馬慧玲，王雷之，李 艷，商愛國，黨安坤，孫圣福，蘭鄒然

(1. 山東省動物疫病預(yù)防與控制中心，山東濟南 250022；2. 臨沂市畜牧檢測中心，山東臨沂 276000；3. 莒南縣動物疫病預(yù)防控制中心，山東莒南 276002；4. 濟寧市動物疫病預(yù)防與控制中心，山東濟寧 272000）

WHO墨爾本流感中心對野生鳥類禽流感的監(jiān)測

馬慧玲1，王雷之2，李 艷3，商愛國4，黨安坤1，孫圣福1，蘭鄒然1

(1. 山東省動物疫病預(yù)防與控制中心，山東濟南 250022；2. 臨沂市畜牧檢測中心，山東臨沂 276000；3. 莒南縣動物疫病預(yù)防控制中心，山東莒南 276002；4. 濟寧市動物疫病預(yù)防與控制中心，山東濟寧 272000）

根據(jù)墨爾本世界衛(wèi)生組織（WHO）流感參考和研究合作中心的監(jiān)測結(jié)果，近10年來，澳大利亞野生鳥類流感病毒監(jiān)測的年平均陽性率均大于1.0%，2005—2012年分離到了除H14亞型外的所有禽流感亞型病毒，其中最多的是H5亞型低致病性流感病毒，共94株（21.36%），監(jiān)測中未發(fā)現(xiàn)高致病性禽流感病毒。本文總結(jié)了該流感中心的機構(gòu)情況、樣品處理流程和野生鳥類禽流感監(jiān)測計劃，以期對我國禽流感防控工作提供借鑒。

澳大利亞；野生鳥類；禽流感；監(jiān)測；防控

近年來，全球冬季高致病性禽流感疫情暴發(fā)嚴(yán)重。2014—2015年高致性禽流感疫情在美國暴發(fā)，給美國的養(yǎng)雞業(yè)帶了巨大的經(jīng)濟損失[1]。2016年冬季該病又席卷歐洲，危害極大。這些禽流感疫情與野生鳥類的傳播不無關(guān)系，野生鳥類在禽流感傳播中起著越來越重要的作用。因為隨著自然界中禽流感病毒的增多，受到感染的野生鳥類也越來越多，攜帶禽流感病毒的鳥類除了自身是受害者外[2]，還會自然地按照一定規(guī)律進(jìn)行著重復(fù)的遷徙活動[3]。全球主要的野生鳥類遷徙路線約有10條（圖1）。野生鳥類沿著遷徙路線可能會受到禽流感病毒感染，從而攜帶禽流感病毒，同時又通過遷徙傳播著禽流感病毒，成為全球禽流感傳播的重要媒介動物。墨爾本世界衛(wèi)生組織流感參考和研究合作中心（WHO Collaborating Centre for Reference & Research on Infl uenza，以下簡稱為WHO墨爾本流感中心）開展了野生鳥類的禽流感監(jiān)測，由于澳大利亞與我國共享有遷徙路線，因此本文對監(jiān)測情況予以歸納總結(jié)，以期對我國野生鳥類禽流感監(jiān)測提供借鑒。

圖1 全球主要野鳥遷徙路線

1 WHO墨爾本流感中心簡介

世界衛(wèi)生組織（WHO）與全球80個國家有合作，約有超過700家合作中心，其中在西太平洋地區(qū)有190個。WHO最早的全球流感監(jiān)測和應(yīng)急響應(yīng)系統(tǒng)網(wǎng)絡(luò)（GISN）始建于1952年，其6個合作中心分別在墨爾本、東京、北京、倫敦、亞特蘭大和孟菲斯，WHO墨爾本流感中心是這6個中心之一。該中心的前身墨爾本聯(lián)邦血清實驗室（CSL），1951年被指定為WHO區(qū)域流感中心，于1992年被指定為WHO流感參考和研究合作中心（南半球的第1個合作中心，也是第3個被指定的全球合作中心）。該中心現(xiàn)有員工25名，大多數(shù)工作人員負(fù)責(zé)監(jiān)測活動和疫苗種毒準(zhǔn)備工作，且獲得了澳大利亞政府衛(wèi)生部的支助。該中心的主要工作包括：分析來自世界各地流感病毒樣品和病毒分離株，監(jiān)視哪些病毒株在世界各地循環(huán)，參與全球流感疫苗研發(fā)，向全球國家流感中心提供培訓(xùn)和實驗室支持，開展流感檢測、預(yù)防和治療的改進(jìn)研究等。

