裴海生，孫君社，王民敬，尹 騰，張秀清

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木質(zhì)素對(duì)靈芝菌絲體生長(zhǎng)的影響

裴海生1,2，孫君社2，王民敬2，尹 騰1，張秀清1※

（1. 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與營(yíng)養(yǎng)工程學(xué)院，北京 100083；2. 農(nóng)業(yè)部規(guī)劃設(shè)計(jì)研究院，北京 100125）

為了解添加外源木質(zhì)素對(duì)靈芝菌絲體生長(zhǎng)的影響，該研究通過(guò)在靈芝培養(yǎng)基中添加纖維素、半纖維素和木質(zhì)素，考察了外源添加木質(zhì)纖維素主要組分對(duì)靈芝菌體生長(zhǎng)的影響，發(fā)現(xiàn)木質(zhì)素添加明顯促進(jìn)靈芝菌絲體生長(zhǎng)；進(jìn)一步考察添加不同濃度木質(zhì)素靈芝菌絲體生長(zhǎng)情況以及靈芝產(chǎn)多糖、三萜變化規(guī)律。結(jié)果表明少量添加木質(zhì)素對(duì)靈芝菌絲體生長(zhǎng)有明顯促進(jìn)作用，木質(zhì)素加量為1.0%時(shí)，靈芝菌絲體生長(zhǎng)情況最好，生物量比對(duì)照提高了56%，同時(shí)靈芝胞外多糖、胞內(nèi)多糖及靈芝胞外三萜、胞內(nèi)三萜的合成均有明顯提高，其中胞內(nèi)多糖提高43%；4種靈芝菌株發(fā)酵產(chǎn)多糖、三萜結(jié)果對(duì)比分析表明1.0%木質(zhì)素添加均能提高不同菌株發(fā)酵多糖、三萜含量，木質(zhì)素作為營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)在不同靈芝菌株培養(yǎng)過(guò)程中添加均能促進(jìn)菌絲體活性物質(zhì)合成。研究結(jié)果可為靈芝菌生長(zhǎng)代謝研究及人工栽培提供科學(xué)依據(jù)和參考。

木質(zhì)素；多糖；生物量；三萜；靈芝菌；液體發(fā)酵

0 引 言

靈芝（）是中國(guó)重要傳統(tǒng)中藥材，靈芝中含有多糖、三萜類化合物、核苷類、生物堿類和甾醇類等多種生物活性成分。其中靈芝多糖是最有效活性成分之一，是由肽多糖、葡萄糖、雜多糖等多糖均一體組成的混合物，目前已分離到的靈芝多糖有200多種，研究報(bào)道靈芝多糖具有抗腫瘤、抗氧化、降血糖、降血脂、抑菌等生理活性[1-7]。三萜類化合物是靈芝的另一種重要化學(xué)成分，同樣具有具有抗腫瘤、抗炎、免疫調(diào)節(jié)、抑菌等生理活性[8-10]。

