蔡青++鄧金強

[摘要] 目的 研究嬰幼兒喘息性疾病呼出氣一氧化氮（FeNO）水平及其與特異性免疫球蛋白E（sIgE）、IgE的相關(guān)性。 方法 選擇2012年5月～2015年6月于東莞康華醫(yī)院就診的65例嬰幼兒喘息患兒作為觀察組，按照1∶1匹配原則選擇同期體檢的健康兒童65例作為對照組，測定FeNO水平，采集血清測定總IgE（tIgE）和塵螨、蛋清、牛奶sIgE以及白細胞介素-4（IL-4）、白細胞介素-10（IL-10）、干擾素-γ（IFN-γ）含量。 結(jié)果 觀察組FeNO水平均顯著高于對照組（P < 0.01），血清tIgE以及塵螨、蛋清、牛奶sIgE含量均顯著高于對照組（P < 0.01），血清IL-4、IL-10、IFN-γ含量均明顯高于對照組（P < 0.01）。FeNO水平與血清tIgE和塵螨、蛋清、牛奶sIgE及IL-4、IL-10、IFN-γ含量呈正相關(guān)（r = 0.772、0.602、0.685、0.591、0.714、0.693、0.753，P < 0.05）。 結(jié)論 嬰幼兒喘息性疾病的FeNO顯著升高，接觸變應(yīng)原所引起的sIgE、IgE升高是造成FeNO升高的相關(guān)因素，而FeNO的升高又會促進炎癥介質(zhì)的分泌、加重氣道炎性反應(yīng)。

[關(guān)鍵詞] 嬰幼兒喘息；呼出氣一氧化氮；特異性免疫球蛋白E；炎癥介質(zhì)

[中圖分類號]R725 [文獻標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-7210（2017）04（c）-0097-04

[Abstract] Objective To study correlation of exhaled nitric oxide （FeNO） detection and sIgE， IgE in infants with asthmatic disease. Methods 65 infantile with asthmatic disease in Dongguan Kanghua Hospital during May 2012 to June 2015 were enrolled as observation group， 65 cases healthy children received physical examination during the same period were enrolled as control group. FeNO level was determined. Serum was collected and total IgE and dust mite， egg white， milk sIgE and IL-4， IL-10， IFN-γ contents were determined. Results FeNO level of observation group was significantly higher than that of control group （P < 0.01）. Serum total IgE content and dust mites， egg white， milk sIgE contents in observation group were significantly higher than those in control group （P < 0.01）. Serum IL-4， IL-10， IFN-γ contents in observation group were significantly higher than those in control group （P < 0.01）. FeNO level was positively correlated with serum total IgE content and dust mites， egg white， milk sIgE contents， serum IL-4， IL-10， IFN-γ contents （r = 0.772， 0.602， 0.685， 0.591， 0.714， 0.693， 0.753， P < 0.05）. Conclusion FeNO of infants with asthmatic disease is significantly higher. Increase of sIgE， IgE contents caused by allergens is related factors with increase of FeNO level， and the increase of FeNO will promote the secretion of inflammatory mediators and aggravate airway inflammation.

[Key words] Infant wheezing； Exhaled nitric oxide； Specific IgE； Inflammatory mediators

