張百平， 孫樹凱， 賈 棟

(第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院神經(jīng)外科，陜西 西安 710038)

CBX8過表達(dá)或沉默對人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖和凋亡的影響

張百平， 孫樹凱， 賈 棟△

(第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院神經(jīng)外科，陜西 西安 710038)

目的： 探究染色質(zhì)結(jié)構(gòu)域蛋白8(chromodomain protein 8，CBX8)對人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖與凋亡的作用。方法: Western blot和RT-qPCR檢測組織及細(xì)胞系中CBX8的表達(dá)。構(gòu)建過表達(dá)CBX8和沉默CBX8載體，轉(zhuǎn)染神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞T98G和U87MG，分別用MTT法和BrdU實驗檢測細(xì)胞增殖，流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡。結(jié)果: 與正常腦組織和星形膠質(zhì)細(xì)胞相比，神經(jīng)膠質(zhì)瘤組織及細(xì)胞中的CBX8蛋白和mRNA水平明顯上升。在T98G和U87MG細(xì)胞中，過表達(dá)CBX8均促進(jìn)細(xì)胞增殖，抑制細(xì)胞凋亡，并上調(diào)Rb/E2F1的表達(dá)水平，而沉默CBX8則作用相反。sh-E2F1轉(zhuǎn)染細(xì)胞之后，cyclin D1的表達(dá)以及Bcl-2/Bax的比值降低。結(jié)論: CBX8可能通過Rb/E2F1通路調(diào)節(jié)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖和凋亡。

神經(jīng)膠質(zhì)瘤； 色素框同源物8； T98G細(xì)胞； U87MG細(xì)胞

神經(jīng)膠質(zhì)瘤亦稱膠質(zhì)細(xì)胞瘤，是最常見的顱內(nèi)腫瘤，因其較高的致死率成為眾所周知的惡性腫瘤[1-2]。目前臨床上以手術(shù)治療為主，輔以放療及化療等綜合治療，但是由于膠質(zhì)瘤的惡性程度高，呈浸潤性生長，與周圍正常腦組織無明顯分界，因此，手術(shù)治療的效果并不理想。近年來，越來越多的人開始研究膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展中的分子生物學(xué)機(jī)制，致力于為膠質(zhì)瘤的診斷和治療尋找新的途徑[3-4]。染色質(zhì)結(jié)構(gòu)域蛋白8(chromodomain protein 8，CBX8)，是多梳基因抑制復(fù)合物1(polycomb repressive complex 1，PRC1)的成員之一[5]，它的異常表達(dá)與癌細(xì)胞的增殖和遷移密切相關(guān)[6]。最近的研究表明，CBX8在神經(jīng)膠質(zhì)瘤組織中高表達(dá)[7]，但其是否促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖及其相關(guān)機(jī)制尚無明確報道。因此，本文通過構(gòu)建CBX8過表達(dá)和沉默載體，檢測其對膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖、凋亡和p-Rb/E2F1表達(dá)等的影響，旨在探究CBX8表達(dá)對神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖凋亡的影響及其相關(guān)機(jī)制。

材 料 和 方 法

1 材料

人正常腦組織(20例)和膠質(zhì)瘤組織(24例)均由唐都醫(yī)院神經(jīng)外科提供；人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系U87MG和T98G，以及HEK293T細(xì)胞均來源于ATCC；人胎腦星形膠質(zhì)細(xì)胞(Cell Applications Inc.)；DMEM高糖培養(yǎng)基、雙抗(含5×104U/L青霉素和50 mg/L鏈霉素)和胎牛血清(Gemini)；MTT、二甲基亞砜(DMSO)和LipofectamineTM2000 脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑盒(Invitrogeo);兔抗人CBX8、p-Rb、E2F1、cyclin D1、Bcl-2和Bax多克隆抗體，鼠抗人β-actin單克隆抗體(Abcam)；羊抗鼠HRP標(biāo)記的II抗、ECL顯色試劑盒和BCA試劑盒(北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司)。

