯(lián)合檢測(cè)更有助于胃癌的早期診斷。

HSP70；Apaf-1；ST13；胃息肉；胃癌

胃癌是全球范圍內(nèi)最常見(jiàn)的癌癥之一，根據(jù)世界衛(wèi)生組織國(guó)際癌癥研究中心(IARC)公布的最新數(shù)據(jù)顯示，2012年世界范圍內(nèi)胃癌死亡病例約72.3萬(wàn)，居惡性腫瘤病死率第三位。我國(guó)胃癌死亡病例約32.5萬(wàn)，占世界胃癌病死率的44.9%[1]。早期胃癌治療后的5年生存率超過(guò)90%[2]。胃鏡操作簡(jiǎn)便、損傷小，是診斷胃部疾病的金標(biāo)準(zhǔn)。目前胃息肉是已確定的胃癌的癌前狀態(tài)，在人群中發(fā)病率為2%～4%[3]，根據(jù)不同的病理組織學(xué)將其分為炎性息肉、增生性息肉、腺瘤性息肉、胃底腺息肉等，其中炎性息肉又稱假性息肉，約占80%，癌變率低；增生性息肉的直徑>1 cm時(shí)存在癌變的可能，約占1%[4]；腺瘤性息肉檢出率較低但癌變率較高，為6%～47%[5]，且易復(fù)發(fā)，對(duì)術(shù)后患者進(jìn)行隨訪發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)率可達(dá)2.6%，且有1.3%的患者進(jìn)展為胃癌。目前，內(nèi)鏡下切除是治療胃息肉的首選方法，也是預(yù)防其癌變的直接方法。細(xì)胞凋亡狀態(tài)及其調(diào)控基因的異?？蓞⑴c腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。熱休克蛋白70(heat-shock protein 70，HSP70)的表達(dá)受細(xì)胞周期的調(diào)控，腫瘤細(xì)胞中突變或異常蛋白質(zhì)的存在刺激HSP70的合成，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖或抑制細(xì)胞凋亡使其呈現(xiàn)持續(xù)的高誘導(dǎo)表達(dá)，是胃癌形成、發(fā)展的重要影響因素之一。凋亡蛋白酶活化因子-1(apoptotic protease activating factor-1，Apaf-1)被認(rèn)為是凋亡體的真正核心，在線粒體凋亡途徑中發(fā)揮核心作用。人體內(nèi)一系列信號(hào)傳導(dǎo)級(jí)聯(lián)反應(yīng)均以Apaf-1為靶目標(biāo)調(diào)節(jié)凋亡體，是一種重要的腫瘤抑制基因。腫瘤抑制基因13(suppression of tumorigenecity 13，ST13)由國(guó)際命名委員會(huì)命名，對(duì)ST13的研究也多集中在分子結(jié)構(gòu)及與分子伴侶的相互作用，其在蛋白質(zhì)調(diào)節(jié)方面扮演著非常重要的角色，可能與腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移有關(guān)。本研究旨在測(cè)定胃息肉及胃癌中HSP70蛋白、Apaf-1蛋白和ST13蛋白的表達(dá)水平，探索胃息肉癌變過(guò)程中的潛在影響因素，為胃癌的早期診斷及治療研究提供臨床依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料收集2014年12月-2015年9月于內(nèi)蒙古包鋼醫(yī)院消化內(nèi)科就診并行胃鏡檢查患者的胃黏膜組織及胃息肉組織，經(jīng)內(nèi)窺鏡和病理結(jié)合確診，正常胃黏膜組、增生性息肉組、腺瘤性息肉組及胃癌組共72例。組織標(biāo)本來(lái)源還應(yīng)排除合并下列情況者：C14呼氣試驗(yàn)提示幽門螺桿菌陽(yáng)性者；既往患家族性腺瘤性息肉病史；既往患惡性腫瘤或合并其他器官系統(tǒng)惡性腫瘤；患有其他內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病；長(zhǎng)期及4周內(nèi)服用過(guò)NSAIDs、質(zhì)子泵抑制劑(PPI)或糖皮質(zhì)激素等；合并其他系統(tǒng)慢性器官功能衰竭。息肉樣本選取直徑>2 cm者。

