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        淮山多糖超聲輔助提取及清除超氧陰離子自由基的作用

        2017-05-08 07:12:40胡月芳
        江蘇農(nóng)業(yè)科學 2017年4期
        關鍵詞:淮山多糖

        摘要:以無水乙醇為提取劑,采用超聲輔助提取淮山中的多糖,設計L9(34)正交試驗,研究超聲功率、液料比、提取時間、提取溫度對淮山多糖提取率的影響,并通過分光光度法分析淮山多糖清除超氧陰離子自由基能力。結(jié)果表明,淮山多糖的最佳提取工藝為超聲功率800 W、液料比80 mL ∶[KG-*3]1 g、提取時間50 min、提取溫度60 ℃,在此條件下淮山多糖提取率高達 8.53%。結(jié)果還表明,淮山多糖具有較好的清除超氧陰離子自由基的能力,且其清除能力與多糖濃度有明顯的量效關系。

        關鍵詞:淮山;多糖;超聲輔助提取;清除;超氧陰離子自由基

        中圖分類號: TS201.2文獻標志碼: A

        文章編號:1002-1302(2017)04-0144-03

        淮山別稱山藥、懷山藥,含有淀粉、多糖、尿囊素、膽堿等成分,藥用價值極高,是藥食兩用的食品[1]。近年來,淮山多糖已被確定具有抗氧化功能[2],有提高人體免疫功能和抗病能力[3]。超氧陰離子自由基(O-2[KG-*2]· [KG-*3])是活性氧之一,具有強烈的氧化能力[4]。O-2[KG-*2]· [KG-*3]產(chǎn)生異常會損壞細胞,直接或間接導致機體衰老、炎癥和癌癥等某些疾病,因此對O-2[KG-*2]· [KG-*3]清除的研究在醫(yī)學保健中越來越重要[5]。

        在淮山多糖提取方法中,最常見的有水提取法[6-7]、微波法[8-9]、酶解超聲輔助提取法[10]。用水提取山藥多糖成本低,不破壞生物活性,方便實用且安全性高,但耗時長、提取率不高。利用微波提取山藥多糖具有高效快速的優(yōu)點,但微波功率較難控制。酶與超聲提取法使用的酶作為一種蛋白質(zhì),其酶解效果受酶解溫度、pH值、底物濃度等多種因素影響,對提取會有干擾。超聲波提取法主要利用超聲波的空化作用產(chǎn)生熱效應,機械作用加速細胞壁的破碎,促進細胞內(nèi)多糖的溶出,達到縮短提取時間和提高多糖提取率的目的,還具有無需加熱的優(yōu)點。

        本試驗采用超聲輔助提取淮山多糖,研究淮山多糖的最佳提取工藝。此外,通過分光光度法研究淮山多糖對超氧陰離子自由基的清除作用,分析其體外抗氧化活性,旨在為淮山的深度加工和綜合開發(fā)利用提供一些參考依據(jù)。

        1材料與方法

        1.1材料、試劑與儀器

        淮山購自賀州市陽光市場。所用化學試劑均為分析純,試驗用水為蒸餾水??梢姺止夤舛扔嫗?22型(上海光譜儀器有限公司)。

        1.2方法

        1.2.1淮山多糖的超聲輔助提取

        將新鮮淮山洗凈、去皮切片,60 ℃烘干后粉碎。稱取干燥淮山粉末2.00 g,按設定試驗條件進行超聲波提取、離心,將上清液濃縮至15 mL,再加入60 mL乙醇,在冰箱冷藏室中放置24 h,離心,取沉淀,用乙[LM]醇洗滌后,再用蒸餾水溶解、稀釋到合適的濃度,測定吸光度,按下式計算淮山多糖的提取率:

