張景秀，齊學(xué)良，劉亞萍，李學(xué)敏，徐本福，孫相國，楊軍霞

(臨沂市沂水中心醫(yī)院小兒內(nèi)三科，山東 沂水 276400)

尿液MCP-1濃度與小兒IgA腎病腎小管間質(zhì)病變的相關(guān)性分析

張景秀，齊學(xué)良，劉亞萍，李學(xué)敏，徐本福，孫相國，楊軍霞

(臨沂市沂水中心醫(yī)院小兒內(nèi)三科，山東 沂水 276400)

目的 探討尿液中單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)與IgA腎病腎小管間質(zhì)病變的關(guān)系。方法 選取2012年3月至2015年8月臨沂市沂水中心醫(yī)院小兒內(nèi)三科進(jìn)行腎穿刺活檢確診的98例原發(fā)性IgA腎病患兒進(jìn)行回顧性研究，根據(jù)活檢病理腎小管間質(zhì)的損害程度分為：無病變組11例、輕度組41例、中度組32例、重度組14例，檢測各組患兒尿液中MCP-1及相關(guān)指標(biāo)并進(jìn)行分析。結(jié)果 中度組、重度組IgA腎病患兒的收縮壓、舒張壓水平均顯著高于無病變組、輕度組患兒，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(重度組與無病變組的收縮壓、舒張壓水平比較，t值分別為4.119、5.820；中度組與輕度組比較，t值分別為4.613、5.714；重度組與無病變組比較，t值分別為2.668、2.914；重度組與輕度組比較，t值分別為2.257、2.573，均P<0.05)；無病變組、輕度組、中度組、重度組患兒的血肌酐、β2微球蛋白(β2-MG)、尿NAG、24h尿蛋白定量、尿MCP-1均呈逐漸升高的趨勢，組間差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F值分別為40.862、37.851、62.396、77.084、21.362，均P<0.05)；肌酐清除率在無病變組、輕度組、中度組、重度組患兒中呈逐漸降低的趨勢，組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=43.396，P<0.05)。腎小管間質(zhì)的損害IgA腎病患兒的血肌酐、β2-MG、尿NAG、24h尿蛋白定量與尿MCP-1均呈顯著的正相關(guān)關(guān)系(r值分別為0.671，0.598，0.664，0.692，均P<0.05)，肌酐清除率與尿MCP-1呈顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.720，P<0.05)。結(jié)論 MCP-1能反應(yīng)IgA腎病患兒腎小管間質(zhì)病變的程度。

尿液；單核細(xì)胞趨化蛋白-1；IgA腎??；腎小管間質(zhì)

IgA腎病是近年來臨床上發(fā)病率較高的泌尿內(nèi)科疾病，特別是在年齡小于14歲的人群中，IgA腎病的發(fā)病率可達(dá)0.5%以上，且具有逐年上升的趨勢[1]。長期的IgA腎病的急慢性進(jìn)展不僅可以導(dǎo)致血尿、蛋白尿、水腫或者高血壓等臨床表現(xiàn)，同時(shí)可引起腎小球損傷的不可逆改變，1.5%左右的患者可進(jìn)展為慢性腎功能衰竭[2]。

雖然IgA腎病主要表現(xiàn)為腎小球系膜的免疫復(fù)合物的沉積等病理改變，但相關(guān)研究已經(jīng)證實(shí)腎小球系膜間質(zhì)成分的病理損傷在評估IgA腎病的疾病預(yù)后以及臨床轉(zhuǎn)歸方面具有重要的價(jià)值，腎小管間質(zhì)病變與疾病的病情變化及發(fā)生發(fā)展具有密切的聯(lián)系。然而臨床上對于腎小管間質(zhì)病變的評估仍然以最終的病理診斷為依據(jù)，但病理檢查屬于有創(chuàng)檢查，臨床應(yīng)用具有明顯的局限性。單核細(xì)胞趨化蛋白-1(monocyte chemotaxis protein-1，MCP-1)被發(fā)現(xiàn)與腎小管間質(zhì)的纖維化、代償性增生等病理過程相關(guān)[3]，本研究重在探討尿液中MCP-1與IgA腎病腎小管間質(zhì)病變的關(guān)系，進(jìn)而為評估腎小管間質(zhì)病變程度及IgA腎病的臨床轉(zhuǎn)歸提供有效的臨床參考。

