吳巍，劉丹，孫靜，婁春霞

（天津市尖峰天然產(chǎn)物研究開發(fā)有限公司，天津300457）

氣相色譜法測(cè)定人參提取物中3種農(nóng)藥殘留

吳巍，劉丹，孫靜，婁春霞

（天津市尖峰天然產(chǎn)物研究開發(fā)有限公司，天津300457）

建立GC-ECD（氣相色譜-電子捕獲檢測(cè)器，Gaschromatograph-electron capture detector）檢測(cè)人參提取物中五氯苯胺、腐霉利、烯酰嗎啉3種農(nóng)殘的方法。人參提取物樣品用水溶解，環(huán)己烷萃取，通過(guò)毛細(xì)管氣相色譜-電子捕獲檢測(cè)器檢測(cè)。五氯苯胺和腐霉利在范圍為0.01 μg/mL～1.0 μg/mL（n=5），烯酰嗎啉在范圍為0.1 μg/mL～10.0 μg/mL標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)線性良好，加標(biāo)回收率平均值為97.71%～107.45%，RSD為1.61%～5.09%（n=9），檢測(cè)限為1 μg/kg～20 μg/kg。該法可用于準(zhǔn)確檢測(cè)人參提取物中五氯苯胺、腐霉利、烯酰嗎啉3種農(nóng)殘含量。

人參；人參提取物；農(nóng)殘；氣相色譜；電子捕獲檢測(cè)器

人參（Panax ginseng C.A.Mey），是五加科的多年生草本植物，在中國(guó)人參歷來(lái)被視為百草之王，滋補(bǔ)上品，現(xiàn)代研究表明，人參中富含人參皂苷，是其主要功效成分，人參提取物就是提取自人參根或人參莖葉的產(chǎn)品，是人參皂苷被富集和純化的產(chǎn)物。近些年來(lái)，人參提取物出口成逐年增長(zhǎng)之勢(shì)，而歐美等國(guó)對(duì)進(jìn)口的人參提取物的農(nóng)殘限量把控的很嚴(yán)，氣質(zhì)聯(lián)用[1-2]雖然更適合農(nóng)殘檢測(cè)，然而氣質(zhì)聯(lián)用價(jià)格昂貴，因此建立普通生產(chǎn)企業(yè)都能使用的GC-ECD農(nóng)殘檢測(cè)方法是很有必要的。

五氯苯胺、腐霉利、烯酰嗎啉是人參提取物中比較常見的3種農(nóng)殘，五氯苯胺（Pentachloroaniline），是土壤專用殺菌劑五氯硝基苯在人參中的代謝產(chǎn)物，CAS號(hào)為527-20-8，分子式為C6H2Cl5N，分子量265.35，沸點(diǎn)335.8℃；腐霉利（Procymidone）是內(nèi)吸式殺真菌劑，CAS號(hào)為32809-16-8，分子式為C13H11Cl2NO2，分子量284.14，沸點(diǎn)477.9℃；烯酰嗎啉（Dimethomorph）是專殺卵菌綱真菌殺菌劑，有2種同分異構(gòu)體，Z（烯酰嗎啉）和E（烯酰嗎啉）[3]，在日光下異構(gòu)體互變，CAS號(hào)為110488-70-5，分子式為C21H22ClNO4，分子量387.86，沸點(diǎn)584.9℃，分子結(jié)構(gòu)式見圖1。

