李碧瓊，陳政明，林俊揚(yáng)，盧翠香，邱春錦，鄭永德

（福建省莆田市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，福建 甫田 351144）

秀珍菇S3-45菌株生物學(xué)特性研究*

李碧瓊，陳政明，林俊揚(yáng)，盧翠香，邱春錦，鄭永德

（福建省莆田市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，福建 甫田 351144）

通過(guò)試驗(yàn)對(duì)不同碳源、氮源、溫度、pH對(duì)秀珍菇S3-45菌絲生長(zhǎng)的影響進(jìn)行比較，并對(duì)其子實(shí)體生長(zhǎng)的最適溫度進(jìn)行研究。結(jié)果表明，以麥芽糖為碳源、酵母粉為氮源的組合，秀珍菇S3-45菌絲生長(zhǎng)速度最快，長(zhǎng)勢(shì)最好；秀珍菇S3-45菌絲生長(zhǎng)最適溫度為24℃～26℃，最適pH為6.00；子實(shí)體生長(zhǎng)最適溫度為15℃～22℃。

秀珍菇S3-45菌株；生物學(xué)特性；碳源；氮源；溫度；pH

秀珍菇（Pleurotus geesteranus），又名小平菇、環(huán)柄側(cè)耳、環(huán)柄斗菇、黃白側(cè)耳、姬平菇和袖珍菇，隸屬于真菌門（Eumycophyta）擔(dān)子菌綱 (Basidiomycotina)傘菌目 (Agaricales)側(cè)耳科 (Pleurotaceae)側(cè)耳屬 (Pleurotus)[1-3]。秀珍菇適宜生長(zhǎng)的基質(zhì)廣泛[4]，是近幾年發(fā)展的食用菌新品種，它不僅營(yíng)養(yǎng)豐富，而且味道鮮美，質(zhì)地細(xì)嫩，纖維含量少，深受餐飲業(yè)青睞，已被廣大消費(fèi)者接受[5]，市場(chǎng)前景廣闊。由于不同秀珍菇品種產(chǎn)量和生物學(xué)性狀差異較大，而秀珍菇S3-45為莆田市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所新選育出的秀珍菇優(yōu)良菌株，筆者為了進(jìn)一步明確并掌握其生物學(xué)特性，而進(jìn)行本試驗(yàn)研究。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

莆田市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所新選育出的秀珍菇S3-45優(yōu)良菌株。

1.2 培養(yǎng)基配方

PDA培養(yǎng)基：馬鈴薯20 g、瓊脂2 g、葡萄糖2 g，蒸餾水100 mL；基礎(chǔ)培養(yǎng)基：蛋白胨1 g、葡萄糖2 g、MgSO4·7H2O 0.05 g、KH2PO40.1 g、VB10.1片、瓊脂2 g，蒸餾水100 mL；栽培培養(yǎng)基：棉籽殼40%、木屑40%、麩皮16%、石灰2%、輕質(zhì)碳酸鈣2%，含水量65%。

1.3 菌絲生長(zhǎng)速度試驗(yàn)方法

本試驗(yàn)中不同碳源、氮源、溫度、pH對(duì)秀珍菇S3-45菌絲生長(zhǎng)的影響，都是采用PDA平板，先將秀珍菇S3-45菌種在25℃條件下連續(xù)培養(yǎng)16 d，使其形成可供試驗(yàn)的菌落，再用無(wú)菌打孔器取直徑5 mm的菌落塊，接種在裝有相應(yīng)培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿平板中央進(jìn)行平板試驗(yàn)，當(dāng)菌絲在平板培養(yǎng)基上表現(xiàn)出良好的生長(zhǎng)勢(shì)時(shí)，每隔2 d用游標(biāo)卡尺進(jìn)行十字交叉法測(cè)量菌落直徑1次，每個(gè)平板測(cè)定3次，每個(gè)處理5個(gè)重復(fù)，計(jì)算平板中菌落半徑平均每天延伸長(zhǎng)度作為菌絲生長(zhǎng)速度并進(jìn)行方差分析，同時(shí)觀察菌落形態(tài)和菌絲長(zhǎng)勢(shì)。

1.4 菌絲生長(zhǎng)培養(yǎng)基碳源、氮源、溫度、pH試驗(yàn)

1.4.1 碳源試驗(yàn)

