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        血清VEGF-C及VEGF-D對(duì)T3期大腸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移作用的研究

        2017-03-31 09:13:50肖大雷張紹鵬王大廣
        關(guān)鍵詞:血清研究

        肖大雷,張紹鵬,王大廣, 所 劍

        (吉林大學(xué)第一醫(yī)院 胃腸外科,吉林 長(zhǎng)春130021)

        *通訊作者

        血清VEGF-C及VEGF-D對(duì)T3期大腸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移作用的研究

        肖大雷,張紹鵬,王大廣, 所 劍*

        (吉林大學(xué)第一醫(yī)院 胃腸外科,吉林 長(zhǎng)春130021)

        結(jié)直腸癌(colorectal cancer)是世界第3大惡性腫瘤,在醫(yī)學(xué)技術(shù)不斷進(jìn)步的今天,盡管全球發(fā)病率有下降趨勢(shì),但其在我國(guó)癌譜中的位置卻不斷攀升[1]。國(guó)內(nèi)外研究均表明大腸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是影響患者5年生存率的最重要因素,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目越多,預(yù)后越差。VEGF-C和VEGF-D是近年來人們發(fā)現(xiàn)的有利于淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞再生的兩種血管生長(zhǎng)因子[2,3],VEGF-C、D與VEGFR-3結(jié)合,促進(jìn)淋巴內(nèi)皮細(xì)胞增生,是淋巴管再生的獨(dú)立影響因子[2,4,5]。多項(xiàng)研究表明大腸癌癌組織中VEGF-C和VEGF-D水平與腫瘤侵潤(rùn)程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),但有關(guān)血中VEGF-C、D水平與大腸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的研究較少,因此設(shè)計(jì)本實(shí)驗(yàn)研究血清VEGF-C及VEGF-D對(duì)T3期大腸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移作用。

        1 對(duì)象與方法

        1.1 研究對(duì)象

        選取吉林大學(xué)第一醫(yī)院胃腸外科術(shù)前明確診斷為大腸癌,無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,術(shù)后病理為T3期大腸癌患者50例,男性29例,女性21例,T3N0期29例,T3N1期13例,T3N2期8例,所有病例均無(wú)糖尿病、糖耐量異常病史,術(shù)前行常規(guī)血生化檢查、心臟彩超、X線等檢查均無(wú)異常,術(shù)前均未作放療和化療。

        1.2 方法

        術(shù)前清晨空腹采靜脈血2 ml,注入抗凝管內(nèi),3 500 r/min,離心5 min。取血清于無(wú)菌管中,置入-80℃冰箱保存。人VEGF-C、D試劑盒購(gòu)自上海源葉生物有限公司;Synergy H1型酶標(biāo)儀。采用雙夾心ELISA法分別測(cè)樣本中VEGF-C、D含量,嚴(yán)格按照試劑盒操作說明進(jìn)行,用酶標(biāo)儀在主波450 nm,輔波540 nm處讀取OD值(15 min內(nèi))。測(cè)定值按標(biāo)準(zhǔn)曲線換算成VEGF-C、D含量。

        1.3 統(tǒng)計(jì)方法

        2 結(jié)果

        T3期大腸癌患者有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者的血清VEGF-C水平明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者,分別為402.867±214.05 pg/ml和176.487±129.25 pg/ml,P<0.001,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者的血清VEGF-D水平明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者,分別為526.997±288.92 pg/ml和213.973±104.12 pg/ml,P<0.001,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(表1、圖1)。

        表1 血清中VEGF-C、D與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間關(guān)系(x—±s)

        圖1 有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組血清中VEGF-C和VEGF-D濃度平均變化情況(±SE)

        T3期大腸癌患者血清中VEGF-C和VEGF-D水平均和患者年齡、性別、腫瘤分化程度、腫瘤部位等無(wú)關(guān),P>0.05;在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者中淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目的多少與血清VEGF-C、D水平無(wú)明顯相關(guān),P>0.05(表2)。

        表2 血清中VEGF-C、D與臨床病理特征之間關(guān)系(x—±s)

