黃燁禎，王幼明，葉林方

（1. 江西省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，江西南昌 330029；2. 中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)研究中心，山東青島 266032）

江西省種豬群偽狂犬病血清學(xué)橫斷面研究

黃燁禎1，王幼明2，葉林方1

（1. 江西省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，江西南昌 330029；2. 中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)研究中心，山東青島 266032）

為了解江西省種豬群偽狂犬?。≒R）的流行情況，尋找狂犬病毒（PRV）感染的潛在風(fēng)險(xiǎn)因素，開(kāi)展了本次橫斷面研究。按照估計(jì)流行率的抽樣策略，隨機(jī)抽取73個(gè)種豬場(chǎng)，根據(jù)豬場(chǎng)養(yǎng)殖規(guī)模將其分為3種類(lèi)型，分別進(jìn)行抽樣，然后采用PRV gE-ELISA抗體檢測(cè)試劑盒進(jìn)行抗體檢測(cè)。同時(shí)，根據(jù)73個(gè)種豬場(chǎng)的詳細(xì)地址，描繪豬場(chǎng)的空間分布圖，并對(duì)其開(kāi)展問(wèn)卷調(diào)查，對(duì)問(wèn)卷中涉及的風(fēng)險(xiǎn)因素進(jìn)行單因素分析，篩選出P＜0.2的變量，將其導(dǎo)入多因素Logistic回歸模型，用倒推法選擇變量，進(jìn)行回歸分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：江西省種豬群PR的群流行率為28.63%（95%CI：18.26%～38.99%），個(gè)體流行率為9.37%（95%CI：8.98%～9.77%）；PR陽(yáng)性豬場(chǎng)多分布于江西省中部的上饒、撫州、鷹潭、宜春等縣市；與PR感染相關(guān)的2個(gè)風(fēng)險(xiǎn)因素是場(chǎng)區(qū)周?chē)? km范圍內(nèi)是否有其他豬場(chǎng)（OR=4.766，P=0.020）和養(yǎng)殖場(chǎng)主是否愿意開(kāi)展PR凈化（OR=0.054，P=0.014）。依據(jù)研究結(jié)果，建議加強(qiáng)對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)主的培訓(xùn)與宣傳，使其認(rèn)識(shí)到PR凈化的重要性，并掌握PR防控與凈化的專(zhuān)業(yè)技術(shù)。

橫斷面研究；豬偽狂犬?。谎辶餍新?；風(fēng)險(xiǎn)因素；宣傳干預(yù)

豬偽狂犬?。≒orcine Pseudorabies，PR）是由偽狂犬病毒（PRV）引起的豬的急性傳染病。種豬PRV感染后主要表現(xiàn)為繁殖障礙，15日齡內(nèi)仔豬感染后的病死率可達(dá)100%，斷乳仔豬病死率為10%～20%，育肥豬感染后則主要表現(xiàn)呼吸道癥狀和增重滯緩。因本病給養(yǎng)豬業(yè)造成了較嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，我國(guó)將其列為二類(lèi)動(dòng)物疫病[1-3]。

根據(jù)《國(guó)家中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃（2012—2020年）》，PR為種畜禽重點(diǎn)凈化疫病，要求到2015年，原種豬場(chǎng)達(dá)到凈化標(biāo)準(zhǔn)；到2020年，全國(guó)所有種豬場(chǎng)達(dá)到凈化標(biāo)準(zhǔn)[4]。江西省從2009年開(kāi)始，在全省種豬場(chǎng)范圍內(nèi)開(kāi)展PR凈化工作，但檢測(cè)結(jié)果顯示種豬場(chǎng)PR陽(yáng)性率自2011年后呈緩慢上升趨勢(shì)。為此設(shè)計(jì)本項(xiàng)流行病學(xué)研究，以期為種豬場(chǎng)的PR凈化提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 目標(biāo)群

本次研究的目標(biāo)群是使用PRV gE基因缺失疫苗免疫的83家或省級(jí)批準(zhǔn)注冊(cè)的種豬場(chǎng)（站）；研究單元為各場(chǎng)內(nèi)的種豬群（能繁母豬、后備母豬、種公豬）。

1.2 病例定義

陽(yáng)性個(gè)體：經(jīng)PRV KgE-ELISA抗體試劑盒檢測(cè)，結(jié)果為gE抗體陽(yáng)性的種豬；陽(yáng)性場(chǎng)：場(chǎng)內(nèi)有1只或1只以上PRV gE抗體陽(yáng)性個(gè)體的種豬場(chǎng)；陰性場(chǎng)：場(chǎng)內(nèi)未檢測(cè)到PRV gE抗體陽(yáng)性個(gè)體的種豬場(chǎng)。