1對象及方法

1.1對象及納入排除標(biāo)準(zhǔn)

選取2012年3月至2015年8月臨沂市沂水中心醫(yī)院小兒內(nèi)三科進(jìn)行腎穿刺活檢確診的98例原發(fā)性IgA腎病患兒進(jìn)行回顧性研究，根據(jù)活檢病理腎小管間質(zhì)的損害程度分為：無病變組11例、輕度組41例、中度組32例、重度組14例。

無病變組11例，男8例、女3例，年齡6～14歲，平均9.2±3.5歲，病程16.2±6.7個(gè)月。輕度組41例，男30例、女11例，年齡6～14歲，平均8.9±3.8歲，病程17.5±7.4個(gè)月。中度組32例，男25例、女7例，年齡6～14歲，平均9.6±3.8歲，病程16.8±7.2個(gè)月。重度組14例，男9例、女5例，年齡5～14歲，平均9.7±3.2歲，病程17.9±7.5個(gè)月。四組患兒的年齡、性別及病程差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①IgA腎病患兒診斷依據(jù)腎臟穿刺活檢結(jié)果。②腎小管間質(zhì)病理損害的標(biāo)準(zhǔn)參考楊曉峰等的標(biāo)準(zhǔn)[1]：0級(正常)為腎小管無明顯改變；1級(輕度)為間質(zhì)中有極少量炎癥細(xì)胞，無纖維化組織增生，病變<20%；2級(中度)為腎小管上皮細(xì)胞萎縮、變性、壞死程度輕，呈灶狀分布，病變范圍20%～50%；3級(重度)為腎小管上皮細(xì)胞萎縮、變性、壞死程度重，呈片狀分布，大量炎癥細(xì)胞，纖維化組織增生呈囊，病變范圍>50%。③患兒的各項(xiàng)臨床資料完整。

排除標(biāo)準(zhǔn)：合并自身免疫性疾病、腫瘤性疾病、原發(fā)性腎小球疾病的患兒。

1.2檢測方法

ELISA法檢測N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(NAG)、β2微球蛋白(β2-MG)，采集兩組病例靜脈血，經(jīng)1 500rpm離心5min后得到血清，4℃保存待測，以標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液將標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶，靜置15min后混勻，倍比稀釋為7個(gè)濃度，取出板條，除了對照孔外每個(gè)孔加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品，劑量為100μL/孔，采用封板蓋封住，室溫反應(yīng)120min，使用PBS液體洗滌三次，除了空白對照孔，每孔加入檢測液(100μL)，室溫孵育1h，PBS洗滌三次，加入底物(50μL/孔)，避光孵育25min，加入終止液5min后測定450nm處吸光度。NAG、β2-MG抗體購自羅氏檢測公司，相關(guān)配套試劑購自南京凱基生物科技有限公司，嚴(yán)格按照說明書的要求進(jìn)行操作。

患者于入院第一天收集尿液5mL，室溫下靜置30min，4 000r/min離心10min分離上清夜。采用Sysmex系列CA-1500全自動生化監(jiān)測儀器檢測單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)，試劑由DadeBehring公司配套生產(chǎn)。

1.3觀察指標(biāo)

對比各組的收縮壓、舒張壓、血肌酐、肌酐清除率、β2-MG、NAG、24h尿蛋白定量、尿液中MCP-1的水平。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)用SAS 9.1統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析正態(tài)分布的計(jì)量指標(biāo)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差進(jìn)行描述，多組間比較采用方法分析法，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)；相關(guān)性分析采用Pearson線性相關(guān)分析法；P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1各組IgA腎病患兒的腎功能、單核細(xì)胞趨化蛋白-1指標(biāo)比較