1.2 分組試驗(yàn)分為4組，A組：正常胃黏膜組20例，男12例，女8例，年齡27～65歲，均以腹脹、中上腹不適為主要癥狀就診，行胃鏡檢查未見(jiàn)異常；B組：增生性息肉組18例，男12例，女6例，年齡38～68歲，經(jīng)過(guò)病理組織學(xué)證實(shí)為增生性息肉；C組：腺瘤性息肉組14例，男6例，女8例，年齡46～63歲，經(jīng)過(guò)內(nèi)鏡形態(tài)學(xué)及病理組織學(xué)證實(shí)為腺瘤性息肉；D組：胃腺癌組20例，男14例，女6例，年齡50～95歲，消化內(nèi)科內(nèi)窺鏡中心行胃鏡活檢胃腺癌標(biāo)本，經(jīng)過(guò)內(nèi)鏡形態(tài)學(xué)及病理組織學(xué)證實(shí)為胃腺癌。兔抗人HSP70抗體(美國(guó)Abcam公司)、ST13抗體(美國(guó)Abcam公司)、Apaf-1抗體(美國(guó)Abcam公司)、β-actin抗體(碧云天生物技術(shù)研究所)、二抗(Santa cruz公司)、蛋白Marker(北京全式金生物技術(shù)有限公司)。

1.3 方法

1.3.1 SDS-PAGE濃縮膠與分離膠(為1.5 mm厚雙面膠的劑量)的配制：清洗裝置并安裝后，根據(jù)待檢測(cè)蛋白分子量大小選取8%的分離膠和5%的濃縮膠，配置好凝膠，待凝固后用保鮮膜包好，4 ℃放置過(guò)夜。

1.3.2 組織中總蛋白的提取：將剪碎的組織在液氮中研磨粉碎后放入離心管(EP管)中，按每20 mg組織加入150～200 μl裂解混合液(RIPA∶PMSF=100∶1)，在冰盒上充分裂解，4 ℃離心，14 000 r/min，離心40 min，取上清液進(jìn)行蛋白濃度測(cè)量，吸取150 μl的樣本溶液加入50 μl的4×上樣緩沖液，煮5 min，冷卻后進(jìn)行上樣。

1.3.3 電泳：安裝裝置，加入電泳緩沖液(1×Running buffer)，每孔上樣量20 μl，Marker上樣量為5 μl，先設(shè)置電壓50 V，30 min，待溴酚藍(lán)將要進(jìn)入分離膠，將電壓換為100 V，90 min，溴酚藍(lán)前沿將要泳出膠外立即關(guān)閉電源。

1.3.4 轉(zhuǎn)膜：用超純水沖洗凝膠，然后對(duì)比Maker切下含有目的條帶的凝膠，將凝膠放入轉(zhuǎn)膜緩沖液(1×Transfer buffer)中進(jìn)行浸泡平衡，約30 min，處理PVDF膜，浸泡海綿，按轉(zhuǎn)移裝置的要求以下列順序進(jìn)行組裝：負(fù)極-海綿墊-濾紙-凝膠-PVDF膜-濾紙-海綿墊-正極，調(diào)節(jié)電壓為26 V，30 min。

1.3.5 封閉：取出PVDF膜，將其轉(zhuǎn)移到盛有超純水的平皿中洗5 min，放入封閉緩沖液中37 ℃水浴慢搖2 h。

1.3.6 一抗孵育：PVDF膜漂洗5 min，使用2%脫脂奶粉按照1∶5 000比例稀釋HSP70抗體，1∶2 000比例稀釋Apaf-1抗體，1∶2 500比例稀釋ST13抗體，將稀釋好的一抗與PVDF膜充分接觸，4 ℃慢搖，過(guò)夜。

1.3.7 二抗孵育：PVDF膜用TBST buffer洗5 min×3次，5%脫脂奶粉稀釋二抗，稀釋比例為1∶5 000，室溫孵育2 h。

1.3.8 ECL顯色：PVDF膜用TBST buffer洗5 min×3次，避光混合ECL顯色液的A液和B液(1∶1)，將混合液滴在膜上，室溫放置3 min，暗室中壓片，待條帶顯出，立即用自來(lái)水洗滌、定影、撈片、晾干、掃描。

1.3.9 結(jié)果判斷：掃描膠片后，采用Image J軟件對(duì)蛋白印跡的灰度值(IOD)進(jìn)行定量分析，以目的蛋白灰度值/內(nèi)參蛋白灰度值用來(lái)反映蛋白的相對(duì)表達(dá)水平。

