程軍明,姜 麗*

（1.河南省信陽市南灣水庫管理局，464031；2.河南省商丘市睢陽區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，476100）

抗生素和激素等一些添加劑促進(jìn)了水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，但抗生素的濫用導(dǎo)致動(dòng)物體菌落平衡遭到破壞，動(dòng)物產(chǎn)生耐藥性，降低免疫力，許多國家禁止抗生素作為飼料添加劑使用，2006年，因?yàn)E用抗生素引起的“多寶魚事件”給我國大菱鯉主要養(yǎng)殖區(qū)(山東、河北) 造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失，嚴(yán)重影響了大菱鲆養(yǎng)殖業(yè)的健康快速發(fā)展，為此開發(fā)綠色飼料添加劑引起養(yǎng)殖行業(yè)的重視，而中草藥作為一種天然的飼料添加劑，綠色環(huán)保，無耐藥性，開發(fā)中草藥飼料添加劑應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)，對水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展具有重要作用，本試驗(yàn)旨在探討中草藥添加劑對鯉魚抗氧化能力和免疫功能的影響，為中草藥添加劑應(yīng)用于鯉魚生產(chǎn)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)用魚 試驗(yàn)魚為從武漢某養(yǎng)殖場引進(jìn)的的健康鯉魚，規(guī)格約147.5 g/尾。采購后的鯉魚要進(jìn)行養(yǎng)殖前的預(yù)處理，首先用3-5%氯化鈉水浸泡20min 進(jìn)行消毒，接著把消毒后的鯉魚苗放入預(yù)養(yǎng)池內(nèi)進(jìn)行馴化，訓(xùn)化為期14d，在預(yù)養(yǎng)期，鯉魚苗喂食基礎(chǔ)飼料，訓(xùn)化的目的在于鯉魚出現(xiàn)有規(guī)律采食。

1.2 中草藥添加劑

中草藥添加劑方劑：黃芪2 份、雙花1 份、留蘭香1 份、柳穗2 份、紅花1 份、當(dāng)歸3 份、小茴香3 份、姜片1 份、甘草1 份。以上藥物按照一定比例混合后粉碎，制成中草藥粉劑備用。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選用360 尾鯉魚苗，隨機(jī)分成4 組，每組3 個(gè)平行，每個(gè)平行放置30 尾育苗，分別放入12 個(gè)網(wǎng)箱中，4 個(gè)組分別是對照組、低濃度組、中濃度組和高濃度組，對照組飼喂基礎(chǔ)飼料，中草藥添加劑分別以1%、2%、3%的比例加入到基礎(chǔ)飼料，分別飼喂低濃度組、中濃度組和高濃度組鯉魚，每天在9:00、13:00 和16:00 時(shí)間定時(shí)投喂飼料，投喂量根據(jù)根據(jù)魚體生長情況及時(shí)調(diào)整，投喂量一般為魚體質(zhì)量的3%—3.5%，養(yǎng)魚用水要保持清潔衛(wèi)生，每天早上8:00 換水25%，全天不間斷充氧，水溫調(diào)控在25℃左右，試驗(yàn)為期42d。

1.4 測定指標(biāo)及方法

試驗(yàn)結(jié)束后每個(gè)平行隨機(jī)取5 尾鯉魚進(jìn)行尾靜脈采血，血樣置于4 ℃冰箱靜置3 h，然后以3000 r/min 高速離心15min，取上清液保存于-20℃冰箱備用。分別采用比色法、紫外法測定血清谷胱甘肽過氧化物酶、過氧化氫酶（CAT）活力，用ELISA 法測定血清補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4 和免疫球蛋白IgM 的含量，所用試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.5 數(shù)據(jù)處理

用SPSS 19.0 進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，采用一般線性模型進(jìn)行比較以及單因素方差分析，以P＜0.05作為顯著性，用Duncan’s 法進(jìn)行多重比較。數(shù)據(jù)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 中草藥添加劑對鯉魚抗氧化能力的影響

由表1可見，添加中草藥添加劑試驗(yàn)各組谷胱甘肽過氧化物酶具有不同程度地提高，中量組和高量組較對照組顯著提高（P＜0.05），低量組較對照組無顯著差異（P＞0.05）。

與對照組相比，試驗(yàn)各組過氧化氫酶均有不同程度地提高，中量組和高量組較對照組的過氧化氫酶顯著提高（P＜0.05），低量組過氧化氫酶較對照組也有提高的趨勢，但差異不顯著（P＞0.05）?？梢娞砑舆m量的中草藥添加劑提高了鯉魚血清谷胱甘肽過氧化物酶和過氧化氫酶的含量，中草藥添加劑提高了鯉魚的抗氧化能力。

表1 中草藥添加劑對鯉魚抗氧化能力的影響U/mL

表2 中草藥添加劑對鯉魚免疫功能的影響（mg/L)

2.2 中草藥添加劑對鯉魚免疫功能的影響

由表2可見：添加中草藥后鯉魚血清補(bǔ)體C3和C4 含量均有不同程度地提高，中量組和高量組補(bǔ)體C3、C4 含量較對照組顯著提高，低量組補(bǔ)體C3、C4 較對照組有所提高，但差異不顯著，中量組和高量組補(bǔ)體C3、C4 較低量組有所提高，差異不顯著，高量組和中量組補(bǔ)體C3、C4 無顯著差異，就IgM 指標(biāo)而言，試驗(yàn)各組IgM 水平較對照組均有不同程度地提高，中量組和高量組血清IgM 較對照組顯著提高，較低量組有所提高，中量組和高量組之間血清IgM 水平差異不顯著?？梢娞砑舆m量的中草藥添加劑可以提高鯉魚血清的補(bǔ)體C3、C4 和IgM 的水平，中草藥添加劑能夠提高鯉魚血清的免疫功能。

3 結(jié)論

適量的中草藥添加劑可以提高鯉魚血清的谷胱甘肽過氧化物酶和過氧化氫酶的含量，提高鯉魚血清的抗氧化能力，適量的中草藥添加劑可以提高鯉魚血清的補(bǔ)體C3、C4 和IgM 的水平，能夠提高鯉魚血清的免疫功能。綜合各項(xiàng)指標(biāo)，鯉魚飼料里添加本試驗(yàn)中的2%飼料添加劑效果較好。