黃萌萌，李 萍，劉玉萍，劉聰燕，瞿 鼎，陳 彥＊＊

（1.南京中醫(yī)藥大學附屬中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院 南京 210028；2.江蘇省中醫(yī)藥研究院中藥組分與微生態(tài)研究中心 南京 210028）

微乳作為納米載體之一，是一種熱力學穩(wěn)定的溶液體系[1]，能夠包載難溶性藥物，促進其口服吸收利用[2-4]。盡管微乳制劑在促進藥物吸收方面有許多優(yōu)勢，但與其它納米制劑一樣在中藥方面的應(yīng)用仍然存在：輔料用量多，載藥量低，難以實現(xiàn)多組分載藥等共性問題[5,6]。有研究發(fā)現(xiàn)某些植物中存在的一些組分如茶葉中兒茶素類成分EGCG[7]、生姜中脂質(zhì)納米顆粒[8]、葡萄柚中的脂質(zhì)[9]，既有一定的活性，又可用作藥物載體，運送各種治療藥物，包括抗癌藥物、DNA/RNA和抗體等，可以降低制劑輔料的用量，實現(xiàn)多組分載藥的同時提高療效，為解決上述問題提供了新的研究思路。本課題組近年來一直倡導“藥輔合一”的設(shè)計理念，并從抗腫瘤中藥中優(yōu)選一批極具藥理活性，又有輔料樣作用的組分作為雙功能組分，參與中藥多組分納米給藥系統(tǒng)的構(gòu)建。譬如，我們以薏苡仁油作為藥物兼油相，人參皂苷作為藥物兼類表面活性劑，荷載諸如靈芝三萜、依托泊甙等難溶性藥物，制備了一系列具有中醫(yī)藥特色的口服多組分抗腫瘤微乳，不僅大大地降低了常規(guī)輔料的用量，還巧妙地將中藥多組分整合到同一個遞藥系統(tǒng)中，實現(xiàn)了多組分協(xié)同抗腫瘤的設(shè)計初衷[10-14]。

眾所周知，抗腫瘤藥物常可導致不同程度的肝腎損傷[15-16]。基于上述“藥輔合一”的設(shè)計思路，本課題組擬采用具有增強免疫、減輕毒性藥物的肝腎損傷等作用的中藥多糖作為功能性組分[17-19]，參與多組分抗腫瘤微乳的構(gòu)建。本研究首先對薏苡仁中的薏苡仁油及多糖進行了提取純化，并以薏苡仁油為油相，薏苡仁多糖水溶液為水相，加入適宜的表面活性劑及助表面活性劑，荷載雷公藤紅素，制備雷公藤紅素-薏苡仁組分微乳（TCC-MEs），再表征其理化性質(zhì)，評價其抗Lewis肺癌移植瘤活性，考察治療所致的肝腎毒性。通過上述研究旨在達到以下四個目的：①通過微乳制劑促進抗腫瘤活性組分薏苡仁油、雷公藤紅素及多糖的體內(nèi)吸收；②降低制劑的輔料用量，實現(xiàn)中藥多組分載藥；③通過多組分配伍達到減毒增效作用；④充分利用薏苡仁藥材中的有效組分，最終為探索高效低毒的中藥多組分抗腫瘤納米制劑提供理論依據(jù)和實踐探索。

1 實驗材料

1.1 儀器

Waters 2695型高效液相色譜儀（美國Waters公司）、ELSD-2000蒸發(fā)光閃射檢測器（美國Alltech公司），Aglient 1260高效液相色譜儀（美國安捷倫公司），Aglient 6890 GC色譜儀，UV-1800型紫外可見分光光度計（上海奧析科學儀器有限公司），Nano-ZS型馬爾文粒徑測定儀（英國Malvern公司），HA221-40(50)-25型超臨界萃取裝置（江蘇南通華安超臨界萃取有限公司），HITACHI7020全自動生化分析儀（日本日立公司）；貝克曼庫爾特LH750全自動血液細胞分析儀（美國貝克曼庫爾特公司）；梅特勒-托利多十萬分之一分析天平（美國METTLER TOLEDO公司），TG16W臺式高速離心機（長沙湘智離心機儀器有限公司），85-2恒溫磁力攪拌器（上海司樂儀器廠）。