1.3 抽樣策略

1.3.1 群體水平。全省共有83家省級(jí)種豬場(chǎng)。按照估計(jì)流行率的方式，設(shè)場(chǎng)間預(yù)期流行率為50%，置信區(qū)間為99%，可接受誤差為5%，經(jīng)樣本量計(jì)算，需要調(diào)查74家種豬場(chǎng)[5]，實(shí)際隨機(jī)抽取了73家種豬場(chǎng)作為研究群。

1.3.2 個(gè)體水平。按照估計(jì)流行率的方式進(jìn)行抽樣。根據(jù)種豬場(chǎng)的種豬數(shù)量，分成3種類(lèi)型進(jìn)行抽樣。種豬數(shù)量＜450頭：設(shè)預(yù)期流行率為50%，可接受誤差為2%，置信區(qū)間為99%；種豬數(shù)量在451～850頭之間：設(shè)預(yù)期流行率為25%，可接受誤差為4%，置信區(qū)間為99%；種豬數(shù)量＞851頭：設(shè)預(yù)期流行率為15%，可接受誤差為4%，置信區(qū)間為99%。

1.4 檢測(cè)試劑

PRV gE-ELISA抗體檢測(cè)試劑盒（美國(guó)IDEXX公司產(chǎn)品），其敏感性（Se）為98%，特異性（Sp）為99%。

1.5 問(wèn)卷調(diào)查

設(shè)計(jì)《江西省種豬場(chǎng)豬偽狂犬病風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估調(diào)查表》，對(duì)種豬場(chǎng)養(yǎng)殖基礎(chǔ)信息、地理位置、生產(chǎn)管理、消毒措施、PR防控措施和參與凈化意愿等方面進(jìn)行問(wèn)卷調(diào)查。

1.6 數(shù)據(jù)分析

1.6.2 空間分析。根據(jù)73個(gè)種豬場(chǎng)的詳細(xì)地址，通過(guò)在線經(jīng)緯度查詢網(wǎng)站[6]，查得對(duì)應(yīng)的經(jīng)緯度坐標(biāo)，用ArcGis10.1軟件描繪豬場(chǎng)空間分布圖。

1.6.3 風(fēng)險(xiǎn)因素。以PR陰性場(chǎng)和陽(yáng)性場(chǎng)為因變量，用IBM SPSS Statistics 22 統(tǒng)計(jì)軟件，對(duì)所有二分類(lèi)變量進(jìn)行單因素分析。結(jié)合變量單因素分析結(jié)果和生物學(xué)知識(shí)，篩選出P＜0.2的變量進(jìn)行多因素Logistic回歸分析[7]。

2 結(jié)果

2.1 問(wèn)卷調(diào)查情況

本次調(diào)查的73個(gè)種豬場(chǎng)中，種豬飼養(yǎng)數(shù)量小于450頭的小規(guī)模種豬場(chǎng)占52.05%（38/73）；451～850頭的中等規(guī)模種豬場(chǎng)占31.51%（23/73）；大于850頭的大規(guī)模種豬場(chǎng)占16.44%（12/73）。對(duì)這73個(gè)種豬場(chǎng)下發(fā)調(diào)查問(wèn)卷，回收70份，回收率為95.89%（70/73），其中有效問(wèn)卷58份，有效率為82.86%（58/70）。

2.1.1 地理位置情況。15.52%（9/58）的豬場(chǎng)周邊有河流湖泊。豬場(chǎng)周邊3 km范圍內(nèi)，29.31%（17/58）的豬場(chǎng)有其他豬場(chǎng)；1.72%（1/58）的豬場(chǎng)有豬屠宰場(chǎng)；27.57%（16/58）的豬場(chǎng)有無(wú)害化處理點(diǎn)。

2.1.2 生產(chǎn)管理情況。36.21%（21/58）的豬場(chǎng)全部在場(chǎng)外購(gòu)置飼料；84.48%（49/58）的豬場(chǎng)飲用水完全依賴井水；43.10%（25/58）的豬場(chǎng)從外場(chǎng)引進(jìn)種豬或精液，其中80.00%（20/25）的豬場(chǎng)在引進(jìn)是進(jìn)行PR病原或野毒抗體檢測(cè)。