分別用可溶性淀粉、蔗糖、果糖、麥芽糖和半乳糖代替基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的葡萄糖，采用直徑5 mm打孔器進(jìn)行定量接種，并在溫度25℃恒溫培養(yǎng)，分析不同碳源對(duì)秀珍菇S3-45菌株菌絲生長(zhǎng)的影響。

1.4.2 氮源試驗(yàn)

分別用牛肉膏、酵母粉、KNO3、 (NH4)2SO4和尿素代替基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的蛋白胨，采用直徑5 mm打孔器進(jìn)行定量接種，在溫度25℃恒溫培養(yǎng)，分析不同氮源對(duì)秀珍菇S3-45菌株菌絲生長(zhǎng)的影響。

1.4.3 碳源和氮源組合試驗(yàn)

根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果，分別選取最佳碳源和最佳氮源各2個(gè)進(jìn)行組合，采用直徑5 mm打孔器進(jìn)行定量接種，并在溫度25℃恒溫培養(yǎng)，比較不同碳源、氮源組合對(duì)秀珍菇S3-45菌株菌絲生長(zhǎng)的影響。

1.4.4 菌絲生長(zhǎng)最適溫度試驗(yàn)

選取15℃、20℃、25℃、30℃和35℃共5個(gè)溫度梯度，采用直徑5 mm打孔器定量接種，觀察不同溫度對(duì)秀珍菇S3-45菌株菌絲在PDA培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的影響，優(yōu)化溫度梯度后，根據(jù)菌絲生長(zhǎng)速度和生長(zhǎng)勢(shì)確定秀珍菇S3-45菌株菌絲最適生長(zhǎng)溫度。

1.4.5 最適pH試驗(yàn)

采用1.0 mol·L-1HCl和1.0 mol·L-1NaOH分別調(diào)節(jié)PDA培養(yǎng)基的pH至4.00、5.00、6.00、7.00和8.00，共5個(gè)梯度，采用直徑5mm打孔器定量接種，在25℃條件下恒溫培養(yǎng)，觀察比較不同pH下秀珍菇S3-45菌株菌絲生長(zhǎng)狀況，然后進(jìn)一步優(yōu)化pH梯度，確定秀珍菇S3-45菌株菌絲生長(zhǎng)最適pH。

1.4.6 子實(shí)體生長(zhǎng)最適溫度試驗(yàn)

按栽培培養(yǎng)基配方比例分別稱取各原料，其中棉籽殼和木屑應(yīng)提前預(yù)濕，再混合拌勻，含水量控制在65%，采用17 cm×33 cm×0.05 cm聚丙烯折角塑料袋進(jìn)行裝料并高壓滅菌，冷卻后接種。當(dāng)菌絲滿袋后移入可調(diào)控溫度的生化培養(yǎng)箱進(jìn)行出菇比較試驗(yàn)，本試驗(yàn)設(shè)10℃、15℃、20℃、25℃、30℃和35℃共6個(gè)溫度梯度，觀察比較不同溫度對(duì)子實(shí)體原基形成和生長(zhǎng)的影響。優(yōu)化溫度梯度后，根據(jù)子實(shí)體原基形成和生長(zhǎng)情況確定秀珍菇S3-45菌株子實(shí)體生長(zhǎng)最適溫度。每個(gè)處理觀測(cè)15袋。

2 結(jié)果與分析

2.1 碳源對(duì)秀珍菇S3-45菌株菌絲生長(zhǎng)的影響

不同碳源對(duì)秀珍菇S3-45菌株菌絲生長(zhǎng)速度和長(zhǎng)勢(shì)的影響見(jiàn)表1。

表1 不同碳源對(duì)秀珍菇S3-45菌絲生長(zhǎng)速度及長(zhǎng)勢(shì)的影響Tab.1 Effect of different kinds of carbon sources on the mycelial growth rate and growth vigor of Pleurotus geesteranus strain S3-45

由表1可知，不同碳源對(duì)秀珍菇S3-45菌株菌絲生長(zhǎng)的影響不同，以麥芽糖、可溶性淀粉為碳源時(shí)，菌絲生長(zhǎng)速度最快，分別為0.45 cm·d-1和0.42 cm·d-1，長(zhǎng)勢(shì)最好；以半乳糖和果糖為碳源時(shí)，菌絲生長(zhǎng)速度較快，但長(zhǎng)勢(shì)弱；以葡萄糖為碳源時(shí)，菌絲生長(zhǎng)速度較快，為0.35 cm·d-1，長(zhǎng)勢(shì)一般；以蔗糖為碳源時(shí)，菌絲生長(zhǎng)速度最慢，僅為0.25 cm·d-1。因此，麥芽糖和可溶性淀粉是秀珍菇S3-45菌株菌絲生長(zhǎng)的最佳碳源，蔗糖不適宜作為秀珍菇S3-45菌株菌絲生長(zhǎng)的碳源。

