陳秋強++胡朝暉++徐建中++倪方方++徐紅梅++宋騰蛟++袁小鳳

【摘 要】杭白術(shù)Atractylodes macrocephalae有嚴(yán)重的連作障礙，前期研究發(fā)現(xiàn)白術(shù)根際土壤有機溶劑浸提物對幼苗生長有顯著抑制作用，但具體是哪些化合物還不清楚。利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（gas chromatography-mass spectrometer，GC-MS）檢測連作后白術(shù)根際分泌物組分及含量的變化，以闡明白術(shù)的連作障礙機制。共鑒定出16種化學(xué)成分，主要為酚類（3種）、芳香烴（3），烷烴（3），烴類衍生物（2）、醇類（2）、酯類（1）、胺類（1），除S-氰戊菊酯、氟啶胺和谷甾醇外，其余13種均為化感物質(zhì)。 在正常種植、連作2年、3年的白術(shù)根際土中均檢測到3，5-二叔丁基-4-羥基苯甲醛、惹烯、2，4-二叔丁基苯酚、2，6-二叔丁基對甲酚、2，4-二（1-苯乙基）-苯酚等5種化合物，只是這些物質(zhì)的含量隨連作年限增加而減少。連作白術(shù)根際中根泌物的種類明顯增加，連作3年的白術(shù)死苗中檢測到15種，連作2年的死苗中有9種，其種類遠(yuǎn)超過活苗，可見白術(shù)的死苗與這些化合物有著必然的聯(lián)系。綜合比較后發(fā)現(xiàn)，2，6-二叔丁基對甲酚、四甲基聯(lián)苯、對二甲苯以及對氯苯基-6，8-二氯-7-苯并吡啶是導(dǎo)致白術(shù)自毒作用的主要根泌物。連作后很多白術(shù)會向土壤分泌一些化感物質(zhì)，例如2，6-二叔丁基對甲酚、四甲基聯(lián)苯、對二甲苯以及對氯苯基-6，8-二氯-7-苯并吡啶，正是這些物質(zhì)的自毒作用，導(dǎo)致白術(shù)發(fā)生連作障礙，其具體機制有待進一步研究證實。

【關(guān)鍵詞】杭白術(shù) 連作障礙 根系分泌物 氣質(zhì)聯(lián)用儀 化感作用

白術(shù)Atractylodes macrocephalae屬菊科多年生草本，以干燥根莖入藥，是著名的道地藥材“浙八味”之一。它作為一種傳統(tǒng)的中藥材，具有健脾益氣、燥濕利水、止汗、安胎之功效，常用于脾虛食少、腹脹泄瀉、痰飲眩悸、水腫、自汗、胎動不安等癥[1-2]。杭白術(shù)有非常嚴(yán)重的連作障礙，這不僅給藥農(nóng)帶來了巨大的經(jīng)濟損失，而且制約了我省道地藥材的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。研究表明，作物之所以有連作障礙的主要是因為土壤理化性質(zhì)變劣、化感自毒作用以及土壤微生物區(qū)系的改變[3]。其中，化感自毒作用主要是指連作后植物會產(chǎn)生一些化感物質(zhì)，這些物質(zhì)通過影響細(xì)胞膜通透性、酶活性、蛋白質(zhì)的合成等多種途徑來影響植物生長[4]。我們的前期研究表明，白術(shù)根際土壤有機溶劑浸提物對幼苗生長有顯著抑制作用[5]，但具體是哪些化合物還不清楚。因此，本實驗擬對檢測連作后白術(shù)根際土壤中的化合物，分析連作后白術(shù)根際土壤中有機化合物成分及含量的變化，為探討杭白術(shù)的連作障礙機制提供證據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗設(shè)計和樣品采集

野外栽培實驗設(shè)在規(guī)范栽培基地磐安，實驗田分3組：連作3年的杭白術(shù)、連作2年的杭白術(shù)，第1年種植的杭白術(shù)。試驗地設(shè)在同一塊地，土壤類型完全相同，每組1m×5m，相鄰而種，整個實驗過程設(shè)專人管理。