1.2 藥品與試劑

薏苡仁藥材購于安徽亳州藥材有限公司，經(jīng)江蘇省中醫(yī)藥研究院錢士輝研究員鑒定為禾本科植物Coix lacryma-jobi L.var.ma-yuen(Roman.)Stapf的干燥成熟種仁。雷公藤紅素（純度≥99%，澤朗醫(yī)藥科技有限公司，批號：ZL1508501Z），甘油三油酸酯（純度≥98%，中國食品藥品檢定研究院；批號：111692-201501）聚氧乙烯氫化蓖麻油（Cremophor?RH 40，德國BASF公司），聚乙二醇400（PEG 400，國藥集團化學試劑有限公司）。

1.3 實驗動物與細胞株

實驗動物：雄性ICR小鼠，20±2 g左右，由南通大學提供，清潔級，合格證號：SCXK（蘇）2014-0001。江蘇省中醫(yī)藥研究院動物中心常規(guī)飼養(yǎng)。

細胞株：Lewis肺癌細胞，購于上海和元生物技術(shù)股份有限公司。

2 方法與結(jié)果

2.1 薏苡仁油提取與分析

2.1.1 薏苡仁油的提取

采用本實驗室優(yōu)選的薏苡仁油超臨界CO2萃取條件提取薏苡仁油。薏苡仁油提取過程如下：取500 g過12目篩的薏苡仁粗粉裝入1 L萃取釜中，設(shè)定萃取釜壓力為22 MPa，萃取溫度為38℃；分離釜I壓力為8 Mpa，溫度為48℃；分離釜II壓力為4 Mpa，溫度為26℃；萃取裝置內(nèi)CO2流量控制在10 L·h-1，萃取時間為2.5 h，攜帶劑（95%乙醇）用量為3.0 mL·g-1生藥。當達到設(shè)定的萃取時間后，從分離釜I和分離釜II出料口接收萃取液，合并萃取液，于37℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)回收溶劑，即得薏苡仁油，得率為2.8%。

2.1.2 薏苡仁油中總甘油三酯含量測定

按照實驗室前期建立的紫外分光光度方法進行測定[20]，以甘油三油酸酯為對照，測定薏苡仁油中總甘油三酯含量。結(jié)果表明超臨界萃取得到的薏苡仁油中總甘油三酯含量以甘油三油酸酯計為70%。

2.1.3 薏苡仁油中的甘油三油酸酯含量測定及組分分析

采用HPLC-ELSD法分析薏苡仁油中成分，方法如下：

（1）色譜條件 色譜柱：ZORBAX SB-C18(4.6×150 mm，5 μm)；流動相：乙腈∶二氯甲烷(68∶32)，流速：1.0 mL·min-1；柱溫：35℃；ELSD 參數(shù)：漂移管溫度72℃，空氣流速1.8 L·min-1；進樣量：5 μL。色譜圖見圖1。

（2）對照品溶液的制備 精密稱取甘油三油酸酯對照品適量于5 mL容量瓶中，加流動相溶解定容，搖勻，0.22 μm微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液即得濃度為1.27 mg·mL-1的對照品溶液。

（3）供試品溶液的制備 分別精密稱取薏苡仁油適量于5 mL容量瓶中，加流動相溶解定容，搖勻，0.22 μm微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液即得供試品溶液。

