李靜 江淵 唐利紅 張祖榮 張陽(yáng)奕 武潔 王莉莉 郁晨蕾 李向群 沈鑫 朱國(guó)峰

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上海市某高級(jí)中學(xué)學(xué)生結(jié)核病疫情的分子流行病學(xué)分析

李靜 江淵 唐利紅 張祖榮 張陽(yáng)奕 武潔 王莉莉 郁晨蕾 李向群 沈鑫 朱國(guó)峰

目的 采用分子流行病學(xué)和傳統(tǒng)流行病學(xué)相結(jié)合的方法分析2014年8—9月發(fā)生在上海市閔行區(qū)某高級(jí)中學(xué)的結(jié)核病聚集性疫情。方法 根據(jù)首發(fā)患者線索，對(duì)該校全體師生分階段采用肺結(jié)核癥狀篩查和胸部X線攝影檢查，胸片有異常陰影者進(jìn)一步行CT掃描檢查，再經(jīng)臨床專(zhuān)家組會(huì)診后篩查出可疑患者進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢查(包括痰涂片、分離培養(yǎng)及GeneXpert MTB/RIF檢測(cè))。將收集到的結(jié)核分枝桿菌菌株進(jìn)行“9+3”12個(gè)位點(diǎn)(QUB11b、QUB18、Mtub21、MIRU26、QUB26、Mtub04、MIRU31、MIRU40、VNTR2372，VNTR3820、VNTR3232、VNTR4120)結(jié)核分枝桿菌可變數(shù)目串聯(lián)重復(fù)序列(Mycobacterial interspersed repetitive unit-variable number tandem repeat，MIRU-VNTR)多態(tài)性分析。結(jié)果 密切接觸者中篩查出該校學(xué)生中疑似肺結(jié)核患者12例，最終確診肺結(jié)核患者11例，其中分枝桿菌培養(yǎng)陽(yáng)性5例，一線抗結(jié)核藥物藥物敏感性試驗(yàn)(簡(jiǎn)稱(chēng)“藥敏試驗(yàn)”)結(jié)果均敏感；GeneXpert MTB/RIF檢測(cè)4例患者結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群陽(yáng)性，對(duì)利福平敏感。將本次結(jié)核病疫情首例患者菌株，以及密切接觸者篩查分離培養(yǎng)得到的5株菌株和1株該校2012年11月確診肺結(jié)核患者保存菌株(共7株菌株)進(jìn)行“9+3”的12個(gè)位點(diǎn)MIRU-VNTR基因型分型。結(jié)果顯示，7例患者9個(gè)位點(diǎn)拷貝數(shù)均相同；3個(gè)高變位點(diǎn)中除1例患者在VNTR3820位點(diǎn)相差1個(gè)拷貝數(shù)外，其他位點(diǎn)拷貝數(shù)均相同。結(jié)論 此次學(xué)校結(jié)核病聚集性疫情中有12例患者確診為肺結(jié)核，其中6例患者的菌株與2012年發(fā)病患者的菌株具有同源性。因此，發(fā)現(xiàn)學(xué)校結(jié)核病患者應(yīng)及時(shí)診斷和治療，同時(shí)將分子診斷技術(shù)應(yīng)用到結(jié)核病篩查工作中，以盡早控制疫情的發(fā)生和蔓延。