嬰幼兒喘息性疾病是一類異質(zhì)性疾病，誘發(fā)因素眾多，其中支氣管哮喘是造成嬰幼兒喘息重要的原因之一。IgE是機體接觸變應(yīng)原后由B淋巴細胞分泌的一類免疫球蛋白，主要介導(dǎo)Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)，在嬰幼兒喘息性疾病的發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮重要作用[1]。近年來關(guān)于支氣管哮喘的研究發(fā)現(xiàn)，內(nèi)源性一氧化氮（NO）的產(chǎn)生與哮喘患者氣道的慢性炎癥密切相關(guān)，哮喘患者呼出氣一氧化氮（FeNO）水平能夠反映氣道炎性反應(yīng)程度[2-3]。但是，目前關(guān)于嬰幼兒喘息性疾病的FeNO變化情況尚未完全明確。本研究主要分析嬰幼兒喘息性疾病FeNO水平及其與SlgE、IgE的相關(guān)性，為臨床早期診斷與治療提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2012年5月～2015年6月就診的65例嬰幼兒喘息患兒作為觀察組，均符合《諸福棠實用兒科學(xué)》嬰幼兒喘息性疾病的診斷標(biāo)準[4]，排除心臟疾病、先天性呼吸道發(fā)育畸形、異物吸入等引起的喘息性疾病。男42例，女23例；年齡3個月～10歲，平均（5.58±0.78）歲；發(fā)病原因：喘息性支氣管炎26例，支氣管哮喘20例，毛細支氣管炎13例，其他6例；喘息時間0～30 d，平均（16.25±2.14）d；發(fā)作程度：<3次/d 46例，≥3次/d 19例。根據(jù)1︰1匹配原則選擇同期體檢的65例健康兒童作為對照組，男41例，女24例；年齡3個月～11歲，平均（5.71±0.74）歲。本研究報醫(yī)院倫理委員會批準，所有受試患兒家屬均簽署知情同意書。兩組患兒性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05），具有可比性。

1.2 FeNO的測定方法

兩組兒童均在安靜狀態(tài)下進行FeNO測定，根據(jù)美國胸科學(xué)會推薦兒童FeNO規(guī)范標(biāo)準[5]，采用無錫尚沃生物科技有限公司Sunvou-D100納庫侖一氧化氮分析，兒童在自然睡眠或水合氯醛催眠情況下，先將肺內(nèi)氣體盡量全部呼出，而后用口唇包緊過濾器并用力吸入不含NO的氣體（NO < 5×10-9mmol/L），立即以50 mL/s的速度呼出肺內(nèi)氣體、時間6～10 s，在儀器上讀取FeNO數(shù)值，結(jié)果以ppb表示，1 ppb=1×109 mol/L。年齡小的兒童不能掌握單次呼氣測定技術(shù)，選用離線潮氣呼氣測定技術(shù)，根據(jù)嬰幼兒年齡選擇不同型號潮氣面罩，把潮氣面罩通過潮氣采樣器與氣體樣袋連接好，平靜呼吸狀態(tài)下，面罩扣緊口鼻，潮氣呼吸30～60 s至半袋，密封好氣袋，通過干燥盒與儀器連接，測定離線FeNO數(shù)值。

1.3 血清指標(biāo)檢測方法

兩組兒童均于清晨采集靜脈外周血3 mL，3000 r/min離心10 min（離心半徑3 cm）取血清，采用日立7600型全自動生化分析儀檢測總免疫球蛋白E（tIgE）以及塵螨、蛋清、牛奶特異性免疫球蛋白E（sIgE）、白細胞介素-4（IL-4）、白細胞介素-10（IL-10）、干擾素-γ（IFN-γ）的含量。檢測方法：酶聯(lián)免疫吸附法，所有試劑盒均購自北京晶美生物工程有限公司。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行分析和處理，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準差（x±s）表示，采用t檢驗，計數(shù)資料采用χ2檢驗，相關(guān)性分析采用Pearson檢驗，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患兒FeNO水平比較

觀察組患兒FeNO水平為（32.59±5.52）×10-9mmol/L，對照組患兒FeNO水平為（16.33±2.18）×10-9mmol/L；觀察組患兒FeNO水平均顯著高于對照組（t = 22.088，P < 0.01）。

2.2 兩組患兒血清tIgE及塵螨、蛋清、牛奶sIgE含量比較

觀察組患兒血清tIgE及塵螨、蛋清、牛奶sIgE含量均顯著高于對照組（P < 0.01）。見表1。

2.3 兩組患兒血清炎癥介質(zhì)含量比較

觀察組患兒血清IL-4、IL-10、IFN-γ含量均明顯高于對照組（P < 0.01）。見表2。

2.4 FeNO水平與IgE、炎癥介質(zhì)含量的相關(guān)性

FeNO水平與血清tIgE及塵螨、蛋清、牛奶sIgE含量呈正相關(guān)，與血清IL-4、IL-10、IFN-γ含量呈正相關(guān)（P < 0.05）。見表3。

