王 濤，李愛巧，吳星星，蔡擴(kuò)軍，楊啟元，馬衛(wèi)平，王文秀，王六合，陳發(fā)喜，季新成，史 茜，鐘 旗

（1. 烏魯木齊市動(dòng)物疾病控制與診斷中心，新疆烏魯木齊 830063；2. 新疆進(jìn)出口檢疫檢驗(yàn)局技術(shù)服務(wù)中心，新疆烏魯木齊 830063；3. 新疆畜牧科學(xué)院獸醫(yī)研究所，新疆烏魯木齊 830063）

新疆烏魯木齊市牛羊流產(chǎn)原因分析

王 濤1，李愛巧1，吳星星1，蔡擴(kuò)軍1，楊啟元1，馬衛(wèi)平1，王文秀1，王六合1，陳發(fā)喜1，季新成2，史 茜2，鐘 旗3

（1. 烏魯木齊市動(dòng)物疾病控制與診斷中心，新疆烏魯木齊 830063；2. 新疆進(jìn)出口檢疫檢驗(yàn)局技術(shù)服務(wù)中心，新疆烏魯木齊 830063；3. 新疆畜牧科學(xué)院獸醫(yī)研究所，新疆烏魯木齊 830063）

[目的]確定引發(fā)牛 羊流產(chǎn)的主要原因，從而提出科學(xué)有效的綜合防控措施。[方法]采用疫病監(jiān)測和流行病學(xué)調(diào)查方法，從飼養(yǎng)管理、疫病流行、流產(chǎn)情況、疫苗免疫等方面進(jìn)行分析。[結(jié)果]分析認(rèn)為：疫病是造成牛羊流產(chǎn)的主要原因，其中引發(fā)羊流產(chǎn)的主要是布魯氏菌病和衣原體病，而引發(fā)牛流產(chǎn)的疫病具有多樣性；飼養(yǎng)管理不善、飼草缺乏、環(huán)境條件差、消毒和衛(wèi)生清掃不徹底、疫苗免疫應(yīng)激等非疫病性因素也是引起牛流產(chǎn)的重要原因。[結(jié)論]分析結(jié)果提示：對羊應(yīng)實(shí)施布魯氏菌病、衣原體病免疫，對牛應(yīng)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理和衛(wèi)生消毒；減少疫病的發(fā)生是防控牛羊流產(chǎn)的有效措施。

牛羊；流產(chǎn)原因；流行病學(xué)調(diào)查；布魯氏菌病；衣原體病；Q熱；新孢子蟲；弓形蟲

流產(chǎn)是指妊娠中斷，其危害甚大，不僅使胎兒夭折或發(fā)育不良，而且常損害母畜健康，影響繁殖能力，甚至導(dǎo)致不育，嚴(yán)重時(shí)還會(huì)危及母畜生命。引起牛羊流產(chǎn)的原因非常復(fù)雜，主要分為疫病性因素和非疫病性因素。由非疫病性因素引起的流產(chǎn)主要包括飼料性流產(chǎn)、損傷及管理性流產(chǎn)、藥物性流產(chǎn)、中毒性流產(chǎn)，以及疫苗免疫注射等引起的應(yīng)激反應(yīng)導(dǎo)致的流產(chǎn)等[1]。由疫病性因素引起的流產(chǎn)包括：寄生蟲病性流產(chǎn)，如新孢子蟲、弓形蟲引起的流產(chǎn)；傳染性疫病性流產(chǎn)，如口蹄疫、小反芻獸疫、布魯氏菌病、衣原體病、Q熱、藍(lán)舌病等引起的流產(chǎn)[2-6]。