（4）線性關(guān)系考察 依次將對照品溶液稀釋配成濃度為 0.064 mg·mL-1、0.127 mg·mL-1、0.254 mg·mL-1、0.635 mg·mL-1、1.27 mg·mL-1的對照品溶液，取上述5個濃度的對照品溶液按照上述色譜條件進行分析，以樣品峰面積值取對數(shù)值Y為縱坐標，對照品溶液濃度X（mg·mL-1）為橫坐標，進行線性回歸。得到回歸方程為Y＝1498.4x+12.495，R2=0.996 7，甘油三油酸酯在0.64-12.7 μg線性關(guān)系良好。

（5）樣品分析

取供試品按上述測定條件測定，超臨界萃取得到的薏苡仁油中甘油三油酸酯含量為6.26%，薏苡仁油中主要含7個成分，參照文獻[21-22]并與對照品對照，除了含有甘油三油酸酯（峰6），還含有三亞油酸甘油酯（峰1），二亞油酸油酸甘油酯（峰2），棕櫚酸二亞油酸甘油酯（峰3），亞油酸二油酸甘油酯（峰4），棕櫚酸亞油酸油酸甘油酯（峰5）、棕櫚酸二油酸甘油酯（峰7）。

2.2 薏苡仁多糖提取分離與分析

2.2.1 薏苡仁多糖的提取分離

參照前期預實驗結(jié)果，稱取經(jīng)超臨界萃取過的薏苡仁殘渣2.0 kg，加入10倍量的水，煎煮2次，每次煎煮1.5 h，合并2次提取液，濃縮至提取液濃度為0.75 g·mL-1。將提取濃縮液先用95%乙醇醇沉至含乙醇質(zhì)量分數(shù)為40%，4℃靜置過夜，抽濾，取上清液，回收乙醇，濃縮液再加95%乙醇沉淀至含乙醇質(zhì)量分數(shù)為80%，4℃靜置過夜，4 500 r·min-1離心10 min，沉淀物冷凍干燥得薏苡仁粗多糖19.8 g，得率為1.0%。

2.2.2 薏苡仁多糖的初步分析

參照文獻[23]采用紫外分光光度法，以葡萄糖為對照，采用苯酚-硫酸法測得薏苡仁多糖中總糖含量為53.72%。采用蒽酮-硫酸反應(yīng)、三氯化鐵反應(yīng)、茚三酮反應(yīng)、咔唑-硫酸反應(yīng)、碘-碘化鉀反應(yīng)等檢測表明薏苡仁多糖主要為還原性多糖。

采用高效凝膠滲透色譜法測定薏苡仁多糖的相對分子質(zhì)量。采用TSKgel 4000PWXL色譜柱，將薏苡仁多糖及分子量分別為650、37、0.18 kD的葡聚糖標準品依次進樣分析，使用Shimadzu LC solution GPC Analysis軟件對各標準品的保留時間進行分析，再根據(jù)薏苡仁多糖的保留時間計算其分子量。結(jié)果表明薏苡仁多糖分子量分布主要在3.7-330 KDa之間。

采用DEAE-Sepharode Fast Flow弱陰離子交換柱對薏苡仁多糖進一步分離純化，采用超純水、0.1 mol L-1、0.5 mol L-1NaCl梯度洗脫，碘-碘化鉀反應(yīng)和苯酚硫酸法對洗脫液進行顯色，收集多糖部位并采用薄層色譜法、氣相色譜法對其單糖組成進行分析，結(jié)果表明薏苡仁多糖主要由葡萄糖、阿拉伯糖、木糖、半乳糖、果糖等組成。