連作白術(shù)的死苗率很高，而未連作的白術(shù)沒有死苗，為分析死苗和活苗的根際土差異，我們分別采集活苗和死苗的根際土。在7月份一個晴天的下午采樣，利用土培收集法收集根分泌[6]，具體如下：按照五點采樣法分別采集連作3年、連作2年以及種植1年的白術(shù)根際土，同時采集連作3年、連作2年的死亡白術(shù)的根際土。采集根際土的方法如下：先撥開表層土，將整株根系從土壤中挖出，抖掉與根系松散結(jié)合的土塊，然后將與根系緊密結(jié)合在4mm 范圍內(nèi)的土壤用毛刷刷下，過2mm尼龍篩后即為根際土，然后裝袋帶回。此外，收集附近未種植物的空地土壤，過篩、裝袋，速帶回實驗室，自然風(fēng)干，備用。每組樣品3個重復(fù)。

1.2 土壤理化性質(zhì)分析

利用電極法測土壤pH[7]。稱取10g過20目篩的風(fēng)干土樣于50 mL 燒杯中，加入25 mL 無CO2 蒸餾水，用玻璃棒混和均勻，靜置30 min，同時注意避免空氣中NH4或揮發(fā)性酸等氣體的影響。將玻璃電極與甘汞電極插入土壤懸液中，讀取pH值。每份樣品測定結(jié)束后即用蒸餾水沖洗電極，并用干濾紙將水吸干，每份樣品測三次。

采用低溫外熱重鉻酸鉀氧化-比色法[8]，稱1g過100目篩的風(fēng)干土樣，放入50mL普通試管中，加5mL重鉻酸鉀溶液和5mLH2SO4，搖勻（同時做無土樣空白），放入100℃恒溫箱中，90min后放冷水浴中冷卻，用注射器加水至50mL，搖勻停放3h或過夜，取上清液比色，用1cm光徑比色杯在590nm波長測定吸收值。用空白樣液調(diào)比色計零點。

采用靛酚比色法（苯酚-次氯酸鈉比色法）測土壤脲酶活性[9]。稱取5.0000g過100目篩的風(fēng)干土樣于50mL三角瓶中，用1mL甲苯處理（以能全部使土樣濕潤為度），15min后加入10mL 10%尿素溶液和20mL檸檬酸鹽緩沖液（pH6.7）。仔細(xì)混合后，將反應(yīng)物放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，對每個樣品設(shè)用10mL水代替基質(zhì)作有土無基質(zhì)對照，整個實驗設(shè)無土無基質(zhì)對照。過濾后取3mL濾液于50mL容量瓶中，加水至20mL，再加入4mL苯酚鈉，仔細(xì)混合，加入3mL次氯酸鈉，充分搖蕩，放置20min，用水稀釋至刻度。將著色液在分光光度計上于578nm處進行比色測定。每個樣品3個重復(fù)。

采用磷酸苯二鈉比色法[9]測土壤磷酸酶活性。稱取5.0000g過100目篩的風(fēng)干土樣于50mL三角瓶中，加入0.25mL甲苯，再加入20mL 0.5%磷酸苯二鈉溶液，充分振蕩后于37℃溫育2h，對每個樣品設(shè)用20mL水代替基質(zhì)作有土無基質(zhì)對照，整個實驗設(shè)無土無基質(zhì)對照。取培養(yǎng)后的濾液5mL置于50mL容量瓶，加入蒸餾水20mL，再加入0.25mL氯化銨-氫氧化銨緩沖液（pH9.8），0.5mL 2% 4-氨基氨替比林液，0.5mL 8%鐵氰化鉀液，每次加入試劑都要充分搖勻，最后定容至刻度，15min內(nèi)在分光光度計上于510nm處進行比色測定。每個樣品3個重復(fù)。

1.3 土壤中有機化合物的提取

每組稱取根際土10 g，加入100 mL蒸餾水溶解，然后振蕩離心，上清液即為根分泌物，濃縮后至于具塞錐形瓶中，加入正己烷50 mL淹沒樣品，20 ℃超生浸提30 min（SK2510HP超聲波清洗儀，上海右一儀器有限公司），離心、過濾得上清液，20 ℃旋轉(zhuǎn)濃縮至1 mL（R-201濃縮儀，上海申順生物科技有限公司），過0.45μm微孔有機濾膜后，作GC-MS檢測。