近幾年，在春冬產(chǎn)羔季節(jié)，新疆烏魯木齊市天山一帶牧區(qū)的牛羊頻繁發(fā)生流產(chǎn)事件，為查清流產(chǎn)原因，減少農(nóng)牧民損失，通過開展疫病監(jiān)測和流行病學(xué)調(diào)查，從飼養(yǎng)管理、疫病流行、流產(chǎn)情況、疫苗免疫等[7-10]方面進(jìn)行分析，了解引發(fā)牛羊流產(chǎn)的主要原因，并提出防控措施，供同行借鑒。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 布魯氏菌病、衣原體病、牛Q熱檢測所用試劑。Taq DNA聚合酶（2.5 U/μL ）、DNA純化回收試劑盒、質(zhì)粒小提試劑盒、血液基因組DNA提取系統(tǒng)和DNA Zol，購自天根生物技術(shù)（北京）有限公司；DL 2000 DNA Maker，購自鼎國昌盛生物技術(shù)（北京）有限責(zé)任公司；dNTP、限制性內(nèi)切酶 EcoR I、pMD18-T載體等，購自寶生物工程（大連）有限公司。引物由上海生工生物有限公司合成。

1.1.2 試劑盒。布魯氏菌普通PCR檢測試劑盒，北京世紀(jì)元亨動(dòng)物防疫技術(shù)有限公司生產(chǎn)；弓形蟲檢測試劑盒，北京世紀(jì)元亨動(dòng)物防疫技術(shù)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)20140311；新孢子蟲檢測試劑盒，瑞典Svanova公司生產(chǎn)，批號(hào)P06137。

1.2 方法

1.2.1 疫病監(jiān)測。收集烏魯木齊市2012—2016年流產(chǎn)胎兒和對應(yīng)母畜的全血、血清樣品和奶樣，針對可能引起牛羊流產(chǎn)的疫病開展病原學(xué)監(jiān)測。檢測由新疆進(jìn)出口檢疫檢驗(yàn)局技術(shù)服務(wù)中心實(shí)施。檢測疫病種類包括：布魯氏菌病、衣原體病、牛Q熱、新孢子蟲病、弓形蟲病等。布魯氏菌病、衣原體病、牛Q熱檢測方法為新疆進(jìn)出口檢疫檢驗(yàn)局技術(shù)服務(wù)中心自行研發(fā)的多重PCR診斷技術(shù)；對新孢子蟲病、弓形蟲病的檢測，按照相關(guān)試劑盒操作說明進(jìn)行。

1.2.2 流行病學(xué)調(diào)查。采取問卷調(diào)查和與養(yǎng)殖戶訪談相結(jié)合的方式，隨機(jī)選取烏魯木齊市養(yǎng)殖大區(qū)的達(dá)坂城區(qū)12個(gè)街道、居委會(huì)，4個(gè)鄉(xiāng)、鎮(zhèn)，1個(gè)管委會(huì)的21個(gè)行政村的牛羊養(yǎng)殖戶開展調(diào)查，了解牛羊飼養(yǎng)管理狀況、種畜管理情況、近3年來牛羊流產(chǎn)情況，以及采取相應(yīng)防控措施后的流產(chǎn)情況變化；采取現(xiàn)場流行病學(xué)調(diào)查方法，對流產(chǎn)率高的烏魯木齊縣和米東區(qū)進(jìn)行調(diào)查；在全市開展緊急免疫對流產(chǎn)影響的流行病學(xué)調(diào)查，評估免疫對牛羊流產(chǎn)的影響，進(jìn)一步分析流產(chǎn)原因。

2 調(diào)查結(jié)果

2.1 問卷調(diào)查結(jié)果

2.1.1 家畜飼養(yǎng)管理特點(diǎn)

2.1.1.1 動(dòng)物來源、飼喂方式及牧場類型。達(dá)坂城區(qū)牛羊養(yǎng)殖以自繁自養(yǎng)為主，占77.5%，其中“自繁自養(yǎng)+外購牲畜”的占10.5%，全部外購的占14.8%；飼養(yǎng)方式中，以放牧為主的占84.7%，舍養(yǎng)為主的占15.0%；使用公共牧場的占61.5%，自有牧場的占38.5%（圖1）。

