王旭 馮星 紀軍 王華峰 左北瑤

摘要：本文結合工作實踐，對在試驗條件簡陋條件下制作羊的細管凍精進行歸納，形成一個簡易的制作羊細管凍精的方法，以期對羊的品種資源保護、高繁殖力種公羊利用等方面發(fā)揮積極作用。

關鍵詞：羊；細管凍精；方法

中圖分類號：S858.26 文獻標識碼：B 文章編號：2096-3637（2017）07-0043-01

20世紀50年代，國外開始研究羊的冷凍精液，80年代以后，隨著輸精方法的改進和輸精器械的改良，羊冷凍精液的受胎率有了較大的提高。目前，國外關于羊冷凍精液的研究已有了較大的進展，并在畜牧業(yè)較為發(fā)達的國家得到廣泛應用。國內(nèi)羊冷凍精液的研究始于20世紀70年代，但在實際應用和推廣實踐中，由于受諸多因素的影響，受胎率一直不太理想[1]。本文結合基層工作實踐和同行做法，形成一個羊細管凍精制作的簡易方法，希望在羊品種資源保護、提高高繁殖力種公羊利用率、推廣人工授精技術等方面上發(fā)揮積極作用。

1 材料選擇

1.1 采精公羊

選擇生長發(fā)育良好、健康無疾病、性欲較強、品種特征明顯的種公羊作為采精公羊。種公羊需提前1個月加強補飼，每只種公羊每天補充精料量為：玉米0.5～1kg，豆粕0.25～0.5kg，胡蘿卜0.5～1kg，雞蛋1～4枚。采精期間增加精料補給量，非采精期間酌情減少，早晚各補飼1次，自由飲水，每天運動不少于2h [2]。

1.2 稀釋液和冷凍液配制[3]

基礎液：葡萄糖3g+檸檬酸鈉3g+雙蒸水100ml，充分搖勻溶解。

稀釋液：取80ml基礎液+20ml卵黃，同時加入青霉素鈉和鏈霉素各10萬單位，搖半個小時，使其充分溶解混合。

冷凍液：取88ml稀釋液+12ml甘油，搖0.5h，使其充分混合。

2 制作流程

2.1 精液采集

使用假陰道采精法采集精液，所有器械在使用前均要高溫消毒或75%酒精消毒。采精時，半蹲在臺畜右側，右手橫握假陰道，閥門靠手掌心，前低后高，待公羊爬跨陰莖頭露出包皮時，左手托住陰莖包皮，順勢將陰莖導入假陰道，再把假陰道傾斜，使集精杯朝下，待公羊向前猛沖射精時，射出的精液就直接進入集精杯中，而不是沿著內(nèi)胎再流入集精杯，減少了精液的污染。

2.2 精液稀釋和平衡

精液采集后，首先檢測精液品密度、活力，只有密度不低于20億/ml，活力不低于0.7才能制作細管凍精。精液的稀釋采用了二次稀釋法，根據(jù)精液密度可先用稀釋液（提前放到37℃水浴鍋中加熱）稀釋1～2倍，然后4℃冰箱中平衡2h。待平衡后，再加入與稀釋液等量的冷凍液（4℃），這樣就對原精液稀釋了2～4倍，然后再在4℃冰箱中平衡2h。

2.3 細管凍精制作

2.3.1封裝

在一個不高于5℃的操作環(huán)境里進行操作，平衡后的精液從4℃冰箱中拿出后，輕微混合，然后將精液吸入0.25ml細管中，并用封口粉封好。

2.3.2平衡

細管精液封裝好后，均勻擺放在細管架上，平衡5min左右。

2.3.3熏蒸

提前準備好的一個大的容器內(nèi)倒入液氮，待分裝好的細管平衡后，迅速將細管架放入容器內(nèi)，確保細管與液氮面保持0.8～1cm的距離，蓋上容器蓋子，熏蒸5min左右。

2.3.4冷凍

細管精液在液氮面上熏蒸完后，將細管全部浸入液氮中，放置10～30min左右，便完成了細管凍精制作。

2.4凍精解凍和保存

將制作好的細管凍精隨機抽取1～3只，在38～40℃的溫水中解凍13～15s，然后再顯微鏡下觀察解凍后的活力，活力檢測在0.3以上便可收集保存，否則棄去不用。將制作好的細管凍精裝入凍精袋，標注公羊的品種、凍精數(shù)量，精液活力以及生產(chǎn)日期等信息后便可裝入液氮罐長期保存。

3 小結

在條件簡易的情況下，如果制作細管凍精的環(huán)境溫度較高，可以準備一個大的泡沫箱，在里面放上冰塊，制造一個低溫的小環(huán)境，便可以完成細管封裝。

封裝細管時，如果沒有專用的設備，可以采取以下簡易做法：將細管海綿端對齊，放入口中，另一端放入精液中，先吸少量精液，然后再吸入一小段空氣，最后將細管吸滿，用封口粉封住即可。

細管架放入液氮容器時一定要放平，同時確保液氮面與細管的距離適當，如果液氮面與細管太近，細管內(nèi)的精液會立即冷凍，距離太遠，冷凍的速度變慢，都會對結果造成影響。

參考文獻

[1]周芬娜，賀曉珺，智利紅等.羊冷凍精液人工授精技術研究進展[J].獸醫(yī)導刊，2015（14）：66.

[2]紀軍，王旭，艾爾肯江等. 巴音布魯克種公羊馴化采精探析[J].安徽農(nóng)業(yè)科學，2003，41（7）：2971-2972.

[3]郭志明，馬濤. 綿羊凍精的生產(chǎn)及其影響因素[J].青海畜牧獸醫(yī)雜志， 2003，33（3）：46.