張立強(qiáng)+李媛+周偉東+鄧平+丁桂珍+李勤+艾桃山

摘要：為了解車輪蟲（Trichodina spp.）豐度與水環(huán)境因子之間的相關(guān)性，對養(yǎng)殖水體黃顙魚腮部寄生的車輪蟲豐度進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)，同時(shí)對水體的溫度、總磷、活性磷、總氮、亞硝酸鹽、氨氮進(jìn)行了測定。相關(guān)性分析表明，黃顙魚腮部寄生車輪蟲豐度與總磷濃度、活性磷濃度、總氮濃度顯著負(fù)相關(guān)；與亞硝酸鹽濃度顯著正相關(guān)；與溫度（24.0～30.5 ℃）、氨氮濃度無顯著相關(guān)性。

關(guān)鍵詞：車輪蟲（Trichodina spp.）；感染豐度；總磷；總氮；亞硝酸鹽；氨氮

中圖分類號：Q959.11 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：0439-8114（2017）06-1103-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.06.028

Abstrat： In order to reveal the trichodinid（Ciliophora：Peritrichida） abundance and its relationship to water quality parameters，the abundance of Trichodina spp. on the gill of yellow catfish was investigated in aquaculture water. Meanwhile，the temperature，total phosphorus，available phosphorus，total nitrogen，nitrite，and ammonia nitrogen data were got. Results indicated that Trichodina spp. abundance was negatively correlated with the concertration of total phosphorus，available phosphorus and total nitrogen. Positively correlated with the concertration of nitrite. No significant correlation with temperature（between 24.0～30.5 ℃） and ammonia nitrogen.

Key words：Trichodina spp.；abundance；total phosphorus；total nitrogen；nitrite；ammonia nitrogen

車輪蟲（Trichodina spp.）是一大類對水產(chǎn)動物危害極大、可自由運(yùn)動的原生動物，隸屬于寡膜綱（Oligohymeno）緣毛目（Peritrichia）游泳亞目（Mobilina）車輪蟲科（Trichodinidae）車輪蟲屬（Trichidina），該蟲具有附著盤結(jié)構(gòu)（圖1）。車輪蟲廣泛寄生于淡水魚類、海水魚類、貝類、甲殼類、兩棲類的鰓、皮膚、鰭條、膀胱、輸尿管、生殖系統(tǒng)等部位，可導(dǎo)致嚴(yán)重的組織病變[1-8]，且車輪蟲的感染一年四季都存在，只是感染程度及造成的危害不同而已。隨著中國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，集約化、規(guī)?；雀呙芏鹊酿B(yǎng)殖模式成為主要的養(yǎng)殖模式，加上水體的流動性，病原的相互隔離很難掌控，車輪蟲病每年都會大規(guī)模暴發(fā)。車輪蟲的感染除了直接導(dǎo)致水產(chǎn)動物的死亡之外，還會間接引起細(xì)菌和病毒的繼發(fā)感染，造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失并制約著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展[9-16]。

有關(guān)車輪蟲的研究主要集中于車輪蟲的分類學(xué)、藥物防治及生態(tài)應(yīng)用方面[6，17-21]，在生產(chǎn)實(shí)踐中車輪蟲病害的發(fā)生與養(yǎng)殖水環(huán)境因子關(guān)聯(lián)性研究較少。為了揭示車輪蟲與環(huán)境因子之間的關(guān)系，研究了黃顙魚養(yǎng)殖水體車輪蟲感染豐度與水溫、總磷、活性磷、總氮、亞硝酸鹽、氨氮之間的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 采樣點(diǎn)

武漢市水產(chǎn)科學(xué)研究所山南養(yǎng)殖池、江夏黃顙魚養(yǎng)殖戶、江夏山坡黃顙魚養(yǎng)殖基地。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

水樣采集：7～9月每周采樣兩次，時(shí)間為上午的9：00～10：00，分別于塘四角及中央用采水器各采5 L水，取混合樣。理化因子的取樣測定與浮游生物樣品采集同步進(jìn)行，其中，溫度現(xiàn)場測定，總磷、總氮、NH4-N、NO2-N、和PO4-P等水質(zhì)指標(biāo)參照水和廢水監(jiān)測分析方法進(jìn)行[22]。

車輪蟲感染豐度的統(tǒng)計(jì)：現(xiàn)場捕獲黃顙魚取第二片鰓組織，用200 μL無菌水反復(fù)沖洗鰓組織，涂片于顯微鏡下統(tǒng)計(jì)車輪蟲數(shù)量。

1.3 數(shù)據(jù)分析

通過GraphPad Prism 5軟件分析環(huán)境因子與車輪蟲感染豐度之間的相關(guān)性。

2 結(jié)果與分析

2.1 車輪蟲數(shù)量及水環(huán)境因子測定

試驗(yàn)共采集數(shù)據(jù)30次，分別測定了總磷、總氮、NH4-N、NO2-N、和PO4-P的濃度，同時(shí)統(tǒng)計(jì)了第二片鰓組織上的車輪蟲數(shù)量，結(jié)果見表1。

