覃子龍 覃華亮

廣西壯族自治區(qū)柳州市食品藥品檢驗所，廣西 柳州 545001

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藥物研究

氣相色譜法測定疏風散熱膠囊中薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮的含量

覃子龍 覃華亮*

廣西壯族自治區(qū)柳州市食品藥品檢驗所，廣西 柳州 545001

目的：建立疏風散熱膠囊中薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮的含量測定方法。方法：采用HP-5毛細管柱(30m×0.32mm，0.25μm)，程序升溫，分流比為10∶1，F(xiàn)ID檢測器。結(jié)果：薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮在同一色譜條件下分離良好，在2～200μg/mL范圍內(nèi)線性關系良好，回收率符合要求。結(jié)論：建立的方法重復性好、靈敏、易操作，適用于疏風散熱膠囊中薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮的質(zhì)量控制。

疏風散熱膠囊；薄荷酮；薄荷腦；胡薄荷酮；氣相色譜法

疏風散熱膠囊是在銀翹散的基礎上經(jīng)加工制成的中藥膠囊[1]，現(xiàn)行標準收載于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準中藥成方制劑第十二冊》，具有清熱解毒，疏風散熱的功效，臨床用于風熱感冒，發(fā)熱頭痛，咳嗽口干，咽喉疼痛[2]。處方由金銀花、連翹、忍冬藤、桔梗、薄荷、牛蒡子、地黃、淡竹葉、荊芥、梔子、淡豆豉、甘草等十二味中藥組成。其中，薄荷味辛而性涼，疏風散熱，且可解毒利咽；荊芥辛而微溫，散發(fā)表邪，透熱外出，二者皆為臣藥。在本制劑的制備工藝中，先提取薄荷和荊芥的揮發(fā)油，最后加到收膏干燥后的粉末中，再裝膠囊。可見上述揮發(fā)油在組方中有重要作用，但現(xiàn)行標準對于揮發(fā)油只有一個顯色反應[2]。王世清等[3]研究了疏風散熱膠囊中薄荷和荊芥的薄層鑒別方法，但該方法仍無法對其中薄荷和荊芥揮發(fā)油的主要成分進行含量控制，不利于藥品的質(zhì)量控制。薄荷的主要揮發(fā)性成分為薄荷腦，同時含少量薄荷酮和胡薄荷酮[4]；荊芥主要揮發(fā)性成分為胡薄荷酮和薄荷酮[5]。因此，本研究借鑒霍麗霞等[6]的方法，以薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮為指標性成分，采用氣相色譜法，建立適用于疏風散熱膠囊中薄荷和荊芥揮發(fā)性成分的含量測定方法，為進一步完善其質(zhì)量標準提供參考依據(jù)。

1 儀器和材料

1.1 儀器 氣相色譜儀(島津GC-2010 plus，配島津AOC-5000plus自動進樣器，F(xiàn)ID檢測器)；安捷倫HP-5毛細管柱(30m×0.32mm，0.25μm)；萬分之一電子分析天平(梅特勒AE200)；十萬分一電子分析天平(梅特勒XS205DU)；AS7240BT超聲波清洗儀(天津奧特賽恩斯儀器有限公司)。

1.2 材料 薄荷酮(批號：111705-200602)、薄荷腦(批號：110728-200506)、胡薄荷酮(批號：111706-201205，含量99.8%)等對照品購自中國食品藥品檢定研究院；疏風散熱膠囊(批號：150302、150303、160801、160802，黑龍江省濟仁藥業(yè)有限公司；批號:20150601，貴州民族藥業(yè)股份有限公司)；乙酸乙酯(分析純，廣州化學試劑廠)。

2 方法

2.1 色譜條件 色譜柱HP-5毛細管柱(30m×0.32mm，0.25μm)；色譜柱升溫條件:初始溫度為50℃，保持1min；以15℃/min的速率升溫至100℃，保持10min；以10℃/min的速率升溫至150℃，保持2min；以15℃/min的速率升溫至240℃，保持2min；進樣口溫度為200℃；FID檢測器；檢測器溫度為250℃；體積流量為1.5mL/min；進樣量1μL，分流進樣，分流比為10∶1。

2.2 對照品溶液制備 取薄荷酮、薄荷腦、胡薄荷酮對照品適量，精密稱定，加乙酸乙酯制成含薄荷酮1.072 mg/mL、薄荷腦1.092 mg/mL和含胡薄荷酮1.209 mg/mL的混合對照品儲備液。2.3 供試品溶液制備 本品混勻后，取0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙酸乙酯20mL，密塞，稱定重量，超聲10min，放冷，稱定重量，用乙酸乙酯補足減失的重量，搖勻，以0.45μm濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得。

2.4 陰性樣品溶液制備 參考疏風散熱膠囊現(xiàn)行標準中的制法[2]，制成缺薄荷和荊芥的陰性樣品。

在上述色譜條件下，分別精密吸取對照品溶液、供試品溶液和陰性樣品溶液各1μL，注入氣相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果表明，供試品溶液色譜中薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮與相鄰色譜峰的分離度均大于1.5，且陰性對照無干擾。見圖1。