圖1 達(dá)坂城區(qū)動(dòng)物來源、飼喂方式及牧場類型占比

2.1.1.2 外購牲畜進(jìn)場前是否開展布魯氏菌病檢疫。在存在外購牲畜的飼養(yǎng)場（戶）中，所有牲畜檢疫合格后進(jìn)場的占19%，抽樣檢疫合格后進(jìn)場的占10%，不檢疫直接進(jìn)場的占67%，不檢疫但隔離觀察后進(jìn)場的占4%（圖2）。

2.1.2 種公畜管理情況。65.5%的養(yǎng)殖戶自己飼養(yǎng)種公畜，34.5%的是租用或共用村里的種公畜。種公畜布魯氏菌病檢疫情況見表1。

圖2 外購牲畜進(jìn)場前布魯氏菌病檢疫情況

表1 種公畜管理及布魯氏菌病檢疫情況

2.1.3 流產(chǎn)情況

2.1.3.1 牛羊流產(chǎn)率。通過詢問達(dá)坂城區(qū)200戶養(yǎng)殖戶2012—2015年的牛羊流產(chǎn)情況，并根據(jù)調(diào)查問卷中的調(diào)查數(shù)據(jù)，利用SSPS軟件進(jìn)行分析，得出在95%CI內(nèi)，2012—2015年達(dá)坂城區(qū)牛羊流產(chǎn)率的年平均值（圖3）。

圖3 2012—2015年達(dá)坂城區(qū)調(diào)查戶牛羊流產(chǎn)率

2.1.3.2 發(fā)生流產(chǎn)的時(shí)間。發(fā)生流產(chǎn)較為集中的季節(jié)為秋冬季，占94.3%；在清楚牛羊流產(chǎn)情況的養(yǎng)殖戶中，89%的養(yǎng)殖戶觀察發(fā)現(xiàn)流產(chǎn)多發(fā)生在母羊懷孕后期。

2.2 現(xiàn)場流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果

對羊流產(chǎn)率高的烏魯木齊縣和米東區(qū)進(jìn)行現(xiàn)場流行病學(xué)調(diào)查，剖檢流產(chǎn)胎兒，觀察其病理剖檢變化；采集血清學(xué)樣品 345 份，檢測布魯氏菌和衣原體，同時(shí)對采集的15份組織樣品，用熒光多重PCR和普通PCR方法檢測，結(jié)果檢出布魯氏菌病陽性5份，其中4份為布魯氏菌病和衣原體病的混合感染。其他6種可能引起流產(chǎn)疫病的病原學(xué)檢測結(jié)果均為陰性（表2）。細(xì)菌病病原學(xué)檢測發(fā)現(xiàn)最多的是大腸桿菌和葡萄球菌。

表2 現(xiàn)場流行病學(xué)調(diào)查的病原學(xué)檢測結(jié)果

2.3 緊急免疫弱毒疫苗對流產(chǎn)影響的流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果

為觀察疫苗免疫對羊流產(chǎn)的影響，對全市實(shí)施小反芻獸疫強(qiáng)制免疫的母羊開展統(tǒng)計(jì)和調(diào)查。統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，烏魯木齊市在春秋兩季共免疫羊55萬只，在開展小反芻獸疫緊急強(qiáng)制免疫后的一個(gè)孕期（150 d）內(nèi)，全市出現(xiàn)死亡羊369只，流產(chǎn)羊羔1 669只，共計(jì)2 038只，死亡率為0.06%，流產(chǎn)率為0.3%。

2.4 疫病檢測結(jié)果

2.4.1 布魯氏菌病檢測

2.4.1.1 羊布魯氏菌病病原學(xué)檢測。采用分離疑似病原菌的方法，5年來在全市8個(gè)區(qū)縣的羊養(yǎng)殖場/戶收集羊流產(chǎn)胎兒298份，開展布魯氏菌病病原學(xué)檢測，共分離出16株布魯氏菌，經(jīng)PCR鑒定均為羊種布魯氏菌（表3）。全市流產(chǎn)胎兒中的布魯氏菌個(gè)體陽性檢出率為5.36%（16/298），場群陽性檢出率為5.44%，表明羊群中的羊種布魯氏菌病感染率較高。