2.2 氮源對(duì)秀珍菇S3-45菌株菌絲生長(zhǎng)的影響

不同氮源對(duì)秀珍菇S3-45菌株菌絲生長(zhǎng)速度和長(zhǎng)勢(shì)的影響見(jiàn)表2。

表2 不同氮源對(duì)秀珍菇S3-45菌株菌絲生長(zhǎng)速度和長(zhǎng)勢(shì)的影響Tab.2 Effect of different kinds of nitrogen sources on the mycelial growth rate and growth vigorof Pleurotus geesteranus strain S3-45

由表2可知，不同氮源對(duì)秀珍菇S3-45菌株菌絲生長(zhǎng)的影響不同，以酵母粉、牛肉膏和蛋白胨等有機(jī)氮為氮源時(shí)，菌絲生長(zhǎng)速度快，長(zhǎng)勢(shì)好；尤其是以酵母粉和牛肉膏為氮源時(shí)，菌絲生長(zhǎng)速度快，分別為0.48 cm·d-1和0.45 cm·d-1，但以蛋白胨為氮源時(shí)，菌絲生長(zhǎng)速度稍慢，為 0.43 cm·d-1；以KNO3、 (NH4)2SO4和尿素等無(wú)機(jī)氮為氮源時(shí)，菌絲生長(zhǎng)速度慢，長(zhǎng)勢(shì)差，特別是以尿素作為氮源時(shí)，菌絲不萌發(fā)。因此，在本試驗(yàn)中秀珍菇S3-45菌株菌絲生長(zhǎng)最適氮源為酵母粉和牛肉膏，尿素不適宜作為秀珍菇S3-45菌株菌絲生長(zhǎng)的氮源。

2.3 碳源、氮源對(duì)秀珍菇S3-45菌株菌絲生長(zhǎng)的協(xié)同影響

選取單因子試驗(yàn)最佳碳源和最佳氮源各2個(gè)進(jìn)行兩兩組合，并以基礎(chǔ)培養(yǎng)基為對(duì)照，共5個(gè)處理，采用直徑0.5 cm打孔器定量接種，在25℃條件下培養(yǎng)，測(cè)試不同組合對(duì)秀珍菇S3-45菌株菌絲生長(zhǎng)的影響，見(jiàn)表3。

表3結(jié)果表明，秀珍菇S3-45菌株菌絲在本試驗(yàn)中的5個(gè)碳源、氮源組合均可生長(zhǎng)，但以麥芽糖為碳源，酵母粉為氮源時(shí)，菌絲生長(zhǎng)速度最快，為0.88 cm·d-1，長(zhǎng)勢(shì)最好，可見(jiàn)，麥芽糖和酵母粉是秀珍菇S3-45菌株菌絲生長(zhǎng)的最佳碳源、氮源組合。

2.4 溫度對(duì)秀珍菇S3-45菌株菌絲生長(zhǎng)的影響

不同溫度對(duì)秀珍菇S3-45菌株菌絲生長(zhǎng)的影響試驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表4。

由表4可知，在PDA培養(yǎng)基中，秀珍菇S3-45菌絲在溫度15℃～30℃均可生長(zhǎng)，經(jīng)優(yōu)化溫度梯度試驗(yàn)后，結(jié)果表明，當(dāng)溫度為20℃～27℃，菌絲生長(zhǎng)速度快，長(zhǎng)勢(shì)好，尤其是當(dāng)溫度為24℃～26℃時(shí)，菌絲生長(zhǎng)速度最快，長(zhǎng)勢(shì)最好。當(dāng)溫度為27℃時(shí)，秀珍菇S3-45菌絲日平均生長(zhǎng)速度為0.72 cm·d-1，生長(zhǎng)速度最快，但菌絲生長(zhǎng)勢(shì)不如25℃時(shí)健壯。通過(guò)本試驗(yàn)觀察得知，當(dāng)溫度低于20℃時(shí)，秀珍菇S3-45菌絲生長(zhǎng)緩慢；15℃時(shí)，菌絲長(zhǎng)勢(shì)極弱，呈氣生狀，生長(zhǎng)極其緩慢；25℃以上時(shí)，菌絲生長(zhǎng)明顯加快；30℃時(shí)，菌絲生長(zhǎng)受到抑制；35℃時(shí)，菌絲生長(zhǎng)停滯，并漸漸死亡。由本試驗(yàn)可得，秀珍菇S3-45菌絲生長(zhǎng)適宜當(dāng)溫度為20℃～27℃，最適溫度為24℃～ 26℃。

