王書(shū)學(xué)

高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)器法測(cè)定琥乙紅霉素片中琥乙紅霉素含量的方法

王書(shū)學(xué)

目的探究高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)器法測(cè)定琥乙紅霉素片中琥乙紅霉素含量的應(yīng)用效果。方法采用高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)器法對(duì)琥乙紅霉素片中琥乙紅霉素含量進(jìn)行測(cè)量, 對(duì)該種方法的應(yīng)用效果進(jìn)行分析。結(jié)果在所設(shè)定的色譜條件下進(jìn)行檢測(cè), 記錄下峰面積。結(jié)果發(fā)現(xiàn)琥乙紅霉素的面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.93%(n=6), 表明試驗(yàn)中設(shè)備儀器的精密度較好。精確獲取適量的供試品溶液, 在室溫下放置。按照設(shè)定的色譜條件在24 h內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)測(cè)定, 對(duì)峰面積進(jìn)行記錄。結(jié)果發(fā)現(xiàn)琥乙紅霉素的面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差1.07%(n=6), 表明試品溶液穩(wěn)定性較好。準(zhǔn)確稱(chēng)取供試品溶液多份, 在設(shè)定的色譜條件下測(cè)定, 對(duì)峰面積進(jìn)行記錄。結(jié)果發(fā)現(xiàn)琥乙紅霉素的面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差0.88%(n=6), 平均含量為98.65%。表明重復(fù)性較好。結(jié)論采用高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)器法對(duì)琥乙紅霉素片中琥乙紅霉素含量進(jìn)行測(cè)定其精確度、穩(wěn)定性以及靈敏度均較好。

高效液相色譜法；蒸發(fā)光散射檢測(cè)器法；琥乙紅霉素

琥乙紅霉素是一種抗菌效果較好的大環(huán)內(nèi)脂類(lèi)藥物, 該藥物被普遍的應(yīng)用于臨床抗菌治療中。琥乙紅霉素片的藥效在很大的程度上取決于琥乙紅霉素的含量, 因此準(zhǔn)確的測(cè)量其含量能夠?qū)υ撍幬锏呐R床應(yīng)用效果進(jìn)行評(píng)定。過(guò)去在對(duì)琥乙紅霉素片中琥乙紅霉素的含量進(jìn)行測(cè)定方時(shí)通常采用微生物檢定法, 該種方法不僅操作較為復(fù)雜, 而且容易受到各種因素的影響而導(dǎo)致測(cè)量結(jié)果精確度較小。在對(duì)琥乙紅霉素片中琥乙紅霉素含量進(jìn)行測(cè)定時(shí)需要選用較為高效且精準(zhǔn)度較高的檢測(cè)方法, 以便獲得更為準(zhǔn)確的檢測(cè)數(shù)據(jù)。也有報(bào)道中指出選用高效液相色譜法對(duì)其含量進(jìn)行測(cè)定, 但是在檢測(cè)時(shí)往往均是采用紫外檢測(cè)器［1］。由于紫外檢測(cè)器在進(jìn)行測(cè)量時(shí)僅僅是在紫外末端才能夠吸收琥乙紅霉素, 因此造成檢測(cè)結(jié)果難以提高。在本文的研究中就在蒸發(fā)光散射檢測(cè)器下采用高效液相色譜法對(duì)其含量進(jìn)行檢測(cè), 取得了較好的效果?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 儀器與藥品

研究中所選用的儀器為HPLC儀由e2695泵、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器以及色譜工作站組成；GHB-4000型數(shù)控超聲波清洗器(上海工洲閥門(mén)有限公司, 功率300 W, 頻率：25 kW)；超精準(zhǔn)電子天平［捷久計(jì)量衡器(上海)有限公司］。所使用的藥品為琥乙紅霉素片(西安利君制藥股份有限公司, 國(guó)藥準(zhǔn)字H61022359, 規(guī)格：0.125 g×24片)。除乙腈為色譜純外,其他均為分析純。而在研究中所使用的水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2. 1 在本次研究中所選用的色譜條件具體見(jiàn)表1。