1.4 GC-MS分析

檢測儀器為安捷倫氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（氣相色譜儀Agilent Technologies 7890；質(zhì)譜檢測器Agilent Technologies 5975）。采用電子轟擊源，轟擊電壓70eV，掃描范圍M/Z30-500，掃描速度0.4s掃描全程。毛細(xì)管柱：SE-54（30 m×0. 25 mm ×0. 25 μm），離子源溫度：230 ℃；進樣口溫度：250 ℃；接口溫度：280 ℃；箱溫度程：70 ℃，以10 ℃/min升至270 ℃；載氣為He，流量1mL/min，不分流進樣，進樣量為1 μL。通過質(zhì)譜分析和計算機標(biāo)準(zhǔn)普庫檢索，并采用峰面積歸一化法確定各化合物的相對百分含量。

2 結(jié)果分析

2.1 連作后土壤理化性質(zhì)的變化

白術(shù)活株根際土的pH值和磷酸酶活性低于死株的根際土，但活株根際土的有機質(zhì)含量高于死株根際土如圖1。土壤理化性質(zhì)的差異說明了白術(shù)在不同時期會分泌不同的根泌物，這些根泌物會影響土壤的理化性質(zhì)。同時，土壤也會反過來影響白術(shù)的生長。隨著連作年限的上升，白術(shù)根際土的pH明顯升高，而磷酸酶活性則表現(xiàn)出先上升，在第三年下降的趨勢。有機質(zhì)的含量變化不大，范圍為2.5-2.66%。與非根際土相比，根際土的pH和磷酸酶活性均上升。

利用GC-MS對不同生長年限、不同生長狀態(tài)的杭白術(shù)根際土壤浸提液進行質(zhì)譜掃描，質(zhì)譜如圖2所示。各色譜峰通過計算機自動在Willey等質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫中查找，匹配度在80%以上的有機化合物共16種如表1，主要為酚類（3種）、芳香烴（3），烷烴（3），烴類衍生物（2）、醇類（2）、酯類（1）、胺類（1），除S-氰戊菊酯、氟啶胺和谷甾醇外，其余13種均為化感物質(zhì)。經(jīng)文獻調(diào)查，S-氰戊菊酯為農(nóng)藥殘留物[10]，氟啶胺是一種保護性殺菌劑，對誘發(fā)杭白術(shù)白絹病的致病菌有抑制作用[11]。谷甾醇具有抑菌活性[12]，除此之外，其余13種均為化感物質(zhì)。

2.2 連作對白術(shù)根際分泌物的影響

在種植1年的白術(shù)根際土中檢測到了5種化合物，包括酚類3種、烯烴類1種、醛類1種，而連作白術(shù)根際土中也檢測到這5種物質(zhì)，這些分泌物的含量隨著種植年限的增加均表現(xiàn)出下降的趨勢，說明連作后白術(shù)根分泌3，5-二叔丁基-4-羥基苯甲醛、惹烯、2，4-二叔丁基苯酚、2，6-二叔丁基對甲酚、2，4-二（1-苯乙基）-苯酚等物質(zhì)的量會減少。此外，在連作白術(shù)根際土中，除了這5種物質(zhì)以外，還檢測到糞甾烷-3-醇及8-異丙基-1，3-二甲基菲、S-氰戊菊酯，這3種物質(zhì)的含量均表現(xiàn)出連作3年比連作2年更高，說明連作會促進這些物質(zhì)分泌。