2.2 車輪蟲的感染豐度與溫度相關(guān)性分析

數(shù)據(jù)測定時(shí)間為7～9月，水溫在24.0～30.5 ℃間波動，即在平均溫度27.25 ℃上、下波動11.8%。第二鰓片組織上的車輪蟲感染豐度在20～420個之間波動，即在平均感染豐度220個上、下波動90.9%（圖1）。相關(guān)性分析結(jié)果表明，車輪蟲的感染豐度與溫度無顯著相關(guān)性（P=0.682 0）。

2.3 車輪蟲的感染豐度與總磷濃度相關(guān)性分析

總磷含量在0.017～0.719 mg/L間波動，即在平均濃度0.368 mg/L上、下波動95.3%。第二鰓片上的車輪蟲感染豐度在20～420個間波動，即在平均感染豐度220個上、下波動90.9%。相關(guān)性分析結(jié)果表明，車輪蟲的感染豐度與總磷濃度顯著負(fù)相關(guān)（P=0.000 3）。

2.4 車輪蟲的感染豐度與活性磷濃度相關(guān)性分析

活性磷含量在0.013～0.265 mg/L間波動，即在平均濃度0.139 mg/L上、下波動90.6%。第二鰓片上的車輪蟲感染豐度在20～420個之間波動，即在平均感染豐度220個上、下波動90.9%。相關(guān)性分析結(jié)果表明，車輪蟲的感染豐度與活性磷濃度顯著負(fù)相關(guān)（P=0.007 5）。

2.5 車輪蟲的感染豐度與總氮濃度相關(guān)性分析

總氮含量在0.171～1.946 mg/L間波動，即在平均濃度1.059 mg/L上、下波動83.8%。第二鰓片上的車輪蟲感染豐度在20～420個間波動，即在平均感染豐度220個上、下波動90.9%。相關(guān)性分析結(jié)果表明，車輪蟲的感染豐度與總氮的濃度顯著負(fù)相關(guān)（P=0.026 6）。

2.6 車輪蟲的感染豐度與亞硝酸鹽濃度相關(guān)性分析

亞硝酸鹽含量在0.008～0.071 mg/L間波動，即在平均濃度0.040 mg/L上、下波動79.7%。第二鰓片上的車輪蟲感染豐度在20～420個之間波動，即在平均感染豐度220個上、下波動90.9%。相關(guān)性分析結(jié)果表明，車輪蟲的感染豐度與亞硝酸鹽濃度顯著正相關(guān)（P=0.002 1）。

2.7 車輪蟲的感染豐度與氨氮濃度相關(guān)性分析

氨氮含量在0.021～0.880 mg/L之間波動，即在平均濃度0.451 mg/L上、下波動95.3%。第二鰓片上的車輪蟲感染豐度在20～420個之間波動，即在平均感染豐度220個上、下波動90.9%。相關(guān)性分析結(jié)果表明，車輪蟲的感染豐度與氨氮濃度無顯著相關(guān)性（P=0.908 8）。

3 小結(jié)與討論

唐發(fā)輝[23]研究表明車輪蟲在10～30 ℃之間，車輪蟲的感染率隨著溫度的升高而升高，Palm等[24]研究顯示車輪蟲對川鰈的感染率隨溫度的下降反而上升，本研究發(fā)現(xiàn)在24.0～30.5 ℃之間沒有直接相關(guān)性，這可能與溫度變化范圍小有關(guān)，同時(shí)由于本研究調(diào)查的水體為養(yǎng)殖水體，存在其他化學(xué)指標(biāo)濃度較高的因素，間接導(dǎo)致車輪蟲對溫度的變化不敏感。同時(shí)，研究發(fā)現(xiàn)車輪蟲的感染豐度與水體總磷、總氮、活性磷的濃度呈負(fù)相關(guān)性，總磷、總氮、活性磷指標(biāo)反映的是水體的富營養(yǎng)化水平。Marcogliese等[19]研究表明魚體感染車輪蟲感染豐度在污染物濃度為1%時(shí)明顯上升，但是沒有給出污染物的各項(xiàng)指標(biāo)參數(shù)。本研究測定結(jié)果表明，總磷含量在0.017～0.719 mg/L間波動，總氮含量在0.171～1.946 mg/L間波動，活性磷含量在0.013～0.265 mg/L間波動，已達(dá)富營養(yǎng)水平，在該水體中車輪蟲的食物微生物及有機(jī)碎屑含量極為豐富，車輪蟲無需附著于魚體攝取食物，這可能是導(dǎo)致車輪蟲感染豐度下降的主要原因。亞硝酸鹽是一種對黃顙魚有毒有害的化學(xué)物質(zhì)，高含量的亞硝酸會抑制黃顙魚的生理指標(biāo)，導(dǎo)致黃顙魚的免疫力下降，本研究測定結(jié)果表明，亞硝酸鹽濃度在0.008～0.071 mg/L間波動，在該濃度下由于黃顙魚體質(zhì)下降，使得車輪蟲的感染豐度上升。這與Ogut等[25]研究結(jié)果是一致的，同樣高含量的氨氮濃度也會抑制黃顙魚的生理指標(biāo)，但是在本研究中發(fā)現(xiàn)氨氮濃度與車輪蟲的感染豐度沒有直接的相關(guān)性，可能是高濃度的氨氮含量同時(shí)對車輪蟲的數(shù)量造成了一定的抑制效果。

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