王伊凡，樓姝含，王永祿，顧曉彤，李學明（南京工業(yè)大學藥學院，南京 211816）

馬來酸羅托沙敏緩釋混懸液的制備及質(zhì)量評價Δ

王伊凡＊，樓姝含，王永祿，顧曉彤，李學明#（南京工業(yè)大學藥學院，南京 211816）

目的：制備馬來酸羅托沙敏緩釋混懸液并評價其質(zhì)量。方法：以馬來酸羅托沙敏為原料，采用陽離子交換樹脂制備載藥樹脂；并通過表面包衣法，以Eudragit RS100為包衣材料制備緩釋微粒，最終制成緩釋混懸液。采用高效液相色譜法測定馬來酸羅托沙敏的含量，計算載藥量，比較原研制劑與自制混懸液的釋放度。結(jié)果：載藥樹脂制備時藥物用量為2%、反應溫度為25℃、反應時間為4 h，表面包衣時載藥量為35%、包衣材料的用量為10%、反應溫度為40℃。緩釋微粒包衣前、后的載藥量分別為35.23%和32.72%，收率為96.82%；所制緩釋混懸液中馬來酸羅托沙敏占標示量的98.76%，10 h的累積釋放度達80%左右，與原研制劑比較的相似因子f2為65.73。結(jié)論：成功制得馬來酸羅托沙敏緩釋混懸液，其釋放特性與原研制劑相似。

馬來酸羅托沙敏；緩釋混懸液；陽離子交換樹脂；表面包衣；高效液相色譜法

離子交換樹脂緩釋混懸劑是一種采用離子交換技術制備載藥樹脂，再對載藥樹脂進行包衣后，混懸于適宜介質(zhì)中制成的一種口服長效制劑。該劑型的特點為流動性好、便于服用、易于分劑量、掩味效果好[1]，適用于吞咽困難的患者；藥物在胃腸道內(nèi)分布面積大而均勻，刺激性?。凰幬镝尫挪皇芪概趴沼绊?、釋藥平穩(wěn)，個體差異小[2]。

馬來酸羅托沙敏（Carbinoxamine maleate）是一種輕度鎮(zhèn)靜抗組胺藥，具有顯著的鎮(zhèn)靜和抗膽堿作用，胃腸道副作用較低。其口服緩釋混懸液由美國Tris Pharma公司研制，是第一種用于治療2歲及以上兒童季節(jié)性和長期過敏性鼻炎的緩釋組胺受體抑制劑，已于2013年在美國批準上市[3]。據(jù)美國FDA資料（http：//101.110.118. 24/www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/nda/2013/ 022556Orig1soooclinpharmR.pdf）顯示，原研制劑除主藥外的輔料組成為無水檸檬酸、草莓-香蕉香精、甘油、果葡糖漿、羥苯甲酯、羥苯丙酯、預膠化淀粉、聚山梨酯80、聚醋酸乙烯酯、聚維酮、焦亞硫酸鈉、聚苯乙烯磺酸鈉樹脂、蔗糖、三醋酸甘油酯和黃原膠。原研制劑所采用的包衣方法是流化床包衣法，該方法包衣膜增質(zhì)量較大，導致復合物粒徑較大；而國內(nèi)常用的流化床多為布袋式，容易吸附，易導致收率相對較低。本研究采用陽離子交換樹脂為藥物載體，以表面包衣法制備了馬來酸羅托沙敏緩釋混懸液，并評價了其質(zhì)量。

1 材料

1.1 儀器

Waters 1525高效液相色譜（HPLC）儀（美國Waters公司）；PHSJ-5 pH計（上海儀點科學儀器股份有限公司）；TDL-50B離心機（上海書培實驗設備有限公司，離心半徑：5.5 cm）；ZRS-8G智能溶出試驗儀（天津市天大天發(fā)科技有限公司）。