        [JZ]提取率=C×V/m×100%。

        式中:C為淮山多糖濃度,mg/mL;V為淮山多糖提取液的體積,mL;m為淮山粉末質(zhì)量,mg。

        1.2.2最優(yōu)提取工藝條件的確定

        在單因素試驗的基礎上,以超聲功率、液料比、提取時間和提取溫度為影響因素,以淮山多糖的提取率為指標,設計L9(34)的正交試驗(表1)確定最優(yōu)提取工藝。首先,分別稱取5份2.00 g淮山粉末,固定液料比為60 mL ∶[KG-*3]1 g,超聲時間為30 min,超聲溫度為60 ℃,分別研究400、600、800、1 000、1 200 W超聲功率對淮山多糖提取率的影響。其次,在確定最佳超聲波功率后,分別稱取5份 2.00 g 淮山粉末,超聲時間為30 min,固定超聲功率為 800 W,超聲溫度為60 ℃,研究40 mL ∶[KG-*3]1 g、60 mL ∶[KG-*3]1 g、80 mL ∶[KG-*3]1 g、100 mL ∶[KG-*3]1 g、120 mL ∶[KG-*3]1 g的液料比對淮山多糖提取率的影響。在確定最佳超聲波功率、液料比后,稱取5份2.00 g淮山粉末,固定超聲功率為800 W,液料比為80 mL ∶[KG-*3]1 g,超聲溫度為60 ℃,研究30、40、50、60、70 min提取時間對淮山多糖提取率的影響。在確定最佳超聲波功率、液料比、提取時間后,分別稱取5份 2.00 g 淮山粉末,固定超聲功率為800 W,液料比為80 mL ∶[KG-*3]1 g,提取時間為50 min,研究40、50、60、70、80 ℃提取溫度對淮山多糖提取率的影響。

        1.2.3多糖含量的測定

        稱取0.100 0 g無水葡萄糖于燒杯中溶解,轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶內(nèi),加水至刻度處,得 1.00 mg/mL 葡萄糖溶液。分別取0.40、0.60、0.80、1.00、120、1.40 mL 葡萄糖溶液于比色管中定容至25 mL,各取200 mL于試管內(nèi),加入1.00 mL 5%苯酚、5.00 mL濃硫酸,振蕩,靜置30 min,以試劑空白作為參比,于490 nm處測定吸光度D490 nm,繪制標準曲線,得回歸方程y=9.483x+0.005,n=5,r=0.998 5。

        1.2.4多糖對超氧陰離子自由基的清除

        以分別加入 4.50 mL Tris-HCl緩沖溶液(0.05 mol/L,pH 值8.2)、2.00 mL H2O、0.20 mL HCl溶液(0.01 mol/L,pH值 8.2)的混合液作為參比溶液,以加入4.50 mL Tris-HCl緩沖溶液(0.05 mol/L,pH值8.2)、2.00 mL H2O、0.20 mL鄰苯三酚溶液(0.05 mol/L)的混合液為空白溶液,以加入4.50 mL Tris-HCl 緩沖溶液(0.05 mol/L,pH值8.2)、不同濃度多糖溶液和0.20 mL鄰苯三酚溶液(0.05 mol/L)的混合液作為樣品液,振蕩,最后加入1滴6 mol/L HCl終止反應,在37 ℃下加熱10 min,冷卻10 min至室溫,在325 nm處測定吸光度D325 nm。計算多糖對 O-2[KG-*2]· [KG-*3]的清除率:清除率 =(D325 nm(0)-D325 nm(樣))/D325 nm(0)×100%。式中:D325 nm(0)代表空白管所測的吸光度;D325 nm(樣)代表不同濃度樣品液所測得的吸光度。

        2結(jié)果與分析

        2.1超聲功率對淮山多糖提取率的影響

        在800 W功率范圍內(nèi),淮山多糖提取率隨著超聲功率的增大而提高,在800 W時出現(xiàn)最高值,多糖提取率達8.5%;之后隨著功率進一步增大,多糖提取率呈平穩(wěn)下降趨勢(圖1)。這可能是超聲功率的增加,加速了提取液的流動,使物料在超聲場中停留的時間縮短,破壁作用減弱,胞內(nèi)多糖溶出速率減緩,使多糖提取率降低[11]。因此,綜合考慮最適宜的超聲功率為800 W。

        2.2液料比對淮山多糖提取率的影響

        淮山多糖的提取率隨液料比的增大而升高,當液料比為80 mL ∶[KG-*3]1 g時,淮山多糖的提取率基本達到最高值,之后隨著液料比的增加提取率升高不明顯(圖2)。因此,最佳液料比為 80 mL ∶[KG-*3]1 g。

        2.3提取時間對淮山多糖提取率的影響

        淮山多糖的提取率隨提取時間的延長而逐漸提高,當提取時間為50 min時,提取率基本達到最高值,之后隨著提取時間的延長提取率變化不明顯(圖3)。因此,最佳提取時間為50 min。

        2.4提取溫度對淮山多糖提取率的影響

        淮山多糖的提取率隨提取溫度的升高而提高,當提取溫度超過60 ℃后,提取率升高不明顯,可能因為過高溫度會造成多糖黏稠,不易分離(圖4)。因此,綜合考慮認為適宜提取溫度為60 ℃。