3 討論

嬰幼兒喘息性疾病是指具有喘息癥狀的呼吸道綜合征，具體包括毛細支氣管炎、喘息性支氣管炎、支氣管哮喘。氣道炎性反應(yīng)增強是嬰幼兒喘息性疾病的突出特征，氣道內(nèi)多種炎癥細胞被激活、多種炎癥介質(zhì)釋放增多[6]。

在生理狀態(tài)下，NO是人類氣道中唯一具有舒張氣道及血管平滑肌作用的神經(jīng)遞質(zhì)。一氧化氮合酶（NOS）是催化產(chǎn)生NO的關(guān)鍵酶[7]，具有三種亞型，其中誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）在喘息性疾病中起關(guān)鍵作用。急性發(fā)作時，各種炎癥因子和炎癥介質(zhì)均能刺激氣道上皮細胞與巨噬細胞中的iNOS，合成大量NO，因此FeNO同時也是炎性反應(yīng)的重要信號分子，反映了炎性反應(yīng)的激活和級聯(lián)放大。已有研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)eNO與支氣管哮喘患者氣道內(nèi)的炎性反應(yīng)密切相關(guān)[8]，但是關(guān)于嬰幼兒喘息性疾病的FeNO變化情況尚未完全明確。滑超等[9]通過對164例哮喘預(yù)測指數(shù)（API）陽性嬰幼兒與78例API陰性兒的比較研究中，報道API陽性組兒FeNO[（32.41±4.41）×10-9mmol/L]明顯高于API陰性組[（9.05±0.56）×10-9mmol/L]，認為氣道內(nèi)NO生成增多與嬰幼兒喘息性疾病的發(fā)生有關(guān)，本文研究結(jié)果也支持這一觀點。

IgE最早發(fā)現(xiàn)于過敏性疾病，一直以來都是檢測人體是否為過敏體質(zhì)的重要指標(biāo)之一。血清中tIgE是由B淋巴細胞合成的一類免疫球蛋白，主要介導(dǎo)Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)，在氣道慢性炎癥和氣道高反應(yīng)性的發(fā)生、發(fā)展過程中，IgE與肥大細胞、嗜堿粒細胞表面的Feek I相結(jié)合并誘導(dǎo)炎癥細胞發(fā)生脫顆粒、釋放多種炎癥介質(zhì)，進而造成血管充血、組織炎癥和氣道痙攣[10-11]。與健康兒童相比，喘息性嬰幼兒發(fā)生氣道過敏的概率過高，常常出現(xiàn)反復(fù)哮喘，臨床調(diào)查結(jié)果顯示，約有1/3的此類患兒在9歲前出現(xiàn)過哮喘發(fā)作。同時，喘息性嬰幼兒常具有高水平血清IgE，這主要是過敏原進入特應(yīng)性體質(zhì)的個體后刺激機體產(chǎn)生的，試驗結(jié)果顯示，88.89%喘息患兒吸入過敏原檢測陽性。另有研究結(jié)果指出，血清IgE還能預(yù)測喘息性患兒的預(yù)后，IgE陰性的喘息性嬰幼兒在學(xué)齡前期基本能停止發(fā)作，而IgE陽性者不然。本文研究中，觀察組患兒血清中tIgE的含量顯著高于對照組，且與FeNO水平呈正相關(guān)，國內(nèi)外學(xué)者也有類似的文獻報道[12-13]，提示嬰幼兒喘息患兒血清中升高的tIgE含量與FeNO水平的升高有關(guān)，患兒接觸外界變應(yīng)原會增加tIgE含量，進而通過IgE與炎癥細胞上相應(yīng)受體Feek I結(jié)合來增加NO的釋放。

