及 華，李運(yùn)朝，溫之雨，劉怡菲，李秀芳，李洪濤

(1.河北省農(nóng)林科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全研究中心，河北 石家莊 050051； 2.河北省獸藥監(jiān)察所，河北 石家莊 050035； 3.河北興達(dá)飼料集團(tuán)有限公司，河北 邢臺(tái) 054000)

河北省玉米貯藏期黃曲霉毒素B1污染調(diào)查及安全性評(píng)價(jià)

及 華1，李運(yùn)朝1，溫之雨1，劉怡菲2，李秀芳3，李洪濤1

(1.河北省農(nóng)林科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全研究中心，河北 石家莊 050051； 2.河北省獸藥監(jiān)察所，河北 石家莊 050035； 3.河北興達(dá)飼料集團(tuán)有限公司，河北 邢臺(tái) 054000)

為了調(diào)查河北省玉米黃曲霉毒素的污染情況，并對(duì)玉米的安全性做出初步評(píng)價(jià)，從河北省不同玉米產(chǎn)地采集貯藏期的玉米樣品92個(gè)，采用ELISA酶聯(lián)免疫檢測技術(shù)對(duì)玉米樣品進(jìn)行黃曲霉毒素B1檢測并根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)。結(jié)果顯示，黃曲霉毒素B1檢出率為84.8%，根據(jù)食品和飼料中黃曲霉毒素B1的限量標(biāo)準(zhǔn)，符合食用標(biāo)準(zhǔn)的玉米占87.0%，符合飼用標(biāo)準(zhǔn)的占95.7%。冀中南生產(chǎn)區(qū)域玉米黃曲霉毒素B1污染普遍，但整體污染程度較低。對(duì)于黃曲霉毒素污染超標(biāo)玉米，應(yīng)加強(qiáng)其安全性跟蹤監(jiān)控工作。

玉米；黃曲霉毒素；污染；安全評(píng)價(jià)

黃曲霉毒素(aflatoxin，AF)主要是由黃曲霉、寄生曲霉等所產(chǎn)生的一族結(jié)構(gòu)相似的有毒代謝產(chǎn)物，廣泛污染糧食、食品和飼料[1]。玉米是污染較嚴(yán)重的作物之一，對(duì)農(nóng)業(yè)和畜牧業(yè)造成了嚴(yán)重危害和損失，糧食、飼料的不安全，肉、蛋、奶的不安全，給動(dòng)物和人類健康造成極大危害[2]。至今已分離出的黃曲霉毒素及其衍生物有20多種，在天然食物中以黃曲霉毒素B1最為多見，是目前發(fā)現(xiàn)的毒性最強(qiáng)的霉菌毒素。1993年，黃曲霉毒素B1被世界衛(wèi)生組織(WHO)列為Ⅰ類致癌物[3]。據(jù)聯(lián)合國糧農(nóng)組織(FAO)2002年資料，世界上約有25%的谷物不同程度地受到霉菌毒素的污染，直接經(jīng)濟(jì)損失可達(dá)數(shù)千億美元。因此，黃曲霉毒素污染已成為糧食工業(yè)、飼料工業(yè)、畜牧業(yè)中不可忽視的問題。

《中國科技日?qǐng)?bào)》2014-05-23發(fā)表了題為《真菌毒素防控刻不容緩》的專題文章，指出相比于公眾關(guān)注的農(nóng)藥殘留超標(biāo)、有害添加劑污染等，真菌毒素對(duì)食品安全的威脅要大得多。專家呼吁，把真菌毒素防控當(dāng)作食品安全監(jiān)管的重中之重，已經(jīng)刻不容緩。食品法典委員會(huì)提出了某些食品中黃曲霉毒素的限量標(biāo)準(zhǔn)，許多國家或地區(qū)都制定了限量標(biāo)準(zhǔn)，我國也制定了食品和飼料中黃曲霉毒素的限量標(biāo)準(zhǔn)[4-5]。