2 實驗方法

2.1 組織樣本采集 標(biāo)本采集時先切成小塊，然后迅速置于凍存管中在-80 ℃下保存。其中，正常腦組織均為內(nèi)減壓切除的標(biāo)本，膠質(zhì)瘤病例均經(jīng)組織病理學(xué)檢查證實為膠質(zhì)瘤，并按WHO神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類標(biāo)準(zhǔn)確定病理診斷和分級[8]。所有組織采集前均得到病人及其家屬的知情同意，并通過唐都醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理學(xué)委員會批準(zhǔn)。

2.2 細(xì)胞培養(yǎng) HEK293T細(xì)胞、人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系U87MG和T98G采用含10%胎牛血清和雙抗的DMEM高糖培養(yǎng)基培養(yǎng)，人胎腦星形膠質(zhì)細(xì)胞采用星形膠質(zhì)細(xì)胞生長培養(yǎng)基，在37 ℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

2.3 載體的構(gòu)建 參照文獻(xiàn)方法[9]完成，以健康人腦組織總RNA為模板，采用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法獲得CBX8的cDNA，并與Flag標(biāo)記的pcDNA3和pEGFP-C3載體連接，構(gòu)建Flag-CBX8表達(dá)載體，測序鑒定正確后中量制備待用。

CBX8和E2F1重組腺病毒用pAdEasy系統(tǒng)構(gòu)建[5]，將Flag標(biāo)記的CBX8和E2F1亞克隆至pAdTrack-CMV質(zhì)粒上，再與pAdEasy腺病毒骨架質(zhì)粒重組，得到重組腺病毒載體，再轉(zhuǎn)染至HEK293T細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增與純化。利用Adeno-X快速滴度試劑盒(Clontech)測定病毒滴度。CBX8和E2F1 shRNA病毒滴度均為5×1011TU/L。

2.4 細(xì)胞轉(zhuǎn)染 取對數(shù)生長期的U87MG細(xì)胞和T98G細(xì)胞以5×105/cm2接種于6孔板，將細(xì)胞分為6組：空白對照組(mock組)、陰性對照組(Flag-empty組)和CBX8過表達(dá)組(Flag-CBX8組)；空白對照組(mock組)、陰性對照組(sh-Luc組)和CBX8沉默組(sh-CBX8組)。次日，按分組轉(zhuǎn)染細(xì)胞，F(xiàn)lag-empty和Flag-CBX8每孔3 μg，脂質(zhì)體6.6 μL；sh-Luc和sh-CBX8的感染復(fù)數(shù)為200。

2.5 MTT檢測細(xì)胞活力 分別取轉(zhuǎn)染0 h、48 h、72 h和96 h的細(xì)胞，PBS清洗，加入MTT反應(yīng)液，37 ℃溫育4 h，每孔加150 μL 二甲基亞砜液，將培養(yǎng)板置于微孔板振蕩器上振蕩10 min，使結(jié)晶物溶解，酶標(biāo)儀570 nm測吸光度值。

2.6 BrdU檢測細(xì)胞增殖 取轉(zhuǎn)染48 h的細(xì)胞，將細(xì)胞以每孔5×103個接種至96孔板內(nèi)，24 h后進(jìn)行BrdU檢測。按照BrdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒檢測的步驟進(jìn)行操作。

2.7 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡 取轉(zhuǎn)染48 h的細(xì)胞，PBS清洗，按照 Annexin V-FITC/PI凋亡檢測試劑盒參照說明書操作，在流式細(xì)胞儀上檢測細(xì)胞凋亡。