2.3 白術(shù)死亡后根際分泌物的變化

連作后，白術(shù)會產(chǎn)生連作障礙。比較死苗和活苗白術(shù)的根際分泌物組分發(fā)現(xiàn)，死亡白術(shù)根際土中化合物種類明顯增加，連作3年的白術(shù)死苗中檢測到15物質(zhì)，而活苗中僅有8種；連作2年的死苗中檢測到9種物質(zhì)，活苗僅6種，可見白術(shù)的死苗與這些化合物有著必然的聯(lián)系，連作促進了白術(shù)化感物質(zhì)的分泌。連作2年的白術(shù)死苗根際比活株中多了3種化合物，分別為8-異丙基-1，3-二甲基菲、氟啶胺、糞甾烷-3-醇；而連作3年的白術(shù)死苗根際則比活株多了7種化合物，分別為2，2'，5，5'-四甲基聯(lián)苯、對二甲苯、2，6，10，14，18-正二十二烷、二十九烷、對氯苯基-6，8-二氯-7-苯并吡啶、氟啶胺、谷甾醇，這些多出的化合物必定與連作障礙相關(guān)。此外，2，6-二叔丁基對甲酚的百分比在連作3年的死苗根際最高，其含量是連作3年活苗的26倍，連作2年活苗的8倍，是正常種植白術(shù)的6倍，值得進一步關(guān)注。2，4-二（1-苯乙基）-苯酚在死苗根際的含量均比活苗高，而2，4-二叔丁基苯酚則在死苗根際的含量比活苗低。

2.4 根際土壤與非根際土壤中化合的差異

在白術(shù)非根際土中一共檢測到了8種化合物，有7種與白術(shù)根際相同，說明這些化合物可能是土壤中共有的物質(zhì)。其中，1-乙苯基-1-苯基乙烷是白術(shù)非根際其特有的。與非根際土相比，種植杭白術(shù)后的土壤中新出現(xiàn)了7種化合物，分別是2，2'，5，5'-四甲基聯(lián)苯、對二甲苯、8-異丙基-1，3-二甲基菲、對氯苯基-6，8-二氯-7-苯并吡啶、氟啶胺、S-氰戊菊酯。

3 討論

研究表明，根泌物對土壤顆粒大小、分布情況、吸附性、穩(wěn)定性及親水性等物理性質(zhì)均有顯著影響[13]。根泌物還能影響根際土壤pH，究其原因，主要是因為植物根對陰陽離子吸收不均衡[14]、以HCO3-、Cl-和SO42-為主植物根泌物中有機陰離子的釋放[15]、根泌物中含草酸、檸檬酸和蘋果酸等有機酸[17-20]、植物根部的呼吸作用[21-22]等。我們研究發(fā)現(xiàn)，白術(shù)連作死苗的根際pH明顯高于活苗，說明白術(shù)根泌物分泌會提高根際土壤酸度，而死亡以后這種影響也隨之消失。

白術(shù)忌連作，其種過之地須隔 5-10 年才能再種，否則其病害發(fā)病率大大提高，嚴(yán)重時甚至絕苗絕收。安信伯等[10]研究結(jié)果表明，重茬白術(shù)易患根腐病，所引起的死苗率達(dá)50%以上，重病田則達(dá)90%。我們在連作1年、2年的土壤上繼續(xù)種植白術(shù)，發(fā)現(xiàn)其死苗率也在一半以上。比較不同連作年限的白術(shù)活苗根分泌物發(fā)現(xiàn)，無論連作與否，或連作2年還是3年，其活苗中的根泌物種類基本相同，均包括3，5-二叔丁基-4-羥基苯甲醛、惹烯、2，4-二叔丁基苯酚、2，6-二叔丁基對甲酚、2，4-二（1-苯乙基）-苯酚等物質(zhì)，差異主要體現(xiàn)在分泌的量不同。連作后這些化感物質(zhì)分泌量明顯減少，而且這些物質(zhì)在白術(shù)的非根際土中也有檢測到，說明這些化合物含量的增加或減少應(yīng)該不是導(dǎo)致白術(shù)死亡的主要原因，但2，6-二叔丁基對甲酚例外。它雖然在所有樣品中均檢測到，但在死苗中的含量遠(yuǎn)超活苗，而且隨著連作年限增加含量急劇上升，說明2，6-二叔丁基對甲酚是連作白術(shù)的化感自毒物質(zhì)，它的高分泌量應(yīng)該是白術(shù)死苗的主要原因之一。