2 結(jié)果

2.1 HSP70蛋白在4組中的表達(dá)Western blotting結(jié)果如圖1所示。HSP70蛋白在A組、B組、C組、D組組織中蛋白灰度值/內(nèi)參蛋白灰度值(IOD值)的平均值分別為0.33±0.05、0.46±0.05、0.77±0.07、0.93±0.04，表達(dá)呈逐漸遞增趨勢(shì)。4組兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。

圖1 Western blotting法檢測(cè)HSP70蛋白在4組組織中的表達(dá)

Fig 1 The level of HSP70 protein detected by Western blotting

2.2 Apaf-1蛋白在4組中的表達(dá)Western blotting結(jié)果如圖2所示。Apaf-1蛋白在A組、B組、C組及D組中的平均IOD值分別為0.74±0.03、0.65±0.03、0.49±0.06、0.28±0.05，表達(dá)呈逐漸遞減趨勢(shì)。A組與B組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。其他組兩兩比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

圖2 Western blotting法檢測(cè)Apaf-1蛋白在4組組織中的表達(dá)

Fig 2 The level of Apaf-1 protein detected by Western blotting

2.3 ST13蛋白在4組中的表達(dá)Western blotting結(jié)果如圖3所示。ST13蛋白在A組、B組、C組及D組中的平均IOD值分別為0.85±0.11、0.64±0.07、0.31±0.06、0.14±0.01，表達(dá)呈逐漸遞減趨勢(shì)。4組兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。

圖3 Western blotting法檢測(cè)ST13蛋白在4組組織中的表達(dá)

Fig 3 The level of ST13 protein detected by Western blotting

2.4 HSP70與Apaf-1之間的相關(guān)性采用Pearson方法檢驗(yàn)腺瘤性息肉組、胃腺癌組中HSP70與Apaf-1的相關(guān)性。胃腺瘤性息肉組中，HSP70與Apaf-1的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.817，P<0.05)；胃腺癌組中，HSP70與Apaf-1的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.816，P<0.05)。

2.5 HSP70與ST13之間的相關(guān)性采用Pearson方法檢驗(yàn)腺瘤性息肉組、胃腺癌組中HSP70與ST13的相關(guān)性。胃腺瘤性息肉組中，HSP70與ST13的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.818，P<0.05)；胃腺癌組中，HSP70與ST13的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.969，P<0.05)。

2.6 Apaf-1與ST13之間的相關(guān)性采用Pearson方法檢驗(yàn)腺瘤性息肉組、胃腺癌組中Apaf-1與ST13的相關(guān)性。胃腺瘤性息肉組中，Apaf-1與ST13的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.830，P<0.05)；胃腺癌組中，Apaf-1與ST13的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.865，P<0.05)。

3 討論

隨著消化內(nèi)鏡技術(shù)的發(fā)展與提高，對(duì)胃息肉的檢出率逐漸增高，胃息肉作為胃癌癌前病變的一種形式也得到更多的關(guān)注。本研究主要以胃腺瘤與胃癌中相關(guān)蛋白的表達(dá)為切入點(diǎn)，探討HSP70、Apaf-1和ST13蛋白表達(dá)的相關(guān)性。

