孫龍，韓定角，伍少欽，曹玉美，于俊勇，顏輝孟

（廣西農(nóng)墾永新畜牧集團(tuán)有限公司良圻原種豬場(chǎng)，廣西南寧530317）

血清馴化及疫苗馴化對(duì)豬場(chǎng)藍(lán)耳病控制效果的對(duì)比

孫龍，韓定角，伍少欽，曹玉美，于俊勇，顏輝孟

（廣西農(nóng)墾永新畜牧集團(tuán)有限公司良圻原種豬場(chǎng)，廣西南寧530317）

本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)豬場(chǎng)6年的生產(chǎn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，對(duì)比了血清馴化和疫苗馴化在規(guī)?；i場(chǎng)藍(lán)耳病控制過(guò)程中產(chǎn)生的不同影響，旨在探索一種安全可行的藍(lán)耳病陽(yáng)性場(chǎng)控制方案。應(yīng)用疫苗和2種毒株進(jìn)行全群馴化，通過(guò)馴化后4個(gè)月的生產(chǎn)數(shù)據(jù)分析，結(jié)合臨床表現(xiàn)，得出：疫苗毒株、A毒株、B毒株3個(gè)不同毒株在馴化時(shí)期的平均活仔率分別為89.06%、76.25%、81.15%，毒力大小分別為A毒株＞B毒株＞疫苗毒株；全群血清馴化后的母豬場(chǎng)一般穩(wěn)定3年以上不發(fā)病，疫苗馴化場(chǎng)每年至少要全群免疫1～2次，否則容易出現(xiàn)生產(chǎn)不穩(wěn)定。結(jié)論：兩種馴化方式對(duì)豬生產(chǎn)水平的影響不大，但可以節(jié)省疫苗注射成本。

藍(lán)耳?。谎羼Z化；疫苗免疫；凈化策略

豬藍(lán)耳?。ㄘi繁殖與呼吸綜合征，PRRS）是由豬藍(lán)耳病病毒（PRRSV）引起的一種以母豬繁殖障礙和仔豬呼吸道疾病為主要特征的傳染病，是困擾養(yǎng)豬業(yè)的主要疾病之一。豬藍(lán)耳病是一種免疫抑制性疾病，很少能夠直接致死易感動(dòng)物，但能通過(guò)破壞動(dòng)物的免疫系統(tǒng)，降低動(dòng)物的免疫力，導(dǎo)致其他細(xì)菌和病毒入侵，并引起發(fā)熱和其他一系列癥狀，這也是藍(lán)耳病難以控制的原因之一。當(dāng)前養(yǎng)豬生產(chǎn)中，除少數(shù)生產(chǎn)場(chǎng)能通過(guò)空氣過(guò)濾等措施保持陰性外，其他場(chǎng)主要是通過(guò)疫苗免疫和血清馴化這兩種方法對(duì)豬藍(lán)耳病進(jìn)行控制與凈化。馴化就是控制藍(lán)耳病病毒在豬群中穩(wěn)定感染，既不清除，也不暴發(fā)。馴化是手段，保持豬群穩(wěn)定是目標(biāo)。馴化手段主要是通過(guò)統(tǒng)一感染，保證只有1個(gè)血清型藍(lán)耳病占主導(dǎo)，感染源抗原包括發(fā)病豬血清、商業(yè)化疫苗、本場(chǎng)分離的藍(lán)耳病自家苗。同時(shí)盡快清除病毒血癥，抑制藍(lán)耳病帶毒豬排毒，將藍(lán)耳病的感染維持在一個(gè)不暴發(fā)、不影響生產(chǎn)成績(jī)的目標(biāo)內(nèi)，這其中還包括淘汰、飼料中添加抗生素控制臨床癥狀、封群與部分清群等措施。疫苗免疫和血清馴化一般會(huì)在兩種情況下引入，一是后備豬入群時(shí)，需要通過(guò)同步感染，使后備豬產(chǎn)生整齊的免疫抗體，避免混入母豬群后引起后備豬群的不穩(wěn)定；另一種情況是當(dāng)母豬場(chǎng)出現(xiàn)藍(lán)耳病活躍，流產(chǎn)、木乃伊胎比例高，保育豬死亡率高時(shí)，同步感染可以使豬群快速獲得免疫抗體，較快地穩(wěn)定生產(chǎn)成績(jī)。

1 疫苗馴化和血清馴化

1.1 馴化毒株的選擇采用德國(guó)某公司弱毒疫苗進(jìn)行疫苗馴化，該疫苗選用的毒株為RespPRRS MLV經(jīng)典弱毒株。通過(guò)對(duì)近5年來(lái)收集的藍(lán)耳病病毒的400余條ORF5序列進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)主要存在2個(gè)優(yōu)勢(shì)毒株，分別命名為A、B，2個(gè)毒株之間的同源性?xún)H為83.6%，2株病毒與其他疫苗毒株ORF5的同源性見(jiàn)表1。

