張 寒，肖 鳴，徐 永，俞 婷

（浙江省農(nóng)藥檢定管理所，杭州 310020)

◆農(nóng)藥分析◆

精草銨膦原藥高效液相色譜分析方法研究

張 寒，肖 鳴*，徐 永，俞 婷

（浙江省農(nóng)藥檢定管理所，杭州 310020)

精草銨膦是一種廣譜觸殺型除草劑。采用高效液相色譜法，以硫酸銅＋乙腈＋水為流動相，使用SUMICHIRAL OA-5000L為填料的不銹鋼柱和二極管陣列檢測器，在254 nm波長下對精草銨膦原藥進(jìn)行分離和定量分析。結(jié)果表明，該分析方法的線性相關(guān)系數(shù)為0.994 4，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.032，變異系數(shù)為0.035%，平均回收率為99.50%。

精草銨膦；原藥；高效液相色譜；分析

草銨膦是由Hoechst公司開發(fā)并首先上市的高效、低毒、非選擇性除草劑。其抑制谷氨酰胺合成，造成銨離子累積從而抑制光合作用，起到除草效果[1]。其多用于果園、葡萄園、非耕地等防除一年生和多年生闊葉及禾本科雜草[2]。草銨膦殺草譜廣，持效期較長，可有效減少用藥次數(shù)，降低人工成本，而且草銨膦對土壤、作物根系和后茬作物影響小，一定程度上緩解了百草枯毒性和草甘膦抗性的問題。精草銨膦（glufosinate-P）是在草銨膦的基礎(chǔ)上，通過定向合成得到的草銨膦L型手性異構(gòu)體，藥效為草銨膦的2倍[3]。

目前關(guān)于精草銨膦原藥的分析方法未見公開報(bào)道。本文采用高效液相色譜法，通過手性柱，對精草銨膦原藥進(jìn)行定性、定量分析。該方法操作簡便，分離效果好，準(zhǔn)確度和精密度均能達(dá)到定量分析的要求，可以作為企業(yè)生產(chǎn)過程質(zhì)量控制和質(zhì)檢機(jī)構(gòu)分析檢測的參考方法。

1 試驗(yàn)部分

1.1 試劑與儀器

乙腈：色譜純；超純水：電阻率18.2 MΩ·cm （25℃）；硫酸銅：化學(xué)純；精草銨膦標(biāo)樣（99.9%）、精草銨膦原藥，浙江永農(nóng)化工有限公司。

Agilent 1260高效液相色譜儀，具二極管陣列檢測器和自動進(jìn)樣器；Agilent色譜工作站；Milli-Q reference超純水制備系統(tǒng)；不銹鋼色譜柱：150 mm×4.6 mm，內(nèi)裝SUMICHIRALOA-5000L（5μm）填充物。1.2 液相色譜操作條件

流動相制備：稱取0.5 g硫酸銅，加入3 mL乙腈，用水定容至1 000 mL。流速：0.5 mL/min；柱溫：室溫；檢測波長：254 nm；進(jìn)樣體積：5 μL。保留時(shí)間：精草銨膦（草銨膦L型）約3.3 min，草銨膦D型約2.9 min。

精草銨膦標(biāo)樣的高效液相色譜圖見圖1。

圖1 精草銨膦標(biāo)樣高效液相色譜圖

1.3 測定步驟

1.3.1 溶液的配制

分別準(zhǔn)確稱取精草銨膦標(biāo)樣和原藥各0.02 g（精確至0.000 2 g），置于2個(gè)50 mL容量瓶中，用流動相溶解定容，搖勻備用。

1.3.2 測定與計(jì)算

在上述操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰2針中精草銨膦的響應(yīng)值相對變化＜1.0%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測定。

將測得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中精草銨膦峰面積分別進(jìn)行平均，按下式計(jì)算試樣中精草銨膦的質(zhì)量分?jǐn)?shù)w（%）。

式中：A1—標(biāo)樣溶液中精草銨膦峰面積的平均值；A2—試樣溶液中精草銨膦峰面積的平均值；m1—標(biāo)樣的質(zhì)量，g；m2—試樣的質(zhì)量，g；P—標(biāo)樣中精草銨膦的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜條件的選擇