HSP是Ritossa等[6]通過(guò)“熱休克反應(yīng)”發(fā)現(xiàn)的一類蛋白，在不改變靶蛋白結(jié)構(gòu)的情況下陪伴蛋白分子在細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸，并參與靶蛋白的折疊、伸展及多聚復(fù)合體的組裝，被稱為“分子伴侶”。HSP70是進(jìn)化上高度保守的一類蛋白，分子量約70 KD，蛋白可分為3個(gè)結(jié)構(gòu)域：水解ATP的ATP結(jié)合域(ATP binding domain，ATP-BD)在N端、可結(jié)合新生肽段及受損蛋白的肽結(jié)合部位(peptide binding domain，PBD)及影響HSP70 mRNA翻譯數(shù)量的具有高度保守末端順序的C端。其可參與細(xì)胞周期，促進(jìn)細(xì)胞增殖，參與DNA損傷與修復(fù)、抗原的加工與提成，可增加細(xì)胞對(duì)自身免疫因子攻擊的耐受性。腫瘤是機(jī)體內(nèi)具有無(wú)限增殖及生長(zhǎng)不協(xié)調(diào)的異常增殖群，由于其基因穩(wěn)定性下降，導(dǎo)致錯(cuò)誤折疊蛋白的增多，使得作為“分子伴侶”HSP70需求量增多，而HSP70具有參與細(xì)胞周期及抗細(xì)胞凋亡的生物學(xué)功能，從而進(jìn)一步助長(zhǎng)了腫瘤細(xì)胞的無(wú)限增殖。本研究發(fā)現(xiàn)，HSP70蛋白在正常胃黏膜、胃增生性息肉、胃腺瘤性息肉及胃癌組織中的蛋白表達(dá)呈遞增趨勢(shì)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與目前國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究結(jié)果相符[7-8]。胃腺瘤性息肉屬于上皮內(nèi)瘤變，其蛋白質(zhì)的合成增加，則需要更多的“分子伴侶”參與，這也進(jìn)一步證實(shí)腺瘤性息肉是癌前病變的一種，需及時(shí)采取治療措施。

Apaf-1是核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域家族(NOD)成員之一，是一種抑癌基因，分子質(zhì)量約為130 KD，表達(dá)于細(xì)胞質(zhì)中，主要有3個(gè)結(jié)構(gòu)域：與Caspase9形成凋亡復(fù)合體的半胱氨酸蛋白酶寡集域(CARD)為N端，中間部分為核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域(NOD)及可與細(xì)胞色素c(cytochromec，Cyt c)結(jié)合得12-13 WD40重復(fù)結(jié)構(gòu)域的C端[9]。其分布于人類胚胎、人體多種組織器官及外周血白細(xì)胞。Apaf-1可影響胚胎發(fā)育，并與化療耐藥性及預(yù)后相關(guān)，但其最重要的生物功能是參與線粒體凋亡途徑。當(dāng)機(jī)體受到應(yīng)激及DNA損傷等刺激后，線粒體膜間腔的Cyt c和線粒體源性Caspase的第二激活因子(SMAC)釋放進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)，Cyt c可與Apaf-1 C端結(jié)合形成Apaf-1/Cyt c復(fù)合物，提高Apaf-1與ATP/dATP結(jié)合力，形成Apaf-1寡聚化七聚體[10]，暴露CARD、激活Caspase9、活化Caspase3、激活下游成分誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[11-12]。腫瘤的發(fā)生發(fā)展與細(xì)胞凋亡缺陷相關(guān)，Apaf-1線粒體凋亡通路中任何一環(huán)節(jié)受到抑制都會(huì)使得細(xì)胞凋亡無(wú)法發(fā)生，如HSP70可直接或間接阻止Apaf-1與Cyt c及proCaspase9結(jié)合。Tanase等[13]提出，Apaf-1可與其他重要的凋亡因子(如P53)一樣成為良好的腫瘤標(biāo)志物。本研究發(fā)現(xiàn)，Apaf-1蛋白在正常胃黏膜、胃增生性息肉、胃腺瘤性息肉及胃癌組織中的蛋白表達(dá)呈遞減趨勢(shì)，提示Apaf-1蛋白參與的線粒體凋亡途徑可能受到一定程度的抑制，使得癌細(xì)胞不能凋亡。這與國(guó)內(nèi)外研究相似[14]。臨床上也通過(guò)使Apaf-1表達(dá)活性增高的方法來(lái)達(dá)到抑制腫瘤細(xì)胞增長(zhǎng)的目的[15]。以Apaf-1作為腫瘤治療的靶點(diǎn)目標(biāo)，不但成為臨床腫瘤治療的新方向，也為抗腫瘤藥物的研制提供了新思路。