表3 在不同碳氮源培養(yǎng)基中菌絲生長(zhǎng)速度和長(zhǎng)勢(shì)Tab.3 Growth rate and growth vigor of mycelial in the media with different carbon and nitrogen sources

表4 不同溫度對(duì)秀珍菇S3-45菌絲生長(zhǎng)速度和長(zhǎng)勢(shì)的影響Tab.4 Effect of different temperatures on the mycelial growth rate and growth vigor of Pleurotus geesteranus strain S3-45

2.5 pH對(duì)秀珍菇S3-45菌株菌絲生長(zhǎng)的影響

通過(guò)對(duì)培養(yǎng)基pH的調(diào)節(jié)，觀察秀珍菇S3-45菌株在不同培養(yǎng)基pH下菌絲生長(zhǎng)情況，見(jiàn)表5。

由表5可知，秀珍菇S3-45菌株菌絲在培養(yǎng)基pH為4.00～8.00范圍內(nèi)均可生長(zhǎng)，在中性偏酸環(huán)境中生長(zhǎng)較好。經(jīng)優(yōu)化pH梯度試驗(yàn)后，結(jié)果表明，當(dāng)培養(yǎng)基pH為5.75～6.50時(shí)，秀珍菇S3-45菌株菌絲生長(zhǎng)速度快，長(zhǎng)勢(shì)好，尤其是pH為6.00時(shí)，菌絲生長(zhǎng)速度最快，為0.69 cm·d-1，長(zhǎng)勢(shì)最好。所以秀珍菇S3-45菌株菌絲生長(zhǎng)最適pH為6.00。

表5 不同pH對(duì)秀珍菇S3-45菌絲生長(zhǎng)速度和長(zhǎng)勢(shì)的影響Tab.5 Effect of different pH on the mycelial growth rate and growth vigor of Pleurotus geesteranus strain S3-45

2.6 溫度對(duì)秀珍菇S3-45菌株子實(shí)體生長(zhǎng)的影響

通過(guò)不同溫度下秀珍菇S3-45菌株栽培出菇情況的觀察比較試驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表6。

表6 不同溫度下秀珍菇S3-45菌株子實(shí)體生長(zhǎng)情況比較Tab.6 Comparison of the fruitbody growth status of Pleurotus geesteranus strain S3-45 with different temperatures

由表6可知，秀珍菇S3-45菌株子實(shí)體形成溫度為10℃～30℃，溫度低于10℃或高于30℃時(shí)，子實(shí)體原基形成數(shù)量少，原基長(zhǎng)勢(shì)差。經(jīng)溫度優(yōu)化試驗(yàn)結(jié)果表明，秀珍菇S3-45菌株子實(shí)體形成最適溫度為15℃～22℃，在此溫度范圍內(nèi)子實(shí)體原基形成數(shù)量多，原基長(zhǎng)勢(shì)好，溫度低于15℃或高于22℃時(shí)，子實(shí)體原基數(shù)量減少，原基長(zhǎng)勢(shì)較弱。

