楊媛媛，姜 旭，王宇卿（南陽醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，河南南陽 473061）

正交試驗優(yōu)化復(fù)方粉背雷公藤凝膠劑處方Δ

楊媛媛＊，姜 旭，王宇卿#（南陽醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校，河南南陽 473061）

目的：優(yōu)化復(fù)方粉背雷公藤凝膠劑處方。方法：以成型性、光澤度、均勻度、黏度、pH、涂展性、穩(wěn)定性等組成的綜合評分（總分15.0分）為指標(biāo)，以卡波姆940、丙二醇、三乙醇胺及藥材提取液等在處方中的用量為考察因素，設(shè)計正交試驗優(yōu)化復(fù)方粉背雷公藤凝膠劑處方，并進(jìn)行驗證試驗。結(jié)果：優(yōu)化處方為卡波姆940 1.0 g、氮酮2.0 g、亞硫酸氫鈉0.4 g、提取液50 mL、丙二醇10 g、三乙醇胺1.0 g，加水至100 g。驗證試驗結(jié)果顯示所制凝膠綜合評分均值為14.8（RSD＝1.35%，n＝3）。結(jié)論：優(yōu)化處方所制復(fù)方粉背雷公藤凝膠成型性好，質(zhì)量符合要求。

復(fù)方粉背雷公藤凝膠劑；正交試驗；處方優(yōu)化；成型性

復(fù)方粉背雷公藤方為民間驗方，由粉背雷公藤、青風(fēng)藤、雞血藤等多味中藥材組成，用于治療風(fēng)濕痹痛、關(guān)節(jié)腫脹、麻痹瘙癢等，但需煎制后使用[1]。其現(xiàn)有制劑易產(chǎn)生胃腸道刺激和肝首關(guān)效應(yīng)等，而凝膠劑具有涂展性好、無油膩感、使用方便、易于清洗、生物相容性好等多種優(yōu)點，可容納中藥復(fù)方的極細(xì)藥粉、提取物等，且制備工藝條件不苛刻，適合中藥復(fù)方制劑的生產(chǎn)[2-3]。故本課題組擬將該方開發(fā)成凝膠劑以方便臨床使用。在本研究中，筆者設(shè)計正交試驗優(yōu)化復(fù)方粉背雷公藤凝膠劑處方，以成型性、光澤度、均勻度等為考察指標(biāo)對制劑進(jìn)行綜合評價，以建立復(fù)方粉背雷公藤凝膠劑的成型工藝，為后續(xù)試驗提供參考。

1 材料

1.1 儀器

ME2002E電子天平[梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司]；FA25高剪切分散乳化機(jī)（上海弗魯克科技發(fā)展有限公司）；SNB-1數(shù)字式黏度計、pHS-3B酸度計（上海精密科學(xué)儀器有限公司）；XYJ-2臺式高速離心機(jī)（江蘇金壇市醫(yī)療儀器廠）。

1.2 藥品與試劑

復(fù)方粉背雷公藤提取液（自制，批號：20160315，規(guī)格：以生藥計0.4 g/mL；制備方法：按處方量稱取各藥材共200 g，用8倍量70%乙醇加熱回流提取3次，每次1 h，合并3次提取液，過濾，減壓濃縮即得）；卡波姆940（美國路博潤特種化工制造有限公司，批號：20151207）；丙二醇、丙三醇、三乙醇胺、氮酮、亞硫酸氫鈉等均為藥用級。

2 方法與結(jié)果

2.1 綜合評價方法的建立

2015年版《中國藥典》（四部）規(guī)定凝膠劑應(yīng)均勻、細(xì)膩，在常溫時保持膠狀、不干涸或液化[1]。參照相關(guān)文獻(xiàn)[4-6]，以凝膠劑成型性、光澤度、均勻度、黏度、pH、涂展性、穩(wěn)定性為指標(biāo)，考察凝膠劑的成型情況。綜合評分滿分為15.0分，其中成型性、光澤度、均勻度、黏度、pH、涂展性各占2.0分，穩(wěn)定性占3.0分（離心1.0分、熱恒溫1.0分、低溫1.0分），綜合評分標(biāo)準(zhǔn)見表1。