河北省是玉米生產(chǎn)大省，在我國食物供給和畜牧業(yè)中具有舉足輕重的地位。玉米作為河北省的主要農(nóng)作物，占全省糧食總產(chǎn)量的50%以上，種植規(guī)模居全國第二位[6]。為了明確河北省玉米黃曲霉毒素的污染狀況，2015～2016年我們收集了河北省玉米不同產(chǎn)區(qū)貯藏期的玉米樣品92份，進(jìn)行了黃曲霉毒素B1含量檢測，并依據(jù)國家食品和飼料中限量標(biāo)準(zhǔn)對(duì)檢測結(jié)果做進(jìn)一步安全性分析，旨在為河北省玉米的安全生產(chǎn)提供科學(xué)依據(jù)，同時(shí)初步評(píng)估玉米的安全現(xiàn)狀。

1 材料與方法

1.1 樣品采集及處理

從河北省玉米主要產(chǎn)區(qū)邯鄲、邢臺(tái)、石家莊、滄州、衡水、保定、唐山等市區(qū)縣采集貯藏期的不同品種、不同級(jí)別、不同栽培措施的玉米樣品92份作為檢測和評(píng)估的材料。按照河北省玉米種植劃分區(qū)域，樣品詳細(xì)來源情況和數(shù)量分布見表1。

表1 玉米樣品來源、品種及數(shù)量分布

樣品采集采用混合四分法。實(shí)驗(yàn)室烘干后粉碎、過80目篩，低溫保存待測。

1.2 檢測方法

樣品中黃曲霉毒素B1的檢測采用ELISA酶聯(lián)免疫法。本實(shí)驗(yàn)選用北京華安麥科生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的ELISA試劑盒。

ELISA試劑盒采用固相直接競爭性酶聯(lián)免疫原理，在包被有毒素抗體的微孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品或經(jīng)提取溶液處理過的樣品以及酶標(biāo)物，標(biāo)準(zhǔn)品或樣品中的毒素與毒素偶聯(lián)物競爭抗體，洗去未結(jié)合的酶標(biāo)記物，TMB底物顯色，加入終止液后用酶標(biāo)儀在450 nm波長下進(jìn)行檢測。樣品檢測同時(shí)做質(zhì)控對(duì)比試驗(yàn)，標(biāo)準(zhǔn)樣品回收率在82.4%～103.6%。

1.3 采用的限量標(biāo)準(zhǔn)

農(nóng)業(yè)部行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《綠色食品 玉米及玉米粉》(NY/T 418—2014)規(guī)定玉米中黃曲霉毒素B1限含量≤10 μg/kg；國家標(biāo)準(zhǔn)《糧食衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》(GB 2715—2005)及《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中真菌毒素限量》(GB 2761—2011)規(guī)定玉米中黃曲霉毒素B1限含量≤20 μg/kg；國標(biāo)《飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》(GB 13078-2001)規(guī)定飼用玉米黃曲霉毒素B1限含量≤50 μg/kg。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用EXCEL和DPS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 玉米樣品中黃曲霉毒素B1檢測結(jié)果

送檢玉米樣品黃曲霉毒素B1檢測結(jié)果見表2。抽檢92份玉米樣品中有78份樣品檢出黃曲霉毒素B1，其檢出率達(dá)84.8%，最大含量61.5 μg/kg，平均含量8.96 μg/kg?？梢?，河北省貯藏期玉米受黃曲霉毒素污染普遍，應(yīng)引起廣泛重視。