圖1 薏苡仁油對照品與樣品色譜圖

2.3 TCC-MEs的制備與表征

2.3.1 未荷載雷公藤紅素的薏苡仁組分微乳（CCMEs）處方篩選

課題組在前期研究的基礎(chǔ)上，首先對薏苡仁油微乳處方進行了篩選：以薏苡仁油為油相，并固定其用量為400 mg，RH40為表面活性劑、PEG400為助表面活性劑，（RH40與PEG400質(zhì)量比3∶1，即Km值為3∶1），采用水滴定法制備微乳，觀察微乳外觀，并測定粒徑，篩選薏苡仁油與混合表面活性劑用量。結(jié)果見圖2A，制備所得微乳粒徑隨著RH 40用量降低逐漸增大，外觀由澄清透明逐漸變?yōu)槿榘咨?。當RH 40（wt%）大于25%時（以RH40量與載體比例計），微乳粒徑均較?。ǎ?00 nm），因此采用薏苡仁油作為油相制備微乳，薏苡仁油與混合表面活性劑用量比應(yīng)低于2∶1。研究表明20-40 nm粒徑左右的小粒徑納米粒子更易于向腫瘤組織的深層滲透[24]，因此為實現(xiàn)藥物的深層滲透，本實驗選擇薏苡仁油微乳（C-MEs）處方為薏苡仁油400 mg，RH40 300 mg、PEG400100 mg，粒徑為38.37 nm。

在確定制備C-MEs的上述處方后，繼續(xù)考察加入薏苡仁多糖是否對C-MEs的粒徑產(chǎn)生影響。稱取薏苡仁油400 mg，RH 40 300 mg，PEG 400 100 mg磁力攪拌1 h，稱取薏苡仁多糖50 mg溶于5 mL純化水中，水滴定法制備微乳并定容至10 mL，考察微乳的粒徑變化。結(jié)果見圖2B，50 mg薏苡仁多糖的加入對微乳粒徑大小基本無影響，且該微乳在不同稀釋倍數(shù)下粒徑與PDI均無顯著性變化；在25℃的條件下保存1個月或1 300 0 r·min-1離心30 min均無明顯絮凝和分層現(xiàn)象，粒徑與PDI無顯著性變化，表明該薏苡仁組分微乳處方可進行下步包埋難溶性抗腫瘤藥物研究。

圖2 RH40與薏苡仁多糖加入量對微乳粒徑的影響 (n=3,±sD)

圖3 TCC-MEs粒徑（內(nèi)部為透射電鏡圖）、電位圖

2.3.2 雷公藤紅素-薏苡仁組分微乳處方的確定

根據(jù)篩選得到的薏苡仁組分微乳處方，精密稱取薏苡仁油400 mg，RH 40 300 mg，PEG 400 100 mg，分別加入雷公藤紅素10、20、40 mg，每份樣品重復3份，在磁力攪拌器下攪拌1 h，混合均勻，逐滴加入含50 mg薏苡仁多糖水溶液5 mL至形成澄清透明的溶液，加水定容至10 mL，磁力攪拌1 h，即得TCC-MEs。對其載藥量、包封率、粒徑及zeta電位進行考察，結(jié)果見表1，隨著雷公藤紅素加入量的增加，其包封率呈減小趨勢，當雷公藤紅素加入量為10 mg時，包封率最大，超過90%。因此選擇處方中加入雷公藤紅素10 mg。

表1 雷公藤紅素-薏苡仁組分微乳的粒徑、PDI、電位及雷公藤紅素的包封率與載藥量(n=3,±sD)

表1 雷公藤紅素-薏苡仁組分微乳的粒徑、PDI、電位及雷公藤紅素的包封率與載藥量(n=3,±sD)

雷公藤紅素/mg 10 20 40多糖/mg 50 50 50 Size/nm 43.86±3.22 44.69±4.31 44.50±2.98 PDI 0.10±0.01 0.10±0.02 0.15±0.01 Zeta/mV-13.74±0.92-15.29±0.76-16.76±0.98包封率/%90.72±0.28 85.72±0.74 82.16±1.17載藥量/%1.08±0.17 1.68±0.16 3.46±0.12

綜上，TCC-MEs最佳處方與制備方法如下：稱取RH40 300 mg，PEG 400 100 mg，薏苡仁油400 mg，雷公藤紅素10 mg，磁力攪拌混勻1 h，滴加含薏苡仁多糖50 mg的水溶液至10 mL，即得。TCC-MEs平均粒徑為(43.86±3.22)nm，Zeta電位為 (-13.74± 0.92)mV，雷公藤紅素包封率為(90.72±0.28)%，載藥量為(1.08±0.17)%。