圖1 分子結(jié)構(gòu)式Fig.1 Molecular structural formula

1 儀器和試藥

Agilent 7890A氣相色譜儀，裝配有微池電子捕獲檢測(cè)器（Micro-ECD），OpenLAB CDS氣相色譜儀操作軟件，7693A 16位自動(dòng)液體進(jìn)樣器，HP-5毛細(xì)管柱（30 m×0.32 mm×0.25 μm）：美國(guó)安捷倫科技公司；Sartorius CP225D十萬(wàn)分之一電子天平：德國(guó)賽多利斯公司；HGC-12A氮吹儀：天津恒奧公司；QT 3L超聲波清洗器：天津瑞普公司；環(huán)己烷（分析純）：天津市風(fēng)船化學(xué)試劑有限公司；水為超純水；五氯苯胺、腐霉利和烯酰嗎啉（標(biāo)示純度均≥98%，批號(hào)分別為SZBD071XV、SZBD178XV、SZB9069XV）：美國(guó)西格瑪公司；人參提取物：天津市尖峰天然產(chǎn)物研究開發(fā)有限公司。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：HP-5毛細(xì)管柱（30 m×0.32 mm×0.25 μm）；進(jìn)樣口：280℃；ECD檢測(cè)器：300℃；載氣高純氮?dú)猓兌取?9.999%；流速：1 mL/min；進(jìn)樣量：1 μL；不分流進(jìn)樣；程序升溫：初始溫度110℃，保持1 min，以60℃/min的速率升至170℃，以6℃/min的速率升至230℃，保持1min，再以25℃/min的速率升至280℃，保持20 min。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備溶液制備

精密稱量五氯苯胺、腐霉利、烯酰嗎啉標(biāo)準(zhǔn)品各10 mg分別于100 mL棕色容量瓶中，加入環(huán)己烷適量超聲溶解，加環(huán)己烷定容至刻度搖勻，配成100 μg/mL的溶液做為標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備溶液。

2.3 樣品溶液制備

精密稱量人參提取物樣品5.00 g于150 mL具塞錐形瓶中，加入12 mL超純水超聲，同時(shí)攪拌，使其均勻溶散，分別加入8 mL，8 mL環(huán)己烷渦旋振蕩1 min萃取，分離環(huán)己烷層，合并2次環(huán)己烷萃取液，45℃氮吹至2.5 mL，過(guò)0.45 μm濾膜，作為樣品溶液。

2.4 線性關(guān)系考察

分別準(zhǔn)確移取標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備溶液適量，加入環(huán)己烷定容搖勻，配成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品混合溶液，其中五氯苯胺和腐霉利標(biāo)準(zhǔn)品濃度分別為1、0.5、0.1、0.05、0.01 μg/mL，烯酰嗎啉標(biāo)準(zhǔn)品濃度分別為10、5、1、0.5、0.1 μg/mL。取上述各溶液1μL注入氣相色譜儀分析，以峰高（烯酰嗎啉以2個(gè)異構(gòu)體峰高之和）為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，得線性方程見表1。

表1 3種農(nóng)藥線性范圍、線性方程、相關(guān)系數(shù)（r）和檢測(cè)限Table 1 Linear ranges，linear equations，correlation coefficient and limit of detections

結(jié)果表明，五氯苯胺在0.010 6 μg/mL～1.058 μg/ mL、腐霉利在0.010 μg/mL～1.009 μg/mL，烯酰嗎啉在0.113 μg/mL～11.286 μg/mL濃度范圍內(nèi)線性良好。3種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品氣相色譜圖見圖2。

圖2 3種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品氣相色譜圖Fig.2 GC chromatogram of three pesticide standards

2.5 檢測(cè)限

以檢測(cè)樣品中信噪比等于3∶1時(shí)的峰高計(jì)算，得到五氯苯胺、腐霉利和烯酰嗎啉的檢測(cè)限，結(jié)果見表1。

2.6 重復(fù)性試驗(yàn)

取同一批人參提取物樣品，按2.3所述樣品溶液制備方法制備6份供試樣品溶液，分別按2.1所述氣相色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，得到五氯苯胺平均含量為0.328 mg/kg、腐霉利平均含量為0.048 mg/kg、烯酰嗎啉平均含量為0.105 mg/kg，其中五氯苯胺RSD為1.63%（n=6），腐霉利RSD為2.28%（n=6），烯酰嗎啉RSD為4.36%（n=6），表明本方法重復(fù)性良好。

