李祥林 （山東省龍口市下丁家鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)工作站 65719）

姜榮忱 （山東省蓬萊市畜牧獸醫(yī)工作站）

王 進(jìn) 孫 勇 （山東省龍口市畜牧獸醫(yī)工作站）

水貂出血性肺炎的診斷與治療

李祥林 （山東省龍口市下丁家鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)工作站 65719）

姜榮忱 （山東省蓬萊市畜牧獸醫(yī)工作站）

王 進(jìn) 孫 勇 （山東省龍口市畜牧獸醫(yī)工作站）

水貂出血性肺炎是由綠膿桿菌引起的一種人畜共患病。對(duì)山東省煙臺(tái)市某養(yǎng)殖戶(hù)送檢的病貂進(jìn)行剖檢，根據(jù)臨床癥狀、病理變化、細(xì)菌的分離及生化實(shí)驗(yàn)鑒定確診為水貂出血性肺炎。

水貂出血性肺炎(水貂綠膿桿菌病)，是由綠膿桿菌引起的毛皮動(dòng)物的一種急性傳染病。以肺出血、肺水腫、呼吸困難及部分水貂突然死亡，并從口鼻中流出血樣泡沫等為特征[1]，嚴(yán)重威脅養(yǎng)貂業(yè)。1953年，Knox首次在丹麥報(bào)道了該病[2]，1982年，Gessord首次從病貂體內(nèi)分離出該病菌[3]。該病在瑞典、芬蘭、美國(guó)、日本、法國(guó)等國(guó)均有報(bào)道[4]。近年來(lái)我國(guó)養(yǎng)貂業(yè)發(fā)展迅速, 其飼養(yǎng)規(guī)模、數(shù)量及密度均不斷增加，但由于飼養(yǎng)管理水平相對(duì)滯后，造成了該病的流行，給養(yǎng)殖戶(hù)造成較大的經(jīng)濟(jì)損失。2015年9月煙臺(tái)某養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)生一種以肺臟出血為典型特征的疾病，經(jīng)綜合診斷，確診為綠膿桿菌引起的水貂出血性肺炎，現(xiàn)將情況報(bào)告如下：

1 發(fā)病情況

該養(yǎng)殖場(chǎng)共養(yǎng)殖水貂10萬(wàn)余只，具有較好的衛(wèi)生防疫制度，分窩后未注射犬瘟熱和細(xì)小病毒性腸炎疫苗。2015年9月2日，突然死亡10多只，以后幾天死亡數(shù)量逐漸增多，公貂比母貂發(fā)病率高。曾采取頭孢氨芐和恩諾沙星等治療措施，未見(jiàn)明顯效果。因誤診延誤了治療時(shí)間，逐漸發(fā)展到1d死亡70余只，經(jīng)過(guò)10余天的治療，至病情完全控制時(shí)，共計(jì)死亡水貂1000余只。

2 臨床特征

發(fā)病急促，有些水貂毫無(wú)癥狀，突然死亡。病貂體溫升高，食欲廢絕，精神高度沉郁，呼吸困難，腹式呼吸，有的呈犬坐式呼吸，并伴有異常的叫聲。有的咳血或鼻孔出血，大部分發(fā)病后1～3d死亡。

3 剖檢變化

病變主要集中于肺部，多呈彌漫性出血或充血，整個(gè)肺葉呈紅色肝樣實(shí)變，切開(kāi)有血樣液體流出，病變較輕部位常見(jiàn)灰白色小結(jié)節(jié)，嚴(yán)重呈大理石樣外觀(guān)，投入水中下沉；氣管內(nèi)有大量血樣泡沫；胸腺布滿(mǎn)大小不等的出血斑點(diǎn)；心肌弛緩，冠狀溝周?chē)谐鲅c(diǎn)；脾臟腫大2～3倍，呈桃紅色，有出血點(diǎn)。胃和小腸前段內(nèi)有血樣物；腎臟有針尖大出血點(diǎn)。

4 實(shí)驗(yàn)室診斷

4.1 細(xì)菌分離培養(yǎng) 無(wú)菌取病死水貂的肺臟、肝臟、脾臟等作為被檢病料。從被檢病料中分離細(xì)菌，劃線(xiàn)接種于普通瓊脂平板、綿羊血瓊脂平板，37℃恒溫培養(yǎng)24h后觀(guān)察。挑取典型菌落進(jìn)行純培養(yǎng)并對(duì)其進(jìn)行革蘭氏染色，顯微鏡下觀(guān)察細(xì)菌形態(tài)特征。

4.2 生化試驗(yàn) 挑取待檢菌株單菌落接種葡萄糖、蔗糖、乳糖、甘露醇等微量發(fā)酵管進(jìn)行生化項(xiàng)目測(cè)定。接種后的發(fā)酵管置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24h，統(tǒng)計(jì)生化試驗(yàn)結(jié)果。

4.3 動(dòng)物試驗(yàn) 選用8只健康小鼠做動(dòng)物試驗(yàn)，分為2組，每組4只。1組腹腔接種分離細(xì)菌24h的肉湯培養(yǎng)物，0.1ml/只。另1組腹腔接種滅菌生理鹽水作為陰性對(duì)照組，0.1ml/只。接種后，每天觀(guān)察小鼠的行為表現(xiàn)以及死亡情況。

4.4 藥敏試驗(yàn) 藥敏試驗(yàn)所選的藥物分別是阿卡米星、恩諾沙星、復(fù)方新諾明、強(qiáng)力霉素、四環(huán)素、環(huán)丙沙星、新霉素、多粘菌素B、慶大霉素、左氧氟沙星、磺胺二甲氧嘧啶、頭孢噻肟、替米考星。待檢的綠膿桿菌均勻的涂抹在普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板表面，然后再將藥敏片鋪于其上，37℃培養(yǎng)24h后測(cè)量各種抗菌藥物的抑菌環(huán)直徑。