表3 羊流產(chǎn)胎兒分離布魯氏菌結(jié)果（單位：個(gè)/份/%）

2.4.1.2 牛布魯氏菌病病原學(xué)檢測。應(yīng)用布魯氏菌病分型多重PCR方法，對發(fā)生過流產(chǎn)的牛場和養(yǎng)殖戶，采集疑似布魯氏菌病所致流產(chǎn)的奶牛組織15份、全血101份、奶液樣品 40 份，進(jìn)行布魯氏菌病病原學(xué)檢測。結(jié)果顯示：組織樣品中共檢出陽性4份，全血樣品中共檢出陽性42份，奶液樣品中共檢出陽性21份，總計(jì)67份。其中牛種布魯氏菌病陽性53份，羊種布魯氏菌病陽性10份，混合感染陽性4份，牛布魯氏菌病的個(gè)體陽性檢出率為42.9%，場群陽性檢出率為31.4%（表4）。

表4 牛布魯氏菌病病原學(xué)檢測結(jié)果（單位：份/%）

2.4.2 衣原體病檢測。在流產(chǎn)率高的烏魯木齊縣和米東區(qū)83個(gè)場群，采集羊血清學(xué)樣品 345 份，羊流產(chǎn)胎兒組織樣品15份。樣品經(jīng)普通PCR檢測發(fā)現(xiàn)，羊衣原體病個(gè)體陽性檢出率為55.8%，場群陽性檢出率為14.4%；對衣原體病陽性樣品，經(jīng)多重PCR檢測發(fā)現(xiàn)，布魯氏菌病和衣原體病混合感染3份，占陽性樣品的75%（表5）。運(yùn)用常規(guī)PCR和多重PCR技術(shù)，對172份臨床疑似牛布魯氏菌樣品進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示，鸚鵡熱衣原體感染陽性2份，個(gè)體陽性檢出率為2.1 %，場群陽性檢出率為5.2%，布魯氏菌和鸚鵡熱衣原體混合感染陽性樣品2份，混合感染個(gè)體陽性檢出率為2.1 %，場群陽性檢出率為10.2%（表6）。

表5 羊衣原體病陽性檢出率統(tǒng)計(jì)結(jié)果 （單位：%）

表6 牛衣原體病陽性檢出率統(tǒng)計(jì)結(jié)果（單位：%）

2.4.3 其他引起牛羊流產(chǎn)的疫病檢測。運(yùn)用常規(guī)PCR對172份臨床疑似牛布魯氏菌樣品進(jìn)行Q熱檢測，結(jié)果共發(fā)現(xiàn)陽性樣品10份，包括全血樣品5份、血清樣品1份、流產(chǎn)胎兒樣品4份，個(gè)體陽性檢出率為5.8%，場群陽性檢出率為8.6%；同時(shí)運(yùn)用多重PCR技術(shù)，檢測出2份布魯氏菌和Q熱混合感染陽性樣品，陽性檢出率為1.2 %；用ELISA方法對 28個(gè)牛群的45頭牛進(jìn)行新孢子蟲病檢測，結(jié)果檢出陽性16份，陽性檢出率為35.5 %，場群陽性檢出率為21.4%；用ELISA方法對不同區(qū)縣的羊血清樣品進(jìn)行弓形蟲抗體檢測，未發(fā)現(xiàn)陽性（表7）。