中度組、重度組IgA腎病患兒的收縮壓、舒張壓水平均顯著的高于無病變組、輕度組患兒，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(重度組與無病變組的收縮壓、舒張壓水平比較，t值分別為4.119、5.820；中度組與輕度組比較，t值分別為4.613、5.714；重度組與無病變組比較，t值分別為2.668、2.914；重度組與輕度組比較，t值分別為2.257、2.573，均P<0.05)。無病變組、輕度組、中度組、重度組患兒的血肌酐、β2-MG、尿NAG、24h尿蛋白定量、尿MCP-1均呈逐漸升高的趨勢，組間差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F值分別為40.862、37.851、62.396、77.084、21.362，均P<0.05)；肌酐清除率在無病變組、輕度組、中度組、重度組患兒中呈逐漸降低的趨勢，組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=43.396，P<0.05),見表1。

組別 例數(shù)(n)收縮壓(mmHg)舒張壓(mmHg)血肌酐(μmol/L)肌酐清除率(mL/min)β2-MG(μg/L)尿NAG(U/L)24h尿蛋白定量(g)MCP-1(ng/L)無病變組11106.4±7.869.1±6.841.0±11.989.5±11.3218.9±86.313.8±5.60.78±0.111.04±0.15輕度組 41108.5±9.571.2±7.965.4±12.077.6±10.3329.5±147.228.4±7.61.14±0.161.56±0.23中度組 32114.4±9.076.3±7.8108.3±14.859.3±9.7785.0±213.257.9±9.01.62±0.212.20±0.24重度組 14122.8±10.083.1±9.5163.2±38.944.7±9.51318.7±398.698.0±17.33.10±0.442.96±0.28F29.08421.33740.86243.39637.85162.39677.08421.362P<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001

2.2腎小管間質(zhì)的損害IgA腎病患兒的腎功能指標(biāo)與單核細(xì)胞趨化蛋白-1指標(biāo)的相關(guān)性

腎小管間質(zhì)的損害IgA腎病患兒的血肌酐、β2-MG、尿NAG、24h尿蛋白定量與尿MCP-1均呈顯著的正相關(guān)關(guān)系(均P<0.05)，肌酐清除率與尿MCP-1呈顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系(P<0.05)，見表2。

表2 腎功能指標(biāo)與MCP-1指標(biāo)的相關(guān)性

Table 2 Correlation between renal functional indexes and MCP-1 index

3討論

3.1對IgA腎病腎小管間質(zhì)病變的評估具有重要意義

IgA腎病是以反復(fù)發(fā)作性肉眼或鏡下血尿、光鏡下系膜細(xì)胞增生、基質(zhì)增多，伴廣泛IgA沉積為特點(diǎn)的原發(fā)性腎小球疾病。IgA腎病患者腎活檢免疫熒光檢查腎小球系膜區(qū)有大量顆粒狀I(lǐng)gA沉積為特征的原發(fā)性腎小球疾病，雖然相關(guān)病變特別是免疫復(fù)合物及補(bǔ)體成分主要聚集于系膜區(qū)域，導(dǎo)致系膜的代償性增生，但近年來對于IgA腎病的基礎(chǔ)相關(guān)研究表明，腎小管間質(zhì)的病理性改變在促進(jìn)IgA腎炎蛋白尿、水腫以及促進(jìn)腎小管重吸收功能的衰竭中發(fā)揮了重要的作用[4-5]。通過評估腎小管間質(zhì)成分病理改變程度特別是纖維化及間質(zhì)代償性增生的程度，可以有效評估IgA腎病的病情嚴(yán)重程度及臨床轉(zhuǎn)歸。一項(xiàng)匯集了83例回顧性分析資料的臨床研究表明，IgA腎病并發(fā)腎功能衰竭的患者中，腎小管間質(zhì)成分的活檢病理可見明顯的纖維化改變，且纖維化程度越高患者的腎小管重吸收功能惡化越為嚴(yán)重[6-7]，表明腎小管間質(zhì)病變程度與IgA腎病具有顯著的平行關(guān)系，但鑒于腎小管間質(zhì)成分的活檢較為困難，其臨床評估和預(yù)后價(jià)值受到了明顯的限制。近年來關(guān)于IgA腎病基礎(chǔ)理論的研究表明，血清學(xué)相關(guān)指標(biāo)在腎小管間質(zhì)病變評估和臨床轉(zhuǎn)歸的預(yù)測中具有重要的價(jià)值，且血清學(xué)生物指標(biāo)的檢測較為容易，臨床上短期內(nèi)可反復(fù)監(jiān)測，客觀性較為理想。