5 結(jié)果

5.1 分離培養(yǎng)結(jié)果及細(xì)菌形態(tài)觀(guān)察 分離菌在普通瓊脂平板上均生長(zhǎng)良好，形成光滑、稍隆起或扁平、邊緣呈波狀的墨綠色中等大小菌落，整個(gè)培養(yǎng)基被染成綠色，且培養(yǎng)基有獨(dú)特的香味；在綿羊血瓊脂培養(yǎng)基上形成溶血環(huán)，灰色，不規(guī)則。革蘭氏染色后鏡檢可見(jiàn)數(shù)量不一的紅色、單個(gè)、成雙或呈短鏈狀排列的中等大小無(wú)芽孢桿菌。鏡檢為革蘭氏陰性小桿菌。

5.2 生化試驗(yàn) 分離菌能分解葡萄糖、伯膠糖、單奶糖、甘露醇產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；不分解麥芽糖、菊糖、棉籽糖、甘露醇、乳糖及蔗糖，能液化明膠；分解尿素，不形成吲哚，氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性，可利用枸櫞酸鹽；不產(chǎn)生H2S，MR試驗(yàn)和VP試驗(yàn)均為陰性。

5.3 動(dòng)物試驗(yàn) 將該分離菌培養(yǎng)物接種小白鼠后，小白鼠在24h內(nèi)全部死亡，伴隨精神沉郁、體溫升高等癥狀。用病死鼠的肺臟和肝臟涂片、鏡檢，可見(jiàn)大量革蘭氏陰性桿菌，經(jīng)鑒定為綠膿桿菌，而對(duì)照組小鼠全部正常。

5.4 藥敏試驗(yàn) 對(duì)該分離菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，抑菌圈的大小比對(duì)結(jié)果表明該菌對(duì)環(huán)丙沙星、新霉素、多粘菌素B、慶大霉素高度敏感；對(duì)強(qiáng)力霉素、頭孢噻肟、恩諾沙星中度敏感；對(duì)其他藥物不敏感。

6 治療

該病爆發(fā)后，5%的熱火堿水對(duì)全場(chǎng)進(jìn)行噴灑消毒，每天清洗水槽和食槽，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，提高貂群的抗病力。根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果選用高度敏感藥物環(huán)丙沙星全群飲水，同時(shí)配合用杜仲葉提取物、電解多維、膽汁酸等進(jìn)行輔助治療，2次/d。治療3d后，死亡現(xiàn)象得到控制，7d后貂群恢復(fù)正常。

7 討論

近年來(lái)，水貂出血性肺炎發(fā)生頻率逐年上升，已成為水貂養(yǎng)殖業(yè)的大病，給養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)巨大的損失。同時(shí)，水貂出血性肺炎臨床流行現(xiàn)狀也出現(xiàn)了新趨勢(shì)，發(fā)病區(qū)域由沿海地區(qū)向內(nèi)地蔓延；發(fā)病高峰期變長(zhǎng)，以往集中在8、9月份，現(xiàn)在6月初即有綠膿桿菌導(dǎo)致的出血性肺炎發(fā)生，7～10月都是該病發(fā)病高峰期。本病常爆發(fā)流行，死亡率較高。通過(guò)臨床癥狀、剖檢癥狀、細(xì)菌的分離培養(yǎng)、生化試驗(yàn)和動(dòng)物致病試驗(yàn)，證實(shí)此養(yǎng)殖場(chǎng)水貂發(fā)病是由綠膿桿菌感染所致。根據(jù)病因必須采取相應(yīng)的防治措施。（1）炎熱的夏季，水貂開(kāi)始換毛，生長(zhǎng)迅速，抵抗力降低，致使體內(nèi)的條件致病菌大量繁殖，自身抵抗力減弱，最終引起感染和死亡。因此夏季對(duì)水貂應(yīng)加強(qiáng)管理，做好通風(fēng)、降溫、防暑的工作；（2）水貂屬于肉食性動(dòng)物，食料主要以雜魚(yú)、雞架等動(dòng)物下腳料為主，來(lái)源復(fù)雜，質(zhì)量不易統(tǒng)一，容易腐敗變質(zhì)，由腐敗飼料引起的水貂發(fā)病情況已有報(bào)道[5]。因此，貂場(chǎng)飼喂新鮮飼料尤其重要。（3）綠膿桿菌引起的出血性肺炎發(fā)病急、死亡迅速，發(fā)現(xiàn)發(fā)病時(shí)往往來(lái)不及投藥治療，所以采取預(yù)防加治療的方式，可以有效減少發(fā)病概率和經(jīng)濟(jì)損失。由于在臨床生產(chǎn)中抗生素的不合理使用，綠膿桿菌已對(duì)大部分抗生素產(chǎn)生了耐藥性，故一旦發(fā)現(xiàn)疫情后，需充分利用臨床診斷和實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)，通過(guò)藥敏試驗(yàn)選擇合理的敏感抗生素進(jìn)行投喂，可有效控制病情，減少損失，配合中藥標(biāo)本兼治，有利于貂群早日恢復(fù)健康。

[1] 程悅寧, 易立, 司方方等. 我國(guó)毛皮動(dòng)物主要傳染病防控現(xiàn)狀及防控建議[J]. 經(jīng)濟(jì)動(dòng)物學(xué)報(bào), 2013, 17(1): 49-54.

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