1.2 藥品與試劑

馬來酸羅托沙敏對照品（南京工業(yè)大學藥學院自制，批號：20150403，純度：99.8%）；Amberlite IRP-69陽離子交換樹脂（美國陶氏公司）；Eudragit RS100[丙烯酸乙酯-甲基丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸氯化三甲胺基乙酯（1∶2∶0.1）共聚物，贏創(chuàng)德固賽特種化學有限公司，批號：B120308514]；聚乙二醇（PEG）4000（中國醫(yī)藥上?；瘜W試劑有限公司，化學純）；黃原膠（江蘇神華藥業(yè)有限公司）；預膠化淀粉（海鹽六和藥業(yè)有限公司）；無水檸檬酸（上海凌峰化學試劑有限公司）；焦亞硫酸鈉（四川金山制藥有限公司）；色素和香精（杭州雪松香精香料有限公司）；甲醇為化學純，乙醇為分析純，水為去離子水。

2 方法與結(jié)果

2.1 馬來酸羅托沙敏的含量測定

2.1.1 色譜條件 色譜柱：Venusil XBP CN（250 mm× 4.6 mm，5μm）；流動相：乙腈-甲醇-0.01 mol/L磷酸二氫鉀[100∶170∶80，用磷酸調(diào)pH至（5.40±0.05）]，流速：1 mL/min；柱溫：40℃；檢測波長：263 nm；進樣量：20 μL。該色譜條件下，馬來酸羅托沙敏檢測質(zhì)量濃度的線性范圍為0.129～0.194 mg/mL（r＝0.999 8），平均回收率為97.32%（RSD＝0.98%，n＝3），穩(wěn)定性RSD＝0.51%（n＝6）。

2.1.2 載藥量的測定 精密稱取供試品（載藥微粒、緩釋微?；蚓忈尰鞈乙海┻m量（約相當于馬來酸羅托沙敏16 mg），置于100 mL量瓶中，加入10 mL無水甲醇，振搖5 min，再加入1 mol/L KCl溶液20 mL，搖勻，置于60℃水浴60 min，取出放冷，用60%甲醇定容，離心；精密量取上清液20 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜。另取馬來酸羅托沙敏對照品適量，精密稱定，用甲醇-1 mol/L KCl溶液（1∶2）溶解并用60%甲醇定量稀釋制成約含馬來酸羅托沙敏0.16 mg/mL的溶液，注入液相色譜儀，記錄色譜，計算載藥量。

2.1.3 釋放度的測定 取馬來酸羅托沙敏緩釋混懸液5 mL，照釋放度測定法（2015年版《中國藥典》（二部）附錄ⅩD第一法）測定。采用溶出度測定法第二法裝置，釋放介質(zhì)為900 mL的0.4 mol/L KH2PO4，轉(zhuǎn)速為50 r/min，溫度為25℃，依法操作。分別在0.25、0.5、1、1.5、2、3、6、12 h時取樣5 mL，同時補充等量釋放介質(zhì)。樣液用0.8 μm濾膜濾過，精密量取續(xù)濾液20 μL，進樣測定，記錄色譜。另取馬來酸羅托沙敏對照品適量，精密稱定，用釋放介質(zhì)溶解并定量稀釋制成0.001 6 mg/mL的溶液，進樣測定，計算釋放度。

2.2 載藥樹脂的制備

取處方量的馬來酸羅托沙敏對照品，加去離子水溶解，作為藥物溶液。然后加入處方量的陽離子交換樹脂，混合，勻速攪拌，靜置，濾過。加去離子水充分振搖清洗至洗液基本無藥物檢出為止，將載藥樹脂轉(zhuǎn)移至50℃烘箱中干燥3 h，取出，200目篩整粒。

2.2.1 藥物用量對樹脂載藥量的影響 取陽離子交換樹脂約10 g，分別加到500 mL 0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%、3%的藥物溶液中，在室溫（25℃）下恒溫攪拌4 h，測定樹脂載藥情況。結(jié)果表明，隨著藥物用量的增加，樹脂的載藥量也增加；但當藥物用量超過2%后，樹脂的載藥量不再增加，表明載藥已達飽和。確定載藥樹脂的最佳藥物用量為2%。