結(jié)核； 疾病暴發(fā)流行； 分子流行病學(xué)； 學(xué)生

肺結(jié)核是一種嚴(yán)重危害人類(lèi)健康的慢性呼吸道傳染病，近年來(lái)一直位居上海市傳染病報(bào)告發(fā)病和死亡例數(shù)的前列，學(xué)生、老年人和流動(dòng)人口已成為上海市結(jié)核病發(fā)病的重點(diǎn)人群。學(xué)校是學(xué)生密集的場(chǎng)所，一旦存在傳染源極易發(fā)生校園結(jié)核病的聚集性發(fā)病[1-2]，不僅影響學(xué)校正常的教學(xué)秩序，更對(duì)學(xué)生的身心健康和正常發(fā)育造成了極大的傷害[3-4]。結(jié)核病細(xì)菌學(xué)診斷常用方法是涂片鏡檢、固體培養(yǎng)和傳統(tǒng)藥物敏感性試驗(yàn)(簡(jiǎn)稱(chēng)“藥敏試驗(yàn)”)。涂片鏡檢法的敏感度相對(duì)較低，傳統(tǒng)固體培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)耗時(shí)較長(zhǎng)，均難以實(shí)現(xiàn)對(duì)結(jié)核病患者的早期正確診斷和治療[5]。隨著分子生物學(xué)診斷技術(shù)的不斷發(fā)展，分子診斷技術(shù)被逐步應(yīng)用于結(jié)核病的早期診斷。2014年8—9月，上海市閔行區(qū)某高級(jí)中學(xué)發(fā)生結(jié)核病疫情，筆者收集疑似患者的痰樣本進(jìn)行痰涂片、分離培養(yǎng)及GeneXpert MTB/RIF檢測(cè)，并對(duì)分離到的陽(yáng)性菌株進(jìn)一步進(jìn)行菌群鑒定和結(jié)核分枝桿菌可變數(shù)目串聯(lián)重復(fù)序列多態(tài)性分析(Mycobacterial interspersed repetitive unit-variable number tandem repeat，MIRU-VNTR)，采用傳統(tǒng)流行病學(xué)和分子流行病學(xué)相結(jié)合的方法分析本次疫情。

資料和方法

一、流行病學(xué)調(diào)查

1.發(fā)現(xiàn)首發(fā)患者：患者楊某，于2014年8月23日首次出現(xiàn)咳嗽、咯痰癥狀，至結(jié)核病定點(diǎn)醫(yī)院就診；9月1日?qǐng)?bào)告為涂陽(yáng)肺結(jié)核。該患者為上海市某高級(jí)中學(xué)學(xué)生，區(qū)級(jí)疾病預(yù)防控制中心(CDC)發(fā)現(xiàn)后與該社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心對(duì)患者就讀的高級(jí)中學(xué)展開(kāi)調(diào)查。

2.可疑患者篩查：對(duì)該校全體師生分階段采用肺結(jié)核癥狀篩查和胸部X線攝影檢查，如發(fā)現(xiàn)胸片有異常陰影，則進(jìn)一步行CT掃描檢查；同時(shí)對(duì)胸片異常陰影者及其密切接觸者進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查。

3.患者確診：結(jié)核病診斷依據(jù)中華醫(yī)學(xué)會(huì)結(jié)核病學(xué)分會(huì)頒布的《肺結(jié)核診斷和治療指南》[6]，結(jié)合患者臨床癥狀、胸部X線攝片、CT掃描及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果，由臨床專(zhuān)家組會(huì)診確診。

二、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

對(duì)于CT掃描發(fā)現(xiàn)異常陰影的患者，留取霧化痰、即時(shí)痰、夜間痰送上海市CDC結(jié)核病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行結(jié)核分枝桿菌分離培養(yǎng)，對(duì)培養(yǎng)陽(yáng)性菌株進(jìn)行藥敏試驗(yàn)和菌種鑒定及分子生物學(xué)檢測(cè)。

1.痰涂片檢查：按照《痰涂片鏡檢標(biāo)準(zhǔn)化操作及質(zhì)量保證手冊(cè)》[7]中的標(biāo)準(zhǔn)化操作程序執(zhí)行。