2.8 Westen blot檢測蛋白表達(dá) 取適量人腦組織提取總蛋白，BCA法測定蛋白濃度。經(jīng)十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)，轉(zhuǎn)膜，5%脫脂奶粉封閉，4 ℃下用抗CBX8和β-actin(均為1∶300)I 抗孵育過夜，PBST洗膜3次，II 抗(均為1∶300)室溫孵育1 h，PBST洗膜3次，最后用ECL發(fā)光液在暗室曝光并壓片。

取轉(zhuǎn)染48 h的細(xì)胞，BCA法測定蛋白濃度。按照上述方法分析CBX8、caspase-3、p-Rb和E2F1蛋白的表達(dá)水平。

取對數(shù)期U87MG和T98G細(xì)胞以5×105/cm2接種于6孔板，分別將細(xì)胞分為5組：空白對照組(mock組)、陰性對照組(Flag-empty組)、CBX8過表達(dá)組(Flag-CBX8組)、E2F1沉默組(sh-E2F1組)和CBX8過表達(dá)同時沉默E2F1組(Flag-CBX8+sh-E2F1組)。按分組轉(zhuǎn)染細(xì)胞，48 h后提取細(xì)胞總蛋白，按上述方法分析cyclin D1、Bcl-2和Bax蛋白的表達(dá)水平。

2.9 實時熒光定量PCR (RT-qPCR)檢測mRNA的表達(dá) Trizol法分別提取人正常腦組織和膠質(zhì)瘤組織的總RNA，并檢測其純度以及完整性。參照逆轉(zhuǎn)錄試劑盒說明書生成cDNA，擴(kuò)增cDNA，CBX8基因擴(kuò)增成功后，采用比較Ct值法(2-ΔΔCt)對CBX8含量進(jìn)行定量分析。RT-qPCR反應(yīng)條件為：95 ℃ 3 min；95 ℃ 15 s，60 ℃ 30 s，72 ℃ 30 s，循環(huán)40次；72 ℃ 7 min。引物由上海生工生物工程公司合成，序列見表1。

表1 引物序列

F: forward; R: reverse.

分別取轉(zhuǎn)染48 h的細(xì)胞，Trizol法提取總RNA，按照上述方法分析E2F1的mRNA表達(dá)水平。

取對數(shù)期U87MG細(xì)胞和T98G細(xì)胞以5×105/cm2接種于6孔板，分別將細(xì)胞分為5組：空白對照組(mock組)、陰性對照組(Flag-empty組)、CBX8過表達(dá)組(Flag-CBX8組)、E2F1沉默組(sh-E2F1組)和CBX8過表達(dá)同時沉默E2F1組(Flag-CBX8+sh-E2F1組)。按分組轉(zhuǎn)染細(xì)胞，48 h后提取細(xì)胞總RNA，按上述方法分析cyclin D1、Bcl-2和Bax mRNA的表達(dá)水平。

3 統(tǒng)計學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料結(jié)果用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示，多組間比較用單因素方差分析，各組均數(shù)間兩兩比較采用SNK-q檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

1 人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤中CBX8蛋白與mRNA的表達(dá)水平上調(diào)

Western blot結(jié)果顯示，與正常腦組織相比，神經(jīng)膠質(zhì)瘤組織(Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ級腫瘤組織)中CBX8蛋白的表達(dá)顯著上升，各級膠質(zhì)瘤組織中CBX8的表達(dá)并無明顯差異；與星形膠質(zhì)細(xì)胞相比，神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系中CBX8蛋白表達(dá)水平也明顯上升。RT-qPCR結(jié)果與Western blot結(jié)果一致，神經(jīng)膠質(zhì)瘤組織和神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系中的CBX8 mRNA的表達(dá)水平明顯上調(diào)(P<0.05)，見圖1。

Figure 1.The expression of CBX8 in the glioma tissue (A) and glioma cell lines (B) validated by Western blot and RT-qPCR. Mean±SD.n=3.*P<0.05vsnormal；#P<0.05vsastrocytes.