表1 色譜條件

2. 2 溶液的制備

2. 2. 1 對(duì)照品溶液 將精準(zhǔn)測(cè)量的琥乙紅霉素對(duì)照品放入到量瓶中, 向量瓶中加入適量的乙腈進(jìn)行定容。最終所獲取的溶液要保證每ml溶液中含有1.216 mg的琥乙紅霉素, 將該溶液靜置以備使用。將上述所獲取的溶液精確量取4 ml,將其置入到10 ml的量瓶中［2］。再次加入乙腈進(jìn)行定容處理,最終所獲取的溶液要保證每1毫升溶液中含有0.486 mg的琥乙紅霉素, 該溶液作為對(duì)照品溶液。

2. 2. 2 供試品溶液 將琥乙紅霉素片精確稱(chēng)取, 將其研磨均勻后放入到100 ml量瓶中。在量瓶中加入乙腈溶液進(jìn)行使其充分溶解, 對(duì)其進(jìn)行超聲溶解。靜置冷卻后再次加入乙腈進(jìn)行定容, 將其搖勻?yàn)V過(guò)后取其濾液［3］。

2. 2. 3 陰性對(duì)照溶液 按照供試品的配置方法選用不含琥乙紅霉素的輔料制備陰性對(duì)照溶液［4］。

在上述色譜條件下對(duì)對(duì)照品溶液、供試品溶液以及陰性對(duì)照溶液進(jìn)行檢測(cè), 檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)圖1。

圖1 檢測(cè)結(jié)果

2. 3 精密度試驗(yàn)在所設(shè)定的色譜條件下進(jìn)行檢測(cè), 記錄下峰面積。結(jié)果發(fā)現(xiàn)琥乙紅霉素的面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.93%(n=6), 表明試驗(yàn)中設(shè)備儀器的精密度較好。

2. 4 穩(wěn)定性試驗(yàn)精確獲取適量的供試品溶液, 在室溫下放置。按照設(shè)定的色譜條件在24 h內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)測(cè)定, 對(duì)峰面積進(jìn)行記錄。結(jié)果發(fā)現(xiàn)琥乙紅霉素的面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差1.07%(n=6), 表明試品溶液穩(wěn)定性較好。

2. 5 重復(fù)性試驗(yàn)準(zhǔn)確稱(chēng)取供試品溶液多份, 在設(shè)定的色譜條件下測(cè)定, 對(duì)峰面積進(jìn)行記錄。結(jié)果發(fā)現(xiàn)琥乙紅霉素的面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差0.88%(n=6), 平均含量為98.65%。表明重復(fù)性較好。

3 討論

目前對(duì)琥乙紅霉素含量的測(cè)定有多種方法, 比如紫外分光光度法、微生物檢測(cè)法、電化學(xué)法等。以上檢測(cè)方法雖然在實(shí)際檢測(cè)中應(yīng)用較為廣泛, 但是檢測(cè)的靈敏度較低且操作較為復(fù)雜［5］。及時(shí)探究出高效、簡(jiǎn)單、精確度更高的檢測(cè)方法至關(guān)重要, 有報(bào)道曾指出高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)器法測(cè)定琥乙紅霉素片中琥乙紅霉素含量［6］。在進(jìn)行試驗(yàn)的過(guò)程中開(kāi)始先使用流動(dòng)相對(duì)對(duì)照組好樣品進(jìn)行溶解, 但是試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)采用該種方法穩(wěn)定性不理想［7］。通過(guò)對(duì)相關(guān)文獻(xiàn)資料的研究和以往經(jīng)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)在進(jìn)行溶解時(shí)選用乙腈作為溶解劑,其穩(wěn)定性相對(duì)較好［8］。在本文的研究中就采用高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)器法測(cè)定琥乙紅霉素片中琥乙紅霉素含量,研究發(fā)現(xiàn)采用該種方法精密度、穩(wěn)定性以及重復(fù)試驗(yàn)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均＜2.0%。

綜上所述, 采用高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)器法對(duì)琥乙紅霉素片中琥乙紅霉素含量進(jìn)行測(cè)定方法簡(jiǎn)單, 精確度、穩(wěn)定性、以及靈敏度均較好, 值得推廣使用。

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10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2017.08.100

2017-03-14］

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