2.4 TCC-MEs粒徑和Zeta電位測定及形態(tài)觀察

取純化水將TCC-MEs稀釋10倍，取1 mL稀釋液加至馬爾文激光散射粒度測定儀的樣品池中，在室溫下測定各微乳的平均粒徑，Zeta電位及多分散指數(shù)(PDI)；取TCC-MEs稀釋5倍的微乳液1滴，滴于載有Formvar支持膜的銅網(wǎng)上，放于蠟板上，晾干，再滴加2%的磷鎢酸1滴，晾干，用濾紙吸走多余的液體，放于透射電鏡下觀察微乳的外觀形態(tài)。結(jié)果見圖3，表明不同雷公藤紅素荷載量制備的TCC-MEs粒徑在43 nm左右，形態(tài)圓整，邊緣清晰，粒徑分布較均勻，呈弱電負性。

2.5 TCC-MEs體內(nèi)抗肺癌藥效評價

2.5.1 TCC-MEs體內(nèi)抗肺癌藥效

取對數(shù)生長期的Lewis肺癌細胞，用0.25%胰酶消化液進行消化，于1000 r·min-1下離心5 min，用滅菌的PBS溶液將細胞制成細胞懸液，調(diào)整細胞數(shù)為2×107個·mL-1。用一次性無菌注射器迅速在每只小鼠右腋部皮下注射0.1 mL新鮮制備的Lewis肺癌細胞懸液。小鼠接種后待右側(cè)腋窩形成體積約80 mm3的硬質(zhì)瘤后，隨機分為4組，每組6只，分別為生理鹽水對照組、雷公藤紅素裸藥組（T）、雷公藤紅素-薏苡仁油微乳（TC-MEs，不含薏苡仁多糖）組、雷公藤紅素-薏苡仁組分微乳（TCC-MEs）組，每天灌胃給藥0.1 mL·10g-1（以雷公藤紅素劑量計，10 mg·kg-1），每天用游標卡尺測量瘤體積大小，稱重，觀察并記錄小鼠進食、活動狀態(tài)及死亡情況。連續(xù)給藥14天后，眼眶取血，頸椎脫臼處死，剝離腋下腫瘤、取肝、脾、腎、胸腺等臟器。

分別稱取小鼠體重、腫瘤重量，計算抑瘤率。并稱取肝臟、脾臟、胸腺重量，計算肝臟指數(shù)、胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)。根據(jù)如下公式計算腫瘤抑制率、肝指數(shù)、脾指數(shù)及胸腺指數(shù)。

抑瘤率(%)=(1-給藥組平均腫瘤體積/模型組平均腫瘤體積)×100%，

臟器指數(shù)=臟器重量（mg）/小鼠體重（g）。

組間數(shù)據(jù)采用SPSS 21.0進行單因素方差分析。以均值±標準差（x?±SD）表示，兩組均數(shù)間的比較采用t檢驗，P＜0.05認為差異有統(tǒng)計學意義。

結(jié)果見表2，由表可知，雷公藤紅素組、TC-MEs和TCC-MEs抑瘤率分別為49.21%、64.89%和71.84%，TC-MEs和TCC-MEs組抑瘤率與裸藥組相比顯著提高（P＜0.05），表明微乳制劑可以促進雷公藤紅素的吸收，且薏苡仁油也具有抗腫瘤療效，兩者聯(lián)用增強了抗肺癌療效，發(fā)揮了中藥多組分的增效優(yōu)勢；TCC-MEs療效略優(yōu)于TC-MEs組，但無統(tǒng)計學差異。值得注意的是，經(jīng)TC-MEs治療后，小鼠脾指數(shù)和胸腺指數(shù)顯著低于雷公藤紅素裸藥組和TCC-MEs組，可能與TC-MEs微乳促進了雷公藤紅素的口服吸收，間接地增加了藥物對小鼠免疫功能抑制有關(guān)[25]，而得益于多糖的引入，TCC-MEs一定程度上緩解了雷公藤紅素免疫抑制作用，也體現(xiàn)了多組分協(xié)同構(gòu)建帶來的增效減毒優(yōu)勢。