2 中心樣品處理流程

WHO墨爾本流感中心接收的禽流感樣品進(jìn)入實驗室后，先通過實時PCR或測序進(jìn)行快速鑒定，然后將樣品接種MDCK或MDCK-SIAT-1細(xì)胞系進(jìn)行培養(yǎng)，分離流感病毒，或者接種雞胚進(jìn)行病毒分離，對分離到的病毒株通過抗原分析、基因序列測定 、抗病毒藥物敏感性研究、篩選敏感抗病毒藥物、制備雪貂抗血清、確定病毒的抗原和遺傳特性等方面研究，完成流感監(jiān)測任務(wù)（圖2）。由于病毒株背景清晰，所以有潛力的新毒株將成為全球流感防控的疫苗候選株。在選擇疫苗候選株時還需要進(jìn)行一系列工作，如通過血凝抑制和病毒中和試驗，來比較毒株的培養(yǎng)滴度。這一點對于疫苗生產(chǎn)也很重要，因為只有滴度高的毒株，才能生產(chǎn)抗原含量高的疫苗。還需要用流行病學(xué)、疫苗有效性、模型預(yù)測等方面數(shù)據(jù)，研究全病毒序列，為全球流感防控提供技術(shù)儲備和技術(shù)支持。

圖2 WHO墨爾本流感中心的樣品處理流程

3 澳大利亞國家禽流感野生鳥類監(jiān)測計劃

澳大利亞制定了國家禽流感野生鳥類監(jiān)測計劃（NAIWB），參與者包括聯(lián)邦政府、州政府相關(guān)部門以及非政府部門的私有參與者等，而WHO墨爾本流感中心屬于參與監(jiān)測工作的非政府部門。

該計劃的主動監(jiān)測是基于風(fēng)險的便利抽樣監(jiān)測，樣品來源于健康的野生活鳥和被獵殺的野生鳥類，選擇靠近家禽與人類活動的地點開展監(jiān)測，采樣地點都是提前設(shè)定的；與此同時，在被動監(jiān)測野鳥類出現(xiàn)不明原因發(fā)病和死亡事件時，樣品由公眾、執(zhí)業(yè)獸醫(yī)、大學(xué)科研人員、動物園工作人員等通過野生動物和動物園協(xié)調(diào)員系統(tǒng)提交。

4 WHO墨爾本流感中心流感監(jiān)測結(jié)果

4.1 2005—2015年禽流感監(jiān)測結(jié)果

WHO墨爾本流感中心2005—2015年禽流感的監(jiān)測結(jié)果顯示（表1），近10年來，每年的野生鳥類流感病毒監(jiān)測陽性率均大于1.0%，最低為2006—2008年的1.1%，最高為2014—2015年的4.0%，平均為2.1%。監(jiān)測結(jié)果顯示，2010年之前流感病毒監(jiān)測陽性率均低于2.0%，而之后基本要高于3.0%，這與近幾年來全球禽流感的流行存在一定的相關(guān)性。

表1 2005—2015年WHO墨爾本流感中心野鳥禽流感的監(jiān)測結(jié)果

4.2 2005—2012年分離到的禽流感病毒亞型

2005—2012年，WHO墨爾本流感中心分離到了除H14以外的其 他H1～H16亞型禽流感病毒（圖3）。其中，最多的是H5亞型低致病性流感病毒，共94株（21.36%）；其次為H6亞型，共69株（15.68%）；再其次是H3亞型64株（14.55%）和H9亞型34株（7.73%）。目前倍受關(guān)注的H7亞型流感病毒排在約第10位，共分離到了17株（3.86%）[4]（表2）。從以上結(jié)果可以看出，野生鳥類幾乎攜帶了所有亞型的流 感病毒。由于野鳥傳播禽流感具有極高的不確定性，這對于禽流感的控制無疑是一種挑戰(zhàn)。

圖3 2005—2012年WHO墨爾本流感中心檢測到的流感病毒亞型

表2 2005—2015年WHO墨爾本流感中心H5 / H7亞型低致病性流感檢測結(jié)果

4.3 近10年H5 / H7亞型低致病性流感檢測結(jié)果

近10年，WHO墨爾本流感中心共檢出H5亞型低致病性流感毒株115株，除了2012.7—2013.6年度未檢出外，其他年度均檢測到該亞型毒株，檢出最多的是2011.7—2012.6年度，共檢出27株病毒。共檢出11株H7亞型低致病性流感病毒，除了2005.7—2006.6、2007.7—2008.6和2010.7—2011.6年度未檢出該亞型病毒外，其他年度均檢出該亞型病毒。這2個亞型的低致病性流感病毒都可能通過病毒重組進(jìn)化成為高致病性禽流感病毒，對于禽流感非免疫無疫國的澳大利亞而言將是一種潛在的威脅。