3.2單核細(xì)胞趨化蛋白-1與腎小管間質(zhì)病變的關(guān)系

MCP-1是腎小管間質(zhì)成分纖維化過程中分泌的重要因子，在反復(fù)的慢性炎癥刺激及免疫損傷中巨噬細(xì)胞及單核細(xì)胞可以通過加劇MCP-1的合成和釋放，進(jìn)而促進(jìn)MCP-1在腎小管間質(zhì)成分中的表達(dá)，并通過藕聯(lián)腎小管重吸收膜上的鈉離子同向轉(zhuǎn)運(yùn)體進(jìn)而促進(jìn)MCP-1的尿液排出，導(dǎo)致尿液中的MCP-1的顯著上升[8-9]。雖然相關(guān)研究探討了MCP-1在IgA腎病疾病中的異常表達(dá)[10]，但對于IgA腎病患兒的腎功能指標(biāo)與MCP-1指標(biāo)的關(guān)系研究不足，此為本次研究的創(chuàng)新性所在。

3.3單核細(xì)胞趨化蛋白-1評估腎小管間質(zhì)病變的作用

本研究中，中度組、重度組IgA腎病患兒的收縮壓、舒張壓水平均顯著高于無病變組、輕度組患兒，IgA腎病發(fā)生發(fā)展的過程中收縮壓及舒張壓的上升可以促進(jìn)腎小管的缺血性損傷，加劇病情的發(fā)展，臨床上對于IgA合并明顯的高血壓的患者應(yīng)注意加強(qiáng)血壓的調(diào)控。血清肌酐及蛋白尿是評估腎小管重吸收及腎小球?yàn)V過功能的重要指標(biāo)，肌酐值及蛋白定量表達(dá)的上升往往提示腎小管疾病病情的加重，其中血清肌酐在不同程度的腎小管間質(zhì)成分病變中具有顯著的差異性表達(dá)，隨著間質(zhì)病理病變程度的增加，血清肌酐的表達(dá)呈現(xiàn)出了線性上升的趨勢，重度組患者的肌酐值可達(dá)163.2±38.9μmol/L，24h蛋白尿定量也可達(dá)3.10±0.44g，肌酐清除率也不足50mL/min，表明隨著腎小管間質(zhì)病變程度的加深，IgA腎炎患者的腎功能進(jìn)一步惡化。β2-MG、尿NAG是反應(yīng)腎小管吸收和分泌功能的重要指標(biāo)，β2-MG、尿NAG上升超過30%時(shí)患者的腎小管功能衰竭的發(fā)生率可上升5%以上，本研究中重癥組的β2-MG、尿NAG上升幅度可達(dá)3～4倍。本研究重點(diǎn)觀察了MCP-1的變化，發(fā)現(xiàn)重癥組患者尿液中的MCP-1可達(dá)2.96±0.28ng/L，較正常對照組及輕度組上升了2～3倍，可見腎組織病理損害越重，MCP-1的表達(dá)越強(qiáng)。腎組織MCP-1主要表達(dá)在腎小管的上皮細(xì)胞和間質(zhì)的小血管內(nèi)皮，腎小管間質(zhì)病理損害程度與MCP-1表達(dá)密切相關(guān)，臨床上可以通過監(jiān)測尿液中MCP-1的表達(dá)進(jìn)而評估患者的腎小管間質(zhì)損傷程度及疾病的預(yù)后。Inker等[11]學(xué)者也發(fā)現(xiàn)，在IgA腎病肌酐清除率下降明顯的患者尿液中，MCP-1可上升25%以上，且MCP-1的上升往往提示患者腎小管分泌以及吸收功能的減退。相關(guān)關(guān)系分析也可見，IgA腎病患兒的血肌酐、β2-MG、尿NAG、24h尿蛋白定量與尿MCP-1呈顯著的正相關(guān)關(guān)系，而與肌酐清除率呈負(fù)性相關(guān)關(guān)系，進(jìn)一步表明了尿MCP-1水平的檢測對于評估IgA腎病患者腎功能損傷的重要參考價(jià)值。