2.5.2 腫瘤組織HE染色

取藥效實驗中各組小鼠的腫瘤投入到10%福爾馬林中，用石蠟包埋、切片、染色，作常規(guī)病理檢查，觀察組織的形態(tài)學改變和腫瘤壞死情況。用顯微鏡觀察，并拍攝圖片，結(jié)果見圖4。腫瘤組織HE染色結(jié)果顯示，雷公藤紅素組腫瘤組織有部分壞死，而TC-MEs和TCC-MEs組腫瘤組織出現(xiàn)大面積壞死現(xiàn)象，提示微乳制劑可以顯著促進腫瘤組織的壞死。

表2 各組制劑的體重、肝、脾、胸腺指數(shù)及抑瘤率(n=6,±SD)

表2 各組制劑的體重、肝、脾、胸腺指數(shù)及抑瘤率(n=6,±SD)

與雷公藤紅素組比較：*P＜0.05，**P＜0.01；與TC-MEs組比較：#P＜0.05，##P＜0.01，###P＜0.001

抑瘤率/%NA 49.21±8.89 64.89±7.65*71.84±6.48**分組對照組雷公藤紅素TC-MEs TCC-MEs體重/g 29.50±1.18 30.12±2.29 31.60±1.04 33.36±2.17肝指數(shù)/g.kg-1 49.03±4.34 48.86±3.87 54.93±4.89 50.32±3.50脾指數(shù)/g.kg-1 4.68±0.57 4.19±0.44 3.10±0.78*4.87±1.10##胸腺指數(shù)/g.kg-1 0.97±0.41 0.78±0.33 0.42±0.21*1.25±0.18###

圖4 各制劑組荷瘤小鼠組織HE染色（×100）

表3 各組制劑給藥后小鼠血常規(guī)數(shù)據(jù)(n=6,±sD)

表3 各組制劑給藥后小鼠血常規(guī)數(shù)據(jù)(n=6,±sD)

與正常組比較：*P＜0.05，**P＜0.01；與對照組比較：#P＜0.05，##P＜0.01

組別正常組對照組雷公藤紅素組TC-MEs組TCC-MEs組白細胞計數(shù)/109?L-1 6.06±2.42 6.37±1.89 14.35±2.70**##17.9±3.90**##8.94±2.37紅細胞計數(shù)/1012?L-1 9.53±1.19 8.61±1.37 9.79±1.61 10.26±1.96 8.83±0.91血紅蛋白/g?L-1 179.33±26.91 154.24±22.54 175.50±25.89 193.60±27.45 168.25±15.94血小板計數(shù)/1011?L-1 15.51±1.82 15.28±1.45 15.92±1.22 16.42±2.11 17.35±1.98

表4 各組制劑給藥后小鼠生化指標數(shù)據(jù)(n=6,±sD)

表4 各組制劑給藥后小鼠生化指標數(shù)據(jù)(n=6,±sD)

與正常組比較：*P＜0.05，**P＜0.01；與對照組比較：#P＜0.05，##P＜0.01

2.6 TCC-MEs安全性評價

2.6.1 小鼠肝腎功能生化指標及血常規(guī)測定

取“2.2.2”項下的小鼠眼眶全血20 μL，采用全自動血液分析儀測定了WBC（白細胞計數(shù)）、RBC（紅細胞計數(shù)）、HGB（血紅蛋白濃度）及PLT（血小板計數(shù)）幾項血常規(guī)指標。另取小鼠眼眶血液，4 000 r/min離心10 min獲得200 μL血清，并對其肝功能指標谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alanine transaminase，ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（aspartate transaminase，AST）、腎功能指標血尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）進行測定。結(jié)果見表3、4。