2.2.2 反應時間對樹脂載藥量的影響 取陽離子交換樹脂約10 g，分別加到2%藥物溶液中，在室溫（25℃）下分別攪拌1、2、3、4、5、6、8 h，測定樹脂載藥情況。結(jié)果表明，隨著反應時間的延長，樹脂的載藥量也增加；但當反應時間超過4 h后，樹脂的載藥量不再增加，表明反應達到平衡。確定載藥樹脂的最佳反應時間為4 h。

2.3 載藥樹脂的浸漬

取載藥樹脂，加適量40%PEG4000水溶液，攪拌30 min，濾過，移至50℃烘箱中干燥3 h，取出，200目篩整粒。稱取干燥后的陽離子交換樹脂、載藥樹脂和浸漬后的載藥樹脂各30 g，分別置于相同規(guī)格的量筒中，振實，記錄干態(tài)體積（V0，以高度表示）；然后分別加入過量純化水，浸泡24 h，使樹脂樣品充分溶脹，記錄溶脹后的濕態(tài)體積（V1）。比較前后體積變化，計算溶脹度（P＝V1/V0）。結(jié)果顯示，3種樣品的V0分別為42.5、43.4、58.8 cm，V1分別為59.1、58.6、48.2 cm，P分別為1.39、1.35、0.82，表明PEG浸漬技術處理樹脂后，溶脹度明顯減小。這說明PEG浸漬技術確實能抑制羅托沙敏樹脂復合物的吸水膨脹，有利于羅托沙敏樹脂復合物在包衣和釋放過程中保持其原有的幾何形狀，以防止羅托沙敏樹脂復合物的衣膜崩裂而出現(xiàn)藥物“突釋”現(xiàn)象。

2.4 緩釋微粒的制備

取浸漬后的載藥樹脂，置于三角燒瓶中，加入處方量的Eudragit RS100-乙醇溶液，置于40℃水浴中攪拌4 h，然后冷卻至室溫，靜置，濾過，加去離子水洗滌，移至50℃烘箱中干燥過夜，取出，200目篩整粒。

2.4.1 包衣方法的選擇 對載藥樹脂進行包衣的常見方法有流化床包衣法、噴霧干燥包衣法[4]、乳化溶劑揮發(fā)包衣法[5-6]、表面包衣法等。流化床包衣技術盡管能夠制備出粒徑在100 μm左右的緩釋微粒，但由于包衣膜增質(zhì)量較大，導致微囊粒徑過度增大，生產(chǎn)成本較高。噴霧干燥包衣法由于樹脂粒徑較小，容易出現(xiàn)各種堵塞問題。乳化溶劑揮發(fā)法，其衣膜增質(zhì)量小于5%，所需設備簡單，但其使用較多有機溶劑和乳化劑，而原研制劑中并無這些輔料，且溶劑后期處理較麻煩。表面包衣法不僅操作簡單、工藝重現(xiàn)性好、容易實現(xiàn)工業(yè)化，而且制備的藥物樹脂復合物微囊的粒徑較小，適合后期進一步的制劑加工。綜合考慮選擇表面包衣法。

2.4.2 載藥量的選擇 取3份同一批次的載藥樹脂10 g，加入10%Eudragit RS100-乙醇溶液200 mL，分別按載藥量25%、35%、44%對藥物樹脂復合物進行表面包衣。取所得樣品適量進行釋放度測定，繪制釋放曲線見圖1。

圖1 載藥量、Eudragit RS100用量、介質(zhì)用量、反應溫度對緩釋混懸液釋放度的影響Fig 1 Effects of drug-loading capacity，Eudragit RS100 amount，media amount and reaction temperature on the release degree of sustainedrelease suspension