現(xiàn)在靈芝的主要來(lái)源是人工段木栽培和袋料栽培。段木栽培需大量的木材，且對(duì)樹(shù)木的種類、年份要求較高，對(duì)林業(yè)和生態(tài)環(huán)境造成挑戰(zhàn)[11-12]。靈芝的菌絲體培養(yǎng)不僅是基礎(chǔ)研究的重要手段，也是生物活性物質(zhì)生產(chǎn)的一種方式[13-14]。靈芝深層發(fā)酵的目標(biāo)產(chǎn)物主要有靈芝多糖(胞外多糖、胞內(nèi)多糖)、靈芝三萜(胞內(nèi)三萜、胞外三萜)，至今為止已有大量關(guān)于以生物量和胞外多糖為目標(biāo)產(chǎn)物的研究報(bào)道[15-20]。Tang等[21]比較了蔗糖、麥芽糖、乳糖和葡萄糖4種碳源對(duì)靈芝發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)靈芝胞內(nèi)、胞外多糖和靈芝酸的影響，結(jié)果表明乳糖對(duì)靈芝菌絲的生長(zhǎng)和靈芝酸及胞內(nèi)多糖的產(chǎn)生有利，但高濃度的乳糖對(duì)靈芝酸的累積有抑制作用；蔗糖做碳源有利于靈芝胞外多糖的產(chǎn)生，但生物量較低。趙小瑞等[22]采用振蕩-靜置兩段培養(yǎng)法，研究了以當(dāng)歸、黨參、甘草、黃芪4種甘肅道地藥材提取物作為誘導(dǎo)子對(duì)靈芝液態(tài)發(fā)酵過(guò)程中細(xì)胞生長(zhǎng)及產(chǎn)靈芝三萜的影響，結(jié)果表明4種中草藥提取物是有效的誘導(dǎo)子，可促進(jìn)靈芝發(fā)酵三萜產(chǎn)量提高。通過(guò)對(duì)菌絲體發(fā)酵培養(yǎng)基及發(fā)酵條件優(yōu)化，菌絲體生物量、多糖及三萜均能達(dá)到較高水平，但是關(guān)于在培養(yǎng)基中添加木質(zhì)素、纖維素和半纖維素三組分來(lái)促進(jìn)菌絲體生長(zhǎng)的研究未見(jiàn)報(bào)道。

靈芝栽種時(shí)常以木質(zhì)素含量較高的木材為主[23]，且靈芝生長(zhǎng)過(guò)程中主要降解基質(zhì)中的木質(zhì)素，鑒于此，本研究在優(yōu)化靈芝液體發(fā)酵培養(yǎng)條件的基礎(chǔ)上，額外添加木質(zhì)纖維素主要組成成分纖維素、半纖維素和木質(zhì)素，考察外源組分的添加對(duì)靈芝菌絲體生長(zhǎng)的影響，隨后進(jìn)一步考察木質(zhì)素添加量對(duì)靈芝細(xì)胞生物量、胞內(nèi)多糖、三萜和胞外多糖、三萜含量的影響情況，以期為靈芝菌生長(zhǎng)代謝研究及人工栽培提供科學(xué)依據(jù)和參考。

1 材料與方法

1.1 取 樣

靈芝菌：赤芝、紫芝，由浙江省龍泉市科達(dá)農(nóng)副產(chǎn)品有限公司提供，是當(dāng)前段木栽培的主要菌種；纖維素、半纖維素購(gòu)于北京易秀博谷生物科技有限公司；木質(zhì)素購(gòu)于Sigma；土豆、麩皮均為市售。

1.2 靈芝菌的平板培養(yǎng)

固體培養(yǎng)基（g/L）：麩皮50，蔗糖10，磷酸二氫鉀2，硫酸鎂2，大豆蛋白胨20，瓊脂20。在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中分別加入一定量（質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5%、1.0%、1.5%）的纖維素、半纖維素和木質(zhì)素，然后調(diào)pH值為5.7并經(jīng)121 ℃高壓滅菌20 min，在超凈工作臺(tái)中趁熱倒平板，待平板中培養(yǎng)基凝固后，按每板接100L培養(yǎng)4 d的靈芝菌懸濁液，放置于28 ℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6 d，然后分別測(cè)量各平板中靈芝菌落的直徑。

1.3 靈芝的液體發(fā)酵培養(yǎng)

發(fā)酵培養(yǎng)基（g/L）：麩皮50，蔗糖10，磷酸二氫鉀2，硫酸鎂2，大豆蛋白胨20。木質(zhì)素添加量為0、0.2%、0.5%、1%和1.5%。液體培養(yǎng)基的裝液量定為100 mL。發(fā)酵培養(yǎng)基的pH值調(diào)至5.7，滅菌后接入4 mL培養(yǎng)4 d的靈芝菌懸濁液，隨后28 ℃、160 r/min恒溫振蕩培養(yǎng)8 d。