由表3可知各給藥組小鼠白細胞數(shù)目均有所升高，雷公藤紅素與TC-MEs組白細胞數(shù)目顯著升高，與正常組相比具有顯著性差異（P＜0.01），TCC-MEs組白細胞略有升高，但與正常組相比無統(tǒng)計學差異；紅細胞數(shù)目、血紅蛋白含量、血小板數(shù)與正常組相比均無統(tǒng)計學差異。各給藥組血清肝功能指標ALT、AST與正常組相比均顯著升高，而TCC-MEs組ALT、AST升高程度明顯低于TCC-MEs；說明薏苡仁多糖的載入可以緩解雷公藤紅素導致的ALT、AST升高；而各給藥組腎功能指標BUN則基本無變化，均在正常范圍之內(nèi)[26]。

2.6.2 肝腎組織HE蘇木精-伊紅染色（hematoxylin-eosin staining）

取藥效實驗中各組小鼠的肝腎組織進行HE染色，觀察組織的形態(tài)學改變，并拍攝圖片，結(jié)果見圖4。由肝組織切片可見TC-MEs組肝細胞索紊亂，有以淋巴細胞為主的炎癥細胞浸潤并伴有輕微纖維化；其它組肝細胞無明顯形態(tài)學變化；腎組織切片顯示，各組腎細胞均無明顯形態(tài)學變化，本實驗劑量下雷公藤紅素及制劑組無明顯腎損傷。

綜合血液生化指標與HE染色結(jié)果，推測裸藥雷公藤紅素由于吸收較差，所以體內(nèi)肝毒性作用相對較小，而TC-MEs對肝臟組織具有一定的損傷，原因推測為微乳促進了雷公藤紅素的吸收，且微乳主要分布在肝臟，所以致使產(chǎn)生一定的肝毒性，而微乳中加入的薏苡仁多糖在一定程度上減輕了雷公藤紅素-薏苡仁油微乳的肝損傷作用。

3 討論

本實驗采用超臨界萃取法和水提醇沉法提取得到薏苡仁油和薏苡仁多糖，采用HPLC、UV高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatograph，HPLC）,紫外可見分光光度法（UV-vis spectrophotometry）法等對其進行化學組成分析，以保證制劑所用藥物來源穩(wěn)定，質(zhì)量一致，并將天然來源的薏苡仁油和薏苡仁多糖作為功能性輔料，在少量表面活性劑和助表面活性劑的作用下，成功制備得到雷公藤紅素-薏苡仁組分微乳。該系統(tǒng)粒徑在40 nm左右，外觀圓整，分布均勻，藥物（薏苡仁油、薏苡仁多糖和雷公藤紅素）與載體（表面活性劑和助表面活性劑）比例達115%，相較常規(guī)微乳，載藥量獲得了極顯著的提高。體內(nèi)抗肺癌實驗表明雷公藤紅素-薏苡仁油微乳可顯著提高雷公藤紅素抗腫瘤療效，潛在的藥效學機制為兩方面：一方面為微乳促進了雷公藤紅素的口服吸收，使藥物能夠達到發(fā)揮療效的有效濃度，另一方面薏苡仁油也具有抗腫瘤療效[27,28]，兩者聯(lián)用可實現(xiàn)協(xié)同增強抗腫瘤療效作用。此外，一定量薏苡仁多糖的引入可以緩解雷公藤紅素相關(guān)制劑所致的肝毒性。因此課題組后續(xù)將繼續(xù)對薏苡仁組分與雷公藤紅素聯(lián)用增效減毒的機理進行深入研究，并探討其他中藥多糖組分是否有類似作用，為中藥多組分微乳的研究提供參考，以期促進源自食用植物的納米載體的開發(fā)，促進中藥天然雙功能輔料的應(yīng)用，為安全的靶向藥物運送平臺的構(gòu)建提供支撐。

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