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        仔豬關(guān)節(jié)炎病原的分離鑒定

        2017-05-30 17:59:23郭世棟穆娟李樂
        大東方 2017年10期
        關(guān)鍵詞:分離鑒定鏈球菌仔豬

        郭世棟 穆娟 李樂

        摘要:某一養(yǎng)豬場(chǎng),60日齡的斷奶仔豬2000頭,其中,12多頭60日齡的斷奶仔豬,出現(xiàn)精神沉郁,食欲廢覺,發(fā)燒41~42℃,出現(xiàn)了嚴(yán)重的食欲廢覺,個(gè)別的60日齡的斷奶仔豬出現(xiàn)了典型的癥狀后肢關(guān)節(jié)對(duì)稱性腫脹,關(guān)節(jié)炎及腫大,個(gè)別的斷奶仔豬不表現(xiàn)任何的癥狀出現(xiàn)突然死亡。為了確定引起60日齡的斷奶仔豬關(guān)節(jié)炎及突然死亡的病原菌,對(duì)突然死亡及關(guān)節(jié)炎的60日齡的斷奶仔豬進(jìn)行剖檢,無菌采集肝臟、關(guān)節(jié)滲出液等病料組織進(jìn)行細(xì)菌的分離與鑒定,分離1株病原菌,對(duì)從死亡的仔豬體內(nèi)分離的1株病原菌通過培養(yǎng)特性鑒定、形態(tài)學(xué)觀察、生化特性鑒定、致病性試驗(yàn)等鑒定方法,分離到的1株病原菌被鑒定為致病性鏈球菌。因而,證實(shí)了引起60日齡的斷奶仔豬關(guān)節(jié)炎及突然死亡的病原菌為致病性鏈球菌,因此,對(duì)分離的仔豬致病性鏈球菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。結(jié)果顯示,分離的仔豬致病性鏈球菌對(duì)頭孢曲松、氨芐西林、阿莫西林、頭孢拉啶、恩諾沙星、青霉素6種藥物高度敏感。

        關(guān)鍵詞:仔豬;鏈球菌;分離鑒定;

        隨著我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展,在我國(guó)的大部分地區(qū)豬的養(yǎng)殖已經(jīng)形成集約化養(yǎng)殖及規(guī)?;B(yǎng)殖。豬的相關(guān)的傳染性疾病越來越多,越來越復(fù)雜。養(yǎng)殖戶對(duì)豬的相關(guān)的傳染性疾病也愈來愈重視。一般的豬的相關(guān)的傳染性疾病主要包括病毒性、細(xì)菌性疾病。其中,鏈球菌病是斷奶仔豬急性死亡和關(guān)節(jié)腫脹的主要病原菌,仔豬感染了鏈球菌后,死亡率均較高能達(dá)到70%以上,仔豬的鏈球菌病,嚴(yán)重危害著養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。因此,斷奶仔豬的鏈球菌病成為臨床上常見的細(xì)菌性傳染性疾病之一,仔豬鏈球菌病是由鏈球菌引起不同階段豬的一種急性、熱性、敗血性傳染病,斷奶仔豬的鏈球菌可以感對(duì)不同階段的豬,斷奶仔豬的鏈球菌感染率和死亡率均較高。尤其對(duì)仔豬的致病性最強(qiáng),危害最嚴(yán)重。斷奶仔豬的鏈球菌發(fā)病無明顯的季節(jié)性,常年均有引發(fā)仔豬發(fā)病,臨床上主要表現(xiàn)為急性敗血癥,關(guān)節(jié)腫脹等,表現(xiàn)神經(jīng)癥狀,渾身抽搐,麻痹死亡。本文作者通過60日齡發(fā)病突然死亡和關(guān)節(jié)炎斷奶仔豬的臨床癥狀表現(xiàn)、病理剖檢變化、實(shí)驗(yàn)室綜合診斷技術(shù)、致病性試驗(yàn),確定引起60日齡的斷奶仔豬關(guān)節(jié)炎及突然死亡的病原菌為鏈球菌,并對(duì)鏈球菌進(jìn)行了藥敏試驗(yàn),分析其耐性。

        (1)發(fā)病情況。某一養(yǎng)豬場(chǎng),60日齡的斷奶仔豬2000頭,其中,12多頭60日齡的斷奶仔豬,出現(xiàn)精神沉郁,食欲廢覺,發(fā)燒41~42℃,出現(xiàn)了嚴(yán)重的食欲廢覺,個(gè)別的60日齡的斷奶仔豬出現(xiàn)了典型的癥狀后肢關(guān)節(jié)對(duì)稱性腫脹,個(gè)別的斷奶仔豬不表現(xiàn)任何的癥狀出現(xiàn)突然死亡。