2.1.1 黏度測定 按照2015版《中國藥典》（四部）通則0633方法[1]，采用轉(zhuǎn)子型旋轉(zhuǎn)黏度計（4號轉(zhuǎn)子，轉(zhuǎn)速6.0 r/min）測定室溫下凝膠劑的黏度。

2.1.2 pH測定 按照2015版《中國藥典》（四部）通則0631方法[1]，測定室溫下凝膠劑的pH。分別稱取2 g凝膠劑，加40 mL新煮沸過的純化水，超聲溶解，測定。

2.1.3 穩(wěn)定性測定 參考文獻(xiàn)[1，7]中方法進(jìn)行穩(wěn)定性試驗。（1）離心試驗：取樣品離心30 min，轉(zhuǎn)速為3 000 r/min，離心半徑為5 cm，觀察是否有分層、結(jié)塊等現(xiàn)象及其他外觀變化。（2）熱恒溫試驗：取樣品密封置于55℃恒溫箱中6 h，同“（1）”項觀察。（3）低溫試驗：取樣品密封置于冰箱（－20℃）中冷藏24 h，同“（1）”項觀察。

2.2 復(fù)方粉背雷公藤凝膠劑的制備

稱取處方量的卡波姆940撒于適量純化水上，靜置24 h，充分溶脹后，加入處方量的丙三醇、氮酮2.0 g，亞硫酸鈉0.4 g，攪拌均勻得A相；另稱取處方量的復(fù)方粉背雷公藤提取液、丙二醇、三乙醇胺，攪拌均勻得B相；將B相緩緩倒入A相中，加純化水至100 g，繼續(xù)攪拌直至得到顏色均一黏稠的半固體凝膠劑。

2.3 正交試驗設(shè)計

2.3.1 因素與水平的確立 根據(jù)凝膠劑處方基質(zhì)組成和預(yù)試驗結(jié)果，選取卡波姆940（A）、丙二醇（B）、丙三醇（C）、三乙醇胺（D）、藥材提取液（E）等5種對凝膠成型和性質(zhì)影響較大的主要組分的用量作為考察凝膠劑成型的因素，每個因素3個水平，因素與水平見表2。

表1 綜合評分標(biāo)準(zhǔn)Tab 1 The comprehensive scoring criteria

2.3.2 正交試驗設(shè)計與結(jié)果 根據(jù)表2，采用L18（35）正交表對凝膠劑處方進(jìn)行優(yōu)化試驗。對18份凝膠樣品分別測定其黏度、pH及穩(wěn)定性，并對其進(jìn)行綜合評分。利用SPSS 18.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，結(jié)果見表3、表4。

表3 正交試驗設(shè)計與結(jié)果Tab 3 Design and results of orthogonal test

表4 方差分析結(jié)果Tab 4 Variance analysis results

由表3可知，各因素對凝膠劑成型性影響大小順序為A＞B＞D＞C＞E。方差分析結(jié)果顯示，卡波姆940、丙二醇、三乙醇胺的用量對凝膠劑的成型具有顯著影響。根據(jù)上述試驗結(jié)果，同時結(jié)合生產(chǎn)實際成本及臨床應(yīng)用需求，最終確定凝膠劑最優(yōu)處方為A3B2C1D3E3，即卡波姆940 1.0 g、丙二醇10 g、丙三醇0 g、三乙醇胺1.0 g、氮酮2.0 g、亞硫酸氫鈉0.4 g、藥材提取液50 mL，加純化水至100 g。

2.3.3 驗證試驗 按照上述優(yōu)化處方制備3批樣品，結(jié)果制成的凝膠均勻、細(xì)膩，外觀呈亮棕色，易于涂布，穩(wěn)定性好，綜合評分均值為14.8（RSD＝1.35%，n＝3）。這表明該處方合理、穩(wěn)定、可行，結(jié)果見表5。