1.4 靈芝菌液體培養(yǎng)生物量測(cè)定

按1.3中的培養(yǎng)方法培養(yǎng)靈芝菌，在培養(yǎng)36 h后開(kāi)始取樣測(cè)定生物量，此后每隔24 h取1次樣。將100 mL靈芝培養(yǎng)液在已知干質(zhì)量砂芯漏斗（1）上真空抽濾，用去離子水洗滌菌絲體，直至菌絲體發(fā)白并且發(fā)酵液呈無(wú)色，然后置于105 ℃烘箱中烘干至恒質(zhì)量后稱質(zhì)量（2），精確至0.001 g，2-1即為靈芝菌絲體干質(zhì)量。

1.5 靈芝菌多糖含量的測(cè)定

發(fā)酵液中多糖含量測(cè)定：取過(guò)濾后的澄清發(fā)酵液5 mL，于50 mL離心管中，緩慢加入15 mL 95%乙醇，靜置一段時(shí)間后于4 000 r/min離心10 min，依次用無(wú)水乙醇和丙酮洗滌，最后將沉淀自然風(fēng)干后，用適量的去離子水溶解定容至50 mL，取定容后的溶液1 mL用苯酚-硫酸法測(cè)定發(fā)酵液中的多糖含量。

靈芝菌絲體中多糖含量測(cè)定：發(fā)酵液靈芝菌絲體烘干后研磨并過(guò)60目篩，取過(guò)篩后的菌絲體粉末0.100 g，置于50 mL離心管中，加入10 mL去離子水于100 ℃下水浴提取1 h，4 000 r/min離心10 min后取出上清液，重復(fù)提取操作，合并2次提取液，定容至50 mL后，取1 mL定容后的溶液用苯酚-硫酸法測(cè)定菌絲體中的多糖含量。

1.6 靈芝菌三萜含量的測(cè)定

發(fā)酵液中三萜含量測(cè)定：取過(guò)濾后的澄清發(fā)酵液2 mL，稀釋4倍至8 mL，然后從中取0.4 mL用香草醛-冰醋酸法測(cè)定發(fā)酵液中的三萜化合物含量。

靈芝菌絲體中三萜含量測(cè)定：將上述烘干后的靈芝菌絲體研磨并過(guò)60目篩，取過(guò)篩后的菌絲體粉末0.100 g，置于50 mL離心管中，加入10 mL 95%乙醇溶液浸潤(rùn)10 min，然后45 ℃超聲處理1 h，4 000 r/min離心10 min后取出上清液，再次加入10 mL 95%乙醇溶液，二次超聲提取1 h，然后4 000 r/min離心10 min后取出上清液，合并2次提取液，定容至50 mL后，取1 mL定容后的溶液用香草醛-冰醋酸法測(cè)定菌絲體中的三萜化合物含量。

2 結(jié)果與討論

2.1 纖維素、半纖維素和木質(zhì)素對(duì)靈芝生長(zhǎng)的影響

通過(guò)在固體培養(yǎng)基中加入不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)的纖維素、半纖維素和木質(zhì)素（0、0.5%、1.0%、1.5%），觀察3種組分對(duì)靈芝菌生長(zhǎng)的影響，培養(yǎng)6 d后生長(zhǎng)情況如圖1所示。

從圖1中可以看出，在培養(yǎng)基中外源添加不同濃度纖維素、半纖維素和木質(zhì)素培養(yǎng)6 d后，靈芝菌長(zhǎng)勢(shì)表現(xiàn)出明顯的差異，纖維素的添加對(duì)菌絲體的生長(zhǎng)并未產(chǎn)生明顯的促進(jìn)作用，而半纖維素、木質(zhì)素的添加則明顯促進(jìn)靈芝菌絲體的生長(zhǎng)，以添加木質(zhì)素最為明顯。木質(zhì)素添加加量為0.5%時(shí)，靈芝菌菌落最大，并且菌絲顯得較為濃密，表明木質(zhì)素的添加對(duì)靈芝菌菌體生長(zhǎng)有一定的促進(jìn)作用。隨著木質(zhì)添加量的增加，靈芝菌落反而變小，當(dāng)木質(zhì)素添加量為1.5%時(shí)，菌落直徑明顯小于0.2%木質(zhì)素添加量（圖2）。