1.2 馴化操作規(guī)程

1.2.1 疫苗馴化免疫方式：全群母豬免疫2次，間隔21d加強(qiáng)免疫，肌肉注射，2mL/頭。

表1 A、B兩個(gè)毒株與疫苗毒株ORF5同源性對(duì)比

1.2.2 田間毒株馴化無(wú)菌采集藍(lán)耳病陽(yáng)性仔豬血清，通過(guò)RT-PCR技術(shù)排除偽狂犬病野毒和豬瘟野毒的感染。用RT-PCR技術(shù)測(cè)定血清中的藍(lán)耳病病毒含量，按照病毒拷貝數(shù)推算，讓血清中的病毒數(shù)跟每頭份疫苗的病毒數(shù)相同。確定每頭豬注射血清4μL，用4℃無(wú)菌生理鹽水稀釋?zhuān)⑻砑与p抗。每頭豬肌肉注射血清生理鹽水溶液2mL，間隔48 h注射1次，共馴化2次。

在疫苗馴化或田間毒株馴化的3 d前，于飼料中添加“紐氟羅”和金霉素各2 kg/t進(jìn)行保健，持續(xù)添加14 d，用于控制馴化帶來(lái)的呼吸道感染。

2 結(jié)果

2.1 馴化后臨床癥狀比較不同毒株的藍(lán)耳病病毒因毒力不盡相同，在全群馴化時(shí)也會(huì)具有不同的臨床表現(xiàn)。通過(guò)表2可以看出，A毒株對(duì)豬群的影響最大，引起3%的母豬流產(chǎn)和12.25%的豬食欲減退，并導(dǎo)致0.1%的母豬死亡；B毒株毒力介于A毒株與疫苗株之間，對(duì)流產(chǎn)的影響很小，沒(méi)有出現(xiàn)死亡情況；疫苗株對(duì)豬群產(chǎn)生的影響最小，豬群沒(méi)有明顯波動(dòng)。

表2 3種馴化方式的臨床表現(xiàn)比較

2.2 馴化后生產(chǎn)數(shù)據(jù)對(duì)比進(jìn)行全群馴化之后，藍(lán)耳病的影響會(huì)持續(xù)3～4個(gè)月，由于病毒的感染導(dǎo)致這段時(shí)間的繁殖水平會(huì)相對(duì)降低。通過(guò)表3～表5可以看出，使用疫苗株馴化對(duì)生產(chǎn)成績(jī)的影響最小。A毒株對(duì)胎兒的影響主要在24～30 d和妊娠的中后期，此時(shí)分別是胚胎著床和胎兒快速生長(zhǎng)的時(shí)期，藍(lán)耳病的感染導(dǎo)致豬體溫升高，胚胎存活率下降。疫苗毒株、A毒株、B毒株3個(gè)不同毒株在馴化時(shí)期的平均活仔率分別為89.06%、76.25%、81.15%，由此可以看出毒力大小分別為A毒株＞B毒株＞疫苗毒株。

表3 使用A毒株馴化后的繁殖數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)（A場(chǎng)）

表4 使用B毒株馴化后的繁殖數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)（B場(chǎng)）

表5 某場(chǎng)使用疫苗株馴化后的繁殖數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)（C場(chǎng)）

圖1 田間毒株馴化抗體消長(zhǎng)跟蹤曲線（B場(chǎng)）

圖2 疫苗株馴化抗體消長(zhǎng)跟蹤曲線（C場(chǎng)）

2.3 馴化后抗體消長(zhǎng)規(guī)律的跟蹤兩種途徑馴化后，固定30頭母豬進(jìn)行抗體的持續(xù)監(jiān)測(cè)，每個(gè)月檢測(cè)一次抗體變化，得到圖1、圖2所示曲線。通過(guò)連續(xù)一年的檢測(cè)，平均抗體水平大約在馴化后的6個(gè)月轉(zhuǎn)為陰性，但此時(shí)仍有部分母豬抗體為陽(yáng)性，8～10個(gè)月的時(shí)間可以讓絕大多數(shù)的母豬抗體轉(zhuǎn)為陰性，此時(shí)如果能夠維持好生物安全，則后代可呈現(xiàn)雙陰性。兩種馴化方式在抗體衰減規(guī)律方面并無(wú)較大差異，最終都可以在一段時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)抗體的轉(zhuǎn)陰。