表2 河北省玉米黃曲霉毒素B1檢測結(jié)果

注：表中同一欄不同字母表示差異顯著(P<0.05)。

2.2 不同生產(chǎn)區(qū)域玉米樣品中黃曲霉毒素B1污染狀況

由表2可知，河北省玉米不同種植區(qū)域樣品中黃曲霉毒素B1污染狀況存在顯著差異。

冀中南平原區(qū)樣品中黃曲霉毒素B1的檢出率、最大值和平均值明顯高于冀東、冀西北和冀東北區(qū)域;冀中南低平原區(qū)包括邯鄲、滄州、衡水和邢臺(tái)的東部縣市,玉米受黃曲霉毒素B1的污染率達(dá)100%，檢出最大值61.5 μg/kg，平均值13.4 μg/kg，是河北省玉米污染最嚴(yán)重的區(qū)域；山前平原區(qū)包括石家莊、保定、邢臺(tái)西部和廊坊西南部分縣市,黃曲霉毒素B1的污染率為88.9%，檢出最大值51.6 μg/kg，平均值9.6 μg/kg，屬于河北省污染較嚴(yán)重的區(qū)域；冀西北、東北區(qū)包括張家口、承德和秦皇島地區(qū),玉米中黃曲霉毒素B1的檢出率為57.1%，最大值3.9 μg/kg，平均值1.57 μg/kg，屬于河北省污染程度最輕的區(qū)域?？梢?，在河北省內(nèi)由北向南玉米黃曲霉毒素B1污染程度逐漸增加。

2.3 玉米安全性評(píng)價(jià)

按照農(nóng)業(yè)部《綠色食品玉米及玉米粉》(NY/T 418—2014)對(duì)玉米黃曲霉毒素B1的限量標(biāo)準(zhǔn)(≤10 μg/kg)，此次抽樣檢測樣品達(dá)到綠色食品標(biāo)準(zhǔn)的占76.1%(表3)；根據(jù)《糧食衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》(GB 2715—2005)和《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中真菌毒素限量》(GB 2761—2011)，玉米中黃曲霉毒素B1含量應(yīng)≤20 μg/kg。

由表3 可知，此次抽檢樣品符合食用標(biāo)準(zhǔn)、可以用作食品原料的玉米占87.0%，超標(biāo)率為13.0%；而符合《飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》(GB 13078—2001)規(guī)定玉米黃曲霉毒素B1含量≤50 μg/kg、可以用作飼料原料的玉米樣品占95.7%，超標(biāo)率為4.3%。

從不同區(qū)域玉米黃曲霉毒素B1檢測結(jié)果分析，黃曲霉毒素B1超標(biāo)的玉米全部集中在冀中南生產(chǎn)區(qū)域(見表2)，食用超標(biāo)率在16.7%～18.8%，飼用超標(biāo)率在5.6%～6.25%，而冀東、冀西北和冀東北生產(chǎn)區(qū)玉米沒有出現(xiàn)超標(biāo)現(xiàn)象，可以確保其安全性。由此可見，河北省玉米受黃曲霉毒素B1污染的安全性總體較好，未對(duì)食用和飼用玉米的質(zhì)量安全構(gòu)成大的潛在風(fēng)險(xiǎn)。

表3 河北省玉米黃曲霉毒素B1濃度分布

3 結(jié)論與討論

此次抽檢的玉米樣品來自河北省不同區(qū)域的代表性產(chǎn)地，是不同村鎮(zhèn)、貯藏庫、加工廠和飼料廠的混合樣品，具有一定的代表性。檢測結(jié)果顯示，河北省貯藏期玉米黃曲霉毒素B1檢出率較高(84.8%)，受黃曲霉毒素B1污染非常普遍(表2)，冀中南區(qū)域污染率(88.9%～100%)明顯高于冀東、冀西北和冀東北區(qū)域(57.1%～60.0%)。

分析原因可能主要是氣候因素造成的，冀西北、東北區(qū)域溫度偏低，年平均溫度7.3℃，降雨量437 mm，空氣濕度53%，而冀中南地區(qū)溫度偏高，年平均溫度13℃，降雨量487 mm，空氣濕度63%，受寄生曲霉和黃曲霉菌等侵染嚴(yán)重。其次，收獲儲(chǔ)存措施不當(dāng)也是真菌毒素積累的主要原因，如雨天采收、籽粒水分偏高、儲(chǔ)存條件差等也加速了黃曲霉毒素的產(chǎn)生[7]。另外，種植方式、管理技術(shù)、品種抗性等因素也可能成為霉菌潛伏浸染導(dǎo)致毒素積累的原因。

