溫賢運 成都市青白江區(qū)疾病預防控制中心 （四川 成都 610300）

膠體鈀化學改進劑石墨爐原子吸收光譜法測定血中鉛

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目的：觀察膠體鈀化學改進劑石墨爐原子吸收光譜法測定血中鉛的效果。方法：用5%硝酸沉淀血樣中蛋白質(zhì)，選用膠體鈀化學改進劑，進行石墨爐原子吸收光譜法測定。結果：該方法線性范圍是0～100μg/L，線性相關系數(shù)r=0.9996，檢出限為0.7μg/L，樣品加標回收率是97.3%～100.5%，相對標準偏差1.4%～1.7%。標準物質(zhì)測定結果為（123±12）μg/L和（314±13）μg/L，符合證書值范圍。結論：該方法方便快速、準確度高，可以用于血液中鉛含量測定。

膠體鈀 石墨爐原子吸收光譜法 血液 鉛

鉛是一種生活中接觸較多，污染環(huán)境的同時危害人體健康的常見重金屬物質(zhì)[1]。鉛和鉛化合物可通呼吸道、消化道、直接接觸等方式進入人體，對人體神經(jīng)系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、造血系統(tǒng)造成損傷[2]。血中鉛可直接反應近期接觸鉛的水平，目前國際上測定血鉛方法較多，石墨爐原子吸收光譜法應用較為廣泛，但不同基體改進劑和消解方法都會影響檢測過程[3～5]。本研究采用5%硝酸溶液處理樣品，膠體鈀為基體改進劑，進行石墨爐原子吸收光譜法檢測血中鉛，該方法檢測準確、快速、靈敏。

1.資料與方法

1.1 一般資料

儀器與試劑：原子吸收分光光度計（PinAAcle900T PE公司），配鉛空心陰極燈和自動進樣器，熱解涂層石墨管（PE公司），鉛標準儲備液1000mg/L（國家標準物質(zhì)中心，GBWO8619），凍干牛血鉛、鎘成分分析標準物質(zhì)（國家以及標準物質(zhì)，GBW09139和GBW09140），膠體鈀（專利號：ZL201010028121.9），BV-III級硝酸（北京翰隆達科技發(fā)展有限公司）。

1.2 方法

儀器設置條件：燈電流5mA，波長283.3nm，狹縫0.6nm，樣品進樣體積15μL，膠體鈀體積3μL，Zeeman 2磁場模式背景校正，石墨爐升溫程序設定如下：干燥100?C，升溫速率10?C/s，維持20s；干燥130?C，升溫速率10?C/s，維持20s；灰化1000?C，升溫速率40?C/s，維持20s；原子化2000?C，維持3s；清除2500?C，維持10s。

樣品收集與處理：采集職業(yè)體檢人群空腹靜脈血3～4mL，抗凝處理后吸取0.5mL全血于5mL離心管中，然后每管加入1.5mL硝酸溶液（5%），旋渦混合器上強力振搖3～5min，12000r/min離心10min，取上清。標準樣品制備：檢測前采用硝酸（1%）配置100μg/L鉛標準液，采用儀器將標準液自動稀釋為0.0μg/L、10.0μg/L、20.0μg/L、40.0μg/L、80.0μg/L、100.0μg/L等6個梯度作為標準系列。

2.結果

2.1 硝酸酸度選擇

實驗中分別采用1%、3%、5%、8%、10%不同濃度硝酸作為萃取劑沉淀血樣蛋白，結果顯示硝酸濃度為1%和3%時，樣品分層不完全，硝酸濃度為8%、10%時，樣品易出現(xiàn)血凝現(xiàn)象，且高酸度會影響石墨管使用壽命，故最后選擇5%硝酸溶液處理血液樣品。

2.2 灰化溫度和時間選擇

灰化作用是在不損失待測元素情況下減少甚至基本排除基體影響?；一瘻囟冗^高會損失待測元素，使重復測量數(shù)據(jù)可靠性變差，溫度過低產(chǎn)生較大背景值，影響最終檢測結果?；一瘯r間與樣品體積和性質(zhì)有關，通過實驗，本文選擇1000?C，維持20s灰化。

2.3 原子化溫度和時間選擇

原子化是指在一定溫度下分解元素為自由原子的過程，待測元素性質(zhì)不同，所需原子化溫度不同，不同樣品中檢測同一元素，可能所需原子化溫度也不同。原子化時間為吸收信號降低至基線所用時間，在保證完全原子化同時，原子化時間越短越好，經(jīng)實驗測定，原子化溫度為2000?C時，維持時間只需3s，故本文選擇設定原子化溫度為2000?C。