表7 其他引起牛羊流產(chǎn)的疫病檢測結(jié)果（單位：份/%）

3 結(jié)論

3.1 引起羊流產(chǎn)的疫病主要為布魯氏菌病和衣原體病

通過問卷調(diào)查發(fā)現(xiàn)，烏魯木齊市牧區(qū)的牛羊飼養(yǎng)方式仍然以自繁自養(yǎng)的流動(dòng)放牧為主，放牧草場以公共草場為主。大多數(shù)外購牲畜不進(jìn)行布魯氏菌病和衣原體病檢疫而直接入場，對種公畜的管理存在漏洞，不能定期開展疫病檢疫。對流通環(huán)節(jié)牛羊和種公畜的監(jiān)管不嚴(yán)，由此增加了烏魯木齊市布魯氏菌病和衣原體病感染的風(fēng)險(xiǎn)。流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果證實(shí)了高流產(chǎn)率區(qū)縣的布魯氏菌病和衣原體病的病原陽性率很高，進(jìn)一步驗(yàn)證了引發(fā)羊流產(chǎn)的疫病主要為布魯氏菌病和衣原體病。同時(shí)，因飼養(yǎng)管理不當(dāng)、圈舍消毒較差而出現(xiàn)的大腸桿菌和葡萄球菌混合感染病例也較多。

3.2 引起牛流產(chǎn)的疫病具有多樣性

經(jīng)疫病檢測發(fā)現(xiàn)，引起牛流產(chǎn)的疫病，如布魯氏菌病、鸚鵡熱衣原體病、新孢子蟲病、Q熱等均被檢出。布魯氏菌病病原學(xué)分型檢測結(jié)果顯示，從流產(chǎn)胎兒組織樣品中檢測出的羊種布魯氏菌陽性最多，由此可推斷羊種布魯氏菌對牛流產(chǎn)的影響最大。在鸚鵡熱衣原體和Q熱病原學(xué)檢測中，也發(fā)現(xiàn)了與布魯氏菌病混合感染樣品[2]；新孢子蟲的檢測陽性數(shù)也較高[3]。因此可見引發(fā)牛流產(chǎn)病原復(fù)雜，具有多樣性。

3.3 疫苗免疫導(dǎo)致的不良反應(yīng)是引起羊流產(chǎn)的原因之一

2015年烏魯木齊市曾對母羊開展小反芻獸疫強(qiáng)制免疫。初產(chǎn)羔季節(jié)來臨時(shí)，免疫后的羊只陸續(xù)出現(xiàn)流產(chǎn)，產(chǎn)死胎和弱胎現(xiàn)象，而且多發(fā)生在引進(jìn)的湖羊、小尾寒羊和雜交的高產(chǎn)多胎羊。通過流行病學(xué)調(diào)查和問卷調(diào)查發(fā)現(xiàn)，強(qiáng)制免疫注射的小反芻獸疫疫苗為弱毒疫苗，湖羊、小尾寒羊和雜交的高產(chǎn)多胎羊?qū)Υ溯^敏感。另外在免疫時(shí)，操作人員抓羊時(shí)，牽扯后腿，用力粗暴，造成羊群驚嚇過度，也是導(dǎo)致流產(chǎn)的原因之一。

3.4 春季飼草缺乏，導(dǎo)致羊營養(yǎng)不良，促使部分羊只發(fā)生流產(chǎn)

春季飼草缺乏，導(dǎo)致部分羊的營養(yǎng)狀況不良。春季牧區(qū)氣溫低，積雪融化慢，羊群食用霉敗、冰凍、含霜露和雪的飼料，使胎兒營養(yǎng)物質(zhì)代謝障礙或引起孕羊子宮強(qiáng)烈收縮，促使部分羊發(fā)生流產(chǎn)[1]。

3.5 布魯氏菌病陽性率高的區(qū)縣實(shí)施布病免疫后，流產(chǎn)數(shù)量明顯減少

2012年達(dá)坂城區(qū)實(shí)施了牛羊布病免疫。為了解免疫實(shí)施1年后的效果，通過問卷調(diào)查，對牛羊布魯氏菌病S2疫苗免疫前后的流產(chǎn)情況進(jìn)行了對比，發(fā)現(xiàn)自2012年達(dá)坂城區(qū)實(shí)施了1年的牛羊布魯氏菌病免疫后，2013年牛羊的流產(chǎn)率明顯下降，采用χ2檢驗(yàn)對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)牛羊布魯氏菌病疫苗免疫前后的流產(chǎn)數(shù)量差異顯著（P＜0.001），免疫后流產(chǎn)數(shù)量明顯減少。