盡管河北省玉米黃曲霉毒素B1污染普遍，但整體污染程度較低。抽檢樣品中黃曲霉毒素B1含量平均值為8.96 μg/kg，但不乏超出國標(biāo)限量的毒素樣本存在，且超標(biāo)樣品全部集中在冀中南生產(chǎn)區(qū)域。對(duì)于毒素超標(biāo)的玉米須嚴(yán)格控制其流通渠道，嚴(yán)禁流入食品市場，加強(qiáng)安全性跟蹤監(jiān)控工作?？梢越?jīng)過減毒、去毒處理使黃曲霉毒素的含量低于飼用、食用限量指標(biāo)[8]，以保證玉米產(chǎn)品和動(dòng)物源食品的安全，保障人體健康。

[1] 侯真真,馮志強(qiáng),林 丹. 糧食及飼料中黃曲霉毒素的檢測方法研究進(jìn)展[J]. 糧食與飼料工業(yè), 2016(5):62-64.

[2] 陳心儀. 2009～2010 年中國部分省市飼料原料及配合飼料的霉菌毒素污染概況[J]. 浙江畜牧獸醫(yī), 2011(2):7-10.

[3] 余 丹，鄒成義. 黃曲霉毒素對(duì)蛋品質(zhì)影響及機(jī)理研究[J]. 飼料工業(yè)，2009(4):59-60.

[4] 衛(wèi)生部．食品中真菌毒素限量：GB 2761—2005 [S]．北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2005．

[5] 衛(wèi)生部.飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)：GB 13078—2001 [S]．北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2001．

[6] 于翠紅，高增玉. 河北省玉米生產(chǎn)現(xiàn)狀及主推品種分析[J]. 河北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，16(2): 22-27.

[7] 吳瑞閣，李豐玉，張克玲. 新收獲玉米黃曲霉毒素B1抽樣檢驗(yàn)及安全性評(píng)估[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42(29):10 306-10 336.

[8] 岳清華，趙仁勇，侯 賽，等. 幾種降解玉米中黃曲霉毒素方法的比較[J]. 糧食與飼料工業(yè), 2015(6):15-19.

(責(zé)任編輯：趙琳琳)

Aflatoxin B1contamination detection and safety evaluation for corn at storage period in Hebei province

JI Hua1, LI Yun-chao1, WEN Zhi-yu1,LIU Yi-fei2, LI Xiu-fang3,LI Hong-tao1

(1.Research Center for Agricultural Products Quality and Safety, Hebei Academy of Agricultural and Forestry Sciences, Shijiazhuang 050051,China; 2.Hebei Province Institute of Veterinary Drug control, Shijiazhuang 050053,China; 3.Hebei Xingda Feed Group Co., Ltd., Xingtai 054000,China)

In order to identify the aflatoxins contamination situation of corn in Hebei province and evaluate the safety,aflatoxin B1of 92 corn samples collected at storage period from different regions in Hebei province were determined by ELISA．And safety valuation was given based on national food and feed standards．The results showed that aflatoxin B1detection rate was 84.8% of 92 corn samples．87.0% of corn was safety for food and 95.7% was safety for feed．In the central and southern regions of Hebei province, the contamination of aflatoxins B1was widespread, but the overall contamination level was low. The safety monitoring and control should be strengthened for the corn with excessive aflatoxin contamination.

corn; aflatoxin; contamination; safety evaluation

2016-11-09；

2017-01-19

河北省財(cái)政專項(xiàng)(A2015110201)基金。

及 華(1968-)，女，碩士，研究員，主要研究方向農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全。

10.7633/j.issn.1003-6202.2017.03.006

TS201.3;TS201.6;S513

A

1003-6202(2017)03-0019-03