3 結(jié)論

3.1 碳源與氮源

本試驗(yàn)研究結(jié)果表明，秀珍菇S3-45菌株菌絲在蔗糖、可溶性淀粉、果糖、麥芽糖、半乳糖和葡萄糖6種碳源上都可生長(zhǎng)，特別是以麥芽糖和可溶性淀粉為碳源時(shí)，菌絲生長(zhǎng)速度快，長(zhǎng)勢(shì)好。菌絲在酵母粉、牛肉膏、蛋白胨、KNO3、 (NH4)2SO4和尿素6種氮源上生長(zhǎng)情況差別較大，其中在以酵母粉、牛肉膏和蛋白胨等有機(jī)氮為氮源時(shí)，菌絲生長(zhǎng)速度快，長(zhǎng)勢(shì)好；而以KNO3、 (NH4)2SO4和尿素等無(wú)機(jī)氮為氮源時(shí)，菌絲生長(zhǎng)速度慢，長(zhǎng)勢(shì)差，特別是以尿素做氮源時(shí)，菌絲不萌發(fā)。通過(guò)選取單因子試驗(yàn)最佳碳源（麥芽糖、可溶性淀粉）和最佳氮源（酵母粉、牛肉膏）各2個(gè)進(jìn)行兩兩組合，測(cè)試不同組合對(duì)秀珍菇S3-45菌株菌絲生長(zhǎng)的影響，結(jié)果表明，以麥芽糖為碳源，酵母粉為氮源時(shí)，菌絲生長(zhǎng)速度最快，長(zhǎng)勢(shì)最好。可見(jiàn)麥芽糖和酵母粉組合是秀珍菇S3-45菌株菌絲生長(zhǎng)的最佳碳源、氮源組合。

3.2 菌絲生長(zhǎng)溫度

本試驗(yàn)研究結(jié)果表明，秀珍菇S3-45菌株菌絲在15℃～30℃均可生長(zhǎng)，適宜的生長(zhǎng)溫度為20℃～ 27℃，最適溫度為24℃～26℃。當(dāng)溫度為27℃時(shí)，秀珍菇S3-45菌株菌絲日平均生長(zhǎng)速度為0.72 cm·d-1，生長(zhǎng)速度最快，但菌絲生長(zhǎng)勢(shì)不如24℃～26℃時(shí)濃密、健壯；低于20℃時(shí)，菌絲呈氣生狀，生長(zhǎng)緩慢；高于27℃時(shí)，菌絲生長(zhǎng)速度明顯降低，35℃或35℃以上，菌絲生長(zhǎng)停滯，并逐漸死亡。

3.3 菌絲生長(zhǎng)pH

本試驗(yàn)研究結(jié)果表明，秀珍菇S3-45菌株菌絲在中性偏酸環(huán)境中生長(zhǎng)較好，最適pH為6.00，當(dāng)pH大于或小于6.00時(shí)菌絲生長(zhǎng)速度下降。

3.4 子實(shí)體生長(zhǎng)溫度

本試驗(yàn)研究結(jié)果表明，秀珍菇S3-45菌株子實(shí)體形成溫度為10℃～30℃，最適生長(zhǎng)溫度為15℃～ 22℃，溫度低于15℃或高于22℃時(shí)，子實(shí)體原基數(shù)量減少，原基長(zhǎng)勢(shì)較弱。

[1]丁湖廣.秀珍菇特性及高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)栽培技術(shù)[J].北京農(nóng)業(yè)，2003（10）：14.

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[3]戴芳瀾.中國(guó)真菌總匯[M].北京：科學(xué)出版社，1979：357 -817.

[4]翁伯琦，江枝和，林勇.不同培養(yǎng)料對(duì)秀珍菇子實(shí)體蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)評(píng)價(jià)的影響[J].食用菌學(xué)報(bào)，2002，9（2）：10-13.

[5]黃毅.食用菌栽培[M].北京：高等教育出版社，2008：166.

Study on the Biological Characteristics of Pleurotus geesteranus S3-45 Strain

LI Bi-qiong,CHEN Zheng-ming,LIN Jun-yang,LU Cui-xiang,QIU Chun-jin,Zheng Yong-de
(Putian Institute of Agricultural Science,Putian 351144,China)

The major test for the effect of different carbon and nitrogen sources,temperatures and pH on the mycelial growth of Pleurotus geesteranus S3-45 strain were compared,the most sutible temperature for fruitbody growth was also studied.The results showed that the combination of maltose as carbon source and yeast powder as nitrogen source leaded to the highest mycelial growth rate and the strongest mycelial growth vigor of P.geesteranus S3-45 strain,and the optimum temperature and pH for mycelial growth were 24℃-26℃and 6.00.The optimum temperature for fruitbody growth was 15℃-22℃.

Pleurotus geesteranus S3-45 strain;biological characteristics;carbon source;nitrogen source;temperature; pH

S646.1

A

1003-8310（2017）02-0013-04

10.13629/j.cnki.53-1054.2017.02.004

莆田市科技計(jì)劃項(xiàng)目（2013N04）。

李碧瓊（1974-），女，本科，副研究員，主要從事食用菌育種和栽培模式研究。E-mail:libig8236@126.com

2017-01-20