2.1.3 消毒情況。98.28%（57/58）的豬場(chǎng)設(shè)有車(chē)輛消毒池，其中49.12%（28/57）的豬場(chǎng)平均每月更換消毒液4～6次；98.28%（57/58）的豬場(chǎng)設(shè)有獨(dú)立的人員消毒通道，消毒方式有紫外線消毒、噴霧消毒、淋浴等；94.83%（55/58）的豬場(chǎng)采取了滅鼠措施；100%（58/58）的豬場(chǎng)采取了殺蟲(chóng)滅蠅措施；17.24%（10/58）的豬場(chǎng)內(nèi)有流浪犬貓活動(dòng)，其中60%的（6/10）豬場(chǎng)內(nèi)流浪犬貓可以直接接觸到飼養(yǎng)豬只。

2.1.4 防控情況。100%（58/58）的被調(diào)查豬場(chǎng)免疫PRV gE缺失疫苗，其中74.14%（43/58）的豬場(chǎng)使用進(jìn)口苗，免疫豬群為種豬和仔豬；3.45%（2/58）的豬場(chǎng)為全場(chǎng)免疫；96.55%（56/58）的種豬場(chǎng)會(huì)定期檢測(cè)PR野毒或野毒抗體，但其中有16.07%（9/56）的場(chǎng)（站）僅依賴省、市、縣疫控機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè)；豬場(chǎng)認(rèn)為發(fā)生PR的因素依次為：引進(jìn)種豬/精液（84.48%，49/58），流浪犬貓（70.69%，41/58），疫苗保護(hù)力不夠（68.97%，40/58），外來(lái)車(chē)輛（62.07%，36/58），外來(lái)人員串場(chǎng)（50.00%，29/58），周邊地區(qū)流行嚴(yán)重（48.28%，28/58）。

2.1.5 參與凈化意愿。89.66%（52/58）的豬場(chǎng)愿意開(kāi)展PR凈化，而其他豬場(chǎng)不愿意開(kāi)展凈化的原因主要為凈化所需費(fèi)用太高、缺少技術(shù)人員、PR凈化沒(méi)有實(shí)際的效益，因此希望能得到資金、檢測(cè)技術(shù)和人員培訓(xùn)等方面的幫助。

2.2 流行率

對(duì)來(lái)自73個(gè)場(chǎng)的21 322份血清樣品進(jìn)行PRV gE-ELISA抗體檢測(cè)，結(jié)果21個(gè)場(chǎng)的2 152份樣品檢測(cè)為抗體陽(yáng)性（表1）。

表1 種豬場(chǎng)PR抗體檢測(cè)結(jié)果

2.3 空間分布

根據(jù)73個(gè)種豬場(chǎng)的經(jīng)緯度坐標(biāo)，繪制坐標(biāo)圖，并標(biāo)注陽(yáng)性場(chǎng)和陰性場(chǎng)（圖1）。

圖1 江西省PR陽(yáng)性和陰性種豬場(chǎng)地理分布

2.4 風(fēng)險(xiǎn)因素

2.4.1 單因素分析。經(jīng)分析得到14個(gè)風(fēng)險(xiǎn)因素（表2），其中有7個(gè)因素（P＜0.2）顯示與種豬場(chǎng)PR的發(fā)生有一定關(guān)系，分別為：場(chǎng)區(qū)周?chē)? km范圍內(nèi)是否有豬場(chǎng)；3 km范圍內(nèi)是否有散養(yǎng)戶；3 km范圍內(nèi)是否有病死畜禽無(wú)害化處理點(diǎn)；場(chǎng)內(nèi)是否有流浪犬貓；流浪犬貓是否能接觸到飼養(yǎng)豬；本場(chǎng)是否開(kāi)展過(guò)PR凈化；是否愿意開(kāi)展PR凈化。

2.4.2 多因素分析。根據(jù)單因素分析結(jié)果，將篩選出的P＜0.2的變量，導(dǎo)入多因素logistic回歸模型，用倒推法選擇變量，進(jìn)行回歸分析，分析結(jié)果見(jiàn)表3。

表2 種豬場(chǎng)PR單因素風(fēng)險(xiǎn)分析結(jié)果

表3 種豬場(chǎng)PR多因素風(fēng)險(xiǎn)分析結(jié)果

3 討論

據(jù)相關(guān)資料表明，仔豬PRV gE抗體呈陽(yáng)性，既有可能是由PRV感染導(dǎo)致的，也有可能是母源抗體引起的，因此從流行病學(xué)分析角度考慮，對(duì)種豬的血清學(xué)調(diào)查與分析更具有意義。公豬和后備豬帶毒是PR凈化的最大障礙，尤其是后備母豬如果豬場(chǎng)不能阻止后備母豬被感染，則很難控制和凈化PR，因此對(duì)種豬群和后備種豬群進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查和分析是符合實(shí)際要求的[8-10]。