2.分離培養(yǎng)：(1)標(biāo)本前處理。按照《結(jié)核病診斷實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)規(guī)程》操作[8]，采用N-乙酰-L-半胱氨酸-氫氧化鈉法(NALC-NaOH法)進(jìn)行標(biāo)本處理。用無(wú)菌粗口吸管吸取干酪樣或膿性痰部分約1～2 ml，移至無(wú)菌離心管中。視痰標(biāo)本性質(zhì)加入1～2倍量的NALC-NaOH消化液(用時(shí)臨時(shí)配制)，渦旋混勻30 s后室溫靜置15 min；加入pH值6.8的磷酸鹽緩沖液(PBS)至45 ml，混勻，3000×g離心15 min，傾棄上清液再加入PBS 0.5 ml后，在漩渦振蕩器上漩渦離心2～3 s，充分混勻成懸浮液待用。(2)MGIT 960液體培養(yǎng)：接種標(biāo)本前，在MGIT 7 ml 培養(yǎng)管中加入0.8 ml混合物[取15 ml營(yíng)養(yǎng)添加劑(OADC)將雜菌抑制劑(PANTA)溶解成混合物]，然后加入0.5 ml標(biāo)本懸浮液，蓋緊MGIT培養(yǎng)管管帽并充分混勻，放置于BACTECTMMGITTM960培養(yǎng)儀器相應(yīng)的位置進(jìn)行孵育，等待儀器自動(dòng)報(bào)告結(jié)果。當(dāng)儀器報(bào)告顯示陽(yáng)性時(shí)，按系統(tǒng)操作步驟提示：取出陽(yáng)性培養(yǎng)管進(jìn)行涂片作抗酸染色，確認(rèn)有抗酸桿菌后則報(bào)告分枝桿菌液體培養(yǎng)陽(yáng)性。陰性培養(yǎng)管應(yīng)繼續(xù)培養(yǎng)、檢測(cè)，培養(yǎng)管判讀至42 d，儀器未報(bào)陽(yáng)，可報(bào)告分枝桿菌液體培養(yǎng)陰性。

3. GeneXpert MTB/RIF檢測(cè)：無(wú)菌吸管移取1.0 ml痰液至螺旋蓋試管中并加入2.0 ml的GeneXpert樣品試劑(SR)，在渦旋振蕩器上振蕩10 s，室溫放置15 min，然后使用GeneXpert提供的專(zhuān)用吸管轉(zhuǎn)移樣本至專(zhuān)用的樣本反應(yīng)盒(GeneXpert MTB/RIF Car-tridge)，將樣本反應(yīng)盒放入GeneXpert Dx(美國(guó)Cepheid公司)儀器的樣本艙中，進(jìn)行DNA提取、PCR擴(kuò)增和結(jié)果的檢測(cè)，通過(guò)專(zhuān)用軟件判讀結(jié)果。

4.藥敏試驗(yàn)：參照文獻(xiàn)[8]進(jìn)行，采用文獻(xiàn)[9]推薦的比例法，使用羅-琴(L-J)培養(yǎng)基，對(duì)4種一線抗結(jié)核藥物進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。抗結(jié)核藥物的終濃度為：異煙肼(H) 0.2 μg/ml、鏈霉素(S) 4.0 μg/ml、利福平(R) 40.0 μg/ml、乙胺丁醇(E) 2.0 μg/ml。耐藥判定：根據(jù)菌落在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)情況，若含藥培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落數(shù)占對(duì)照培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落數(shù)的百分率大于1%，則認(rèn)為受試菌對(duì)該抗結(jié)核藥物耐藥。

5.菌群鑒定：采用傳統(tǒng)生化法進(jìn)行鑒定。使用噻吩-2-羧酸肼(TCH)培養(yǎng)基和對(duì)硝基苯甲酸(PNB)培養(yǎng)基及28 ℃培養(yǎng)試驗(yàn)進(jìn)行分枝桿菌菌群鑒定試驗(yàn)。PNB培養(yǎng)基上不生長(zhǎng)、TCH培養(yǎng)基上生長(zhǎng)或不生長(zhǎng)并且28 ℃培養(yǎng)不生長(zhǎng)的菌株為結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群；PNB培養(yǎng)基上生長(zhǎng)或不生長(zhǎng)、TCH培養(yǎng)基上生長(zhǎng)和28 ℃培養(yǎng)生長(zhǎng)的菌株為非結(jié)核分枝桿菌。