圖1 膠質(zhì)瘤組織以及膠質(zhì)瘤細(xì)胞系中CBX8的表達(dá)

2CBX8過表達(dá)促進(jìn)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖

Western blot結(jié)果顯示，按實驗分組感染T98G細(xì)胞與U87MG細(xì)胞后，與對照組相比，過表達(dá)組細(xì)胞CBX8 蛋白表達(dá)量增加(圖2A)，沉默組細(xì)胞CBX8 蛋白表達(dá)量下降(圖2B)。

MTT結(jié)果顯示，與對照組相比，CBX8過表達(dá)的T98G細(xì)胞和U87MG細(xì)胞的活力明顯上升。而CBX8沉默的T98G和U87MG細(xì)胞活力顯著下降(P<0.05)。BrdU實驗與MTT實驗的結(jié)果一致，表明CBX8促進(jìn)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖，見圖2C、D。

Figure 2.The effects of CBX8 on the proliferation of T98G and U87MG cells. Flag-CBX8 (A) and sh-CBX8 (B) were transfected into T98G cells and U87MG cells, and Western blot was used to determine the CBX8 expression after transfection for 48 h. The proliferation of the T98G cells and U87MG cells was detected by MTT assay and BrdU staining after Flag-CBX8 (C) or sh-CBX8 (D) transfection for 48 h. Mean±SD.n=3.*P<0.05vsmock.

圖2 CBX8對膠質(zhì)瘤T98G細(xì)胞和U87MG細(xì)胞增殖的影響

3CBX8過表達(dá)抑制人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的凋亡

流式細(xì)胞術(shù)分析結(jié)果顯示，與對照組相比，CBX8過表達(dá)的T98G細(xì)胞和U87MG細(xì)胞早期凋亡以及晚期凋亡百分比都明顯下降，而CBX8沉默的T98G細(xì)胞和U87MG細(xì)胞凋亡率顯著上升(P<0.05)，見圖3A、B。

另外，Western blot結(jié)果顯示，與對照組相比，CBX8過表達(dá)的T98G細(xì)胞和U87MG細(xì)胞中凋亡蛋白caspase-3的表達(dá)顯著降低，而CBX8沉默的T98G和U87MG細(xì)胞中caspase-3蛋白的表達(dá)則顯著升高(P<0.05)，見圖3C、D。這些結(jié)果表明，CBX8抑制人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的凋亡。

4CBX8過表達(dá)通過上調(diào)Rb/E2F1通路促進(jìn)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖

Western blot 結(jié)果顯示，與對照組相比，CBX8過表達(dá)使T98G和U87MG細(xì)胞內(nèi)p-Rb和E2F1的蛋白水平都顯著上升。而CBX8沉默使細(xì)胞內(nèi)p-Rb和E2F1的蛋白水平都顯著下降。另外，CBX8過表達(dá)顯著提高了cyclin D1和Bcl-2/Bax比值，E2F1 shRNA則使其水平明顯降低，而在沉默E2F1的前提下，CBX8過表達(dá)對cyclin D1和Bcl-2/Bax的水平并沒有影響(P<0.05)。RT-qPCR結(jié)果與Western blot結(jié)果一致，可見，CBX8過表達(dá)可能通過上調(diào)E2F1通路促進(jìn)細(xì)胞增殖并抑制細(xì)胞凋亡，見圖4。

Figure 3.The effects of CBX8 on the apoptosis of T98G cells and U87MG cells. Flag-CBX8 and sh-CBX8 were transfected into the T98G cells and U87MG cells. The apoptosis of T98G cells and U87MG cells was detected by flow cytometry after Flag-CBX8 (A) or sh-CBX8 (B) transfection for 48 h. The expression of cleaved caspase-3 protein was detected by Western blot after Flag-CBX8 (C) or sh-CBX8 (D) transfection for 48 h. Mean±SD.n=3.*P<0.05vsmock.

