于雷

摘 要：本實(shí)驗(yàn)對(duì)柴芍六君口服液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研究。含量測(cè)定方法：采用安捷倫C18色譜柱（220mm×4.6mm，5μm），乙腈-0.1%醋酸（20∶80）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為276nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃；鑒別方法：羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板，以三氯甲烷-甲醇-水（13∶7∶2）為展開劑，以2%對(duì)二甲氨基苯甲醛的40%硫酸乙醇溶液為顯色劑，在60℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置日光及紫外燈（365nm）下檢視。結(jié)論：本法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，可作為柴芍六君口服液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

關(guān)鍵詞：柴芍六君口服液；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；研究

柴芍六君口服液具有舒肝解郁、健脾和胃、益氣養(yǎng)血的功效，由黨參、柴胡、白術(shù)、甘草等組成。甘草別名國(guó)老、甜草、烏拉爾甘草、甜根子，是一種補(bǔ)益中草藥。甘草生用偏涼，可瀉火解毒、緩急止痛；炙用偏溫，能散表寒、補(bǔ)中益氣。《藥性論》記載：“主腹中冷痛，治驚癇，除腹脹滿；補(bǔ)益五臟；制諸藥毒；養(yǎng)腎氣內(nèi)傷，令人陰（不）痿；主婦人血瀝腰痛；虛而多熱；加而用之。”甘草具有抗炎、抗過(guò)敏、解毒、祛痰、抗腫瘤、抗病毒、防止動(dòng)脈硬化等作用[1-5]。柴胡用于感冒發(fā)熱、寒熱往來(lái)、瘧疾、肝郁氣滯、胸肋脹痛、子宮脫落、月經(jīng)不調(diào)等。柴胡始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品。《日華子本草》記載：“安魂定魄。補(bǔ)五勞七傷，一切虛損、驚悸、煩悶、健忘。通九竅，利百脈，益精養(yǎng)氣，壯筋骨，解冷熱。”本實(shí)驗(yàn)對(duì)柴芍六君口服液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研究。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：KHW-D-1LC精密拉伸水浴鍋（上海科恒實(shí)業(yè)發(fā)展有限公司）；FA2004B電子分析天平（上海右一儀器有限公司）；1810-B石英自動(dòng)雙重蒸餾水器（上?？德穬x器設(shè)備有限公司）。

754紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（西安華辰樂(lè)天實(shí)驗(yàn)室設(shè)備有限公司）；EX1600高效液相色譜儀（上海棱譜儀器儀表有限公司）；R-1050大型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司）；半自動(dòng)點(diǎn)樣儀LINOMAT Ⅳ（瑞士CAMAG）；雙槽展開缸 PF 562C（瑞士CAMAG）；DHG-9240A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海和呈儀器制造有限公司）。

1.2 色譜柱：安捷倫C18色譜柱（220mm×4.6mm，5μm）。

1.3 對(duì)照品：甘草苷

1.4 試劑：甲醇（北京亞太龍興化工有限公司）、乙腈（北京亞太龍興化工有限公司）、三氯甲烷（南京大唐化工有限公司）、二甲氨基苯甲醛（南京大唐化工有限公司）、硫酸（淄博齊泰石油化工有限公司）、磷酸（北京亞太龍興化工有限公司）、正丁醇（上?；翩诨び邢薰荆?、乙醇（南京大唐化工有限公司）、醋酸（南京大唐化工有限公司）。

1.5 試藥：柴芍六君口服液

2 測(cè)定方法確定

2.1 色譜條件

依據(jù)查閱文獻(xiàn)及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下。流動(dòng)相：乙腈-0.1%醋酸（20∶80）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)：276nm，流速：1.0m·min-1。柱溫：30℃。理論板數(shù)按甘草苷峰計(jì)算應(yīng)不得低于2000。

2.2 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取甘草苷對(duì)照品適量，置容量瓶中，加70%乙醇制成每1mL含100μg的溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備

取柴芍六君口服液適量，精密量取，水浴蒸干，加15毫升70%乙醇超聲提取30分鐘，過(guò)濾，將濾液轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）濾過(guò)，即得。

2.4 專屬性試驗(yàn)

取除甘草以外黨參、陳皮、白芍、白術(shù)、柴胡等藥材按樣品制備工藝制成陰性對(duì)照樣品，按上述實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)，結(jié)果陰性試驗(yàn)沒(méi)有干擾，表明本方法專屬性良好。

2.5 精密度試驗(yàn)

取對(duì)照品溶液按上述色譜條件，精密吸取20μl，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積。結(jié)果，RSD=0.68%，表明本方法精密度良好。

2.6 對(duì)照品的線性考察

精密稱取適量甘草苷對(duì)照品，加入流動(dòng)相溶液使溶解分別配制成每毫升含20、40、80、160、240、320微克的溶液。分別精密上述溶液吸取10μL，注人液相色譜儀，依照2.1項(xiàng)下的色譜條件測(cè)定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，對(duì)照品進(jìn)樣量（X）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明，甘草苷在20～320μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.7 重現(xiàn)性試驗(yàn)

稱取同一批的柴芍六君口服液樣品6份，按測(cè)定方法項(xiàng)下的方法制備供試品溶液，測(cè)定含量，并計(jì)算樣品的RSD值，結(jié)果RSD為0.71%，結(jié)果表明此方法的重現(xiàn)性良好。

2.8 準(zhǔn)確度試驗(yàn)

取對(duì)照品適量分別精密加入柴芍六君口服液中，按含量測(cè)定進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算回收率為99.3%，RSD為0.69%。

3 鑒別

取柴芍六君口服液適量（約相當(dāng)于柴胡藥材1g），用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨試液50ml洗滌1次，再用正丁醇飽和的水50ml洗滌1次，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取1克柴胡對(duì)照藥材，按上述方法制備，作為對(duì)照品溶液。取除柴胡以外黨參、陳皮、白芍、白術(shù)、甘草等藥材按樣品制備工藝制成陰性對(duì)照樣品，按上述方法制成陰性對(duì)照樣品。照薄層色譜法（附錄Ⅵ B）試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13∶7∶2）的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以含2%對(duì)二甲氨基苯甲醛的40%硫酸乙醇溶液，在60℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置日光及紫外燈（365nm）下檢視。

4 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)分離效果好、方法簡(jiǎn)便、快捷、準(zhǔn)確、專屬性好，可用于柴芍六君口服液中甘草苷的含量測(cè)定。樣品與柴胡對(duì)照藥材對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性無(wú)干擾。該鑒別方法專屬性強(qiáng)，操作簡(jiǎn)單，可用于柴芍六君口服液中柴胡的鑒別。

參考文獻(xiàn)

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