圖2為不同木質(zhì)素添加量下靈芝菌落直徑大小變化情況，從圖2中可以看出，菌落直徑隨木質(zhì)素添加量的增加呈先增大后減小的趨勢(shì)，當(dāng)木質(zhì)素添加量為0.2%時(shí)，靈芝菌長(zhǎng)勢(shì)最好，菌落直徑最長(zhǎng)可達(dá)9 cm。當(dāng)木質(zhì)素添加量高于1.0%后，菌落直徑隨木質(zhì)素添加量的增加而明顯縮小，木質(zhì)素添加量為2.0%時(shí)，菌落直徑只有3 cm。由此可知，一定濃度的木質(zhì)素能促進(jìn)靈芝生長(zhǎng)，但當(dāng)木質(zhì)素添加量過(guò)高后反而會(huì)對(duì)靈芝的生長(zhǎng)造成一定的抑制作用，因此在靈芝培養(yǎng)過(guò)程中要嚴(yán)格控制木質(zhì)素添加量，使靈芝菌絲體生長(zhǎng)處于最優(yōu)的水平。

2.2 木質(zhì)素添加對(duì)靈芝液體培養(yǎng)生物量的影響

隨后在靈芝液體培養(yǎng)基中添加不同濃度的木質(zhì)素，考察木質(zhì)素添加對(duì)靈芝菌液體培養(yǎng)的影響。從圖3中可以看出，在培養(yǎng)基中添加低濃度的木質(zhì)素時(shí)（0.2%、0.5%），靈芝菌初期生長(zhǎng)速度明顯高于高濃度木質(zhì)素添加時(shí)的生長(zhǎng)速度，隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，1.0%木質(zhì)素添加組靈芝菌生長(zhǎng)速度逐漸加快，在第4天達(dá)到最大生物量且高于0.2%和0.5%木質(zhì)素添加組。分析其生長(zhǎng)滯后的原因可能是1.0%木質(zhì)素添加在發(fā)酵初期對(duì)靈芝生長(zhǎng)表現(xiàn)出一定程度的抑制作用，菌體達(dá)到一定濃度后分泌可降解木質(zhì)素的酶系，并將木質(zhì)素作為其營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，進(jìn)而生物量得到迅速提升。當(dāng)木質(zhì)素添加量為1.5%時(shí)，靈芝菌的生長(zhǎng)受到明顯抑制作用，生物量要低于對(duì)照組。液態(tài)培養(yǎng)基中木質(zhì)素添加量為1.0%時(shí)，菌體生長(zhǎng)情況最好，生物量最高可達(dá)0.7 g/(100 mL)，比對(duì)照組高56%。

2.3 添加木質(zhì)素對(duì)多糖含量的影響

木質(zhì)素對(duì)靈芝液體發(fā)酵產(chǎn)多糖的影響分別如圖4所示。圖4為發(fā)酵液中多糖含量變化情況，可以看出靈芝發(fā)酵液多糖的含量呈先升后降趨勢(shì)。在經(jīng)過(guò)1～2 d的適應(yīng)期后，靈芝胞外多糖含量逐步提高增加，在第4天左右靈芝發(fā)酵液多糖含量達(dá)到最大。隨木質(zhì)素添加量的增加，胞外多糖含量呈先增加后降低的趨勢(shì)，0.2%、0.5%、1.0%木質(zhì)素添加量胞外多糖濃度均高于對(duì)照組，1%木質(zhì)素添加胞外多糖最高，與不添加木質(zhì)素相比，其最大胞外多糖產(chǎn)量提高了33.6%。而添加1.5%木質(zhì)素胞外多糖含量反而低于對(duì)照組，可見(jiàn)過(guò)量添加木質(zhì)素同樣會(huì)抑制靈芝菌胞外多糖的合成。