ST13被認(rèn)為是HSP70的分子共伴侶，分子質(zhì)量約為130 KD，主要有3個(gè)結(jié)構(gòu)域：參與分子同源聚合的N端、與HSP70的ATP酶區(qū)域的結(jié)合的三十四肽重復(fù)單位(Tetratricopeptide repeats，TPR)功能區(qū)及可能與HSP70的多肽結(jié)合區(qū)相互作用的GGMP重復(fù)序列和Stil區(qū)。ST13的TPR功能區(qū)與HSP70的ATP酶結(jié)構(gòu)域結(jié)合后可穩(wěn)定ADP構(gòu)象，增強(qiáng)分子伴侶與多肽底物的親和力，促進(jìn)HSP70發(fā)揮作用，保證蛋白質(zhì)的加工過(guò)程。本研究也發(fā)現(xiàn)，ST13蛋白在正常胃黏膜、胃增生性息肉、胃腺瘤性息肉及胃癌組織中的蛋白表達(dá)呈遞減趨勢(shì)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，證實(shí)了ST13在胃癌及胃息肉組較正常胃黏膜組表達(dá)降低，具體機(jī)制不明確，可能與ST13在胃癌組織中參與其他凋亡途徑致消耗過(guò)多或表達(dá)受到抑制相關(guān)，也可能是自身的表達(dá)缺陷，其生物學(xué)功能仍有待被發(fā)現(xiàn)和完善。

本研究發(fā)現(xiàn)，胃腺瘤性息肉組及胃腺癌組HSP70與Apaf-1的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。“分子伴侶”HSP70不但在蛋白質(zhì)加工方面為細(xì)胞無(wú)限增殖提供了條件，也可與Apaf-1的N端的CARD結(jié)構(gòu)域直接結(jié)合，阻止Caspase9與之結(jié)合，阻止了凋亡復(fù)合體Apaf-1/Caspase9的形成，無(wú)法激活Caspase3。此外，完整表達(dá)的HSP70可抑制從線粒體中釋放Cyt c的過(guò)程，故HSP70在某種程度上也阻止Apaf-1/Cyt c復(fù)合體的形成。由此可見(jiàn)，HSP70能在Cyt c的釋放和Caspase起始活化兩個(gè)水平發(fā)揮作用，阻止了Apaf-1線粒體凋亡途徑的啟動(dòng)激活，影響凋亡通路及Apaf-1的表達(dá)，阻止細(xì)胞凋亡。HSP70與ST13在胃腺瘤性息肉組及胃腺癌組的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，提示HSP70與ST13可能在腫瘤形成的過(guò)程中存在潛在相互關(guān)系。HSP70的過(guò)度表達(dá)是人體各組織惡性腫瘤形成的前提條件，是胃癌發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中的重要影響因子之一。ST13 TPR結(jié)構(gòu)域與HSP70結(jié)合可穩(wěn)定HSP70的ADP構(gòu)象，使HSP70更好地發(fā)揮功能。ST13作為分子共伴侶對(duì)HSP70起著穩(wěn)定和正調(diào)控的作用。但本研究結(jié)果觀察到胃腺癌組中HSP70與ST13呈負(fù)相關(guān)，與ST13分子共伴侶的生物學(xué)功能不相符，而此結(jié)果與我們之前研究[16]結(jié)果相同。Wang等[17]在研究結(jié)腸癌時(shí)發(fā)現(xiàn)ST13在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)要顯著低于癌旁正常黏膜組織，說(shuō)明在癌變后ST13表達(dá)缺陷。以上研究結(jié)果可能提示，在胃癌組織中HSP70可能對(duì)其分子共伴侶ST13產(chǎn)生直接或間接下調(diào)作用，ST13也可能與其他癌基因或抑癌基因在胃癌組織及癌前病變中產(chǎn)生拮抗作用。Apaf-1與ST13在胃腺瘤性息肉組和胃腺癌組表達(dá)呈正相關(guān)。ST13分子具介導(dǎo)蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用的重要分子元件的TPR功能區(qū)，故ST13可與多種蛋白質(zhì)結(jié)合，其中Apaf-1與HSP70的ATP序列有局部同源性，則ST13可能與Apaf-1的ATP結(jié)合區(qū)直接作用，由此推測(cè)其可能參與Apaf-1控制的細(xì)胞凋亡相關(guān)。在胃癌組織中，Apaf-1表達(dá)降低，繼而可能下調(diào)ST13的表達(dá)。目前對(duì)ST13在腫瘤中的表達(dá)差異研究剛剛起步，還有許多分子生物學(xué)功能尚未闡明，仍需進(jìn)一步探究二者的相互調(diào)節(jié)機(jī)制。