6.MIRU-VNTR：參照文獻(xiàn)[10]，包括9個(gè)位點(diǎn)：QUB11b、QUB18、Mtub21、MIRU26、QUB26、Mtub04、MIRU31、MIRU40、VNTR2372和3個(gè)高變位點(diǎn)：VNTR3820、VNTR3232、VNTR4120，利用北京康為世紀(jì)生物科技有限公司生產(chǎn)的結(jié)核病鑒定試劑盒Ⅱ進(jìn)行結(jié)核分枝桿菌VNTR多態(tài)性分析。PCR反應(yīng)體系和條件參考試劑盒說(shuō)明書(shū)。取1 μl PCR擴(kuò)增產(chǎn)物用1%的瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳。電泳讀數(shù)：根據(jù)各樣本擴(kuò)增條帶與Marker相對(duì)位置，利用各VNTR位點(diǎn)重復(fù)單元讀數(shù)表及VNTR各位點(diǎn)重復(fù)單元電泳圖，計(jì)算出各菌株在該位點(diǎn)的重復(fù)單元數(shù)。比較不同菌株9個(gè)VNTR位點(diǎn)的重復(fù)數(shù)進(jìn)行成簇分析，如果2例(含)以上的患者感染相同9個(gè)位點(diǎn)基因型的結(jié)核分枝桿菌，初步鑒定為成簇菌株，再加入3個(gè)高變位點(diǎn)進(jìn)一步確認(rèn)；如果患者分離的菌株具有特異的12個(gè)位點(diǎn)基因型，鑒定為單一菌株。以H37Rv標(biāo)準(zhǔn)株作為質(zhì)控菌株。

結(jié) 果

一、流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果

2014年9月1日確診首例涂陽(yáng)肺結(jié)核患者，9月 10日上海市閔行區(qū)CDC協(xié)助學(xué)校組織該校全體243名師生及后勤人員分階段進(jìn)行結(jié)核病篩查。篩查發(fā)現(xiàn)16例胸部X線攝片有異常陰影者，均為學(xué)生。進(jìn)一步CT掃描檢查，發(fā)現(xiàn)12例肺部有異常陰影，其中，4例伴有空洞形成；最終經(jīng)專(zhuān)家組會(huì)診后，排除4例，12例不排除肺結(jié)核的可能。12例經(jīng)CT掃描發(fā)現(xiàn)異常陰影的疑似肺結(jié)核者流行病學(xué)調(diào)查顯示：9例曾經(jīng)為同班同學(xué)，9例住校，8例為暑期班同班同學(xué)，1例有既往結(jié)核病病史，現(xiàn)已結(jié)束療程。該12例學(xué)生的癥狀體征表現(xiàn)為：8例出現(xiàn)咳嗽癥狀，其中3例有咯痰，無(wú)咯血；2例持續(xù)胸痛數(shù)日，2例出現(xiàn)發(fā)熱，1例出現(xiàn)盜汗。對(duì)12例CT掃描發(fā)現(xiàn)異常陰影者進(jìn)行密切接觸者調(diào)查，結(jié)果胸部X線攝片未發(fā)現(xiàn)有明顯異常者。在調(diào)查期間獲悉，該校有1名學(xué)生曾于2012年11月確診為肺結(jié)核，當(dāng)時(shí)進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查未發(fā)現(xiàn)可疑患者。

二、實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果

1.細(xì)菌學(xué)檢查：12例CT掃描發(fā)現(xiàn)有異常陰影者的痰標(biāo)本涂片結(jié)果均陰性，分離培養(yǎng)得到陽(yáng)性菌株5株，經(jīng)PNB和TCH初步鑒定均為結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群，使用16S rRNA基因序列法鑒定為結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群；藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示，5株分離株對(duì)H、S、E、R等一線抗結(jié)核藥物均敏感。

2. GeneXpert MTB/RIF檢測(cè)：12例CT掃描發(fā)現(xiàn)有異常陰影者的痰標(biāo)本中共檢測(cè)出4例結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群陽(yáng)性，對(duì)R敏感，其余8例未檢出。此4例GeneXpert MTB/RIF檢測(cè)陽(yáng)性患者的痰培養(yǎng)也均為陽(yáng)性。

