對(duì)于從事食品生產(chǎn)相關(guān)產(chǎn)業(yè)的人來說，食品安全是重中之重，是維護(hù)消費(fèi)者信任的首要因素。食品生產(chǎn)商為了確保產(chǎn)品的安全與品質(zhì)，都會(huì)進(jìn)行食源性致病菌的檢測(cè)。廣州迪奧生物科技有限公司針對(duì)目前的致病微生物檢測(cè)現(xiàn)狀開發(fā)了全方位的IMSA技術(shù)平臺(tái)，本次課程的主題主要由申洪杰老師對(duì)迪奧公司的IMSA技術(shù)平臺(tái)做一個(gè)簡(jiǎn)單的講解。

現(xiàn)行檢測(cè)方法概述

微生物學(xué)及生化鑒定方法（即國(guó)標(biāo)方法）是傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法，這種方法的檢測(cè)結(jié)果非常準(zhǔn)確，但是具有時(shí)間長(zhǎng)、效率低的缺點(diǎn)，并且這種方法需要專業(yè)人員進(jìn)行結(jié)果分析。

分子生物學(xué)方法是目前主流的檢測(cè)方法之一。第一代PCR檢測(cè)技術(shù)具有反應(yīng)熱循環(huán)、操作繁雜、靈敏度高、準(zhǔn)確度低、反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)、結(jié)果判斷麻煩、需要專業(yè)背景、單指標(biāo)檢測(cè)等諸多缺點(diǎn)，已經(jīng)無法滿足日益壯大的市場(chǎng)需求。第二代熒光PCR檢測(cè)技術(shù)分為普通熒光PCR和熒光探針PCR，普通熒光PCR反應(yīng)熱循環(huán)，操作很繁雜，但是靈敏度很高；熒光探針PCR的檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)、結(jié)果分析麻煩、需要專業(yè)背景。另外分子生物學(xué)方法只適用于大型高端儀器，局限于高端市場(chǎng)，普及推廣困難，無法滿足基層檢測(cè)機(jī)構(gòu)的需求。第三代恒溫?cái)U(kuò)增檢測(cè)技術(shù)可實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)過程，操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)時(shí)間短，使用成本低，但也具有擴(kuò)增結(jié)果無法測(cè)序和多使用目視判斷的缺點(diǎn)。

IMSA技術(shù)平臺(tái)

廣州迪奧生物科技有限公司針對(duì)目前的致病微生物檢測(cè)現(xiàn)狀開發(fā)了全方位的IMSA技術(shù)平臺(tái)。該平臺(tái)結(jié)合了IMSA技術(shù)和熒光檢測(cè)技術(shù)，在通過優(yōu)化之后實(shí)現(xiàn)高效率和高準(zhǔn)確率。IMSA平臺(tái)的核心技術(shù)是Bst聚合酶，它的來源是濕熱脂肪芽孢桿菌bacillus、stearothermophilus DNA聚合酶的部分片段，分子量67KD。Bst聚合酶具有5`→3`DNA聚合酶活性，但不具有5`→3`外切核酸酶活性；鏈置換活性強(qiáng)；在寬溫度范圍內(nèi)具有活性，最佳活性溫度為63℃，80℃ 20min酶便失活等特點(diǎn)。

MISA技術(shù)平臺(tái)與其他檢測(cè)方法的對(duì)比見表1、表2、表3。IMSA技術(shù)平臺(tái)的特點(diǎn)有五點(diǎn)：第一、恒溫?cái)U(kuò)增，無需熱循環(huán)，持續(xù)擴(kuò)增；第二、Bst DNA聚合酶，高效擴(kuò)增；第三、引物設(shè)計(jì)，成剪刀狀莖環(huán)結(jié)構(gòu)，自主擴(kuò)增；第四、擴(kuò)增模板濃度需求低，提高低拷貝模板的擴(kuò)增概率；第五、熒光信號(hào)檢測(cè)，擴(kuò)增產(chǎn)物檢測(cè)準(zhǔn)確率高，干擾小。

IMSA技術(shù)的應(yīng)用范圍非常廣，能夠檢測(cè)包括國(guó)家規(guī)定必檢致病菌在內(nèi)的眾多微生物和玉米和大豆等農(nóng)作物的轉(zhuǎn)基因成分，還能夠?qū)ωi、牛、羊、雞、鴨、鵝等動(dòng)物源性食品做成分檢測(cè)，也能檢測(cè)出水產(chǎn)中細(xì)菌和病毒引起的病害。

IMSA檢測(cè)平臺(tái)是既適用于食品生產(chǎn)加工企業(yè)日常質(zhì)控，也適用于基層監(jiān)管部門開展批量風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)的優(yōu)秀技術(shù)平臺(tái)。具有更簡(jiǎn)單、更經(jīng)濟(jì)、更純粹的優(yōu)勢(shì)。