5 思考

隨著我國對野生鳥類禽流感監(jiān)測重視程度的加強，近3年來對野鳥禽流感病原學(xué)的監(jiān)測數(shù)量呈依次增長勢頭，2014、2015和2016年的病原學(xué)監(jiān)測樣品數(shù)量分別為4 771、12 045和11 953份，但病原學(xué)監(jiān)測陽性樣品數(shù)量分別為0、1和1份，陽性率極低，這與共享野鳥遷徙路線的澳大利亞WHO墨爾本流感中心開展的野鳥禽流感監(jiān)測結(jié)果差距很大。因此，應(yīng)積極探討我國野鳥禽流感病原監(jiān)測陽性率低的原因，是監(jiān)測方案設(shè)計不科學(xué)、監(jiān)測方案敏感性低、監(jiān)測采集的樣品有問題，還是樣品運輸和保存條件差、檢測方法敏感性低，或是還有其他原因，應(yīng)認(rèn)真分析，客觀面對。因為野鳥在禽流感傳播中作用越來越大，且其在 禽流感暴發(fā)中起到的不確定性作用難以排除，只有準(zhǔn)確發(fā)現(xiàn)野鳥中的禽流感病毒帶毒情況，才能更好地預(yù)測其將帶來的威脅，從而更有效地防止野鳥將禽流感病毒傳播到家禽中。因此，我國當(dāng)前除了應(yīng)繼續(xù)加強對野鳥的禽流感監(jiān)測外，還應(yīng)重點解決如何提高禽流感監(jiān)測敏感性的問題，以便及時、準(zhǔn)確地發(fā)現(xiàn)野鳥中禽流感病毒的存在和分布情況，防止由野鳥引發(fā)的禽流感疫情發(fā)生。

[1] 李印，韋欣捷，徐全剛，等. 2014年以來美國高致病性禽流感疫情分析[J]. 中國動物檢疫，2016，33（1）：5-8.

[2] 閻保平. 科研信息化在青海湖聯(lián)合科研基地建設(shè)中的運用[J]，中國教育網(wǎng)絡(luò)，2012（6）：25-28.

[3] PETER B. Bird migration：the present view of evolution，control，and further development as global warming progresses[J]. Acta Zoologica Sinica，2002，48（3）：291-301.

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（責(zé)任編輯：杜憲）

Avian Inf uenza Surveillance for Wild Birds Launched by WHO Collaborating Centre for Reference and Research on Inf uenza in Melbourne

Ma Huiling1，Wang Leizhi2，Li Yan3，Shang Aiguo4，Dang AnKun1，Sun Shengfu1，Lan Zouran1
（1. Shandong Animal Disease Prevention and Control Center，Jinan，Shandong 250022；2. Linyi Testing Center for Animal Husbandry，Linyi，Shandong 276000；3. Junan Animal Disease Prevention and Control Center，Junan，Shandong 276002；4. Jining Animal Disease Prevention and Control Center，Jining，Shandong 272000）

The Melbourne WHO Collaborating Centre for Reference and Research on Influenza conducted avian infl uenza（AI）surveillance for wild birds. According to the surveillance data，in the past 10 years in Australia，the annual average positive rates of AI in wild birds all exceeded 1.0%. Except subtype H14，all of the subtypes of AIV were isolated from 2005 to 2012. Among these isolated strains，H5 subtype low pathogenic avian influenza virus accounted for the fi rst place with 94 virus strains（ratio of 21.36%）. In addition，no high pathogenic avian infl uenza virus was found in the surveillance. Objective to provide reference for AI prevention and control in China，3 key points of the WHO Collaborating Centre were summarized including its organization situation，handling procedure of the samples，and the surveillance plan for AI in wild birds.

Australia；wild bird；avian infl uenza；surveillance；prevention and control

S855.2

：B

：1005-944X（2017）05-0028-04

10.3969/j.issn.1005-944X.2017.05.008

山東省科技發(fā)展計劃項目（2015GNC110027）

蘭鄒然