大量報道稱，酚類物質(zhì)具有一定自毒作用，可抑制種子的萌發(fā)、幼苗的生長、以及通過影響核酸和蛋白質(zhì)合成而抑制植物的生長[11]。張新慧等[12]發(fā)現(xiàn)2，4-二叔丁基苯酚對?？浦参锲【苹℉umulus lupulus具有強烈的化感自毒作用。高濃度的2， 4 - 二叔丁基苯酚作用下啤酒花根際微生物數(shù)量下降，多樣性指數(shù)降低，其地上生產(chǎn)力也相對較低。馬云華[13]研究表明，酚酸類物質(zhì)能夠刺激真菌的繁殖與生長，或是為真菌的生長提供了有效碳源，而連作白術(shù)大部分死亡原因是白術(shù)感染了真菌土傳病害如根腐病、白絹病等[14]。此外，酚類物質(zhì)還可破壞細(xì)胞的完整性使病原菌入侵[15]。白術(shù)之所以死亡，是因為連作后白術(shù)向土壤中分泌了高濃度的2，6-二叔丁基對甲酚，該化感物質(zhì)的存在促進了真菌尤其是致病真菌在白術(shù)根部土壤中的生長和富集，同時由于酚類物質(zhì)的存在白術(shù)根部細(xì)胞遭到破壞，致使病菌更容易入侵植物根部，最終導(dǎo)致白術(shù)的連作障礙。具體機制還有待于下一步研究證實。

在檢測到的白術(shù)根泌物中，大部分均為化感物質(zhì)，這些物質(zhì)可通過浸析、揮發(fā)、植物殘體分解和根系分泌等方式進入環(huán)境中[25-26]。其中，根系分泌物種類復(fù)雜，其組成和含量的變化是植物響應(yīng)環(huán)境脅迫最直接、最明顯的反應(yīng)[27-28]。我們前期研究發(fā)現(xiàn)，白術(shù)栽植土壤的有機溶劑浸提液對白術(shù)幼苗生長有顯著抑制作用，推測導(dǎo)致白術(shù)連作障的原因很可能是白術(shù)的自毒作用。GC-MS檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)，發(fā)生連作障礙的白術(shù)死苗根際中的確分離到了很多化合物，其化合物的種類遠(yuǎn)超過未發(fā)生連作障礙的白術(shù)活苗。對照白術(shù)活苗和死苗根際、不同連作白術(shù)活苗根際，以及白術(shù)根際與非根際中的各類化合物的組成與含量，綜合分析認(rèn)為，除2，6-二叔丁基對甲酚外，四甲基聯(lián)苯、對二甲苯以及對氯苯基-6，8-二氯-7-苯并吡啶等化感物質(zhì)的分泌可能也是導(dǎo)致白術(shù)死苗的主要原因。

4 結(jié)語

由于根際土壤中化合物的種類較多，包含不同極性的化學(xué)成分，本研究采用GC-MS主要分析了杭白術(shù)根際土壤化合物中非極性成分。研究結(jié)果表明，連作后很多白術(shù)會向土壤分泌一些化感物質(zhì)，其中2，6-二叔丁基對甲酚、四甲基聯(lián)苯、對二甲苯以及對氯苯基-6，8-二氯-7-苯并吡啶，由于這些物質(zhì)的存在，最終導(dǎo)致白術(shù)發(fā)生連作障礙而死苗，其具體機制有待進一步研究證實。

參考文獻：

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（2010版一部）[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010：274.

[2]孫燕妮.白術(shù)的藥理實驗及臨床研究進展[J].中國中醫(yī)藥科技，1999，6（4）：279.

[3]張子龍，王文全.植物連作障礙的形成機制及其調(diào)控技術(shù)研究進展[J].生物學(xué)雜志，2010，27（5）：69-71.

[4]張重義，林文雄.藥用植物的化感自毒作用與連作障礙[J].中國生態(tài)農(nóng)業(yè)學(xué)報，2009，17（1）：189.

[5]徐建中，王志安，孫乙銘等.白術(shù)自毒作用研究[J].中國現(xiàn)代中藥，201l，13（11）：5-27，48.

[6]涂書新，吳佳.植物根系分泌物研究方法評述[J].生態(tài)環(huán)境學(xué)報，2010，19（10）：2493-2500.

[7]鮑士旦.土壤農(nóng)化分析[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1999：68.

[8]魯如坤.土壤農(nóng)業(yè)化學(xué)分析方法[M].北京：中國農(nóng)業(yè)科技出版社，2000：56-58.

[9]關(guān)松蔭.土壤酶及其研究方法[M]. 北京： 中國農(nóng)業(yè)出版社，1986：26-28.