由圖1可知，隨著載藥量的增加，藥物緩釋范圍逐漸減小，并較快趨于平衡。這是由于隨著樹脂載藥量的增大，陽離子交換樹脂交換藥物離子后剩余的磺酸基減少，導致與丙烯酸樹脂分子中的季胺基結(jié)合減少，包衣效果欠佳，緩釋范圍減小。綜合考慮選擇表面包衣的最佳樹脂載藥量為35%。

2.4.3 Eudragit RS100用量的影響 取3份同一批次的載藥樹脂（載藥量為35%）10 g，分別加入不同用量（10%、5.0%、2.5%）Eudragit RS100-乙醇溶液200 mL，在40℃水浴條件下進行表面包衣。取所得樣品適量進行釋放度測定，繪制釋放曲線見圖1。

由圖1可知，Eudragit RS100的用量越低，藥物釋放越快。Eudragit RS100用量為2.5%和5.0%時，載藥樹脂經(jīng)表面包衣后所得微粒的緩釋范圍只有5 h，5 h后藥物基本釋放平衡；而Eudragit RS100用量為10%時，載藥樹脂經(jīng)表面包衣后所得微粒的緩釋范圍將近10 h。綜合考慮選擇表面包衣的最佳Eudragit RS100用量為10%。2.4.4 介質(zhì)用量的影響 取2份同一批次的載藥樹脂（載藥量為35%）10 g，分別加入10%Eudragit RS100-乙醇溶液100 mL和200 mL，在40℃水浴條件下進行表面包衣。取所得樣品適量進行釋放度測定，繪制釋放曲線見圖1。

由圖1可知，100 mL介質(zhì)用量比200 mL介質(zhì)用量所得微粒的釋藥速度明顯加快。這是由于隨著介質(zhì)用量的加大，表面包衣材料與載藥樹脂的結(jié)合交換增多，從而使藥物的釋放減慢。綜合考慮選擇表面包衣的最佳介質(zhì)用量為200 mL。

2.4.5 反應溫度的影響 取3份同一批次的載藥樹脂（載藥量為35%）10 g，加入10%Eudragit RS100-乙醇溶液200 mL，分別在20、40、50℃水浴條件下進行表面包衣。取所得樣品適量進行釋放度測定，繪制釋放曲線見圖1。

由圖1可知，反應溫度越高，藥物釋放速度越慢。原因是Eudragit RS100與陽離子交換樹脂反應是一個吸熱過程，溫度越高越有利于Eudragit RS100與載藥樹脂結(jié)合，從而導致藥物釋放緩慢。綜合考慮選擇表面包衣的最佳反應溫度為40℃。

2.5 緩釋混懸液的制備

在燒杯中加入適量去離子水，再依次加入處方量的黃原膠、預膠化淀粉、甘油、蔗糖、高果糖玉米糖漿、無水檸檬酸、焦亞硫酸鈉、防腐劑等，攪拌、充分混勻，然后加入處方量的緩釋微粒，攪拌混勻，即得緩釋混懸液。其分散性良好，沉降體積比＞0.90。

2.6 載藥樹脂、緩釋微粒和緩釋混懸液中馬來酸羅托沙敏的含量測定

分別精密稱取供試品（載藥樹脂、緩釋微?；蚓忈尰鞈乙海?，按“2.1.2”項下方法檢測載藥量。結(jié)果表明，載藥樹脂的最大載藥量為44.89%；緩釋微粒包衣前、后的載藥量分別為35.23%、32.72%，收率達96.82%；緩釋混懸液中馬來酸羅托沙敏占標示量的98.76%。

2.7 緩釋混懸液的釋放度研究

分別繪制自制緩釋混懸液與原研制劑混懸液（參考美國FDA資料）的釋放曲線。結(jié)果顯示，2種樣品的釋放情況相似，均為前期釋放較快、后期釋放較緩，整體緩釋效果良好、釋放平穩(wěn)，10 h累積釋放度達到80%左右；計算相似因子f2為65.73（f2＞50，兩者相似）。自制緩釋混懸液與原研制劑的釋放曲線見圖2。