嬰幼兒喘息患兒長期接觸變應(yīng)原是造成B淋巴細胞激活、IgE合成增多的重要因素。吸入性和食入性過敏原在不同年齡階段分布不同，3歲以下的患兒食入性過敏原偏多，然而，隨著年齡的增長和外出活動的增加，食物性過敏源也可能轉(zhuǎn)化為吸入性過敏原。只有明確過敏原，才能制訂更有針對性的治療和預(yù)防方案，提高診治效率。塵螨、蛋清、牛奶是造成嬰幼兒喘息最常見的三類變應(yīng)原，刺激體內(nèi)B淋巴細胞能產(chǎn)生相應(yīng)的sIgE[14]。已有研究報道，嬰幼兒喘息患兒血清塵螨、蛋清、牛奶sIgE的檢出率顯著高于對照組[15]。本文研究中，觀察組患兒血清塵螨、蛋清、牛奶sIgE含量顯著高于對照組，且與FeNO水平呈正相關(guān)。說明嬰幼兒喘息患兒血清中升高的塵螨、蛋清、牛奶sIgE含量與FeNO水平的升高有關(guān)，患兒接觸塵螨、蛋清、牛奶等變應(yīng)原會激活B細胞、增加sIgE的分泌，進而通過激活肥大細胞、嗜堿粒細胞等炎癥細胞來增加NO的產(chǎn)生。另外，在進行sIgE檢測時，本研究發(fā)現(xiàn)相當(dāng)一部分喘息性疾病患兒對2種及以上過敏原陽性，可能為多種過敏原混合致敏導(dǎo)致的結(jié)果，這與國內(nèi)相關(guān)報道一致[16]，臨床醫(yī)師應(yīng)格外注意。

NO是體內(nèi)調(diào)節(jié)炎性反應(yīng)的重要信號分子，氣道內(nèi)在IgE作用下大量產(chǎn)生的NO能夠調(diào)控炎癥介質(zhì)的分泌、影響炎性反應(yīng)[17]。IL-4、IL-10、IFN-γ是介導(dǎo)氣道炎性反應(yīng)重要的炎癥介質(zhì)，在嬰幼兒喘息的病情發(fā)展過程中，IL-4、IL-10、IFN-γ的釋放顯著增多，局部浸潤的炎癥介質(zhì)能夠介導(dǎo)炎癥細胞的募集及炎性反應(yīng)的級聯(lián)放大[18-19]。梁坤等[20]通過對53例難治性肺炎支原體肺炎患兒與30例支氣管異物患兒肺泡灌洗液IL-6、IL-10以及T細胞亞群的比較，報道難治性肺炎支原體患兒肺泡灌洗液中IL-6、IL-10水平均明顯高于支氣管異物患兒，細胞亞群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+均明顯低于支氣管異物患兒。本文研究中，觀察組患兒血清IL-4、IL-10、IFN-γ含量顯著高于對照組，且與FeNO水平呈正相關(guān)。這就說明氣道內(nèi)過多產(chǎn)生的NO參與氣道炎性反應(yīng)的調(diào)控，NO能夠增加炎癥介質(zhì)IL-4、IL-10、IFN-γ的釋放、加重氣道炎性反應(yīng)。

本研究結(jié)果表明，嬰幼兒喘息性疾病的FeNO顯著升高，接觸變應(yīng)原所引起的sIgE、IgE升高是造成升高的相關(guān)因素，而FeNO的升高又會促進炎癥介質(zhì)的分泌、加重氣道炎性反應(yīng)。需要指出的是，本文樣本量相對較少，且均來自同一家醫(yī)院，且觀察指標(biāo)相對較少，嬰幼兒喘息性疾病FeNO與sIgE、IgE的相關(guān)性還有待于擴大樣本量作進一步的研究。

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（收稿日期：2016-10-20 本文編輯：李亞聰）