[10]王軍，熊傳武，萬宇.S-氰戊菊酯在甘藍(lán)和土壤中的殘留分析方法[J].安徽化工，2007，33（3）：65-66.

[11]覃麗萍，黃思良.氟啶胺與粘帚霉對防治榮莉白絹病的協(xié)同增效作用[C].北京：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院出版社，2006：78-81.

[12]于玲玲.白術(shù)化學(xué)成分及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[D].沈陽：遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，2010：56.

[13]馬云華，王秀峰，魏珉等.黃瓜連作土壤酚酸類物質(zhì)積累對土壤微生物和酶活性的影響[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報，2005，16（11）：2149-2153.

[14]趙寬，吳沿友.4種植物幼苗根莖葉及根系分泌物中低分子量有機酸的特征[J].西北植物學(xué)報，2014，34（5）：1002-1007.DOI：10.7606/j.issn.1000-4025.2014.05.1002.

[15]張騰，饒良懿，呂坤瓏等.土壤呼吸影響因素研究進展[J].廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2012，39（8）：64-67.

[16]安信伯，李德新，姚克榮等.白術(shù)根腐病發(fā)生規(guī)律研究[J].河北林果研究， 2007，22（1）：65-68.

[17]李霞.酚類化合物對植物的化感作用[J].長春師范學(xué)院學(xué)報：自然科學(xué)版，2006， 25（2）：40-42.

[18]張新慧，王霞霞，張恩和.2，4-二叔丁基苯酚對啤酒花根際土壤微生物數(shù)量的化感效應(yīng)研究[J].中國生態(tài)農(nóng)業(yè)學(xué)報，2008，16（6）：1606-1608.

[19]李培棟，王興祥，李奕林，等.連作花生土壤中酚酸類物質(zhì)的檢測及其對花生的化感作用[J].生態(tài)學(xué)報， 2010，30（8）：2128-2134.

[20]Raaijmakers J M， Paulitz C T， Steinberg C， et al. The rhizosphere： a playground and battlefield for soilborne pathogens and beneficial microorganisms[J]. Plant Soil，2009，321（1-2）： 341-361

[21]S.A. MATERECHERA， A.R. DEXTER， A.M. ALSTON. Formation of aggregates by plant roots in homogenised soils[J]. Plant and Soil， 1992，142：69-79.

[22]劉玉，魏潔，黃雄飛，等.紅樹植物桐花樹、秋茄的有機酸類根系分泌物組成及含量[J].應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報，2014，20（5）：850-855.

[23]張淑香，高子勤.連作障礙與根際微生態(tài)研究根系分泌物與酚酸物質(zhì)[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報，2000，11（1）：152-156.

[24]薛文悅，戴偉，王樂樂，等.北京山地幾種針葉林土壤酶特征及其與土壤理化性質(zhì)的關(guān)系[J].北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報，2009，31（4）：90-96.

[25]范利超.茶園土壤呼吸及其組分研究[D].北京：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院， 2015：66-68.

[26]董利蘋，曹靖，李先婷，等.不同耐鹽植物根際土壤鹽分的動態(tài)變化[J].生態(tài)學(xué)報，2011，31（10）：2813-2821.

[27]田昕竹，陳世寶，王學(xué)東，等.土壤溶液性質(zhì)對Zn的形態(tài)變化及其微生物毒性的影響[J].中國環(huán)境科學(xué)，2014，（10）：2602-2609.

[28]陳紹莉，周寶利.化感物質(zhì)的提取、分離及鑒定方法的研究[J].上海蔬菜， 2010（4）：20-21.

[29]Zhang H C， Liu J M， Chen H M， et al. Up-Regulation of Licochalcone A Biosynthesis and Secretion by Tween 80 in Hairy Root Cultures of Glycyrrhiza uralensis Fisch Molecular Biotechnology. 2011，47（1）： 50-56

[30]沈宏，嚴(yán)小龍.根系分泌作用及其誘導(dǎo)機制[J].土壤與環(huán)境， 2001，10（4）：339-342.

[31]Sarah A. Ficko， Allison Rutter， Barbara A. Zeeb. Effect of pumpkin root exudates on ex situ polychlorinated biphenyl （PCB） phytoextraction by pumpkin and weed species. Environ Sci Pollut Res，2011，（18）：536-1543.