通過HPLC的二極管陣列檢測器（DAD）進(jìn)行全波長掃描，得到精草銨膦的紫外波長掃描圖。精草銨膦在225～260 nm間有較大的吸收?？紤]到雜質(zhì)響應(yīng)值的影響，將檢測波長定為254 nm。

根據(jù)精草銨膦理化性質(zhì)，選擇以乙腈＋水溶液為流動相，以SUMICHIRAL OA-5000L手性柱為色譜柱，將不同體積比的流動相在色譜柱上進(jìn)行試驗(yàn)。當(dāng)以0.5 g硫酸銅、3 mL乙腈用水定容至1 000 mL的混合液作流動相，流速為0.5 mL/min時(shí)，草銨膦L型與草銨膦D型能較好分離，且基線平穩(wěn)，峰形對稱。

2.2 分析方法的線性相關(guān)性試驗(yàn)

分別稱取精草銨膦標(biāo)樣0.008 2 g、0.015 2 g、0.026 3 g、0.031 2 g，0.043 4 g于50 mL容量瓶中，按1.3方法進(jìn)行測定，測定結(jié)果見表1。以精草銨膦質(zhì)量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得線性方程y=98 443 x＋162.64，其線性相關(guān)系數(shù)為0.994 4。

表1 分析方法的線性關(guān)系試驗(yàn)結(jié)果

2.3 分析方法的精密度試驗(yàn)

準(zhǔn)確稱取5個(gè)精草銨膦原藥試樣，按1.3方法進(jìn)行測定，測得精草銨膦的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.032，變異系數(shù)為0.035%（表2）。

表2 分析方法的精密度試驗(yàn)結(jié)果

2.4 分析方法的準(zhǔn)確度試驗(yàn)

從已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)的精草銨膦原藥樣品中稱取5個(gè)試樣，分別加入一定量的精草銨膦標(biāo)樣（99.9%），按1.3方法進(jìn)行測定。測得精草銨膦的平均回收率為99.50%（表3）。

表3 分析方法的準(zhǔn)確度試驗(yàn)結(jié)果

3 結(jié)論

試驗(yàn)結(jié)果表明，本方法檢測精草銨膦原藥有較高的準(zhǔn)確度和精密度，線性關(guān)系良好。方法具有簡單、快速、準(zhǔn)確及分離效果好的優(yōu)點(diǎn)，是進(jìn)行產(chǎn)品質(zhì)量檢測較理想的分析方法。

[1]顧林玲,王欣欣.全球除草劑市場、發(fā)展概況及趨勢(Ι)[J].現(xiàn)代農(nóng)藥,2016,15(2):8-12.

[2]佘曉云,石巖.滅生性除草劑草銨膦的應(yīng)用研究[J].耕作與栽培, 2016(1):69-72.

[3]樓億圓,林志堅(jiān),鄭仁朝,等.生物法合成L-草銨膦的研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代農(nóng)藥,2009,8(3):1-4;10.

（責(zé)任編輯：顧林玲）

Analytical Method for Determination of Glufosinate-P TC by HPLC

ZHANG Han,XIAO Ming*,XU Yong,YU Ting
(Institute for the Control of Agrochemicals of Zhejiang Province,Hangzhou 310020,China)

Glufosinate-P is a kind of non-selective contact herbicide,used for control of a wide range of weeds.A method for separation and quantitative analysis of glufosinate-P was established by HPLC,using acetonitrile,copper sulphate and water as mobile phase,on SUMICHIRAL OA-5000L chiral column and DAD at 254 nm wavelength.The results showed that the linear correlation coefficient of the method was 0.994 4,the standard deviation was 0.032,the variable coefficient was 0.035%,and the average recovery was 99.50%.

glufosinate-P;TC;HPLC;analysis

TQ 450.7

A

10.3969/j.issn.1671-5284.2017.02.010

2016-08-09；

2016-09-08

張寒(1988—)，男，浙江省麗水市人，碩士研究生，主要從事農(nóng)藥質(zhì)量檢測工作。E-mail：figols@126.com

肖鳴（1984—），女，杭州市人，中級農(nóng)藝師，主要從事農(nóng)藥質(zhì)量檢測工作。E-mail：123481180.xm@163.com