        2.5正交試驗

        采用表1的L9(34)因素水平進行正交試驗,以淮山多糖提取率為指標。由表2可知,影響淮山多糖提取率因素的順序為A(超聲功率)>D(提取溫度)>B(液料比)>C(提取時間),即超聲功率的影響最大,提取時間的影響最小?;瓷蕉嗵亲顑?yōu)提取因素水平的組合為A2B3C2D1,即超聲功率 800 W、液料比80 mL ∶[KG-*3]1 g、提取時間50 min、提取溫度60 ℃。

        2.6驗證試驗

        在最佳提取工藝條件下,即超聲功率800 W、液料比 80 mL ∶[KG-*3]1 g、提取時間50 min、提取溫度60 ℃,用相同方法提取5個樣品,測定多糖提取率分別為8.52%、8.51%、853%、8.54%、8.55%,平均提取率為8.53%,表明該最佳提取工藝穩(wěn)定可靠。

        2.7本試驗方法與其他方法的比較

        通過與與其他提取淮山多糖方法(傳統(tǒng)水提法、微波法、復合酶法)的比較,發(fā)現(xiàn)采用超聲輔助提取淮山多糖的提取率最高,且提取時間比其他方法短(表3)。

        2.8淮山多糖對超氧陰離子自由基的清除作用

        當向鄰苯三酚氧化體系中加入不同濃度的淮山多糖溶液時,吸光度會有所降低,由此可知淮山多糖能催化O-2[KG-*2]·與H+結(jié)合,從而降低體系中的超氧陰離子自由基含量。在反應過程中淮山多糖對O-2[KG-*2]· [KG-*3]清除率越高,表明對O-2[KG-*2]· [KG-*3]清除作用越強。此外,淮山多糖具有較好的清除超氧陰離子自由基的能

        3結(jié)論

        通過單因素試驗和正交試驗確定淮山多糖的最優(yōu)超聲輔

        助提取工藝:超聲功率800 W、液料比80 mL ∶[KG-*3]1 g、提取時間50 min、提取溫度60 ℃,在此條件下多糖提取率高達 8.53%,比傳統(tǒng)水提法、微波法、復合酶法高,且提取時間也比這些方法短。因此,本試驗結(jié)果將為淮山多糖提取及淮山多糖抗氧化作用研究提供理論參考,有望促進淮山資源的開發(fā)利用。

        參考文獻:

        [1]雷伏貴,華樹妹,涂前程,等. 山藥種質(zhì)資源親緣關系的ISSR分析[J]. 福建農(nóng)業(yè)學報,2013,28(1):27-32.

        [2]胡月芳. 毛細管電泳-電化學檢測法測定淮山中5種活性成分[J]. 分析科學學報,2014,30(4):533-536.

        [3]盛瑋,薛建平,謝筆鈞. 懷山藥零余子提取物抗氧化活性的研究[J]. 食品科學,2009,30(3):92-94.

        [4]王振,張立敏,田陽. 超氧陰離子自由基電化學分析的新進展[J]. 分析化學,2014,42(1):1-9.

        [5]姜招峰,何湘平,劉傳繢,等. 超氧陰離子自由基誘導皮層神經(jīng)細胞Cu/Zn SOD基因表達的研究[J]. 北京聯(lián)合大學學報(自然科學版),2003,17(3):9-11.

        [6]趙衛(wèi)星,姜紅波,張來新,等. 山藥多糖的提取測定研究[J]. 寶雞文理學院學報(自然科學版),2010,30(3):34-38.

        [7]孫鋒,谷文英,丁霄霖. 山藥粗多糖的提取工藝[J]. 食品與生物技術學報,2006,25(3):79-83.

        [8]王安良,云霞,楊紅. 響應曲面法優(yōu)化山藥中多糖的微波提取工藝[J]. 食品科技,2007,28(12):86-90.

        [9]余芳,朱秋紅. 山藥多糖提取純化工藝研究進展[J]. 江蘇調(diào)味副食品,2013(2):13-16.

        [10]葛立軍,朱振洪,沙躍,等. 正交實驗優(yōu)化復合酶法提取山藥多糖工藝研究[J]. 時珍國醫(yī)國藥,2010,21(12):3187-3188.

        [11]李金忠,馬海樂,吳沿友. 超聲波提取山藥多糖的研究[J]. 糧油食品科技,2005,13(5):14-15.[HT][HJ]

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