3.MIRU-VNTR基因型檢測(cè)：將本次結(jié)核病疫情首例患者菌株，以及密切接觸者篩查到的12例CT掃描發(fā)現(xiàn)肺部異常陰影可疑者的痰標(biāo)本分離培養(yǎng)陽(yáng)性的5株菌株和1株2012年11月確診肺結(jié)核患者的保存株(共7株菌株)進(jìn)行MIRU-VNTR基因型分型。7例患者9個(gè)位點(diǎn)拷貝數(shù)均相同，3個(gè)高變位點(diǎn)除1例患者VNTR3820位點(diǎn)相差1個(gè)拷貝數(shù)外，其他位點(diǎn)拷貝數(shù)均相同，見(jiàn)表1。

4.患者確診：采用肺結(jié)核癥狀和影像學(xué)檢查共篩查到12例肺部有異常陰影的可疑患者，經(jīng)臨床專(zhuān)家組會(huì)診，結(jié)合患者臨床癥狀、影像學(xué)及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果，共確診11例肺結(jié)核患者。由此，加上首例患者，本次該學(xué)校結(jié)核病疫情共發(fā)現(xiàn)12例肺結(jié)核患者。

討 論

學(xué)校是典型的群體環(huán)境，人群密集、接觸密切，存在結(jié)核病暴發(fā)流行的風(fēng)險(xiǎn)，尤其是在通風(fēng)條件較差，出現(xiàn)傳染源后更易造成集團(tuán)感染[4]。本次疫情中首發(fā)患者為涂陽(yáng)肺結(jié)核，其所在校舍基本為全封閉狀態(tài)，導(dǎo)致多名同班或同寢室同學(xué)感染肺結(jié)核。除首發(fā)患者外，12例疑似肺結(jié)核患者根據(jù)臨床癥狀、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果和影像學(xué)資料，有11例患病學(xué)生臨床診斷為肺結(jié)核。將收集到的陽(yáng)性培養(yǎng)物進(jìn)行MIRU-VNTR基因分型分析，結(jié)果顯示本次發(fā)病的6例患者菌株的基因型與2012年發(fā)病患者一致，具有同源性，可能存在近期傳播關(guān)系。

表1 7例患者分離株12個(gè)位點(diǎn)MIRU-VNTR基因分型結(jié)果(重復(fù)拷貝個(gè)數(shù))

目前，結(jié)核分枝桿菌VNTR分型技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于結(jié)核病流行病學(xué)調(diào)查[11-12]。Supply等[13]于2006年提出的15或24位點(diǎn)VNTR是目前應(yīng)用最多的方案，但該方案對(duì)我國(guó)高度流行的北京家族菌株的分辨率較低[10]。本次調(diào)查采用Luo等[10]在2014年建立的適合中國(guó)結(jié)核分枝桿菌臨床菌株特征的分型方案，一套位點(diǎn)數(shù)少且分辨率高的“9+3”VNTR位點(diǎn)組合。7株分離株中在9個(gè)位點(diǎn)上的擴(kuò)增目的片段大小完全一致，拷貝數(shù)一致，在3個(gè)高變位點(diǎn)上6株拷貝數(shù)一致，1株在VNTR3820位點(diǎn)僅相差1個(gè)拷貝數(shù)。本次采用的高變位點(diǎn)VNTR3820、3232和4120等雖然存在擴(kuò)增產(chǎn)物分子量較大而不宜準(zhǔn)確判讀，但由于其具有較高分辨率而被納入二線分型方案中[10]。高變位點(diǎn)相對(duì)比較穩(wěn)定，但在少數(shù)患者體內(nèi)還是存在變異[10]。本次研究結(jié)果中，1例患者在VNTR3820高變位點(diǎn)相差1個(gè)拷貝數(shù)，很有可能為這例患者在體內(nèi)發(fā)生了微進(jìn)化，從而導(dǎo)致重復(fù)片段與其他患者不一致。對(duì)此結(jié)果，筆者將在后續(xù)工作中應(yīng)用全基因組測(cè)序的方法進(jìn)一步研究。一般情況下，高變位點(diǎn)中只有1個(gè)位點(diǎn)相差1～2個(gè)重復(fù)拷貝，可以判定為成簇，因此本次疫情獲得的6株分離株屬于同一個(gè)簇，且2012年發(fā)病的患者菌株也屬于該簇，所有患者藥敏試驗(yàn)結(jié)果均相同，結(jié)合傳統(tǒng)流行病學(xué)調(diào)查，筆者初步判斷此次暴發(fā)的結(jié)核分枝桿菌菌株可能來(lái)源于2012年的結(jié)核病患者。