圖4b為靈芝菌絲體中多糖含量變化情況，與胞外多糖合成情況類似，隨木質(zhì)素添加量增加靈芝胞內(nèi)多糖含量同樣呈先增加后降低的趨勢(shì)，0.2%、0.5%、1.0%木質(zhì)素添加胞內(nèi)多糖含量均高于對(duì)照組，1.5%木質(zhì)素添加胞內(nèi)多糖含量低于對(duì)照組。添加1.0%的木質(zhì)素組對(duì)靈芝菌絲體多糖的合成具有很好的促進(jìn)作用，該組中的靈芝菌絲體多糖在5 d前一直呈上升趨勢(shì)，在第5天產(chǎn)量達(dá)到最大，為58.25 mg/g菌絲體，與對(duì)照組相比，其最大胞內(nèi)多糖產(chǎn)量提高了43%。添加1.5%的木質(zhì)素抑制靈芝胞內(nèi)多糖的產(chǎn)量，其胞內(nèi)多糖含量明顯低于未添加木質(zhì)素組，分析其主要原因可能是由于過(guò)量添加木質(zhì)素明顯抑制菌體生長(zhǎng)，從而影響了胞內(nèi)多糖的合成。

a. 胞外多糖含量

a. Polysaccharide content in fermentation broth

2.4 木質(zhì)素添加對(duì)三萜含量的影響

木質(zhì)素對(duì)靈芝液體發(fā)酵產(chǎn)三萜的影響如圖5所示。圖5a為發(fā)酵液中三萜含量變化情況，從圖中可以看出，發(fā)酵液中三萜含量在前4 d逐漸增加，在第4 天達(dá)到最大，后期三萜含量基本保持恒定。與對(duì)照組相比，添加木質(zhì)素均能促進(jìn)胞外三萜含量的增加，木質(zhì)素添加量低于1.0%時(shí)，隨添加量的增加胞外三萜含量呈明顯上升趨勢(shì)。添加1.0%木質(zhì)素，胞外三萜含量最高，在第4天發(fā)酵液三萜質(zhì)量濃度最高達(dá)66 mg/(100 mL)，對(duì)照組三萜含量最高僅為49 mg/(100 mL)，比對(duì)照提高34.6%。木質(zhì)素添加量1.5%時(shí)，胞外三萜含量要低于0.2%、0.5%、1.0%木質(zhì)素添加量三萜含量，但與對(duì)照組相比三萜含量要略高。

圖5b為靈芝菌絲體中三萜含量變化情況，從圖中可以看出，木質(zhì)素添加均能促進(jìn)靈芝菌絲體內(nèi)三萜含量的增加，隨著木質(zhì)素添加量的增加菌絲體三萜含量明顯增加。木質(zhì)素添加量為0.2%、0.5%時(shí)，與對(duì)照組相比菌絲體內(nèi)三萜含量略有增加但差距并不明顯。當(dāng)木質(zhì)素添加量為1.0%時(shí)，菌絲體內(nèi)三萜含量明顯增加，菌絲體內(nèi)三萜質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高可達(dá)到41.5 mg/g，與對(duì)照組相比三萜含量提高41%。而當(dāng)木質(zhì)素添加量繼續(xù)增加到1.5%時(shí)，與1.0%添加組相比靈芝菌絲體內(nèi)三萜含量開(kāi)始減少。

a. 胞外三萜含量

a. Triterpene content in fermentation broth

2.5 木質(zhì)素添加下不同靈芝菌株活性成分含量變化情況

為進(jìn)一步驗(yàn)證添加木質(zhì)素對(duì)靈芝菌絲體多糖合成的促進(jìn)作用，選取赤芝203、野生靈芝、龍泉紫芝、金寨紫芝4種段木栽培常用菌株，液體發(fā)酵培養(yǎng)基中添加1.0%木質(zhì)素，考察木質(zhì)素添加對(duì)其發(fā)酵產(chǎn)胞外多糖、三萜的影響情況，結(jié)果如圖6所示。