圖3 CBX8對膠質(zhì)瘤T98G細(xì)胞和U87MG細(xì)胞凋亡的影響

討 論

神經(jīng)膠質(zhì)瘤是常見的顱內(nèi)腫瘤，由于無法控制的細(xì)胞增殖、腫瘤細(xì)胞的侵襲性以及新生血管生長等生物學(xué)行為，而面臨嚴(yán)峻的治療難題[10]。PcG蛋白是在果蠅體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的第一個通過染色質(zhì)修飾調(diào)控靶基因的轉(zhuǎn)錄抑制子的蛋白，分為PRC1和PRC2兩種蛋白復(fù)合物。PcG蛋白的異常狀態(tài)能夠?qū)е掳┌Y的發(fā)生[11-12]。CBX8又叫多梳蛋白3(polycomb protein，HPC3)，在PRC1中作為轉(zhuǎn)錄抑制因子，可與BMI1相互結(jié)合[6, 13]。近年來，CBX8對細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)作用逐漸被發(fā)現(xiàn)，有研究表明，CBX8沉默通過促進(jìn)INK4A-ARF通路調(diào)節(jié)纖維細(xì)胞增殖[14]。在結(jié)腸癌中，CBX8沉默明顯抑制細(xì)胞的增殖[6]。然而CBX8在神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的作用目前尚不清楚，本文旨在研究CBX8對神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖凋亡的影響及其相關(guān)機(jī)制。

Figure 4.The effects of CBX8 on the expression of Rb/E2F1 in T98G and U87MG cells. Flag-CBX8, sh-CBX8 and sh-E2F1 were transfected into the T98G cells and U87MG cells. The effects of Flag-CBX8 (A) and sh-CBX8 (B) on the expression of Rb/E2F1 in the T98G cells and U87MG cells were determined by Western blot and RT-qPCR after transfection for 48 h. The effects of sh-E2F1 and Flag-CBX8 on cyclin D1, Bcl-2 and Bax levels in the T98G cells (C) and U87MG cells (D) were detected by Western blot and RT-qPCR. Mean±SD.n=3.*P<0.05vsmock.

圖4 CBX8對膠質(zhì)瘤T98G細(xì)胞和U87MG細(xì)胞中Rb/E2F1表達(dá)的影響

有研究發(fā)現(xiàn)，PcG蛋白在神經(jīng)膠質(zhì)瘤中異常表達(dá)，其中CBX7、CBX6等表達(dá)顯著降低，而CBX8表達(dá)顯著升高，并且CBX6過表達(dá)顯著抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖[7]。本實驗結(jié)果表明，與正常腦組織及人胚腦星形膠質(zhì)細(xì)胞相比，神經(jīng)膠質(zhì)瘤組織及細(xì)胞中的CBX8蛋白和mRNA水平明顯上升，這可能與神經(jīng)膠質(zhì)瘤的發(fā)展有著密切的關(guān)系。因此，本實驗將CBX8過表達(dá)和沉默載體轉(zhuǎn)染入神經(jīng)膠質(zhì)瘤T98G細(xì)胞和U87MG細(xì)胞，檢測細(xì)胞增殖凋亡情況，結(jié)果顯示，過表達(dá)CBX8促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖并抑制細(xì)胞凋亡，而沉默CBX8抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖并促進(jìn)細(xì)胞凋亡。