2.4 標準曲線與檢出限

在測定條件下，鉛標準系列溶液進行GF-AAS分析，樣品空白進行10次測定，鉛的線性范圍是0～100μg/L，線性相關系數(shù)r=0.9996，檢出限為0.7μg/L。

2.5 精密度與回收率

將正常人血樣分別加入20.0μg/L、40.0μg/L、80.0μg/L的鉛標準溶液，通過儀器進行測定，精密度與回收率見表1。2.6標準物質(zhì)測定

采用同樣方法檢測凍干牛血鉛、鎘成分分析標準物質(zhì)，檢測結果符合證書值范圍，見表2。

表1.精密度與回收率檢測結果(n=6)

3.討論

鉛進入人體之后，只有少量經(jīng)尿液或汗液排除，數(shù)小時后鉛會融入血液，對人體血液功能造成嚴重影響，從而引發(fā)貧血，表現(xiàn)為頭暈、困乏、無力、便秘等現(xiàn)象，嚴重者會出現(xiàn)消化道潰瘍、動脈硬化。兒童鉛中毒會出現(xiàn)失眠、食欲下降、發(fā)育延遲現(xiàn)象，有的還會伴隨聽覺障礙、智力低下。對于處于生長發(fā)育階段的兒童，鉛吸收率和吸收量都遠高于成人[6]。

表2.標準物質(zhì)鉛含量測定結果(n=6，±s，μg/L)

表2.標準物質(zhì)鉛含量測定結果(n=6，±s，μg/L)

標準物質(zhì)編號 標準值 檢測值GBW09139 124±14 123±12 GBW09140 310±13 314±13

目前檢測血中鉛含量的常見方法是石墨爐原子吸收光譜法，該方法將石墨材料制成管形或杯形原子化器，電流加熱原子化后分析原子吸收情況，有效避免原子濃度被火焰氣體所稀釋，提高分析靈敏度和準確性，在痕量金屬元素檢測方面具有較大優(yōu)勢。然而不同化學改進劑和消解方式會影響檢測過程，本研究選取膠體鈀化學改進劑，進行石墨爐原子吸收光譜法檢測。

鈀是一種常用無機化學改進劑，普通鈀鹽因其化學形態(tài)、作用受樣品基體影響，檢測靈敏度較低。膠體鈀在干燥階段可通過“晶體嵌套效應”避免待測元素損失，提高灰化溫度，降低或消除基體干擾，減少背景值。元素保持穩(wěn)定利于原子吸收檢測，提高檢測準確度和靈敏度。本研究經(jīng)實驗選定5%硝酸溶液作為萃取液，有效沉淀血樣中蛋白質(zhì)，將鉛釋放入硝酸溶液，減少基體干擾，操作相對于微波消解技術更為簡單方便。有研究報道，可用TritionX-100直接稀釋法處理樣品，但對于連續(xù)大批樣品檢測，存在稀釋樣品粘稠度較大、樣品在進樣管粘附致使體積不準等缺陷。本研究還對灰化和原子化溫度和時間進行分析，發(fā)現(xiàn)灰化溫度為1000?C，維持時間20s時，基體干擾相對最小，原子化溫度為2000?C，維持時間3s，可完全原子化。在設定條件下，該方法檢測樣品加標回收受率為97.3%～100.5%，相對標準偏差為1.4%～1.7%，標準物質(zhì)測定結果符合證書值范圍。

綜上所述，血樣經(jīng)5%硝酸溶液處理，以膠體鈀作為化學改進劑，石墨爐原子吸收光譜法檢測血液中鉛含量，具有簡便快速、精確靈敏等有點，可用于大批量樣品檢測。

[1] 張英, 周長民.重金屬鉛污染對人體的危害[J].遼寧化工, 2007, 36(6)395-397.

[2] 勞哲, 江恩源, 韋麗麗.膠體鈀基體改進劑對石墨爐原子吸收光譜法測定尿中的鉛的應用研究[J].醫(yī)藥前沿, 2015,28(15):13-14.

[3] 錢國英, 李綱.以磷酸二氫銨為基體改進劑的石墨爐原子吸收光譜法直接測定全血中的鉛[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志, 2013,23(5):1100-1103.

[4] 張斯恩, 張貝基, 譚紅麗.石墨爐原子吸收法測定全血標本鉛含量的3種前處理方法[J].檢驗醫(yī)學與臨床, 2014,11(13):1778-1780.

[5] 周學猛, 段江平, 孫仕萍.氯化鈀-磷酸二氫銨基體改進劑石墨爐原子吸收法測定血鉛[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志, 2010,20(6):1331-1332.

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1006-6586(2017)04-0026-02

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