4株靈芝菌添加木質(zhì)素后多糖、三萜含量均得到明顯提高，與對(duì)照組相比多糖含量增加量在38%～43%左右，三萜含量增加在30%～38%左右，因菌株不同略有差異，其中赤芝203多糖含量與對(duì)照比提高43%，金寨紫芝三萜含量與對(duì)照相比提高38%。由此可見(jiàn)，木質(zhì)素作為營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)在不同靈芝菌種培養(yǎng)過(guò)程中添加均能促進(jìn)菌絲體多糖、三萜合成。

2.6 討 論

靈芝生長(zhǎng)及活性成分含量受靈芝品種、栽培方式、栽培基質(zhì)、生長(zhǎng)環(huán)境等因素的影響較大[24-26]。靈芝段木栽培、袋料栽培均需選用木質(zhì)素含量較高的殼斗科木材、木屑或棉籽殼等，表明木質(zhì)素在靈芝生長(zhǎng)過(guò)程中起著不可或缺的作用。尹騰通過(guò)測(cè)定種植前后段木組分含量變化情況發(fā)現(xiàn)靈芝種植后段木中木質(zhì)素質(zhì)量分?jǐn)?shù)減少70%以上[27]，進(jìn)一步證明靈芝段木及袋料種植過(guò)程中需要以木質(zhì)素組分為營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。而目前關(guān)于木質(zhì)素對(duì)靈芝生長(zhǎng)影響的研究報(bào)道并不多。本文通過(guò)靈芝液體培養(yǎng)考察木質(zhì)素對(duì)靈芝菌絲體生長(zhǎng)的影響規(guī)律，發(fā)現(xiàn)在相同培養(yǎng)條件下少量添加木質(zhì)素可促進(jìn)靈芝菌絲體生長(zhǎng)及多糖、三萜合成，但與文獻(xiàn)報(bào)道發(fā)酵水平相比，菌絲體濃度及活性多糖、三萜含量存在一定差距[28-30]，分析其主要原因有以下幾方面：1）所選菌株為實(shí)際生產(chǎn)菌株，未經(jīng)馴化篩選，導(dǎo)致菌株在液體培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)活力較低；2）為避免碳源過(guò)于豐富，影響測(cè)定結(jié)果分析，我們降低了發(fā)酵培養(yǎng)基中碳源濃度，使得纖維素、半纖維素、木質(zhì)素組分對(duì)生長(zhǎng)影響的差異更加明顯，這樣也導(dǎo)致了靈芝菌絲體發(fā)酵處于較低水平。鑒于此，后面在此研究的基礎(chǔ)上，需對(duì)靈芝菌種及發(fā)酵條件進(jìn)一步篩選優(yōu)化，以期提高整體發(fā)酵水平。

3 結(jié) 論

本文選用靈芝段木栽培生產(chǎn)菌株，在培養(yǎng)基中分別添加纖維素、半纖維素、木質(zhì)素三大主要組分，主要考察3種組分添加對(duì)靈芝菌絲體生長(zhǎng)促進(jìn)作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)添加半纖維素、木質(zhì)素均能促進(jìn)菌絲體生長(zhǎng)，且木質(zhì)素添加長(zhǎng)勢(shì)最好，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)添加少量木質(zhì)素能促進(jìn)菌體生長(zhǎng)及菌絲體活性物質(zhì)多糖和三萜的生物合成，過(guò)量添加反而抑制菌絲體生長(zhǎng)及活性物質(zhì)的合成。當(dāng)木質(zhì)素添加量為1.0%時(shí)，菌絲體生長(zhǎng)情況最好，此時(shí)胞外多糖、胞內(nèi)多糖、胞外三萜、胞內(nèi)三萜相應(yīng)的合成情況均處于最佳，與對(duì)照組相比均有所提高，其中胞內(nèi)多糖含量提高了43%。