2.5 線性試驗 分別精密吸取混合對照品溶液適量，加乙酸乙酯制成濃度分別為2～200μg/mL的梯度混合對照品溶液。以濃度(μg/mL)為橫坐標，峰面積為縱坐標進行線性回歸，得回歸方程、相關系數(shù)及線性范圍。結(jié)果見表1。

表1 薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮的標準曲線及線性范圍

2.6 精密度試驗 精密吸取濃度為10μg/mL的混合對照品溶液，重復進樣6次。結(jié)果薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮峰面積的RSD值分別為0.47%、0.48%、0.68%，表明儀器精密度良好。2.7 穩(wěn)定性試驗 精密吸取同一供試品溶液，分別于0、2、4、6、8、12h進樣6次。結(jié)果薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮峰面積的RSD分別為0.99%、0.79%、0.89%，表明供試品溶液在12h內(nèi)基本穩(wěn)定。2.8 重復性試驗 同時取6份樣品(批號：20150601)，依法制備供試品溶液，測定并計算含量，結(jié)果樣品中薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮含量RSD值分別為0.25%、0.91%、0.23%表明測定方法的重復性良好。2.9 回收率試驗 取樣品(批號：20150601)6份，每份加入薄荷酮濃度為0.05360mg/mL、薄荷腦0.05460 mg/mL和含胡薄荷酮0.06045 mg/mL的混合對照品溶液各1.0mL，依法測定其含量，計算回收率，結(jié)果薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮的平均回收率分別為102.4%、97.0%、103.2%。見表2～4。

表2 薄荷酮回收率試驗結(jié)果

表3 薄荷腦回收率試驗結(jié)果

表4 胡薄荷酮回收率試驗結(jié)果

2.10 樣品測定 取疏風散熱膠囊5批(標示量均為0.25g/粒)，依法制備供試品溶液，測定并計算其中薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮含量。結(jié)果見表5。

表5 樣品含量測定結(jié)果

3 討論

研究考察了提取時間(5min、10min、20min)和提取溶劑的用量(10mL、20mL、30mL)，確定以0.5g取樣時，用20mL乙酸乙酯超聲10min，即可完全提取樣品中的薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮，且在本實驗的色譜條件下，分離良好。

從樣品測定結(jié)果也可知，薄荷酮和薄荷腦的含量相對較為穩(wěn)定，但胡薄荷酮的含量差異較大，或許與生產(chǎn)投料有關。故研究以薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮為指標性成分建立的色譜方法可用于疏風散熱膠囊中薄荷與荊芥的含量測定，為準確評價藥品質(zhì)量提供參考依據(jù)。

[1]貴州省衛(wèi)生廳.貴州省藥品標準[S].貴陽：貴州科技出版社,1989：98.

[2]中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準·中藥成方制劑(第十二冊)[M].北京：中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會，1997:197.

[3]王世清,彭英.疏風散熱膠囊的TLC鑒別[J].中國藥業(yè),1999,8(9):11.

[4]沈梅芳,李小萌,單琪媛.薄荷化學成分與藥理作用研究新進展[J].中華中醫(yī)藥學刊,2012,30(7):1484-1486.

[5]趙立子,魏建和.中藥荊芥最新研究進展[J].中國農(nóng)學通報,2013,29(4):39-43.

[6]霍麗霞,魯寅生,郭青,等.GC法測定銀翹解毒系列制劑中薄荷腦、薄荷酮和胡薄荷酮[J].藥物評價研究,2015,38(1):66-70.

The Determination of Menthone,Menthol and Pulegone in Shufengsanre Capsule by GC

QIN Zilong QIN Hualiang*

Liuzhou Institute of Food and Drug Control of Guamgxi，Liuzhou 545001,China

Objective To develop a quality method of menthone、menthol and pulegone in shufengsanre capsule. Methods Analyzed samples on HP-5 column(30m×0.32mm，0.25μm)with temperature programmed,and the splitting ratio was 1∶10,detected by FID. Results menthone、menthol and pulegonehave been separated well under the same chromatographic condition, and have a good relationship within the range of 2～200μg/mL, and recoveryrate of the determination method all corresponded to the experimental standard.Conclusion The method developed was in good repeatability, sensitive and easy operation, can be applied in quality control of menthone,menthol and pulegone in shufengsanre capsule.

Shufengsanre Capsule；Menthone；Menthol；Pulegone；GC

覃子龍(1984-),男,漢族，在職研究生，主管藥師，研究方向為中藥質(zhì)量標準。E-mail:125490357@qq.com

覃華亮(1981-),男，壯族,在職研究生，主管中藥師，研究方向為中藥質(zhì)量標準。E-mail:23033415@qq.com

R284.2

A

1007-8517(2017)08-0011-03

2017-02-11 編輯：梁志慶)