總之，HSP70、Apaf-1和ST13在胃息肉-胃癌演變過(guò)程中有明顯的異常表達(dá)，且彼此之間具有相關(guān)性。對(duì)HSP70、Apaf-1和ST13進(jìn)行監(jiān)測(cè)將有助于篩選出胃癌高?；颊?，尤其是ST13蛋白在胃癌中低表達(dá)的特點(diǎn)，更有助于潛在胃癌的診斷。本課題檢測(cè)出3種因子在人體組織中的表達(dá)及表達(dá)趨勢(shì)，與眾多體外細(xì)胞培養(yǎng)及動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果相似，利于探索基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究與臨床人體組織研究的異同，也可成為日后研究靶向治療的潛在靶分子。

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(責(zé)任編輯：馬 軍)

Expressions and correlation of HSP70, Apaf-1 and ST13 in gastric polyps and gastric carcinoma

CHEN Ji, JIA Mingxu

Department of Gastroenterology, Inner Mongolia Medical Baogang Hospital, Baotou 014010, China

Objective To explore the expressions and relationship of HSP70, Apaf-1 and ST13 in the normal gastric mucosa, gastric polyps and gastric cancer, to provide research basis and a new way for gastric cancer in the early diagnosis and clinical treatment. Methods Gastric mucosa samples of 72 patients who suffered from surgery in the Inner Mongolia Medical Baogang Hospital by gastroscopy from Dec. 2014 to Sep. 2015 were selected, and divided into normal gastric mucosa, gastric polyps, gastric adenomatous polyps and gastric carcinoma. The levels of HSP70, Apaf-1 and ST13 proteins were detected by the Western blotting. Results The average IOD of HSP70 expressions were 0.33±0.05, 0.46±0.05, 0.77±0.07, 0.93±0.04 in normal gastric mucosa group, gastric polyps group, adenomatous polyps group, gastric carcinoma group, the difference was statistically significant among four groups (P<0.05). The average IOD of Apaf-1 expressions were 0.74±0.03, 0.65±0.03, 0.49±0.06, 0.28±0.05, the difference was statistically significant among four groups except for normal gastric mucosa and gastric polyps (P<0.05). The average IOD of ST13 expressions were 0.85±0.11, 0.64±0.07, 0.31±0.06, 0.14±0.01, the difference was statistically significant among four groups (P<0.05). The expressions of HSP70 and Apaf-1 proteins were negatively correlated in the adenomatous polyps (r=-0.817,P<0.05) and gastric carcinoma (r=-0.816,P<0.05). The expressions of HSP70 and ST13 proteins were negatively correlated in the adenomatous polyps (r=-0.818,P<0.05) and gastric carcinoma (r=-0.969,P<0.05). The expressions of Apaf-1 and ST13 proteins were positively correlated in the adenomatous polyps (r=0.830,P<0.05) and gastric carcinoma (r=0.865,P<0.05). Conclusion The expression of HSP70 is increased progressively from normal gastric mucosa to gastric polyps to gastric carcinoma suggests that high expression of HSP70 in gastric polyps can be regarded as one of the indicators of early diagnosis of gastric cancer. The expressions of Apaf-1 and ST13 are decreased progressively from normal gastric mucosa to gastric polyps to gastric carcinoma suggest that Apaf-1 and ST13 can be used as diagnostic indicators for gastric cancer. The expressions of HSP70 and Apaf-1, HSP70 and ST13 proteins are negatively correlated, Apaf-1 and ST13 protein are positively correlation in the adenomatous polyps and gastric carcinoma. The detection of HSP70, Apaf-1 and ST13 may be helpful in early diagnosis of gastric cancer.

HSP70; Apaf-1; ST13; Gastric polyps; Gastric cancer

10.3969/j.issn.1006-5709.2017.03.004

陳吉，主任醫(yī)師，博士，研究方向：消化系統(tǒng)疾病診治。E-mail:chenji2847@163.com

賈明旭，碩士研究生，醫(yī)師，研究方向：消化系統(tǒng)疾病診治。E-mail:jiamx2005@163.com

R735.2

A 文章編號(hào)：1006-5709(2017)03-0256-05

2016-06-20