3 討論

本研究采用表面包衣法，系利用丙烯酸樹脂分子中的季胺基與離子交換樹脂中剩余的磺酸基結(jié)合而起到包衣的作用。丙烯酸樹脂的長鏈包覆在樹脂的外表面起屏蔽作用，以減緩反離子的進入，從而調(diào)節(jié)藥物的釋放速度。相比于Eudragit RS100的用量、介質(zhì)用量、反應溫度等因素，載藥樹脂的載藥量對整個工藝的影響較大。其主要表現(xiàn)在隨著樹脂載藥量的增大，陽離子交換樹脂交換藥物離子后剩余的磺酸基減少，導致與丙烯酸樹脂分子中的季胺基結(jié)合減少，包衣效果欠佳，進而緩釋范圍縮小。因此需要合理分配磺酸基的兩種結(jié)合情況，兼顧載藥量和緩釋效果，同時優(yōu)化表面包衣的工藝參數(shù)，以制得優(yōu)質(zhì)的緩釋混懸液。

圖2 自制緩釋混懸液與原研制劑混懸液的釋放曲線Fig 2 The release curves between self-made sustainedrelease suspension and original preparation suspension

該緩釋混懸液要得到進一步應用，離不開體內(nèi)實驗驗證。參考相關資料[7-8]，發(fā)現(xiàn)可以考慮在比格犬體內(nèi)進行藥動學特征的研究，并進行生物等效性評價。此外，這類劑型還具有較好的掩味效果，可大大提高患者用藥的順應性。不過，陽離子交換樹脂交換容量不大，這使得適用藥物在一定程度上受到了限制。該制劑要得到更廣泛的發(fā)展，還有待于進一步研究開發(fā)。

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Preparation and Quality Evaluation of Carbinoxamine Maleate Sustained-release Suspension

WANG Yifan，LOU Shuhan，WANG Yonglu，GU Xiaotong，LI Xueming（School of Pharmacy，Nanjing University of Technology，Nanjing 211816，China）

OBJECTIVE：To prepare Carbinoxamine maleate sustained-release suspension，and evaluate its quality.METHODS：Using carbinoxamine maleate as raw material，drug-loaded resin was prepared by cation exchange resin；surface coating method was used to finally prepare sustained-release suspension，using Eudragit RS100 as sustained-release coating material to prepare sustained-release microparticles.HPLC was conducted to determine the content of carbinoxamine maleate，release degree oforiginal preparations and self-made suspensions was compared，drug-loading capacity was calculated.RESULTS：The drug amount in preparing drug-loaded resin was 2%，reaction temperature was 25℃，and reaction time was 4 h；the drug-loading capacity in surface coating was 35%，amount of coating material was 10%，and reaction temperature was 40℃.The drug-loading capacities of sustained particles before and after coating were 35.23%，32.72%，respectively；the yield was 96.82%.The carbinoxamine maleate in prepared sustained-release suspension accounted for 98.76%of the labeled amount；release degree in 10 h reached about 80%，f2was 65.73.CONCLUSIONS：Carbinoxamine maleate sustained-release suspension is prepared successfully，and its release is similar to the original preparation.

Carbinoxamine maleate；Sustained-release suspension；Cation exchange resin；Surface coating；HPLC

R943；R927

A

1001-0408（2017）07-0947-04

2016-07-16

2016-09-04）

（編輯：鄒麗娟）

國家自然科學基金資助項目（No.81170492）；江蘇省高校自然科學研究面上項目（No.10KJB350002）；江蘇省普通高校研究生科研創(chuàng)新計劃項目（No.KYLX15_0816）

＊碩士研究生。研究方向：藥物制劑。電話：025-58139399。E-mail：771815727@qq.com

#通信作者：教授，碩士生導師。研究方向：藥物分析、制劑研究。電話：025-58139399。E-mail：xuemingli@njut.edu.cn

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2017.07.24