本次調(diào)查中，江西省種豬場(chǎng)群流行率為28.63%（95%CI：18.26%～39.00%），個(gè)體流行率為8.99%（95%CI：8.61%～9.36%），21個(gè)陽(yáng)性豬場(chǎng)的樣品陽(yáng)性率在0.21%～100%之間。被調(diào)查的豬場(chǎng)雖然全部免疫了PRV gE基因缺失疫苗，但場(chǎng)間流行率差異較大，說(shuō)明疫苗免疫接種雖然在一定程度上可以阻止PR臨床發(fā)病，但不能完全防止病毒入侵，也不能清除已經(jīng)感染的PRV。因此，PRV凈化不能僅僅依賴疫苗，野毒抗體監(jiān)測(cè)、淘汰陽(yáng)性豬只和加強(qiáng)生物安全等綜合措施也非常重要[11-12]。同時(shí)，系統(tǒng)開(kāi)展PR場(chǎng)間流行風(fēng)險(xiǎn)因素研究，找到PR防控的主要風(fēng)險(xiǎn)因素，將有助于PR的防控和凈化。

個(gè)體流行率和群體流行率調(diào)查結(jié)果顯示，感染情況最嚴(yán)重的是中等規(guī)模種豬場(chǎng)。這與研究設(shè)計(jì)時(shí)假設(shè)的情況不一致，但不影響本次結(jié)果的可靠性，其具體原因需要進(jìn)一步調(diào)查。

PR陽(yáng)性場(chǎng)多分布于江西省的上饒、撫州、鷹潭、宜春等中部地區(qū)。這些地區(qū)雖然面積小，卻承擔(dān)著全省43.13%的養(yǎng)殖量，養(yǎng)殖非常密集。而本次研究發(fā)現(xiàn)，風(fēng)險(xiǎn)因素“場(chǎng)區(qū)周?chē)? km范圍內(nèi)是否有其他豬場(chǎng)”與養(yǎng)殖密度也存在一定的關(guān)聯(lián)性。因采集的信息有限，本次研究未對(duì)養(yǎng)殖密度與PRV傳播之間的關(guān)系進(jìn)行探討。

雖然有70.69%（41/58）的種豬場(chǎng)認(rèn)識(shí)到流浪犬貓是導(dǎo)致發(fā)生PR的重要因素，但仍有17.24%（10/58）的豬場(chǎng)內(nèi)有流浪犬貓活動(dòng)，這一現(xiàn)象應(yīng)該嚴(yán)格禁止再次出現(xiàn)。

調(diào)查發(fā)現(xiàn)，養(yǎng)殖場(chǎng)主是否愿意開(kāi)展PR凈化是影響病毒傳播的關(guān)鍵風(fēng)險(xiǎn)因素之一，因此應(yīng)引起疫病防控工作人員和養(yǎng)殖人員的重視。雖然有96.55%（56/58）的種豬場(chǎng)會(huì)定期檢測(cè)PRV野毒或野毒感冒抗體，但其中有16.07%的場(chǎng)（站）僅依賴省、市、縣疫病控制機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè)，以至于不能及時(shí)淘汰感染豬只，導(dǎo)致場(chǎng)陽(yáng)性率居高不下。另外，有10.34%的養(yǎng)殖場(chǎng)主不愿意開(kāi)展PR凈化，主要是因?yàn)橘M(fèi)用高、技術(shù)人員少、實(shí)際效益低。為此，須加強(qiáng)對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)主的培訓(xùn)與宣傳，讓其認(rèn)識(shí)到PR凈化的重要性，使其掌握PR防控與凈化的專(zhuān)業(yè)技術(shù)。

本次研究?jī)H針對(duì)生產(chǎn)管理水平較高的省級(jí)種豬場(chǎng)進(jìn)行了調(diào)查，對(duì)數(shù)量更多、更具代表性的生產(chǎn)豬場(chǎng)的流行狀況有待進(jìn)一步調(diào)查。因問(wèn)卷中設(shè)計(jì)的風(fēng)險(xiǎn)因素較多，雖在填寫(xiě)前進(jìn)行了小范圍的預(yù)調(diào)查，并對(duì)調(diào)查人員進(jìn)行了培訓(xùn)，但因其中有一些回顧性問(wèn)題，可能會(huì)產(chǎn)生信息偏倚。

[1] 陸承平. 獸醫(yī)微生物學(xué)[M]. 4版.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2007.