3 討論

3.1 凝膠基質(zhì)的選擇

卡波姆是丙烯酸與烯丙基蔗糖或丙烯基季戊四醇交聯(lián)的高分子聚合物，分子結(jié)構(gòu)中含有52%～68%的酸性基團(tuán)，其1%水溶液的pH為2.5～3.0，可加入無機(jī)堿或有機(jī)堿（如三乙醇胺）中和。中和后形成的水凝膠在pH 4.0～11.0范圍內(nèi)穩(wěn)定，在pH 6.5～7.5范圍內(nèi)最為黏稠，pH小于3或大于12時黏度下降[8]。中和后的卡波姆除具有良好的黏合性、膠凝性外，還具有良好的乳化性、增稠性、助懸性和成膜性，廣泛應(yīng)用于乳液、膏霜、凝膠的制備中[9]。目前，國內(nèi)主要的卡波姆型號有934、940、941等。其中卡波姆940具有易于涂展、黏附性好、易清洗、無油膩感、能吸收組織滲出液、對皮膚無刺激性等特點，常作為凝膠劑骨架材料被廣泛用于緩控釋經(jīng)皮制劑的制備。其用量會直接影響凝膠黏度和藥物的釋放，一般選擇質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5%～2.0%[10]。故本試驗選用卡波姆940作為凝膠劑基質(zhì)骨架材料。

表5 驗證試驗結(jié)果Tab 5 Verification test results

3.2 透皮促進(jìn)劑的選擇

氮酮為一種高效、無毒、無刺激性的透皮吸收促進(jìn)劑，對多種親脂及親水性藥物均有顯著的透皮吸收促進(jìn)作用[11]。有研究表明，青藤堿凝膠劑含2%氮酮時透皮吸收最好，其體外累積滲透量及促透速率最大[12]?？紤]到青藤堿是該復(fù)方的主要有效成分，故本試驗采用2%的氮酮作為透皮促進(jìn)劑。

3.3 抗氧劑的選擇

由于青藤堿的穩(wěn)定性較差，遇水、受熱易氧化變色。研究表明，亞硫酸氫鈉對青藤堿有較好的抗氧化作用，0.4%的亞硫酸氫鈉用量可增強青藤堿凝膠劑穩(wěn)定性[13]。故本試驗采用0.4%的亞硫酸氫鈉作為抗氧劑。

3.4 凝膠劑綜合評價方法的建立

本試驗采用綜合評分法，從影響凝膠劑成型的骨架材料基質(zhì)、黏合劑、載藥量等方面對復(fù)方粉背雷公藤凝膠劑處方進(jìn)行優(yōu)化，使凝膠劑的質(zhì)量控制更全面。

復(fù)方粉背雷公藤凝膠劑中雷公藤甲素具有抗炎、免疫抑制等作用[14]；青藤堿具有鎮(zhèn)痛鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)咳局麻、抗炎等作用，臨床用于治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和神經(jīng)痛[15]；兩者為該復(fù)方的主要有效成分。根據(jù)復(fù)方粉背雷公藤凝膠劑臨床用量及藥材中主要有效成分含量[16-18]計算，該藥每次臨床用量中含雷公藤甲素0.690 mg、青藤堿2.945 mg。筆者設(shè)計的凝膠每次使用量約為5 g，每1 g凝膠中應(yīng)含雷公藤甲素0.138 mg、青藤堿0.589 mg。本試驗所制復(fù)方粉背雷公藤凝膠劑中每1 g凝膠含雷公藤甲素0.130 mg、青藤堿0.587 mg，與設(shè)計量相比，這2種有效成分含量均在90%以上，表明本試驗所制復(fù)方粉背雷公藤凝膠劑含量符合要求。

[1] 熊常平，張存，梁勝林，等.復(fù)方粉背雷公藤湯治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎120例[J].廣西中醫(yī)藥，1992，15（4）：1-2.

[2] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：四部[S].2015年版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：77-79.

[3] 王金鳳，蔡興東.中藥凝膠劑研究近況[J].中國當(dāng)代醫(yī)藥，2011，18（2）：14-15.

[4] 陳瓊，王海燕，余紅霞，等.復(fù)方半邊蓮凝膠制備工藝優(yōu)化[J].中國生化藥物雜志，2015，35（3）：162-165.

[5] 唐建蘭，張珊，劉承偉，等.金黃凝膠制備及質(zhì)量控制研究[J].世界科學(xué)技術(shù)：中醫(yī)藥現(xiàn)代化，2015，17（5）：1085-1089.

