張立娟

摘 要：本文采用高效液相測(cè)定了鹽酸頭孢替安中聚合物的含量，固定相為葡聚糖凝膠Sephadex G-10柱（300mm×15mm），流動(dòng)相A為pH7.0的0.05mol/L磷酸鹽緩沖液[0.05mol/L磷酸氫二鈉溶液：0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液（60：40）]，流動(dòng)相B為水；流速為1.0mL/min，柱溫為30℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm。頭孢替唑鈉質(zhì)量濃度在10.0～320.0mg/mL范圍內(nèi)與聚合物峰面積之間線性關(guān)系良好。鹽酸頭孢替安樣品溶液的質(zhì)量濃度在10.0～40.0mg/mL范圍內(nèi)與聚合物峰面積之間線性關(guān)系良好。此方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，可用于鹽酸頭孢替安中聚合物的含量測(cè)定。

關(guān)鍵詞：鹽酸頭孢替安；含量；高效液相

鹽酸頭孢替安適應(yīng)癥為主要用于對(duì)本品敏感的普通變形桿菌，葡萄球菌屬、流感桿菌、克雷白桿菌屬、腸道菌屬、大腸桿菌、肺炎球菌、枸櫞酸桿菌屬、奇異變形桿菌，雷特格氏變形桿菌，摩根氏變形桿菌等所致下列感染：膿胸，膽管炎，燒傷感染，骨髓炎，膽囊炎，膀胱炎，敗血癥，化膿性關(guān)節(jié)炎，支氣管炎，術(shù)后感染，肺化膿癥，尿路炎，前列腺炎，腦脊膜炎，子宮內(nèi)膜炎，前庭大腺炎、中耳炎、副鼻竇炎等[1]。高分子化合物是由千百個(gè)原子彼此以共價(jià)鍵結(jié)合形成相對(duì)分子質(zhì)量特別大、具有重復(fù)結(jié)構(gòu)單元的有機(jī)化合物，也稱為高分子、大分子等。由于高分子多是由小分子通過(guò)聚合反應(yīng)而制得的，因此也常被稱為聚合物或高聚物。樣品相對(duì)分子質(zhì)量的差異進(jìn)行分離的凝膠色譜法具有明顯的優(yōu)勢(shì)。因此本文采用高效液相法對(duì)制劑中聚合物進(jìn)行含量測(cè)定，為鹽酸頭孢替安的質(zhì)量控制提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

ULABO 實(shí)驗(yàn)室溫度控制器（優(yōu)萊博技術(shù)（北京）有限公司）； 實(shí)驗(yàn)室用高純水制備器（北京科譽(yù)興業(yè)科技發(fā)展有限公司）；SCQ？-8201B全不銹鋼數(shù)控加熱超聲波清洗機(jī)（上海聲彥超聲波儀器有限公司）；EX1700S-HPLC超高效液相色譜儀（上海伍豐科學(xué)儀器有限公司）；PA225型DCPA卓越電子分析天平（上海金鵬分析儀器有限公司）；R-1001-VN旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司）；UV2800雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（四川匯巨儀器設(shè)備有限公司）。鹽酸頭孢替安對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所提供）。甲醇（北京京科瑞達(dá)科技有限公司）、乙腈（廣州自力色譜科儀有限公司）、冰醋酸（廣州自力色譜科儀有限公司）、磷酸氫二鈉（天津市正化化工公司）、磷酸二氫鈉（北京京科瑞達(dá)科技有限公司）、三乙胺（天津市正化化工公司）、磷酸（北京京科瑞達(dá)科技有限公司）。

2 含量測(cè)定

2.1 色譜條件

色譜柱為葡聚糖凝膠Sephadex G-10柱（300mm×15mm），流動(dòng)相A為pH7.0的0.05mol/L磷酸鹽緩沖液[0.05mol/L磷酸氫二鈉溶液：0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液（60：40）]，流動(dòng)相B為水；流速為1.0mL/min，柱溫為30℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm[2-5]。