本研究明確了靈芝菌菌絲體生長(zhǎng)過(guò)程中添加木質(zhì)素對(duì)菌體生長(zhǎng)及活性物質(zhì)合成均有明顯促進(jìn)作用。如果在靈芝培養(yǎng)過(guò)程中補(bǔ)加木質(zhì)素成分，靈芝子實(shí)體生長(zhǎng)及活性成分合成會(huì)得到明顯提高，后續(xù)需在木質(zhì)素的代謝和轉(zhuǎn)化途徑及廢棄木質(zhì)素回收利用方面做進(jìn)一步深入研究，為實(shí)現(xiàn)農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展服務(wù)。

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Effect of lignin on growth of

Pei Haisheng1,2, Sun Junshe2, Wang Minjing2, Yin Teng1, Zhang Xiuqing1※

(1.,,100083,; 2.,100125,)

is a typical polypore fungus used for traditional Chinese medical purposes. The active ingredients ofinclude polysaccharides, triterpene, proteins and ganoderic acid, which can be effective in the treatment of cancer, hypertension and viral infections. Therefore, it has been widely planted and used in human health products. Nowadays the main cultivation methods forwere cut-log cultivation and substitute cultivation. These two methods use abundant wood. So the cultivation ofby using abundant wood could cause destruction to the ecological environment.liquid fermentation cultivation was no only an important method for fundamental research, but also a way to product bioactive compounds. In this study, cellulose, hemicellulose and lignin were added into the media to investigate the influence of these additives on the growth of. The results showed that adding lignin or hemicellulose all could obviously promote the growth of. However, adding cellulose could not obviously promote the growth of. Most of lignin and a part of hemicellulose could be used, while the cellulose could not be used for the growth of. The effects of liquid culture media with different lignin concentrations on the growth ofwere studied. The liquid fermentation media with four different lignin concentrations (0.2%, 0.5%, 1.0%, 1.5%) were designed. The results showed that adding little lignin could promote the growth of, however, when the concentration of lignin was above 1.0%, the growth ofwas severely inhibited. Compared with the control, the growth ofwas the best with the lignin concentration of 1.0%, and its biomass was increased by 56%; the synthesis of extracellular polysaccharides and intracellular polysaccharides were increased by 33.6%, 43%, respectively; and the synthesis of extracellular triterpenoid and intracellulartriterpenoid were increased by 34.6%, 41%, respectively. It was proved that adding lignin in the process of liquid fermentation culture could increase the yield of polysaccharides and triterpenoid in four differentstrains (203, wild, Long Quan, Jin Zhai. Compared with the control, the polysaccharide contents of fourwere increased by 38%-43%, and triterpenoid contents were increased by 30%-38%, and the polysaccharide content of203 was higher than the control by 43%, and triterpenoid content of Jin Zhaiwas higher than the control by 38%. However, it will need further study to prove that adding lignin between cut-log cultivation or substitute cultivation can promote the growth ofand the synthesis of bioactive compounds.

lignin; polysaccharides; triterpenes;; liquid fermentation

10.11975/j.issn.1002-6819.2017.06.040

S567.3+1

A

1002-6819(2017)-06-0309-06

2017-01-04

2017-03-16

國(guó)家自然科學(xué)基金（21576142）

裴海生，男（漢族），工程師，主要從事生物技術(shù)及酶工程方面的研究。北京 農(nóng)業(yè)部規(guī)劃設(shè)計(jì)研究院，100083。Email：peihaisheng2001@163.com

張秀清，女（漢族），副教授，主要從事生物技術(shù)及酶工程方面的研究。北京 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)，100083。Email：xiuqingzhang@cau.edu.cn