MCP-1能反應(yīng)IgA腎病患兒腎小管間質(zhì)病變的程度，其可能在兒童IgA腎病的病理損害中發(fā)揮著重要作用，通過動態(tài)監(jiān)測尿液中的MCP-1的表達(dá)變化，可以為評估腎小管間質(zhì)損傷程度及IgA腎病的臨床預(yù)后提供重要參考。

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[專業(yè)責(zé)任編輯：潘凱麗]

Correlation analysis between concentration of MCP-1 in urine and renal tubular interstitial lesion in children with IgA nephropathy

ZHANG Jing-xiu, QI Xue-liang, LIU Ya-ping, LI Xue-min, XU Ben-fu, SUN Xiang-guo, YANG Jun-xia

(ThirdDepartmentofInternalMedicine,YishuiCentralHospital,ShandongYishui276400,China)

Objective To investigate the relationship between urinary monocyte chemotaxis protein-1 (MCP-1) and renal tubular interstitial lesion in IgA nephropathy. Methods A total of 98 patients with primary IgA nephropathy confirmed by renal biopsy were retrospectively studied from March 2012 to August 2015 in Yishui Central Hospital. They were divided into no lesion group (11 cases), mild group (41 cases), moderate group (32 cases) and severe group (14 cases) according to renal tubular interstitial damage degree in biopsy pathology. Urine MCP-1 and related indicators were detected and analyzed. Results The systolic blood pressure and diastolic blood pressure of moderate group and severe group were significantly higher than those of no lesion group and mild group, and the differences had statistical significance (comparing severe group to no lesion group,tvalue was 4.119 and 5.820; comparing moderate group to mild group,tvalue was 4.613 and 5.714; comparing severe group to no lesion group,tvalue was 2.668 and 2.914; comparing severe group to mild group,tvalue was 2.257 and 2.573, respectively, allP<0.05). Serum creatinine, β2 microglobulin (β2-MG), urinary NAG, 24h urinary protein, and urinary MCP-1 showed increasing trend in no lesion group, mild group, moderate group and severe group, and the differences between two groups had statistical significance (Fvalue was 40.862, 37.851, 62.396, 77.084 and 21.362, respectively, allP<0.05). Creatinine clearance rate in no lesion group, mild group, moderate group and severe group was gradually reduced and the difference between two groups had statistical significance (F=43.396,P<0.05). Serum creatinine of renal tubular matter damage in children with IgA nephropathy, β2-MG and urinary NAG and 24h urinary protein were positively correlated with urinary MCP-1 (rvalue was 0.671, 0.598, 0.664 and 0.692, respectively, allP<0.05), and creatinine clearance rate was negatively correlated with urinary MCP-1 (r=-0.720,P<0.05). Conclusion MCP-1 can reflect the degree of renal tubular interstitial lesion in children with IgA nephropathy.

urine; monocyte chemotaxis protein-1; IgA nephropathy; renal tubular interstitial

2016-04-29

張景秀(1981-)，女，主治醫(yī)師，碩士，主要從事小兒腎臟疾病及風(fēng)濕疾病的診療工作。

孫相國，副主任醫(yī)師。

10.3969/j.issn.1673-5293.2017.03.022

R725

A

1673-5293(2017)03-0288-03