2.2 供試品溶液的制備

精密量取鹽酸頭孢替安適量，置10mL量瓶中，加水適量，超聲處理5分鐘，放置至室溫，加水稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）濾過(guò)，即得。

2.3 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取鹽酸頭孢替安對(duì)照品適量，用水配置成每1mL溶液中含鹽酸頭孢替安0.1mg。

2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

制備濃度為10.0、20.0、40.0、80.0、160.0、320.0mg·mL-1的頭孢替唑鈉對(duì)照品溶液，分別吸取上述對(duì)照品溶液注入HPLC，以流動(dòng)相B為流動(dòng)相進(jìn)行測(cè)定，記錄色譜圖，以吸收峰面積對(duì)質(zhì)量濃度進(jìn)行線性回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程。試驗(yàn)表明，頭孢替唑鈉質(zhì)量濃度在10.0～320.0mg·mL-1范圍內(nèi)與聚合物峰面積之間線性關(guān)系良好。制備濃度為10.0、15.0、20.0、25.0、30.0、35.0、40.0mg·mL-1的頭孢替唑鈉樣品溶液，分別吸取上述對(duì)照品溶液注入HPLC，以流動(dòng)相A為流動(dòng)相進(jìn)行測(cè)定，記錄色譜圖，以吸收峰面積對(duì)樣品質(zhì)量濃度進(jìn)行線性回歸，得線性方程。結(jié)果表明鹽酸頭孢替安樣品溶液的質(zhì)量濃度在10.0～40.0mg/mL范圍內(nèi)與聚合物峰面積之間線性關(guān)系良好。

2.5 精密度試驗(yàn)

精密吸取鹽酸頭孢替安對(duì)照品溶液，以流動(dòng)相B為流動(dòng)相連續(xù)進(jìn)樣5次測(cè)定峰面積積分值，對(duì)照品峰面積積分值的RSD為0.96%。結(jié)果表明，本方法具有良好的精密度。

2.6 重現(xiàn)性試驗(yàn)

分別稱取同批鹽酸頭孢替安樣品6份，依照含量測(cè)定項(xiàng)下方法，測(cè)定含量，并計(jì)算樣品的RSD值為1.32%。結(jié)果表明，此含量測(cè)定方法的重現(xiàn)性良好。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取鹽酸頭孢替安樣品，分別在0，2，4，8小時(shí)注入高效液相色譜儀，以流動(dòng)相A為流動(dòng)相，進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果表明聚合物質(zhì)量分?jǐn)?shù)隨著時(shí)間增加很快，因此樣品溶液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配。

2.8 回收率試驗(yàn)

采用加樣回收試驗(yàn)，取已知含量的同一批供試品各6份，精密稱定，分精密添加一定量的聚合物，按供試品制備所述方法制備供試品溶液，測(cè)定含量（同時(shí)測(cè)定樣品含量），計(jì)算回收率。6次測(cè)定的平均回收率為98.1%，RSD為1.22%。

2.9 樣品含量測(cè)定

依照上述含量測(cè)定方法，測(cè)定鹽酸頭孢替安三批樣品中聚合物的含量，結(jié)果三批樣品的含量分別為0.15%、0.16%、0.18%。

3 討論

本實(shí)驗(yàn)還對(duì)實(shí)驗(yàn)溫度進(jìn)行了考察，分別采用15攝氏度、20攝氏度、25攝氏度、30攝氏度、35攝氏度進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)溫度升高對(duì)分離度影響較大，當(dāng)溫度由15℃升高到25℃過(guò)程中分離度變化較大，當(dāng)溫度由25℃升高到35℃過(guò)程中分離度變化較小，所以選擇30攝氏度為實(shí)驗(yàn)溫度。本文對(duì)鹽酸頭孢替安中的聚合物進(jìn)行含量測(cè)定的試驗(yàn)方法，結(jié)果表明該法不受其它成分的干擾，分離度好，精密度、重現(xiàn)性佳，可用于鹽酸頭孢替安中聚合物的含量測(cè)定。聚合物的含量應(yīng)小于0.5%。

參考文獻(xiàn)

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