2012年11月發(fā)病并確診肺結(jié)核的患者陳某為該校高一學(xué)生，當(dāng)時(shí)進(jìn)行了流行病學(xué)調(diào)查并做相應(yīng)檢查未發(fā)現(xiàn)有新的可疑結(jié)核病患者。本次2014年首發(fā)患者為陳某高一時(shí)同班同學(xué)，兩人均為涂陽(yáng)結(jié)核病患者，兩者發(fā)病間隔時(shí)間近2年。李建翠等[11]報(bào)道了一起菌陽(yáng)結(jié)核病患者引起某中學(xué)結(jié)核病聚集性疫情，說(shuō)明涂陽(yáng)或菌陽(yáng)結(jié)核病患者在通風(fēng)條件較差的環(huán)境下相比涂陰或菌陰結(jié)核病患者更易發(fā)生傳播，如不及時(shí)發(fā)現(xiàn)并及時(shí)診斷和篩查，可能使疫情進(jìn)一步惡化。人感染結(jié)核分枝桿菌后僅有部分人會(huì)發(fā)生結(jié)核病，而且從感染到發(fā)病需要一定時(shí)間，筆者建議對(duì)于涂陽(yáng)患者周?chē)巳哼M(jìn)行定期隨訪，改善教室通風(fēng)環(huán)境，并進(jìn)行結(jié)核病健康知識(shí)宣傳，以盡早發(fā)現(xiàn)傳染源，減少發(fā)生新的患者，從而降低結(jié)核病疫情發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。

結(jié)核病從發(fā)病到確診需要一個(gè)較長(zhǎng)的時(shí)間，早發(fā)現(xiàn)、早診斷是阻止結(jié)核病疫情暴發(fā)和蔓延的關(guān)鍵。筆者認(rèn)為，除了要重視結(jié)核病疫情苗頭監(jiān)測(cè)工作外[14]，建議將分子診斷技術(shù)引入結(jié)核病疫情的早期診斷。本次疫情采用了GeneXpert MTB/RIF檢測(cè)，該技術(shù)被WHO推薦用于檢測(cè)結(jié)核病和R耐藥[15]。相比傳統(tǒng)的細(xì)菌學(xué)檢查方法，GeneXpert MTB/RIF檢測(cè)儀器自動(dòng)完成從結(jié)核分枝桿菌DNA提取、擴(kuò)增、產(chǎn)物檢測(cè)到結(jié)果報(bào)告[16]；除標(biāo)本前處理外，整個(gè)檢測(cè)均在封閉的反應(yīng)盒內(nèi)進(jìn)行，可有效避免實(shí)驗(yàn)中的交叉污染造成的假陽(yáng)性。相對(duì)涂片、培養(yǎng)藥敏試驗(yàn)等檢測(cè)，該檢測(cè)對(duì)實(shí)驗(yàn)室生物安全要求較低，結(jié)果報(bào)告時(shí)間(2.5 h)大大縮短，且敏感度和特異度高，進(jìn)而能更好地輔助臨床醫(yī)生對(duì)肺結(jié)核、尤其對(duì)于菌陰肺結(jié)核患者進(jìn)行早期診斷和治療[5]。本次疫情中的12例疑似結(jié)核病患者均為涂陰肺結(jié)核，4例經(jīng)GeneXpert MTB/RIF檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，為臨床早期確診肺結(jié)核提供了實(shí)驗(yàn)室診斷依據(jù)。