[2] OIE. Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals[M]. 6th ed. Paris：OIE，2008.

[3] 農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)局. 一二三類(lèi)動(dòng)物疫病釋義[M]. 北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2010.

[4]國(guó)務(wù)院辦公廳. 關(guān)于印發(fā)國(guó)家中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃（2012-2020）的通知：國(guó)辦發(fā)（2012）31號(hào)[A]. 北京；農(nóng)業(yè)部，2012.

[5]沈朝建，王幼明. 獸醫(yī)流行病學(xué)調(diào)查與監(jiān)測(cè)抽樣技術(shù)手冊(cè)[M]. 北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2013.

[6]GPSspg. 經(jīng)緯度在線查詢[DB/OL].[2016-10-11]. http:// www.gpsspg.com/maps.htm.

[7]劉華，占松鶴，王靖飛，等. 2013年安徽省中小規(guī)模種豬場(chǎng)豬偽狂犬病群流行率及風(fēng)險(xiǎn)因素橫斷面研究[J]. 中國(guó)動(dòng)物檢疫，2014，3（11）：16-20.

[8]KRAMER T，GRECO T M，LYNN W E，et al. Proteomic characterization of pseudorabies virus extracellular virions[J]. J Virol，2011，85（13）：6427-6441.

[9]鄒敏，楊旭兵，鄭輝，等. 2012—2013年我國(guó)部分地區(qū)豬偽狂犬病流行病學(xué)調(diào)查[J]. 中國(guó)動(dòng)物檢疫，2015，32（4）：1-5.

[10]GARY S. Preferential sexual transmission of pseudorabies virus in feral swinepopulations may not account for observed seroprevalence in the USA[J]. Preventive Veterinary Medicine，2012，103（2/3）：145-156.

[11]ARJAN S. Aujeszky's disease（pseudorabies）virus eradication campaign in the Netherlands[J]. Veterinary Microbiology，1997，55（1/2/3/4）：175-180.

[12]何啟蓋，童光志，楊漢春，等. 豬偽狂犬病流行病學(xué)特征、凈化技術(shù)及其應(yīng)用示范[J]. 中國(guó)畜牧雜志，2015，51（24）：68-74.

（責(zé)任編輯：朱迪國(guó)）

A Cross-sectional Study on Sero-prevalence of Pseudorabies in Swine Breeding Herds in Jiangxi Province

Huang Yezhen1，Wang Youming2，Ye Linfang1

（1. Jiangxi Animal Disease Prevention and Control Center，Nanchang，Jiangxi 330029；2. China Animal Health and Epidemiology Center，Qingdao，Shandong 266032）

In order to estimate the prevalence of Pseudorabies（PR）in swine breeding herds in Jiangxi Province，and to identify the potential risk factors，a cross-sectional study was conducted. According to the sampling strategy，73 swine breeding farms were randomly selected and divided into 3 types based on their scales，then the selected serum samples were tested by PRV gE-ELISA kits. Meanwhile，a spatial distribution map was drawn in terms of the 73 detailed addresses，and a questionnaire survey was conducted to analyze the relevant risk factors. Firstly，variates screened from single factor analysis（P <0.2）were imported into multiple logistic regression model. Then by means of backward induction，the variates were chosen to carry out regression analysis. Results showed that in Jiangxi Province，the herd prevalence of PR was 28.63%（95%CI：18.26%～38.99%），while the rate at individual level was 9.37%（95%CI：8.98%～9.77%）. Besides，the infected farms distributed mainly in the middle area of Jiangxi province，including Shangrao，F(xiàn)uzhou，Yingtan and Yichun. Two risk factors associated PR infection were found，one was whether there were other swine farms within 3 km（OR=4.766，P=0.020），and the other was if the farmers had willing to eradicate PR（OR=0.054，P=0.014）.This study indicated that further training and propaganda about PR eradication for farmers should be strengthened，which would conducive to let them realize the importance and master professional techniques for PR prevention and control.

cross-sectional study；PR；sero-prevalence；risk factor；propaganda

S851.3

A

1005-944X（2017）04-0020-05

10.3969/j.issn.1005-944X.2017.04.006

聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織-中國(guó)獸醫(yī)現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)培訓(xùn)項(xiàng)目；科技部科技基礎(chǔ)性工作專(zhuān)項(xiàng)（2012FY111000）