4 防控建議

對由疫病引起的流產(chǎn)畜，應(yīng)及時(shí)進(jìn)行隔離或撲殺，對污染的用具和場地進(jìn)行徹底消毒，對流產(chǎn)的胎兒、胎衣和產(chǎn)道分泌物作深埋處理。必要時(shí)開展布魯氏菌病基線調(diào)查，對個(gè)體陽性檢出率超過2%或群體陽性檢出率超過5%的羊群，開展布魯氏菌病免疫。同時(shí)，采取衣原體病免疫也可對減少羊流產(chǎn)起到一定的防控效果。此外，應(yīng)加強(qiáng)疫病檢疫，特別是種公畜的年檢以及引種前的檢疫，對普通畜做好每年的疫病檢測工作，及時(shí)淘汰陽性畜。對非疫病性流產(chǎn)的防治，建議做好牛羊的日常清潔消毒工作，在產(chǎn)羔季節(jié)增加場內(nèi)外的消毒次數(shù)，避免飼喂帶有冰碴和發(fā)霉的飼草。避免在產(chǎn)羔期開展疫苗免疫，同時(shí)做好人員培訓(xùn)，規(guī)范免疫操作，禁止采用粗暴方式抓羊、趕羊。

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（責(zé)任編輯：朱迪國）

Reason Analysis on Abortion of Cattle and Sheep in Urumqi City of Xinjiang

Wang Tao1，Li Aiqiao1，Wu Xingxing1，Cai Kuojun1，Yang Qiyuan1，Ma Weiping1，Wang Wenxiu1，Wang Liuhe1，Chen Faxi1，Ji Xincheng2，Shi Qian2，Zhong Qi3
（1. Urumqi Animal Disease Control and Diagnosis Center，Urumqi，Xinjiang 830063；2. Technology Service Center of Xinjiang Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau，Urumqi，Xinjiang 830063；3. Veterinary Research Institute，Xinjiang Academy of Animal Husbandry and Science，Urumqi，Xinjiang 830000）

[Objective] In order to determine the main reasons of the cattle and sheep abortion，so as to put forward scientifi c and effective comprehensive prevention and control measures for reducing economic loss. [Methods]Through disease surveillance and epidemiological investigation，an analysis was made from the fi elds of feeding management，prevalence of diseases，abortion and vaccination. [Results] Results showed the main reasons causing abortion of cattle and sheep were some animal diseases. Sheep abortion were mainly caused by Brucellosis and Chlamydia. For cattle，various diseases could result in abortion，in addition，other non-disease factors also played important role in cattle abortion，such as improper breeding management，lack of forage grass，poor environmental conditions，incomplete disinfection and cleaning，as well as adverse reactions of vaccination. [Conclusion]Results indicated that sheep should be immunized with vaccines against Brucellosis and Chlamydia. For cattle，feeding management and disinfection should be strengthened. Besides，reduction of disease outbreaks could effectively avoid abortion of cattle and sheep.

cattle and sheep；abortion reason；epidemiological investigation；Brucellosis；Chlamydiosis；Q fever；Neospora；Toxoplasma

S851.3

：B

：1005-944X（2017）05-0004-05

10.3969/j.issn.1005-944X.2017.05.002

烏魯木齊市科技局現(xiàn)代服務(wù)業(yè)促進(jìn)計(jì)劃項(xiàng)目（Y141310002）；重慶市社會(huì)民生科技創(chuàng)新專項(xiàng)援疆項(xiàng)目（cstc2016shmszx80121）

李愛巧