本研究從分子流行病學(xué)角度分析此次學(xué)生肺結(jié)核疫情，為學(xué)校結(jié)核病疫情的流行病學(xué)調(diào)查提供了重要的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)，提示學(xué)校內(nèi)結(jié)核病傳染源的傳播風(fēng)險(xiǎn)非常高[12]。因此，要嚴(yán)格按照《上海市學(xué)校結(jié)核病防控工作規(guī)范(試行)》執(zhí)行；加強(qiáng)學(xué)校結(jié)核病防治知識(shí)的健康教育和宣傳工作，預(yù)防學(xué)校結(jié)核病的發(fā)生，提高社會(huì)公眾對(duì)結(jié)核病防治知識(shí)的了解[3]；做好新生入學(xué)體檢及各年級(jí)學(xué)生的健康監(jiān)測(cè)和體檢，發(fā)現(xiàn)學(xué)校有可疑結(jié)核病患者應(yīng)及時(shí)進(jìn)行診斷和治療，同時(shí)將結(jié)核病分子診斷技術(shù)應(yīng)用到結(jié)核病篩查工作中，以盡早控制學(xué)校結(jié)核病疫情的發(fā)生和蔓延。

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(本文編輯：李敬文)

Analysis of tuberculosis aggregation epidemic in a senior high school in Shanghai using molecular epidemiology method

LIJing*,JIANGYuan,TANGLi-hong,ZHANGZu-rong,ZHANGYang-yi,WUJie,WANGLi-li,YUChen-lei,LIXiang-qun,SHENXin,ZHUGuo-feng.

*TuberculosisLaboratory,ShanghaiMunicipalCenterforDiseaseControlandPrevention,Shanghai200336,China

s:SHENXin,Email:shenxin@scdc.sh.cn;ZHUGuo-feng,Email:zhugf2014@126.com

Objective To analyze the tuberculosis (TB) aggregation epidemic in a senior high school in Minhang District of Shanghai between August 2014 and September 2014, using the molecular and traditional epidemiological survey. Methods Because of the first episode, all the teachers and students in the school were performed symptom screening and chest X-ray, and then chest CT scan were performed on the chest X-ray abnormal cases. The suspected TB cases were tested with sputum smear, liquid culture and GeneXpert MTB/RIF. TheMycobacteriumtuberculosis(MTB) isolates were genotyped by 12-loci (9+3) Mycobacterial interspersed repetitive unit-variable number tandem repeat (MIRU-VNTR; includingQUB11b,QUB18,Mtub21,MIRU26,QUB26,Mtub04,MIRU31,MIRU40,VNTR2372,VNTR3820,VNTR3232,VNTR4120). Results A total of 12 suspected cases were screened among the close-contact students. Finally, 11 cases were definitely diagnosed of TB, among which 5 cases were MTB cultured positive and were sensitive to first-line anti-TB drugs. Of the 12 cases, 4 cases were positive in MTB culture and sensitive to rifampin, using GeneXpert MTB/RIF assay.Six strains of MTB isolated from this school TB aggregation epidemic and the strain isolated from a TB student from this school in November 2012 were genotyped by 12-loci MIRU-VNTR. It was found that 9 locies had the same VNTR pattern; as to the other 3 hypervariable sites, only 1 case had single-locus variant inVNTR3820 locus which was regarded as hypervariable loci. Conclusion A total of 12 pulmonary TB cases were identified in this school, 6 clinical isolates of which were homologous to the MTB of the TB patient which were reported in November 2012. Hence, the timely diagnosis and effective treatment once finding the student TB cases is important in school TB prevention. It was suggested that the application of the rapid diagnostic techniques to screen close-contact students may be benefit to prevention of TB epidemic situation in schools.

Tuberculosis; Pandemics; Molecular epidemiology; Students

10.3969/j.issn.1000-6621.2017.05.018

上海市衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)科研課題青年項(xiàng)目(20144Y0063)

200336 上海市疾病預(yù)防控制中心結(jié)核病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室(李靜、江淵、張陽(yáng)奕、武潔、王莉莉、郁晨蕾、朱國(guó)峰)，結(jié)核病防治科(張祖榮、李向群、沈鑫)；上海市閔行區(qū)疾病預(yù)防控制中心結(jié)核病防制科(唐利紅)

沈鑫，Email：shenxin@scdc.sh.cn；朱國(guó)峰，Email：zhugf2014@126.com

2016-09-20)