        (2)仔豬的臨床證狀。60日齡的斷奶仔豬2000頭,其中,12多頭60日齡的斷奶仔豬,出現(xiàn)精神沉郁,食欲廢覺,發(fā)燒41~42℃,出現(xiàn)了嚴(yán)重的食欲廢覺,個(gè)別的60日齡的斷奶仔豬出現(xiàn)了典型的癥狀后肢關(guān)節(jié)對(duì)稱性腫脹,關(guān)節(jié)腫大,個(gè)別的斷奶仔豬不表現(xiàn)任何的癥狀出現(xiàn)突然死亡

        (3)病理剖檢變化。剖檢變化可見,仔豬的肝臟腫大、出血,形成出血斑,呈藍(lán)紫色;關(guān)節(jié)炎腫脹,切開后,有炎性滲出物滲出,關(guān)節(jié)面腫脹。全身的頜下淋巴結(jié)、腹股溝管淋巴結(jié)、腸系膜淋巴結(jié)出血與腫大;病死豬的腹腔內(nèi)有大量的淡黃色滲出液,氣管、喉頭剖檢可見有不同程度的腫脹、出血;胃底部區(qū)及腸道有出血點(diǎn),腸壁變薄,腸黏膜脫落;

        (4)細(xì)菌分離培養(yǎng)與形態(tài)學(xué)觀察。無菌采集60日齡斷奶死亡的仔豬的肝臟、關(guān)節(jié)滲出液等病料組織接種于7%綿羊脫纖血液營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基上,置 37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12-16h后,在7%綿羊脫纖血液營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基生長(zhǎng)出淡灰色、大小一致透明、圓形小菌落,菌落呈現(xiàn)典型的β溶血現(xiàn)象,呈現(xiàn)典型的β溶血現(xiàn)象的菌落進(jìn)行革蘭氏染色觀察,顯微鏡下可見分離菌株呈單個(gè)的或者雙排列的陽性球菌。

        (5)分離菌株的生化鑒定。挑取7%綿羊脫纖血液營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基上單個(gè)菌落接種于含5% 血清的TSB 培養(yǎng)基里, 37℃震蕩培養(yǎng)12-16h后,調(diào)整菌液的濃度為2個(gè)麥?zhǔn)蠞岫?,按照要求加入生化鑒定的試紙條中,置 37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24后,根據(jù)生化試紙條的變化進(jìn)行判定細(xì)菌的種類。結(jié)果顯示,分離菌株被鑒定為鏈球菌。

        (6)細(xì)菌的的致病性試驗(yàn)。將純化培養(yǎng)的分離的鏈球菌的, 置37℃震蕩培養(yǎng)12-16h后,調(diào)整菌液濃度(108cfu /mL),將20只小白鼠分為2組,每組10只,第一組每只小白鼠肌肉注射劑量為0.5 mL(108cfu /mL),第2組,肌肉注射等量的生理鹽水,攻毒12h后開始觀察7天,并記錄每組小鼠的死亡數(shù)和發(fā)病情況,結(jié)果顯示,在攻毒后的48~72h后,第1組小鼠出現(xiàn)死亡,死亡率為90%,至到7d,死亡率100%,第2組小鼠健康的存活,因而,從斷奶死亡的仔豬體內(nèi)分離鏈球菌對(duì)具有很強(qiáng)的致病性。

        (7)分離菌株的藥敏試驗(yàn)。將純化培養(yǎng)的分離的鏈球菌無菌涂布在7%綿羊脫纖血液營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基上,貼上藥敏紙片,置 37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12-16h后測(cè)量抑菌直徑,藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示,分離的仔豬鏈球菌菌株對(duì)頭孢曲松、氨芐西林、阿莫西林、頭孢拉啶、恩諾沙星、青霉素6種藥物高度敏感。

        總之,引起仔豬關(guān)節(jié)炎和突然死亡的病原菌為致病性鏈球菌,藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示,致病性鏈球菌對(duì)分離的仔豬鏈球菌菌株對(duì)頭孢曲松、氨芐西林、阿莫西林、頭孢拉啶、恩諾沙星、青霉素6種藥物高度敏感。

        參考文獻(xiàn):

        [1]邵靚,陳斌,周莉媛,陳弟詩,湯芳,陸承平. 四川地區(qū)一株豬鏈球菌16型菌株的分離與鑒定[J]. 畜牧與獸醫(yī),2017,49(05):109-111.

        [2]惠艷華,丁寧,沈莉萍,等.一例豬鏈球菌2型感染的病原分離鑒定及藥敏試驗(yàn)[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫,2017,34(08):97-99.

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