2.4 不同馴化方式對(duì)后備豬生產(chǎn)的影響后備豬的引入環(huán)節(jié)是控制藍(lán)耳病的關(guān)鍵點(diǎn)。后備豬入群前，通過(guò)連續(xù)6年分別使用疫苗株和A毒株進(jìn)行后備豬入群前的馴化，馴化后2～3個(gè)月方可引入生產(chǎn)母豬場(chǎng)。這樣可最大程度減少后備豬對(duì)生產(chǎn)母豬群的影響。表6、表7的數(shù)據(jù)表明，使用A毒株馴化和使用疫苗株馴化在生產(chǎn)上的差異不大，A毒株馴化比疫苗株馴化具有略高的活仔數(shù)和總仔數(shù)，配種分娩率分別為87.41%、86.28%，基本持平；疫苗馴化的平均活仔率高于A毒株馴化，分別為89.1%、87.5%。

表6 使用A毒株進(jìn)行后備豬馴化的近6年生產(chǎn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)（A場(chǎng)）

表7 使用疫苗株進(jìn)行后備豬馴化的近6年生產(chǎn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)（C場(chǎng)）

3 討論與結(jié)論

3.1 藍(lán)耳病病毒經(jīng)過(guò)呼吸道進(jìn)入豬體，通過(guò)與肺泡巨噬細(xì)胞（PAM）受體結(jié)合，進(jìn)入肺泡巨噬細(xì)胞并大量繁殖，導(dǎo)致PAM裂解、死亡。肺泡巨噬細(xì)胞的大量破壞使其對(duì)異物的非特異性吞噬清除作用大為降低，在不利條件下易繼發(fā)副豬嗜血桿菌病、鏈球菌病、巴氏桿菌病、肺炎支原體病等細(xì)菌性疾病和豬瘟、偽狂犬病等病毒性疾病。另外，病毒進(jìn)入機(jī)體后引起的嚴(yán)重的全身炎癥反應(yīng)會(huì)導(dǎo)致母豬流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎及木乃伊胎，嚴(yán)重影響豬場(chǎng)生產(chǎn)。

3.2 在當(dāng)前養(yǎng)豬條件下，保持場(chǎng)內(nèi)藍(lán)耳病病毒株的單一性是控制陽(yáng)性場(chǎng)藍(lán)耳病的最合理途徑，而尋找一株優(yōu)勢(shì)毒株是實(shí)現(xiàn)單一性的第一步。我們通過(guò)對(duì)ORF5基因序列進(jìn)行比對(duì)分析，尋找了2株優(yōu)勢(shì)毒株，并在不同的場(chǎng)做了血清馴化，結(jié)果顯示毒株B比毒株A具有更低的毒力，對(duì)生產(chǎn)的影響也更小。確立優(yōu)勢(shì)毒株后，堅(jiān)持后備豬入群前的血清馴化，即可以實(shí)現(xiàn)場(chǎng)內(nèi)毒株的單一化。而德國(guó)進(jìn)口疫苗的毒力更弱，進(jìn)行全群血清馴化時(shí)能夠保持場(chǎng)內(nèi)穩(wěn)定，不會(huì)出現(xiàn)大的生產(chǎn)損失。

3.3 后備豬引入母豬場(chǎng)前的馴化是控制藍(lán)耳病必不可少的環(huán)節(jié)。研究表明，藍(lán)耳病陽(yáng)性豬的排毒時(shí)間大約有14周，因此需要足夠的時(shí)間隔離才能將后備豬引入母豬場(chǎng)。單一的病毒毒株使得生產(chǎn)母豬具有較好的交叉免疫保護(hù)力，持續(xù)使用血清馴化和疫苗馴化手段對(duì)生產(chǎn)場(chǎng)進(jìn)行馴化，2～3個(gè)月后檢測(cè)抗原合格即可引入母豬場(chǎng)。6年的生產(chǎn)數(shù)據(jù)表明，兩種馴化方式在活仔率、分娩率等方面略有差異，但差異不顯著?？梢?jiàn)在后備豬階段使用不同種馴化方式進(jìn)行馴化對(duì)母豬場(chǎng)的影響并不大，但可以節(jié)省所需疫苗的成本。

3.4 穩(wěn)定的藍(lán)耳病陽(yáng)性場(chǎng)離不開(kāi)嚴(yán)格的生物安全措施，保持單一的病毒毒株更是依賴(lài)于生物安全，因此嚴(yán)格地執(zhí)行空欄消毒、全進(jìn)全出等生物安全措施具有十分關(guān)鍵的作用。

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S858.284.5

B

1001-8964（2017）05-0030-04

2017-03-02

優(yōu)質(zhì)瘦肉型配套系種豬選育與產(chǎn)業(yè)化示范（桂科重14121003-2-3）

孫龍（1988-），男，碩士研究生，研究方向：規(guī)?；i場(chǎng)主要疫病的控制與凈化。