Rb基因家族處于細(xì)胞周期調(diào)控的中心環(huán)節(jié)，在細(xì)胞生長和分化的調(diào)控中發(fā)揮重要作用。E2F1作為重要的細(xì)胞周期調(diào)控因子，與Rb共同參與調(diào)控細(xì)胞由G0/G1期向S期的過渡[15]。研究表明，E2F1通過調(diào)節(jié)細(xì)胞周期促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖[16]，而CBX8能夠通過Rb-E2F1通路調(diào)節(jié)白血病細(xì)胞衰老[5]。作為周期蛋白，cyclin D1的過度表達(dá)會使細(xì)胞周期失控，從而導(dǎo)致惡性轉(zhuǎn)化[17]。因此，cyclin D1已經(jīng)作為抑制腫瘤細(xì)胞增殖的靶分子被廣泛研究[18-19]。過表達(dá)CBX8提高cyclin D1的表達(dá)，使細(xì)胞G1期縮短，持續(xù)增殖。細(xì)胞程序性死亡的調(diào)節(jié)因子Bcl-2與Bax的比值反映了膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖或凋亡的過程，當(dāng)Bcl-2/Bax比值增大，細(xì)胞趨向增殖[20]。本實驗結(jié)果表明，CBX8過表達(dá)促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系Rb/E2F1通路的激活;反之，CBX8沉默顯著降低細(xì)胞中Rb/E2F1的激活。另外，CBX8過表達(dá)顯著提高了cyclin D1和Bcl-2/Bax的水平，E2F1 shRNA則使其水平明顯降低，而在沉默E2F1的前提下，CBX8過表達(dá)對cyclin D1和Bcl-2/Bax的水平并沒有影響。因此，結(jié)合參考文獻(xiàn)我們推測，CBX8可能通過Rb/E2F1通路，調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白cyclin D1、Bcl-2和Bax的表達(dá)，從而調(diào)控神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖和凋亡。

綜上所述，本研究通過構(gòu)建過表達(dá)和沉默CBX8載體并轉(zhuǎn)染神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞T98G和U87MG，發(fā)現(xiàn)CBX8可通過激活Rb/E2F1通路促進(jìn)T98G和U87MG細(xì)胞增殖并抑制細(xì)胞凋亡。這一結(jié)果初步闡明了CBX8誘導(dǎo)神經(jīng)膠質(zhì)瘤發(fā)生的相關(guān)機(jī)制，為神經(jīng)膠質(zhì)瘤的治療提供了新思路。

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(責(zé)任編輯： 林白霜， 羅 森)

Effects of silencing and overexpression of CBX8 on proliferation and apoptosis of human glioma cells

ZHANG Bai-ping, SUN Shu-kai, JIA Dong

(DepartmentofNeurosurgery,TangduHospital,FourthMilitaryMedicalUniversity,Xi’an710038,China.E-mail:shidasda@163.com)

AIM: To explore the effects of chromodomain protein 8 (CBX8) on the proliferation and apoptosis of human glioma cells. METHODS: The expression of CBX8 in the tissues and cells was detected by Western blot and RT-qPCR. The overexpression (Flag-CBX8) and silencing (sh-CBX8) vectors ofCBX8 were constructed and transfected into glioma T98G cells and U87MG cells. The cell proliferation was detected by MTT assay and BrdU staining. The cell apoptosis was analyzed by flow cytometry. The protein expression of Rb/E2F1 was detected by Western blot. RESULTS: Compared with normal brain tissues and astrocytes, the expression of CBX8 was increased in the glioma tissues and glioma cells. Overexpression ofCBX8 promoted the cell proliferation, inhibited the cell apoptosis, and upregulated the protein levels of Rb/E2F1. On the contrary, silencing ofCBX8 inhibited the cell proliferation, promoted the cell apoptosis, and decreased the protein levels of Rb/E2F1 in the T98G cells and U87MG cells. Moreover, the expression of cyclin D1 and Bcl-2/Bax ratio were reduced after transfection with sh-E2F1 in the T98G cells and U87MG cells.CONCLUSION: CBX8 may regulate the proliferation and apoptosis of glioma cells through Rb/E2F1 pathway.

Glioma; Chromodomain protein 8; T98G cells; U87MG cells

1000- 4718(2017)04- 0723- 07

2016- 11- 23

2016- 12- 29

R730.23; R739.4

A

10.3969/j.issn.1000- 4718.2017.04.024

△通訊作者 Tel: 13519182336； E-mail： shidasda@163.com