[6] 李娜，買爾丹·馬合木提.新疆紫草提取物凝膠劑的制備及質(zhì)量考察[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2011，17（1）：14-17.

[7] 唐建蘭，劉承偉，王丹丹，等.金黃凝膠制劑成型工藝研究[J].中草藥，2015，46（2）：207-210.

[8] 李晏，楊延莉，鄒豪，等.卡波姆及其在藥劑學(xué)上的應(yīng)用[J].解放軍藥學(xué)學(xué)報，2002，18（2）：91-95.

[9] 梁斌，朱丹燕.新型凝膠劑研究進(jìn)展[J].海峽藥學(xué)，2012，24（3）：13-15.

[10] 徐和，戴領(lǐng)，沈成英，等.苦參堿凝膠劑的制備及體外釋藥特性考察[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2014，20（1）：8-11.

[11] 周潔.復(fù)方雷公藤凝膠劑對大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎療效及毒性研究[D].重慶：重慶醫(yī)科大學(xué)，2013.

[12] 張丙宏，張先洲，李杰，等.月桂氮酮對青藤堿凝膠劑的透皮吸收作用[J].中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，2002，22（12）：4-6.

[13] 張先洲，潘細(xì)貴，羅順德，等.青藤堿凝膠的制備及質(zhì)量控制[J].中國藥房，2003，14（5）：19-21.

[14] Liu Q.Triptolide and its expanding multiple pharmacological functions[J].Int Immunopharmacol，2011，11（3）：377-383.

[15] Zhao XX，Peng C，Zhang H，et al.Sinomenium acutum：a review of chemistry，pharmacology，pharmacokinetics，and clinical use[J].Pharm Biol，2012，50（8）：1053-1061.

[16] 周潔，劉岳鳳，何凱.復(fù)方雷公藤凝膠劑對大鼠佐劑型關(guān)節(jié)炎的療效及肝毒性研究[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志，2013，29（9）：914-918.

[17] 陳岳祥，喬艷，喬化民，等.HPLC法測定粉背雷公藤中雷公藤甲素的含量[J].藥學(xué)實踐雜志，2009，27（2）：134-136.

[18] 嚴(yán)華，馬雙成.RP-HPLC法測定青風(fēng)藤中青藤堿的含量[J].藥物分析雜志，2006，26（2）：201-203.

Formulation Optimization of Compound Tripterygium Hypoglaucum Gel by Orthogonal Test

YANG Yuanyuan，JIANG Xu，WANG Yuqing（Nanyang Medical College，Henan Nanyang 473061，China）

OBJECTIVE：To optimize the formulation of Compound tripterygium hypoglaucum gel.METHODS：Using the comprehensive score（total score was 15.0）composed by forming property，glossiness，uniformity，viscosity，pH，spreadable property and stability as indexes，using the usage amount of carbomer 940，propylene glycol，triethanolamine and extracts in formula as study factors，orthogonal test was designed to optimized the formulation of Compound tripterygium hypoglaucum gel，and the verification test was conducted.RESULTS：The optimal matrix formulation was as follow as carbomer 940 1.0 g，azone 2.0 g，sodium bisulfite 0.4 g，extracts 50 mL，propylene glycol 10 g，triethanolamine 1.0 g，adding water to 100 g.The average comprehensive score of the gel in verification test was 14.8（RSD＝1.35%，n＝3）.CONCLUSIONS：The optimized formulation of Compound tripterygium hypoglaucum gel shows good forming property，the quality meets the requirements.

Compound tripterygium hypoglaucum gel；Orthogonal test；Formulation optimization；Forming property

R283

A

1001-0408（2017）07-0961-03

2016-06-17

2016-11-08）

（編輯：劉 萍）

河南省中醫(yī)藥科學(xué)研究專項課題（No.2014ZY02019）

＊講師，碩士。研究方向：藥物制劑。電話：0377-63526562。E-mail：nyyzyyy@163.com

#通信作者：副教授，博士。研究方向：中藥創(chuàng)新藥物。電話：0377-63526575。E-mail：wyq2013@163.com

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2017.07.28