2.7 回收率考察

精密稱取已測(cè)知3種農(nóng)藥含量的人參提取物9份，分成3組，分別精密加入相當(dāng)于已測(cè)知農(nóng)藥量的1.2、1、0.8倍的標(biāo)準(zhǔn)品的量，測(cè)得五氯苯胺平均回收率為97.71%，RSD為1.62%（n=9），腐霉利平均回收率為107.45%，RSD為4.39%（n=9），烯酰嗎啉平均回收率為103.71%，RSD為5.09%（n=9）。

2.8 樣品測(cè)定

分別取6個(gè)批次人參提取物（3批未脫農(nóng)殘，3批脫農(nóng)殘），制備供試樣品溶液，按2.1所述氣相色譜條件進(jìn)樣分析，用標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算含量，測(cè)定3種農(nóng)藥含量，結(jié)果見表2。

表2 人參提取物樣品中3種農(nóng)藥含量測(cè)定Table 2 Determination of three pesticides in ginseng extract sample

3 討論

1）本文采用氣相色譜配合電子捕獲檢測(cè)器檢測(cè)五氯苯胺、腐霉利、烯酰嗎啉3種農(nóng)殘含量，可得到穩(wěn)定、準(zhǔn)確的結(jié)果。

2）人參提取物農(nóng)殘檢測(cè)，樣品凈化也有用到固相萃取柱[3]、硅膠柱[4]，本文僅使用環(huán)己烷萃取，降低了成本，提高了效率。

[1]解魁,張偉,楊麗,等.氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定人參中五氯苯胺和腐霉利的殘留[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2015,25(21):3624-3628

[2]賴青海,王琳琳,石壵,等.QuEChERS結(jié)合氣相色譜-質(zhì)譜快速測(cè)定人參提取物中25種農(nóng)藥殘留[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2015, 21(11):55-60

[3] 何強(qiáng),郭新東,李暢方,等.土壤中烯酰嗎啉殘留量的氣相色譜分析[J].廣州化工,2006,34(4):67-68

[3]嚴(yán)付華,張艷,曾建國(guó).氣相色譜法測(cè)定人參提取物中15種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量[J].中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué),2010,10(8):1016-1023

[4]李順子.氣相色譜法測(cè)定人參提取液中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量[J].中國(guó)藥業(yè),2007,16(8):30

Determination of Three Kinds of Pesticide Residues in Ginseng Extract by Gas Chromatography

WU Wei，LIU Dan，SUN Jing，LOU Chun-xia
（Tianjin Jianfeng Natural Product R&D Co.，Ltd.，Tianjin 300457，China）

To establish a GC-ECD method for the determination of 3 kinds of pesticide residues in Ginseng extract，including pentachloroaniline，procymidone and dimethomorph.Dissolved Ginseng extract in water，extracted with cyclohexane，detected by GC-ECD.Linear range of pentachloroaniline and procymidone were 0.01 μg/mL-1.0 μg/mL（n=5），and dimethomorph was 0.1 μg/mL-10.0 μg/mL（n=5）.Average recovery range was 97.71%-107.45%.RSD was 1.61%-5.09%（n=9）.Limit of detection was 1 μg/kg-20 μg/kg.This method could be used to detect pentachloroaniline，procymidone and dimethomorph 3 pesticide residues in Ginseng extract accurately.

ginseng；ginseng extract；pesticide residue；gaschromatography；ECD

10.3969/j.issn.1005-6521.2017.08.026

2016-08-03

天津市技術(shù)創(chuàng)新引導(dǎo)專項(xiàng)（基金）計(jì)劃“純天然無(wú)農(nóng)殘膳食補(bǔ)充劑的研發(fā)”（15YDSSNC00040）

吳?。?970—），男（漢），高級(jí)工程師，本科，從事植物提取物質(zhì)量檢測(cè)、提取純化的研發(fā)等工作。