        3 討論

        VEGF-C和VEGF-D是VEGF家族中的兩種促進(jìn)淋巴管再生的因子,人的 VEGF-C 基因位于染色體 4q34 上,含 7 個(gè)外顯子,編碼一種含 419個(gè)氨基酸殘基的蛋白,分子量約 46.9 kD[6],VEGF-D基因位于染色體xp22.34上,長(zhǎng)度為50 kb[7],VEGF-C和VEGF-D的受體都有兩種,分別為VEGFR-2 和VEGFR-3,其與VEGFR-2結(jié)合能促進(jìn)血管內(nèi)皮再生,與VEGFR-3結(jié)合能促進(jìn)淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞再生,與腫瘤通過血行和淋巴途徑轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。研究表明,腫瘤細(xì)胞可分泌VEGF-C和VEGF-D,通過旁分泌和自分泌方式作用于周邊血管、淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞,促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞和淋巴內(nèi)皮細(xì)胞再生,形成新的血管和淋巴管[8,9],新生的血管內(nèi)皮細(xì)胞間隙較大,可能是VEGF-C、D等因子進(jìn)入血液循環(huán)的途徑。

        查閱相關(guān)文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn),有關(guān)血清中VEGF-C、D水平與大腸癌淋巴轉(zhuǎn)移的研究較少,且研究結(jié)果各異,Alabi AA[10]用Elisa法對(duì)120名大腸癌患者血清VEGF-C含量進(jìn)行測(cè)定,有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者血清中VEGF-C含量平均值為91 pg/ml,無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者血清中VEGF-C含量平均值為124 pg/ml,P=0.81,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,且VEGF-C含量與患者性別、年齡、腫瘤位置、Dukes分期無(wú)關(guān)。但Xu 等[11]的研究顯示較高濃度的血清VEGF-C大腸癌患者與腫瘤淋巴轉(zhuǎn)移有相關(guān)性,本研究顯示,有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移大腸癌患者的血清VEGF-C水平明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者,分別為402.867±214.05 pg/ml和176.487±129.25 pg/ml,P<0.001,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,這與Xu等的研究相符,血清中VEGF-C含量與患者性別、年齡、腫瘤位置無(wú)關(guān)。Duff[12]等利用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)測(cè)量120例結(jié)直腸癌患者血漿中VEGF-D濃度,有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組VEGF-D的平均值為335 pg/ml,無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組平均值為316.5 pg/ml,其差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,認(rèn)為術(shù)前VEGF-D水平不能評(píng)估患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)。但本研究顯示,T3期有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者大腸癌患者的血清VEGF-D水平明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者,分別為526.997±288.92 pg/ml和213.973±104.12 pg/ml,P<0.001,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。這與Duff等的研究有差異。Alabi AA[10]等研究還顯示,血清中VEGF-C與大腸癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān),但考慮到其他VEGF家族因子如VEGF-A、B、E等可促進(jìn)血管再生,可能對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有影響,因此本實(shí)驗(yàn)將有轉(zhuǎn)移的大腸癌剔除,主要關(guān)注血清中VEGF-C、D對(duì)大腸癌淋巴轉(zhuǎn)移的作用。

        總之,通過結(jié)合本研究及過往研究,我們認(rèn)為,血清中VEGF-C、D水平與T3期大腸癌淋巴轉(zhuǎn)移相關(guān),Xu 等[11]研究顯示,當(dāng)血清中VEGF-C達(dá)到臨界值1438.0 pg/ml時(shí),其對(duì)腫瘤淋巴轉(zhuǎn)移預(yù)測(cè)的靈敏度為81%,準(zhǔn)確度為76%,但想通過血清中VEGF-C、D含量準(zhǔn)確判斷大腸癌淋巴轉(zhuǎn)移狀態(tài)還有待進(jìn)一步進(jìn)行大樣本實(shí)驗(yàn)研究。

        [1]赫 捷,趙 平,陳萬(wàn)青.中國(guó)腫瘤登記年報(bào)[M].北京:軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)出版社,2011:10.

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        [5]Karkkainen MJ,Haiko P,Sainio K,et al.Vascular endothelial growth factor C is required for sprouting of the first lym-phatic vessels from embryonic veins[J].Nat Immu-nol,2004,5(1):74.

        [6]Karkkainen MJ,Haiko P,Sainio K,et al.Vascular endothelial growth factor C is required for sprouting of the first lymphatic vessels from embryonic veins[J].Nat Immunol,2004,5(1):74.

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        1007-4287(2017)03-0481-03

        2016-08-22)

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